人工培养蛹虫草多糖的分离纯化及其结构的初步研究

目的人工培养蛹虫草多糖类成分的提取与纯化。方法采用SephadexG 10 0柱色谱法进行了分离纯化 ;通过理化常数测定、化学和光谱分析等方法研究了其化学结构特征。结果分离得到CPS 1、CPS 2和CPS 33种多糖 ,其单糖组成分别为 :CPS 1:鼠李糖 木糖 甘露糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶6 .4 3∶2 5 .6∶16 .0∶13.8) ;CPS 2 :鼠李糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶4 .4 6∶2 .4 3) ;CPS 3为只含葡萄糖的均一多糖。 3种多糖的分子量分别为 2 30 0 0、12 90 0和 5 0 0 0。CPS 1主要含有β糖苷键 ,CPS 2和CPS 3主要含有α糖苷键。 结论CPS 1为一种含有 5种单糖 ,糖苷键为 β构型的多糖 ;CPS 2是一种含有 3种单糖 ,糖苷键为α构型的多糖 ;CPS 3是一种仅含葡萄糖。

SE-HPLC-ICP-MS联用技术在富硒蛹虫草硒蛋白形态分析中的应用研究

从富硒培养的虫草中提取可溶性蛋白质，经过（NH4）2SO4分级盐析，采用ICP-MS对不同盐析组分中蛋白及硒分布进行测定，结果表明，富硒蛹虫草的可溶性硒含量占总硒含量的69．3％以上，在所得的各级蛋白组分中，除A组分（0～30％饱和度的盐析）外，其它各组分均存在含硒蛋白，其硒含量高低顺序为B组分（30％～50％饱和度的盐析）〉C组分（50％～75％饱和度的盐析）〉D组分（75％～100％饱和度的盐析）〉A组分．采用SE—HPLC—ICP—MS联机技术对样品中的硒蛋白进行分离检测，结果表明，其分子量分布在114000和1000之间，且含量各异．进一步研究结果表明，硒在虫草体内参与了蛋白的合成，这对于以蛹虫草为载体将无机硒有机化具有重要意义．

蛹虫草药理作用及化学成分研究进展

随着蛹虫草市场需求的不断扩大,蛹虫草作为一种药食两用菌已经被广泛接受。文章从蛹虫草的药理作用、化学成分及人工栽培3方面展开论述,为蛹虫草进一步研究与开发提供一定的理论依据。

富硒蛹虫草对小鼠降血脂和抗氧化作用的影响

目的探讨富硒蛹虫草的降血脂和抗氧化作用。方法昆明种雄性小鼠60只,随机分4组(n=15只/组):正常对照组、高脂模型组、普通蛹虫草组、富硒蛹虫草组。用不同的饲料持续喂养5周,每周的固定时间称量小鼠体质量1次,第5周断头取血后解剖小鼠,检测血清总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果富硒蛹虫草组与高脂模型组相比,T-CHO和TG的含量降低,HDL-C的含量升高,均达到了显著水平(P<0.05);LDL-C含量降低(P>0.05);GSH-Px和SOD活性升高,MDA含量降低,均达到了显著水平(P<0.05)。并且富硒蛹虫草的降血脂与抗氧化作用均高于普通蛹虫草。结论富硒蛹虫草具有良好的降血脂和抗氧化作用。

北虫草培养基中多糖的闪式提取工艺研究

为实现北虫草[Cordyceps militaris(L.Fr.)Link]培养基的高效利用,采用闪式提取技术从北虫草培养基中提取多糖。通过单因素试验考察了闪式提取的液料比、提取时间、转速对提取效果的影响,利用正交试验法,优化了北虫草培养基中多糖提取的工艺。结果表明,提取时间和转速对多糖提取效果有显著影响,最佳提取工艺为液料比35∶1(m L∶g),提取时间12 min,转速8 000 r/min。在该条件下,闪式提取多糖得率为3.52%,略高于传统热水回流提取的得率,且只需在室温下进行,提取时间大大缩短,说明闪式提取是一种快速有效提取北虫草培养基中多糖的方法。

蛹虫草培养液成分研究(Ⅰ)

目的对人工蛹虫草培养液的化学成分进行研究。方法采用常压、加压硅胶柱色谱、制备色谱进行分离 ,通过理化和波谱分析方法鉴定化合物结构。结果目前从氯仿部分分离得到 9个化合物 ,鉴定了其中的 5个化合物 ,分别为 :环 (苯丙氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L phenylalanyl L prolyl) ,Ⅰ ];环 (亮氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L leucyl L prolyl) ,Ⅱ ];环 (缬氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L valyl L prolyl) ,Ⅲ ];环 (丙氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L alanyl L prolyl) ,Ⅳ ];7,8 二甲基 异咯嗪 (7,8 dimethyl iso allox azine ,Ⅴ )。结论这 5个化合物均是从蛹虫草培养液中首次分离 ,且化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ

