不同采收期云南黄连中有效生物碱含量测定

通过比较不同采收季节云南黄连根茎、须根、叶中3种生物碱的含量,确定适宜的采收时间。采用高效液相色谱法,以云南黄连主要有效成分小檗碱、药根碱、巴马汀含量为评价指标,研究7个不同采收时间段云黄连根茎、须根、叶中有效成分含量变化,得出有效成分在根茎中含量最高,须根次之,叶片最低;有效成分在药用部位根茎中的含量在10月及11月最高,云南黄连的最佳采收期为10～11月的结论。

云南黄连自然资源及其保护问题的研究

目的系统调查研究云南黄连的资源分布、生物学和生态学特性、利用历史和现状,为科学保护和合理开发利用这一传统地道药材提供基础资料。方法室内文献资料和标本查阅、药用民族植物学调查和野外考察相结合的方法。结果研究报道云南黄连的生物学和生态学特性、生长发育规律、自然分布特点和利用历史及现状。结论应加强保护野生种质资源和合理开发利用这一药用植物。

濒危药用植物云南黄连传粉生态学研究

云南黄连为中药材黄连的原植物之一,为国家二级濒危保护植物。通过对云南黄连的开花物候、花部特征、繁育系统及传粉方式进行观察研究,以探讨云南黄连濒危机制,为其种质资源保护及人工抚育奠定基础。结果表明:(1)云南黄连的花期从12月份起至第二年的3月份,花期长达4个月,花序开花可持续45～60d,同一花序上不同花的开花时间相隔1～3d,单花花期可持续40～45d。(2)云南黄连为多歧聚伞花序,苞片包被花芽,花两性,雄蕊和心皮多数。(3)云南黄连的花粉-胚珠比(P/O)为9 000左右,杂交指数(OCI)值为4或5,为自交亲和但需要传粉者完成传粉的兼性异交型繁育系统,并存在无融合生殖现象。

云南黄连花粉活力和柱头可授性研究

通过扫描电子显微镜观察花粉粒的形态特征,采用I2-KI染色法测定云南黄连花粉活力,并通过联苯胺+过氧化氢反应液和3%的过氧化氢测定其柱头可授性。结果表明:云南黄连的花粉粒为近圆球形,具有萌发孔,表面具有刺状雕纹;花粉活力一天中最强的时间段是13∶30—15∶30,最强的时期是散粉时期;I型(雌蕊长于雄蕊)的云南黄连柱头可授性高于II型(雄蕊长于雌蕊)的。在散粉初期,云南黄连普遍具有较高的柱头可授性。

云南黄连的研究进展

就云南黄连的植物学形态特征、生境特征、资源现状、引种驯化、栽培技术及采收加工等进行了综述,并针对云南黄连资源现状,对云南黄连亟待解决问题进行了探讨,旨在为深入研究云南黄连奠定基础。

HPLC法同时测定云黄连中四种生物碱的含量

目的:建立同时测定云黄连中四种生物碱含量的高效液相色谱方法。方法:采用Agilent ZORBAX Extend-C_(18)(250mm×4.6 mm,5μm),流动相:0.05 mol·L^(-1)KH_2PO_4(含0.2%三乙胺,用H_3PO_4调pH至2.0):乙腈为75:25,流速:1.0 ml·min^(-1),检测波长345 nm,柱温30℃,进样量10μl。结果:药根碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱分别在0.012 6～0.126 0、0.025 1～0.251 0、0.012 6～0.126 0及0.137 6～1.376 0μg范围内呈良好线性关系(r≥0.999 4);四种生物碱的平均回收率(n=9)分别为99.49%、99.02%、98.83%、99.08%;RSD分别为1.62%、1.20%、1.36%、1.39%。结论:该方法简便、准确,分离效果好,可用于云黄连的质量控制。

