CRISPR/Cas9系统介导的p53基因突变促进树鼩骨骼肌卫星细胞的增殖活性

目的:利用CRISPR/Cas9系统在树鼩骨骼肌卫星细胞中敲除p53基因并检测其增殖活性。方法:通过生物信息学方法对树鼩和15种哺乳动物的p53蛋白氨基酸序列进行同源性分析,根据树鼩基因组信息设计可编辑树鼩p53突变位点sgRNA,构建lenti CRISPR v2-sgp53基因编辑重组质粒,用293T细胞进行慢病毒包装,感染树鼩骨骼肌卫星细胞,嘌呤霉素筛选多克隆细胞并扩增;通过测序确定基因编辑效果。采用CCK8法检测细胞增殖活性,采用western blotting验证p53蛋白表达水平。结果:与人p53和小鼠p53氨基酸序列同源性(96.92%)相比,人p53和树鼩p53的氨基酸序列同源性(98.21%)更高。进化树分析显示,与小鼠相比,人与树鼩的亲缘关系更近。成功构建了3个靶向树鼩p53编辑的重组载体:lenti CRISPR v2-sgp53-g1、lenti CRISPR v2-sgp53-g2、lenti CRISPR v2-sgp53-g3,均成功在树鼩骨骼肌卫星细胞上实现p53基因编辑产生突变,导致p53功能丧失,p53的突变提高了树鼩骨骼肌卫星细胞的增殖能力。经药筛后的树鼩骨骼肌卫星细胞p53基因敲除成功,p53蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:本研究利用CRISPR/Cas9系统成功使树鼩骨骼肌卫星细胞p53基因突变、功能丧失,为后续树鼩p53基因敲除模型的建立提供了重要的分子生物学基础。

高分组前列腺癌组织中PCDH9表达缺失且与p53、Rb、STAT3的表达相关

目的探讨前列腺癌中原钙黏蛋白9(PCDH9)的表达缺失在调控细胞周期、促进肿瘤进展中的作用。方法选取南充市中心医院病理科2018-2023年存档的前列腺癌样本127例,其中根据世界卫生组织/国际泌尿病理协会分级标准(WHO/ISUP)分组为G4~5组的石蜡组织标本87例,G1~3组的石蜡组织标本40例。应用免疫组织化学染色检测前列腺癌组织中PCDH9和细胞周期相关蛋白人类肿瘤抑制蛋白53(p53)、视网膜母细胞瘤(Rb)肿瘤抑制蛋白及信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达情况,分析其表达与临床病理特征的关系。结果PCDH9在G4~5组前列腺癌组织中的表达缺失率(44.8%vs.7.5%)显著高于G1~3组(P<0.001)。G4~5组前列腺癌组织中p53、STAT3的阳性表达率分别为34.5%、89.7%,Rb的表达缺失率为27.6%。PCDH9、Rb的表达缺失与是否伴有神经内分泌样组织学形态、神经侵犯和脉管侵犯相关(P<0.05)。高分组前列腺癌组织中,PCDH9表达与p53(r=0.345,P<0.05)、Rb(r=0.503,P<0.05)及STAT3(r=0.224,P<0.05)的表达呈正相关。结论PCDH9在高分组前列腺癌组织中易发生表达缺失,且表达缺失患者常伴有神经内分泌样组织学形态,高分组前列腺癌中PCDH9表达缺失可能通过STAT3信号通路调控细胞周期,进而促进肿瘤的进展。