蛹虫草子实体和蛹虫草根醇提物抗氧化活性的对比

蛹虫草根作为人工蛹虫草的副产品未得到有效利用。本试验以10 mL体积分数70%乙醇分别提取1 g蛹虫草子实体和蛹虫草根,分析了二者的醇溶性总糖、还原力和清除自由基的能力。结果表明:蛹虫草子实体的醇溶性总糖含量为蛹虫草根部2倍;蛹虫草根部醇提物还原力和清除DPPH自由基能力要明显高于蛹虫草孢子头子实体醇提物;后者清除羟自由基的能力稍强于前者。说明人工蛹虫草根有潜在的开发利用价值。

超高压技术提取北虫草多糖的工艺研究

在常温条件下使用超高压技术提取北虫草多糖,采用正交试验设计对提取工艺条件进行优化。结果表明最优提取工艺条件为溶剂45%乙醇、压力400MPa、料液比1:35(g/ml)、提取时间5min,此条件下北虫草多糖提取率为10.13%。该方法不仅可以快速高效地提取出有效成分,而且保持其生理活性,为天然产物有效成分的提取提供了一种崭新的提取方法。

反相高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

建立一种新的反相高效液相色谱方法,用于蛹虫草中腺苷和虫草素的定性定量分析。样品经水超声提取,以终浓度20mmol/L柠檬酸、40mmol/L醋酸、20mmol/L三乙胺的混合溶液-乙腈(体积比98:2)为流动相,流速1.0mL/min,色谱柱CapcellpakC18(150mm×4.6mm,5μm)分离,柱温40℃,进样量10μL,紫外检测波长260nm。在此条件下,腺苷在1～1000μg/mL范围内有良好的线性关系(Y=33574X+54.526,R2=0.9999),检测限0.2μg/mL,回收率93.75%～96.90%,RSD为0.116%;虫草素在2～1000μg/mL范围内有良好的线性关系(Y=34385X+23.103,R2=1.0000),检测限0.2μg/mL,回收率92.03%～97.35%,RSD为0.104%。该方法样品处理简便、分离度高、杂质干扰小、回收率高、重复性好,能够对蛹虫草中腺苷和虫草素进行准确的定性定量分析。

人工蛹虫草药材高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的:利用高效毛细管电泳(HPCE)技术建立人工蛹虫草药材的指纹图谱。方法:采用50 cm×75μm毛细管柱,以0.5 mmol/L硼砂溶液为缓冲液,运行电压为20 kv,检测波长为254 nm,柱温25℃。结果:建立的指纹图谱中共有11个共有峰,且方法学考察符合规定的标准。结论:该法准确简便,可作为控制人工蛹虫草中药材内在质量的有效手段。

人工蛹虫草子实体多糖的提取与含量测定

目的建立人工蛹虫草子实体多糖的提取与含量测定方法。方法采用正交试验筛选提取条件,苯酚-硫酸法测定多糖的含量。结果多糖的最佳提取条件为80倍量纯化水,45℃提取1次,每次10 min;线性范围为10～100μg·mL^-1,r=0.9998,加样回收率为99.41%,RSD=2.36%。3批供试品中多糖的平均含量为22.12%。结论该提取和测定方法操作简单,重复性好,结果准确可靠,可用于人工蛹虫草中多糖的提取与含量测定。

人工培养蛹虫草高效液相色谱指纹图谱的初步研究

目的建立人工蛹虫草药材的高效液相色谱指纹图谱。方法利用Agilent ZOBAXSB-AqC18(250mm×4.0mm,5μm)色谱柱,甲醇5%～60%为流动相梯度洗脱,分析时间30min,检测波长260nm,进样量1μL,体积流量1.0mL/min;对样品超声提取条件以及流动相、检测波长等色谱条件进行了系统优化设计。结果建立的指纹图谱中有11个共有峰,且方法学考察符合规定的标准,并以"中药色谱图分析和数据管理系统"软件对11个人工蛹虫草样品进行了相似度评价。结论该法准确简便,可作为控制人工蛹虫草药材内在质量的有效手段。

北虫草不同部位超氧化物歧化酶(SOD)酶活力的比较

目的:对北虫草菌丝体、子座的超氧化物歧化酶(SOD)酶活力进行对比实验,在水提取和丙酮分级提取两种方法中选择效果更好的一种。方法:利用水、丙酮分别对北虫草不同部位的超氧化物歧化酶(SOD)进行提取,邻苯三酚自氧化法检测其酶活性。结果:北虫草菌丝体的SOD酶活性和蛋白含量均明显高于子座,并且丙酮分级提取的效果更优。结论:北虫草各部分的SOD酶活性和蛋白含量各不相同,不同提取方法效果也有差异。