施用磷肥与复合肥对云黄连生长性状、产量和品质的影响

【目的】药用植物施肥措施的研究对于提高药材产量、保证药材品质均具有重要的意义。【方法】采用林下随机区组试验设计,测定施用磷肥和复合肥对云黄连生长性状指标、产量和品质的影响。【结果】磷肥的单独施用(35 kg/hm2)对云黄连生长的促进作用较小,而磷肥与复合肥混合施用[25 kg/hm2过磷酸钙和10 kg/hm2复合肥m(N)∶m(P)∶m(K)=18∶9∶5]可显著促进云黄连生长(P<0.05)。【结论】在保证云黄连优良品质的前提下,磷肥与复合肥混合施用能极显著地提高产量。本研究可为制定合理的云黄连规范化栽培管理措施提供科学的理论依据和实践基础。

云黄连根化学成分的研究

目的研究云黄连根的化学成分。方法云黄连根茎甲醇提取物乙酸乙酯部位采用硅胶柱、薄层色谱和制备型HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到14个化合物,分别鉴定为methyl orsellinate(1)、7⁃hydroxy⁃6⁃methoxy⁃2H⁃1⁃benzopyran⁃2⁃one(2)、豆甾⁃4⁃烯⁃3⁃酮(3)、阿魏酸甲酯(4)、berbithine(5)、3,5,7⁃三羟基⁃6,8⁃二甲基黄酮(6)、3,4⁃二羟基苯乙醇(7)、8⁃oxyberberine(8)、药根碱(9)、巴马汀(10)、表小檗碱(11)、小檗碱(12)、coptisonine(13)、黄连碱(14)。结论化合物1~4为首次从该植物中分离得到。

不同商品来源云南黄连中重金属含量的测定与评价

目的测定并比较不同商品来源云南黄连中重金属残留量的含量。方法采用微波消解-原子吸收光谱法测定铅、镉、铜、砷、汞5种重金属的含量。结果样品中铅、镉、铜、砷、汞含量差异较大,各元素残留量波动范围较大,但均未超过国家及行业标准的重金属限量值。结论该方法准确、精密度高,可为该品种制订重金属限量标准和合理用药提供科学依据。

濒危植物云南黄连不同居群表型多样性研究

以揭示濒危药用植物云南黄连不同居群表型变异程度和变异规律为目的，抽取5个天然居群和2个栽培居群为研究材料，对其20个表型性状进行系统分析．采用变异系数、方差分析、相关分析、多样性指数分析和聚类分析等统计分析方法，讨论了云南黄连居群间和居群内的表型多样性．结果表明：云南黄连表型性状在居群内与居群间变异丰富，20个表型性状的变异程度不同，其变异系数范围为10．9％～75．1％，平均为33．6％，其多样性指数范围在1．634～1．839之间；7个居群的变异程度也不同，变异系数在27．4％～37．1％之间，变异最大的为腾冲明光乡自治（TCZ）居群，变异最小的为贡县普拉底乡（GSP）居群；通过表型分化分析，居群间与居群内的表型分化不同，居群问的表型分化系数为74．405％，居群内为25．595％，表明云南黄连的变异主要来自于居群间；20个表型性状间多数呈现出显著和极显著的相关性，采用居群间欧氏距离进行UPGblA聚类分析，7个云南黄连在阈值为10～15时被分为3类，但结果不以地理位置的远近作为分类的依据，且栽培居群与野生居群间差异不大．

