Studies on the Components of Crude and Processed Fructus Corni by ESI-MS^n

The components of crude and processed Fructus Corni were investigated by means of electrospray ionization-tandem mass spectrometry（ESI-MSn） technique in the negative ion mode. Compared with those of crude Fructus Corni, the chemical components of the processed Fructus Corni were changed both in quality and in quantity. From the ESI-MS spectra of the crude and processed Fructus Corni, six peaks were selected to establish the characte-ristic ESI-MS peaks. Several factors in the processing procedure were examined. The experimental results demonstrate that the chemical reactions that occurred in the processing procedure can be used for the elucidation of the processed mechanism of Fructus Corni, which is regularly affected by the processing conditions. The present article provides both the chemistry evidence for the understanding of the processing procedure of Fructus Corni and the specific methodology for the research of the processing procedure and quality identification of traditional Chinese medicine.

熟地黄-山茱萸药对通过PI3K/AKT通路对Aβ25-35诱导的N2a细胞凋亡的影响

目的研究熟地黄-山茱萸药对通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导小鼠脑神经瘤细胞株(N2a)细胞凋亡的抑制作用。方法以Aβ25-35(20μmol/L)处理N2a细胞构建阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)细胞模型,给予低、高浓度的熟地黄-山茱萸醇提物作用24 h。采用CCK8法测定细胞存活率,寻求最佳的Aβ25-35的诱导浓度;Hoechst 33342和Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡;比色法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性;Western Blot法检测cleaved Caspase-3、p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT蛋白表达。结果与空白对照组比较,经过Aβ25-35处理后的N2a细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达及活性显著升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值下降(P<0.05);给予低、高浓度的熟地黄-山茱萸醇提物作用24 h后,N2a细胞的凋亡率和Caspase-3蛋白表达及活性降低,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比值升高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);与低剂量组比,高剂量组N2a细胞的凋亡率和Caspase-3活性降低,p-AKT/AKT比值升高(P<0.05)。结论熟地黄-山茱萸醇提物可对Aβ25-35诱导的N2a细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与促进PI3K/AKT信号通路有关。

基于网络药理学与分子对接探讨山茱萸-菟丝子治疗认知障碍的作用机制

目的 利用网络药理学和分子对接方法探讨山茱萸-菟丝子治疗认知障碍的潜在作用机制。方法 利用TCMSP筛选山茱萸、菟丝子活性成分,并预测潜在靶点,从UniProt数据库获得药物成分对应靶点,通过TTD、GeneCards和OMIM数据库获取认知障碍相关靶点,利用R4.2.2软件获取山茱萸-菟丝子与认知障碍的共同靶点。利用Cytoscape3.7.2软件构建“药物-活性成分-靶点”网络,通过STRING11.5数据库构建共有靶点蛋白相互作用网络,利用R4.2.2软件进行GO功能及KEGG通路富集分析,利用AutoDock1.5.6、PyMoL2.4.0软件进行分子对接验证。结果 经过筛选共得到30个药物活性成分,184个药物-疾病交集靶点,通过GO功能和KEGG通路富集分析得到2 678个GO条目和179条信号通路。共同靶点的通路富集分析显示主要与PI3K-Akt、HIF-1α/VEGF等信号通路相关,分子对接结果显示,认知障碍核心靶点与山茱萸-菟丝子主要成分亲和力较好,可能有效自由结合。结论 山茱萸-菟丝子中槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、异鼠李素、豆甾醇、四氢鸭脚木碱等成分可能通过抗氧化应激、抗炎及免疫调节、糖脂调节等作用治疗认知障碍。