ADAM9和p53在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨ADAM9和p53在卵巢癌中的潜在诊断和预后价值。方法选取2016年01月至2022年12月间泰州市人民医院收治的128例卵巢癌患者,并收集患者的肿瘤组织和癌旁组织,对不同患者根据ADAM9和p53的表达水平进行临床病理特征与生存周期比较,分析ADAM9和p53的表达与卵巢癌病理特征及预后的相关性。结果ADAM9在卵巢肿瘤组织中的表达水平高于癌旁组织(χ^(2)=5.082,P<0.05),p53在卵巢肿瘤组织中的表达水平低于癌旁组织(χ^(2)=12.623,P<0.001)。RT-PCR的检测发现ADAM9在卵巢肿瘤组织中mRNA高表达,p53在卵巢组织中mRNA低表达;并且ADAM9和p53二者之间具有显著相关性,呈负相关(P<0.0001,r=-0.123)。ROC曲线分析显示ADAM9和p53的AUC值分别为0.924(95%置信区间为0.880~0.967)和0.851(95%置信区间为0.796-0.906),表示ADAM9和p53是诊断卵巢癌的敏感标志物。ADAM9高表达组和p53低表达组卵巢肿瘤患者的无病进展生存期(PFS)均明显降低。结论卵巢癌发生发展过程与ADAM9和p53的表达异常有关,可作为临床诊断和预后的标志物。

基于p53信号通路探讨木香烃内酯对H9C2心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的:研究木香烃内酯对于心肌细胞氧化损伤的保护作用及其与凋亡相关通路的相关性。方法:培养H9C2心肌细胞,分3组,分别为:正常组(Control)、氧化损伤组(Oxidative Damage Group, ODG)、木香烃内酯组(Costunolide);其中氧化损伤组H9C2心肌细胞通过双氧水构建氧化损伤模型,木香烃内酯组在氧化损伤组的基础上使用木香烃内酯预处理;通过CCK8实验测定各组细胞活力值,流式细胞仪检测各组细胞培养基上清液氧化应激及抗氧化应激指标的表达,Western blot检测各组p53通路蛋白的表达。结果:与Control组相比,ODG组与Costunolide组细胞活力值均明显下降(均P<0.05),ROS、MDA表达量均明显上升(均P<0.05),SOD、GSH表达量均明显下降(均P<0.05);与ODG组相比,Costunolide预处理后,细胞活力值明显提升(P<0.05),ROS、MDA表达量均明显下降(均P<0.05),SOD、GSH表达量均明显上升(均P<0.05),Caspase-3、p53的表达量明显降低(均P<0.05),Bcl-2表达量明显上升(P<0.05)。结论:木香烃内酯预处理可有效发挥对双氧水致心肌细胞氧化损伤的保护作用,其机制可能与p53相关信号通路相关。

NEDD9、Ki67、P53联合检测对胃癌的早期诊断和恶性程度评估的价值

目的:探讨NEDD9、Ki67、P53在胃癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化法分别对30例正常胃黏膜,54例早期胃癌及51例进展期胃癌进行NEDD9、Ki67、P53蛋白检测。结果:(1)NEDD9、Ki67、P53阳性表达率在正常胃黏膜、早期胃癌和进展期胃癌组织中依次升高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)胃癌组织中NEDD9的阳性表达与胃癌的浸润深度和组织学分化程度有关(P<0.05);Ki67的阳性表达与胃癌的临床分期和浸润深度有关(P<0.05);P53的阳性表达与胃癌的组织学分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05);(3)Spearman相关分析显示NEDD9和Ki67蛋白表达呈正相关(r=0.216,P=0.027)。结论:NEDD9、Ki67、P53阳性表达率在正常胃黏膜、早期胃癌和进展期胃癌组织中依次升高,且在早期胃癌中表达率已显著升高,联合检测三者有助于胃癌的早期诊断和胃癌恶性程度的评估。

基于Cortex-A9平台的ZigBee物联网综合实验平台设计

基于ARM嵌入式平台,设计无线网络通信实验课程,能够把分散的嵌入式系统知识点,整合在统一平台中,达到创新物联网实验教学体系的目的。实验通过Cortex-A9内核平台与ZigBee无线网络平台配套研发,让学生在实际操作和编程过程中,深刻理解物联网通讯的工作原理。实验分析了Cortex-A9内核在物联网实验中的工作特点,选用Tiny4412核心板,配套CC2530传感器节点,搭建物联网综合实验平台。同时,针对高校学生的基本情况,设计了理论完善、操作性强的实验流程,实现Android APP应用、Linux QT应用、QT应用的演示方式,贯穿物联网3个结构层次所涉及的知识要点和实践重点。