不同产地不同部位云黄连生物碱成分累积研究

研究不同产地云黄连不同部位中盐酸小檗碱、药根碱和巴马汀3种生物碱积累量差异,旨在寻找云黄连优质产区及为非药用部位综合利用提供理论依据.在云黄连采收期,分别采集泸水、贡山、福贡、腾冲4县共10个地区的云黄连居群,测定云黄连根茎、须根和叶片3个部位的生物量,采用HPLC法测定样品不同部位中盐酸小檗碱、药根碱和巴马汀的含量.结果显示,云黄连不同部位3种生物碱含量大小依次为根茎>叶>须根.云黄连根茎中3种生物碱在不同产地间差异显著,其中贡山县后山、贡山县丙中洛神山、贡山县普拉底乡3个地区所产云黄连生物碱含量、生物量、生物积累量较高.其中贡山县普拉底乡积累量最高,其盐酸小檗碱、药根碱和巴马汀单株平均积累量分别为46.899,2.76,1.708 mg.结论:在云黄连种植生产过程中,在考察其有效成分含量的同时,还应考虑其生物量.综合比较不同产地不同部位生物量、3种生物碱含量及其积累量等因素,确定贡山县后山、贡山县丙中洛神山、贡山县普拉底乡为云黄连优质产区.非药用部位中3种生物碱的积累量较大,应收集后进行有效成分的提取,达到云黄连资源综合利用的目的.

云连总生物碱提取工艺优化研究

目的:筛选云连总生物碱最优提取工艺。方法:利用正交试验筛选最优提取工艺,通过大孔吸附树脂进行纯化。结果:通过对正交试验结果进行分析,得到最佳提取工艺:8倍量体积分数80%乙醇提取3次,每次1 h,经纯化,云连提取物浸膏中总生物碱含量达到55%以上。结论:云连总生物碱最佳提取工艺稳定可行。

两种黄连转录组中SSR位点信息分析与多态性引物开发

本研究通过对两种黄连,即黄连（Coptis chinensis Franch.）和云南黄连（C.teeta Wall.）转录组中SSR位点信息的分析,设计SSR引物,为开发新的SSR标记提供理论基础。利用MISA工具筛选黄连及云南黄连转录组测序获得的55 903和49 741条Unigenes,对其SSR位点信息进行了分析;Primer3设计SSR引物,随机选取60对引物对两种黄连,每种20株,共40株进行多态性扩增分析。黄连和云南黄连转录组分别搜索到4 071和4 041个SSR位点。两种黄连中二核苷酸和三核苷酸重复皆是主要的类型,分别占总SSR的87.71%和87.58%。黄连中,二核苷酸重复基元出现最多的为AG/CT,共953个,占总SSR的23.40%,三核苷酸重复基元出现最多的为AAG/CTT,共746个,占总SSR的18.3%;在云黄连中,AG/CT和AAG/CTT分别为934（23.10%）和773（19.10%）。随机选取60对引物进行PCR扩增,其中12对（20.00%）表现出多态性差异。利用Populations软件作图,将40个材料分为2类。两种黄连转录组中SSR位点出现频率高,类型丰富;大量的SSR为其遗传多样性分析和遗传图谱构建提供了丰富的候选分子标记。

比较转录组分析云南黄连开花过程对低温的应答

为了研究云南黄连在开花过程中对低温的响应,本研究观测了云南黄连在不同温度条件下的开花率和开花过程中花朵内温度和环境温度的变化,并对早(6:00)、中(12:00)、晚(18:00)3个时间段的云南黄连花朵进行转录组测序,比较云南黄连花朵3个时间段的基因表达差异。结果发现,云南黄连阳坡(>10℃)开花率显著高于阴坡(<5℃),早上时云南黄连花朵内温度是1.19℃,显著高于环境温度。在转录组分析结果中共得到了67607 Unigenes差异表达分析确定,在早上和中午的花朵比较中共得到4839个差异基因,中午和晚上的花朵比较中共得到2287个差异基因。差异基因的KEGG和GO富集结果表明,温度越低云黄连花朵能量代谢过程越快,大量抗逆境基因高表达,提高云南黄连花朵的抗逆性,保证了云南黄连生殖生长的顺利进行。云南黄连是典型的高山耐寒濒危药用植物,通过云黄连开花过程中对低温的响应研究,揭示了云南黄连抗低温的分子机制,有利于云黄连的繁育,同时也为植物响应低温的热感应途径提供新的依据。