山茱萸多糖的提取分离、化学结构及生物活性研究进展

山茱萸始载于《神农本草经》,在我国应用历史悠久,具有补益肝肾、涩精固脱的功效。多糖是山茱萸中被关注的主要活性成分之一,查阅近20年的国内外文献,综述山茱萸多糖常用的提取分离及纯化方法,并对山茱萸多糖化学结构特征和生物活性的研究现状进行总结。结果显示,山茱萸多糖的提取分离多采用经典的水提醇沉法,还有超声波提取法、微波辅助提取法、复合酶解法及稀碱提取法等,提取率范围为5.29%~18.92%;均一多糖的分离纯化多同时采用DEAE-纤维素柱、Sephadex及Sephacryl等多种分离填料层析获得,已明确均一多糖的分子量、单糖组成及比例、糖苷键类型和连接顺序的多糖共有9个。山茱萸多糖具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化、免疫调节和肝脏保护等多种生物学活性,已成为近几年来有关山茱萸基础研究及产品开发的热点。综上所述,对山茱萸多糖的结构进行综合解析,基于肠道微生态探讨山茱萸多糖的构效关系及作用机制可能是未来的主要研究方向。

山茱萸环烯醚萜苷的化学成分及生物活性研究进展

山茱萸是我国药食两用的大宗药材之一,广泛应用于内外妇儿各类患者及保健品的开发等。山茱萸环烯醚萜苷(cornel iridoid glycosides, CIG)为山茱萸的特征活性成分群,综述近10年的文献报道,已有103种CIG被分离鉴定。研究将对CIG的化学成分、裂解规律、体内代谢产物研究进行归纳总结,并从药理药效、作用通路及分子机制等方面综述CIG在降血糖、神经保护、心脏保护、肝脏保护、肾脏保护、睾丸保护等多种生物活性的研究进展,以期为CIG进一步的研究、开发及应用提供新的思路。

黄芪健骨胶囊质量标准研究

目的建立黄芪健骨胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对制剂中黄芪、山茱萸药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中马钱苷、毛蕊异黄酮苷、柚皮苷的含量,色谱柱为XSelect HSS T_(3)柱(250 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为甲醇-0.3%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为240 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果黄芪、山茱萸的TLC图特征斑点清晰,分离度好,且阴性对照无干扰。马钱苷、毛蕊异黄酮苷、柚皮苷质量浓度分别在21.54~430.80μg/mL(R^(2)=0.9993)、5.02~100.40μg/mL(R^(2)=0.9999)、20.28~405.60μg/mL(R^(2)=0.9997)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于3.0%;平均加样回收率分别为100.66%,98.58%,100.17%,RSD分别为1.70%,2.36%,1.98%(n=6)。结论该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于黄芪健骨胶囊的质量控制。

基于网络药理学探究山茱萸-附子治疗心力衰竭的分子机制

目的基于网络药理学探究山茱萸-附子治疗心力衰竭的分子机制。方法2021年4月至2022年5月,运用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)数据库对山茱萸-附子有效成分进行筛选,利用SwissTargetPrediction数据库进行靶点预测。通过DisGeNet、DrugBank、OMIM疾病数据库收集心力衰竭的治疗靶点,取疾病与药物之间的靶点交集,将靶点交集导入STRING11.5数据库构建山茱萸-附子蛋白质-蛋白质相互作用(proteinprotein interaction,PPI)网络图。利用DAVID数据库对关键靶点进行基于京都基因和基因组数据库(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,使用AutoDuckTool 1.5.6软件对关键靶点进行分子对接。结果筛选出山茱萸-附子有效化学成分33种、靶点208个,心力衰竭疾病靶点2046个,山茱萸-附子治疗心力衰竭的靶点85个。在DAVID数据库中进行基因本体论(GO)分析得出与疾病最相关的前20个条目,KEGG分析显示81条通路。山茱萸-附子治疗心力衰竭的关键靶点有过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、表皮生长因子受体(EGFR)、雌激素受体1(ESR1)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2),KEGG通路主要有环磷酸鸟苷-蛋白激酶G信号通路(cGMP-PKG)、缺氧诱导因子1信号通路(HIF-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路(PPAR)等;分子对接结果显示活性成分β-谷甾醇与关键靶点ESR1、EGFR的对接亲和力较好。结论山茱萸-附子通过多靶点、多成分、多通路的作用机制治疗心力衰竭。