基于Cortex-A9的物联网网关的通信协议设计

针对Cortex-A9物联网网关硬件平台,提出一套可靠的物联网网关通信协议。协议承担物联网网关的数据汇集和中转等任务,完成传感器数据的上传、报警短信的转发以及网关和服务器的局域组网等功能,成功将无线传感器网络协议、GSM协议、TCP/IP协议相融合,实现对环境信息稳定可靠的监测。

端粒酶反转录酶活化与p53金属蛋白酶-9表达对非小细胞肺癌发生的影响

目的探讨人端粒酶反转录酶(hTERT)、p53、金属蛋白酶-9(MMP-9)与非小细胞肺癌(NSCLC)发生的内在联系及其作用。方法应用原位杂交、HE及免疫组织化学技术对104例NSCLC组织进行检测,探讨NSCLC发生的分子机制及诊断的可能性。结果(1)hTERT mRNA、p53、MMP-9在NSCLC中均有较高的表达,阳性率分别为73.08%,69.23%,84.62%。(2)hTERT mRNA在鳞癌中表达为64.71%,腺癌中为88.89%(2χ=6.997,P<0.01)。(3)p53与hTERT mRNA阳性表达呈正相关性(r=0.651,P<0.05),二者的阳性共表达为53.85%,一致性表达为65.40%。p53与MMP阳性表达呈正相关性(r=0.477,P<0.05),二者的阳性共表达为53.85%,一致性表达为53.85%。hTERT mRNA与MMP-9阳性表达呈正相关性(r=0.671,P<0.01),二者阳性共表达率为71.15%,一致性表达率为75.00%。结论p53、hTERT mRNA、MMP-9具有协同促进NSCLC发生的作用;hTERT mRNA的表达与NSCLC的类型有关。

Livin与Caspase-9、p53与胃癌关系的研究进展

胃癌的发生是一个多基因、多步骤、多阶段的复杂过程。通过研究Livin、caspase-9、p53的生物学特性、作用机制、与胃癌的关系揭示Livin与caspase-9、p53在胃癌发生发展中的作用机制。Livin在胃癌组织中的表达与caspase-9的表达呈负相关,而与p53呈正相关,提示抑癌基因p53的突变和Caspases-9蛋白抑制其介导级联激活反应引起细胞凋亡作用,干扰Livin在胃癌组织中上调或下调机制,影响Livin抗细胞凋亡作用和机制,可能在胃癌的发生发展中起着重要作用。因此研究Livin与caspase-9、p53之间的关系,为肿瘤的早期诊断、基因治疗和细胞治疗提供了新的靶点,为胃癌的检测和治疗提供科学依据。

CD_(44)V_6和MMP-9及P_(53)的表达与胃癌患者淋巴结转移的关系——附60例检测报告

目的:探讨CD44第6变异株(CD44V6)、金属基质蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)、P53蛋白表达与胃癌患者淋巴结转移的关系。方法:采用分子原位杂交和免疫组织化学方法对60例胃癌患者癌组织中的CD44V6信使核糖核酸(messengerribonucleicacid,mRNA)、MMP-9mRNA和P53蛋白的表达进行检测。结果:胃癌组织中CD44V6mRNA、MMP-9mRNA、P53蛋白表达阳性率分别为60%、63%、65%,CD44V6mRNA、MMP-9mRNA、P53蛋白阳性表达者的淋巴结转移率分别为92%、92%、90%,均明显高于阴性者的38%、32%、33%,P<0.05;同时有2个以上指标表达者的淋巴结转移率为100%,明显高于1个指标表达者(20%)和3个指标均不表达者(23%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CD44V6mRNA、MMP-9mRNA和P53蛋白的异常表达与胃癌淋巴结转移过程密切相关,对分析胃癌的生物学行为和判断预后有重要意义。