木耳虫草胶囊对高脂血症大鼠的降血脂作用

采用高脂饮食法复制高血脂动物模型。研究木耳虫草胶囊对饮食性高脂血症大鼠的降血脂功能。动物试验设置空白对照组、高脂模型对照组、木耳虫草胶囊-低、中、高剂量处理组;木耳虫草胶囊-低、中、高3个剂量组分别灌胃27.0、54.0、81.0mg·kg^(-1)·d^(-1)木耳虫草胶囊28d,空白对照组和高脂模型对照组灌胃等体积生理盐水;观察木耳虫草胶囊对高脂血症大鼠血清、肝脏脂质代谢和小肠吸收代谢的影响。与高脂模型对照组比较,木耳虫草胶囊低剂量组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)降低,中剂量组总胆固醇(TC)降低,高剂量组TC、LDL-C、甘油三酯(TG)均显著降低(P<0.01),同时各处理组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与模型对照组的HDL-C没有差异;中、高剂量组能极显著降低动脉粥样硬化指数(AI);各处理组的肝脏指数、肝小叶结构和脂肪变性的严重程度较模型对照组改善;各处理组的小肠绒毛高度和隐窝深度的比值较模型组明显减小。木耳虫草胶囊具有辅助降低血脂、胆固醇、甘油三酯功能和降低动脉粥样硬化指数的作用,并可部分改善高脂饮食对肝脏的损害,降低绒毛高度和隐窝深度的比值,从而减少饲料中脂肪的吸收。

蛹虫草虫草素提取工艺的研究

以蛹虫草[Cordyceps militaris(Linn.)Link]子实体为材料,首先通过单因素分析法探索虫草素的最佳提取溶剂,结果表明,70%乙醇是虫草素的最佳提取溶剂,并通过正交试验考察了微波助提法中微波功率、微波时间、提取次数和料液比4个因素对虫草素提取功率的影响,最终建立了提取虫草素的最佳工艺条件,即微波功率350 W,微波处理时间4 min,提取2次,料液比1∶50(g∶m L),提取率可达6.87%。

罐组式动态逆流提取蛹虫草多糖的工艺研究

目的建立罐组式动态逆流提取蛹虫草多糖的方法。方法通过单罐单因素实验,正交设计分析提取时间、提取温度和料液比对蛹虫草多糖提取的影响;设计罐组式动态逆流提取装置,重点探讨料液比和提取级数对多糖提取得率的影响。结果罐组式动态逆流提取虫草多糖的条件为:提取时间150 min,温度90℃,料液比1∶15和级数为5级,提取率88.8%,显著高于单罐提取率79.5%。结论蛹虫草多糖的罐组式动态逆流提取工艺节省能源,缩短生产时间,提取率较高。

蛹虫草菌丝体液体培养条件研究

研究蛹虫草液体发酵条件,以干菌体得率为指标,通过单因素试验确定适宜的碳源、氮源、培养温度和pH值。结果表明,最适液体培养基为:葡萄糖20 g/L,蛋白胨5.0 g/L,最适pH=6.0,最适培养温度24℃。

提高蛹虫草质量和产量的综合生产技术研究

目前市场上生产的蛹虫草产品没有统一的质量标准,影响市场对蛹虫草产品的消费,研究结果表明,蛹虫草菌种Hz1孢子复壮的菌株培养的子实体干重高于菌种B1、Bz1、H1孢子复壮的菌株培养的子实体干重,其液体培养基最优组合为葡萄糖20g/L、蛋白胨8g/L、KH2PO41.0g/L、MgSO4500mg/L。生产富硒蛹虫草培养基的最优主料为富硒大米45g、培养液55mL,在培养温度为22℃、空气相对湿度70%时蛹虫草子实体生长最好。综合而言,子实体培养最优条件为日间温度22℃、夜间温度15℃、空气相对湿度70%、光照度200lx,并结合先用日光灯照射、待子实体长至1～2cm时使用蓝紫灯照射处理的产量最高。检测结果显示,蛹虫草子实体的有效成分含量分别为硒52.03mg/kg、蛋白质27.74%、腺苷0.05%、多糖2.50%、虫草素2.61%、氨基酸26.92%,尤其是所含的虫草素具有工业提取价值。

大孔树脂对蛹虫草粗多糖的脱色工艺研究

【目的】探讨大孔树脂对蛹虫草粗多糖脱色的最佳工艺参数条件。【方法】以脱色率、多糖保留率为指标,利用静态吸附脱色实验对7种大孔树脂进行优选,并通过静态/动态吸附脱色的单因素影响实验,对筛选树脂脱除蛹虫草粗多糖色素的最佳条件进行考察。【结果】D941大孔树脂的脱色效果最好,其最佳脱色条件为:样品起始浓度为50 mg/m L,溶液p H值为5.5,操作温度为45℃;动态吸附流速为2.5床体积/h(BV/h),样品溶液上样量为5 BV,最优条件下,脱色率和多糖保留率分别为(93.9±3.4)%和(91.7±2.2)%。【结论】D941树脂适合应用于蛹虫草粗多糖的脱色,本研究优化方法可行、可靠。

人工蛹虫草子实体中游离麦角甾醇的提取及含量测定

目的:从人工蛹虫草子实体中提取游离型麦角甾醇,并测定其含量。方法:采用正交设计法筛选走角甾醇最佳提取条件,用HPLC法测定麦角甾醇含量。结果:走角甾醇在5.8～58.0μg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.5%(RSD=1.3%)。结论:该提取方法快速、简便,结果准确、可靠。