基于酸甘化阴理论探讨药食同源品种山茱萸-炙甘草药对的心肌保护作用

各种心肌损伤因素造成的相关疾病往往预后不佳,且用药疗程较长,是临床亟待解决的重要问题。研究发现,酸甘化阴治法对慢性心肌病有显著疗效,通过文献研究和实验筛选,发现药食同源品种山茱萸-炙甘草药对可改善心肌损伤。故从酸甘化阴理论角度,对山茱萸-炙甘草保护心肌、缓解心肌损伤的作用进行探讨,以期更好地指导山茱萸-炙甘草在临床中的使用以及为药食同源品种的研究开发与应用提供参考。

山茱萸提取物对小鼠造血系统辐射损伤的作用研究

目的研究山茱萸提取物对辐射诱导小鼠造血系统损伤的防护作用。方法选取6~8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠16只,体重20~22 g,随机选取1只分离股骨,体外培养其骨髓细胞,设置细胞对照组、细胞照射组、0.001 mg/ml山茱萸组、0.01 mg/ml山茱萸组。细胞对照组正常培养,细胞照射组进行照射(1 Gy),0.001 mg/ml山茱萸组、0.01 mg/ml山茱萸组给予相应浓度的山茱萸提取物30 min后照射,18 h后观察四组细胞活力,根据细胞活力选择后续实验的山茱萸提取物浓度。比较细胞对照组、细胞照射组、0.001 mg/ml山茱萸组凋亡程度及活性氧水平。将剩余15只小鼠采用随机区组法分为对照组、照射组、山茱萸组,每组5只。照射组、山茱萸组给予2 Gy全身照射,山茱萸组照射前1 h给予山茱萸提取物DMSO溶液0.2 ml(400 mg/kg),对照组和照射组给予等量含8%DMSO的生理盐水。给药7 d后,检测三组外周血血常规和单侧股骨骨髓单个核细胞(BMNC)、造血祖细胞(HPC)、造血干细胞(HSC)数量及其活性氧生成和DNA(γH2AX)损伤程度。结果细胞照射组细胞活力低于细胞对照组,凋亡细胞比例、活性氧水平高于细胞对照组(P<0.05)。0.01 mg/ml山茱萸组细胞活力与细胞照射组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。0.001 mg/ml山茱萸组细胞活力高于细胞照射组,凋亡细胞比例、活性氧水平低于细胞照射组(P<0.05)。照射组白细胞、红细胞、血小板、HPC、HSC水平均低于对照组(P<0.05)。三组BMNC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。山茱萸组红细胞、HPC水平高于照射组(P<0.05),两组白细胞、血小板、HSC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。三组BMNC、HPC、HSC中活性氧水平及BMNC中γH2AX水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。照射组HPC、HSC中γH2AX水平高于对照组,山茱萸组HPC、HSC中γH2AX水平低于照射组(P<0.05)。结论山茱萸提取物对造血系统辐射损伤有一定的预防作用。

《傅青主女科》女科卷中山茱萸应用探析

山茱萸是《傅青主女科》中的高频用药之一,通过对女科卷中其应用病证、配伍、剂量、炮制的搜集整理、分析、总结,发现傅青主用山茱萸剂量平允,均用蒸制,合核与去核沿袭古法。通过精当的配伍,使山茱萸的功效不囿于“补益肝肾,收涩固脱”,而兼有生血、柔肝、制火、固冲、敛肺的作用,扩大了山茱萸的应用范围,对当今临床具有借鉴意义。

