三角叶黄连丛枝菌根真菌的多样性研究

目的:调查三角叶黄连主产区根围中丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)的资源和分布情况。方法:采用碱解离-乳酸甘油酸性品红染色法观察三角叶黄连根系侵染情况,并计算侵染率;采用湿筛-倾注-蔗糖离心法分离提取孢子,利用形态特征及组织化学染色的方法对AMF孢子进行分类鉴定。结果:三角叶黄连能与AMF形成菌根,不同产地采集三角叶黄连菌根侵染率不同,为23.3%～34.4%;从6个产地共分离出了6属30种丛枝菌根真菌,其中无梗囊霉属Acaulospora 17种、球囊霉属Glomus 7种、巨孢囊霉属Gigaspora 2种、内养囊霉属Entrophospora 1种、类球囊霉属Paraglomus 1种和原囊霉属Archaeospora 2种,无梗囊霉属和球囊霉属是三角叶黄连根系土壤中AMF的优势种群;道地产区洪雅的AMF最丰富。结论:三角叶黄连是菌根营养型植物,其产区AMF具有丰富的多样性,是三角叶黄连的扩大生产和无公害丰产栽培中具有重要应用前景的生物资源。

内源激素对三角叶黄连和峨眉黄连花发育的影响

探索三角叶黄连和峨眉黄连花的内源性激素对种子形成的影响。用高效液相色谱法测定2种黄连的初花期、盛花期和末花期的花中3种内源性激素的含量并进行分析。峨眉黄连花3个时期中的赤霉素、吲哚乙酸和脱落酸的含量均呈下降趋势。在初花期,3者的含量均高于三角叶黄连。三角叶黄连中赤霉素、吲哚乙酸在3个时期含量变化不大,略呈上升趋势,脱落酸含量则呈下降趋势。结合2种黄连的传粉学与花粉粒形态研究分析,在开花正常情况下,赤霉素和吲哚乙酸的含量与变化,可能与花粉粒是否发育正常关系密切,2种黄连脱落酸含量与下降趋势的一致性,说明对花粉粒的发育无关。该研究为进一步寻求三角叶黄连花粉粒发育异常,不能形成种子的成因奠定了一定基础。

三角叶黄连ISSR反应体系的建立与优化

目的针对三角叶黄连ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR-PCR分子标记反应体系,为进一步研究三角叶黄连的种质资源遗传多样性奠定基础。方法通过筛选引物并设定影响三角叶黄连ISSR-PCR反应诸因子的不同梯度,检测其不同反应体系的扩增效果,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立三角叶黄连ISSR-PCR稳定可靠的反应体系。结果建立了可用于三角叶黄连ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系:25μLPCR反应体系中,内含10×PCR Buffer 2.5μL,1.5mmol/L Mg2+,200μmol/L dNTP,0.3μmol/L引物,40ng模板,1.0U Taq DNA聚合酶。扩增程序为94℃预变性5min,然后进行35个循环:94℃变性30s,(据不同引物的退火温度)复性60s,72℃延伸90s,循环结束后72℃延伸7min,4℃保存。结论所建立的三角叶黄连ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,可以较好地应用于三角叶黄连的种质资源遗传多样性及居群鉴别的研究。

味连与雅连改善2型糖尿病大鼠糖及脂代谢紊乱的研究

目的比较川黄连濒危品种（雅连）与常见商业品种（味连）生品对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢的药效差异。方法测定大鼠的血糖指标和脂质指标。结果在降糖方面，两者与模型组比较，均有不同程度升高糖尿病大鼠空腹血清中的胰岛素、降低空腹血糖的作用，尤以味连的疗效最佳，但雅连降低糖化血清蛋白含量的程度则更为显著；在降脂方面，两者均可显著降低糖尿病大鼠血清中甘油三酯、胆固醇及低密度脂蛋白的含量，并增加高密度脂蛋白的含量，就总体趋势而言，雅连的降脂作用略优于味连。结论从降脂机制来看，抑制胰岛素靶器官SCAP／SREBP通路蛋白及其基因的表达可能是中药黄连减少糖尿病机体脂质沉积的途径之一，而雅连下调上述蛋白及其基因表达的效果更加突出。