多指标结合熵权-TOPSIS法探究酒萸肉的干燥方法

目的:从性状、成分、溶出方面探究干燥技术在酒萸肉生产应用中的适用性。方法:使用电子眼、电子舌技术收集酒萸肉性状信息。采用UPLC-Q-TOF-MS法定性分析酒萸肉的成分,筛选酒萸肉中的指标性成分。HPLC法测定不同干燥方法处理的酒萸肉样品在10、20、40、60、90、120 min时水煎液中没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷的含量。使用SIMCA 13.0、Origin 2021等统计分析软件对数据进行分析,并利用熵权法-TOPSIS对酒萸肉进行综合评价。结果:在酒萸肉提取液中定性出14个成分。以没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷为指标性成分分析,发现75℃真空微波干燥处理的酒萸肉饮片在综合评价中得分最高,远红外干燥法及鼓风干燥法次之。结论:电子眼和电子舌技术可以比较出不同干燥方法处理后酒萸肉饮片的性状差异信息,UPLC-Q-TOF-MS可高效定性出酒萸肉中化学成分,多指标结合熵权-TOPSIS法可用于不同干燥方法酒萸肉综合评价。

微波辅助提取山茱萸多糖的工艺优化

[目的]优化微波辅助提取山茱萸（FRUCTUS CORNI）多糖的提取工艺。[方法]在全面单因素试验的基础上,先采用Plackett-Burman设计对7个因素进行试验,筛选出影响最大的3个因子,并确定其余因素的最优水平,再利用响应面法设计对3个主要因子进行试验和优化,建立了二次多项式数学模型。[结果]微波功率、液料比和乙醇体积分数是主要因子,最佳工艺条件是：山茱萸粉末直径在300~450μm之间,料液比1∶19.7（g∶m l）,微波功率624 W,辐照时间55 s,水浴温度90℃,浸提时间2 h,乙醇体积分数为68.4%,在此条件下,多糖得率达20.94%。[结论]该方法误差小、数据可靠,可用于山茱萸多糖的提取。

山茱萸-白芷美白面膜的制备

以山茱萸、白芷为原料,从中提取有效成分制备撕拉型山茱萸-白芷美白面膜。采用单因素实验和正交试验对面膜配方进行优化,DPPH法对面膜的抗氧化活性进行评价。结果显示面膜最佳配方组成为PVA∶PVP为2.2 g∶1.0 g、钛白粉1.2 g、乙醇0.6 mL、十八醇1.2 g、丙二醇1.0 mL、甘油3.0 g、山茱萸多糖∶白芷提取液为0.1 g∶0.3 mL、乳化剂用量1 g时。按此配方制备得到的面膜均匀度、光滑度、爽滑感、黏度、刺激性、成膜时间等参数最佳,DPPH抗氧化性实验得出,面膜的抗氧化性较好,最大值可达66.32%。

ICP-AES法测定山茱萸中六种微量元素的含量

应用微波消解、电感耦合等离子体-原子发射光谱（ICP-AES）法测定山茱萸中6种微量元素的含量。结果表明,山茱萸中Fe、Se、Zn、Mn、Cu和Ni 6种元素的含量分别为240.612、9.091、6.942、5.388、4.110和1.457μg/g;加标回收率为94.0%～103.5%,RSD在0.48%～4.17%。山茱萸中富含Fe、Se、Zn、Mn、Cu和Ni 6种微量元素,测定结果具有良好的准确性和精密度。

山茱萸提取物抑菌活性成分稳定性的研究

本实验主要对山茱萸抑菌性能进行研究,结果表明,山茱萸提取物具有强抑菌活性,在pH<7的条件下提取物对细菌具有较好的抑菌效果,明显强于山梨酸钾。同时以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,研究山茱萸提取物活性成分的稳定性,结果表明提取物经过酸、碱处理后只有在酸性条件下具有一定的抑菌活性,碱处理使其抑菌活性减弱,甚至消失;温度、紫外照射及常见金属离子(Na+、K+、Ca2+、Fe2+、Fe3+)对其稳定性几乎没有影响。

山茱萸的化学、药理与炮制研究进展

通过对山茱萸在近几年国内外化学研究、药理作用方面相关文献的查阅,以及对其炮制沿革及现代临床应用等方面的研究情况进行了总结,为进一步合理开发利用山茱萸提供理论依据。

山茱萸总萜的降血糖作用

目的:通过正常小鼠、四氧嘧啶糖尿病模型小鼠和链脲佐菌素糖尿病模型大鼠研究山茱萸总萜的降血糖作用。方法:1.山茱萸总萜以100 mg.kg-1,50 mg.kg-1,25 mg.kg-1的剂量连续10 d灌胃给予正常小鼠,观察其降血糖作用。2.以相同剂量连续4 d灌胃给予正常小鼠,末次给药1 h后灌胃给予淀粉5 g/kg,观察其对糖耐量的影响。3.以相同剂量连续12 d灌胃给予四氧嘧啶糖尿病模型小鼠,观察其降血糖作用及对胰岛素水平的影响。4.以60 mg.kg-1,30 mg.kg-1,15 mg.kg-1的剂量连续14 d灌胃给予链脲佐菌素糖尿病模型大鼠,观察其降血糖作用及对胰岛素水平,糖化血清蛋白GSP和肝糖原含量的影响。结果:山茱萸总萜对正常小鼠的血糖水平无明显影响;100 mg.kg-1可提高正常小鼠的糖耐量(P<0.01);三个剂量均可显著降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖值(P<0.05),提高血清胰岛素水平(P<0.05);显著降低链脲佐菌素糖尿病模型大鼠的血糖值(P<0.05或0.01),增加肝糖原含量(P<0.05);60 mg.kg-1,30 mg.kg-1可以显著降低糖化血清蛋白GSP的含量(P<0.05)。结论:山茱萸总萜对糖尿病模型动物具有良好的降血糖作用。

山茱萸免疫活性部位F-1C的免疫抑制作用

目的 :研究山茱萸免疫活性部位F 1C对小鼠免疫反应的抑制作用。方法 :运用淋巴细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应、溶血空斑实验和流式细胞技术观察F 1C体外应用和口服对正常小鼠免疫反应和脾脏T细胞亚群的影响。结果 :F 1C在 10 2 0 0 μg/ml剂量范围内无明显细胞毒性 ,但对小鼠ConA诱导的脾细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应和脾细胞抗体生成反应具有明显的抑制作用 ,对LPS诱导的裸鼠脾细胞增殖反应呈剂量依赖性的促进作用。连续 7天口服给予 4 0和 80mg/kg ,明显抑制脾细胞抗体生成反应和脾细胞自发增殖反应 ,对脾脏T细胞亚群CD4+ 细胞数目无明显影响 ,但明显升高CD8+ 细胞百分数 ,使CD4+ /CD8+ 比值降低。同时给药组小鼠T抑制细胞 (Ts)的抑制功能增强。结论 :F 1C对正常小鼠免疫反应具有明显的抑制作用 ,增加Ts细胞数量并增强Ts细胞抑制功能可能是其发挥免疫抑制作用的途径之一。

山茱萸多糖SZYP-2的结构分析

从中药山茱萸(FructusCorni)中分离得到多糖组分SZYP_2 ,它的糖基组成为鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖 ,单糖间的摩尔比是1∶3.3∶3∶3.8,通过部分甲基化、部分乙酰化后的气相色谱分析确定了各单糖间的连接点。

山茱萸对小鼠免疫系统的影响

山茱萸水煎剂10,20g/kg ig使小鼠胸腺明显萎缩;减慢网状内皮系统对碳粒的廓清速率:10g/kg升高小鼠血清溶血素抗体的含量,而5g/kg作用不显著;山茱萸5,10g/kg均使血清抗体IgG含量明显升高,并能抑制SRBC所致小鼠迟发型足垫肿胀;10,20g/kg于抗原攻击前给药明显减轻DNCB所致小鼠接触性皮炎;而20g/kg于抗原攻击后3～15h给药亦对接触性皮炎有较明显的抑制作用。