p53,Ki67,VEGF和MMP-9在胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨p53,Ki67,VEGF,MMP-9在胶质瘤组织中的表达及其与肿瘤恶性程度之间的相关性。方法:用免疫组化方法检测10例正常脑组织和38例胶质瘤组织中p53,Ki67,VEGF,MMP-9的表达,并与肿瘤恶性度进行相关性分析。结果:Ki67和MMP-9表达与胶质瘤恶性程度有关(P<0.05),而其他生物学指标的表达与胶质瘤恶性程度无显著性相关。VEGF和MMP-9的表达呈显著正相关(P<0.05),p53表达与Ki67,VEGF,MMP-9表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:Ki67和MMP-9阳性表达可以作为评价胶质瘤恶性程度的生物学指标。

垂体腺瘤MRI Knosp分级与Ki-67、p53、MMP-9的相关性分析

目的检测增殖细胞核抗原Ki67(Ki-67)、抑癌基因p53(p53)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在侵袭性及非侵袭性垂体瘤中的表达变化,探讨它们与Knosp分级的相关性。方法选用垂体瘤179例,根据Knosp分级分为侵袭性组(n=91)和非侵袭性组(n=88),应用免疫组化方法检测标本中Ki-67、p53及MMP-9的表达情况。结果 p53、Ki-67和MMP-9在Knosp分级Ⅲ级以上组中显著增高(P<0.01)。结论 Ki-67、p53和MMP-9表达与Knosp分级呈正相关。

巨幼红细胞性贫血患者血浆维生素B9和维生素B12水平对骨髓组织p53表达的影响研究

目的探究巨幼红细胞性贫血(megaloblastic anemia, MBA)患者血浆维生素B9(VB9)和维生素B12(VB12)水平对p53表达的影响。方法选择自2015年3月~2018年5月68例MBA患者为病例组,另选取同期68例健康者为对照组。分别比较VB9和VB12的分布情况、比较p53在不同程度VB9和VB12分布中的表达水平、比较两组间同型半胱氨酸(Hcy)的含量和分布情况和分析低VB9和VB12的MBA患者同型半胱氨酸的含量与p53表达的相关性。结果病例组VB9和VB12水平分别为5.28±0.36ng/ml及144.51±28.17pg/ml,显著低于对照组(5.73±0.45ng/ml,176.33±31.54pg/ml),差异有统计学意义(t=-6.44,-6.20,均P<0.001)。在VB9和VB12含量均偏低时,病例组患者的分布频数显著高于对照组(t=4.847,P <0.05)。在VB9和VB12含量均偏低时,病例组细胞p53表达中度和重度染色的比例较高,与其余两组病例组的差异具有统计学意义(t=7.551,P <0.05)。病例组的同型半胱氨酸含量为43.2μmol/L,且同型半胱氨酸患者分布比例为80%,显著高于对照组(t=4.226,P <0.05)。在VB9和VB12含量均偏低时患者中同型半胱氨酸含量与p53表达呈正相关性(Y=0.655X+12.42,r=0.661)。结论 p53的高表达可作为低VB9和VB12水平诱导MBA产生的标志物,为MBA的诊断提供有效参考。

MMP-9和p53蛋白的表达及微血管密度对乳腺癌远处转移的影响

目的观察乳腺癌组织中MMP-9,p53蛋白的表达及微血管密度与患者腋淋巴结及远处肿瘤转移之间的关系,以探讨它们与乳腺癌生物学行为的关系及机制。方法通过组织化学方法检测MMP-9,p53在肿瘤细胞中的表达,在显微镜下计算肿瘤组织中微血管密度值,观察其与患者腋淋巴结及远处肿瘤转移之间的关系。结果MMP-9主要分布在胞浆,20例乳腺纤维腺瘤细胞均未表达MMP-9,乳腺癌细胞内随同侧腋淋巴结转移量的增多,MMP-9阳性级别增加,两者呈正相关;p53主要表现为核阳性,20例乳腺纤维腺瘤细胞中18例未表达p53,随同侧腋淋巴结转移量的增多,p53表达级别增加,两者呈正相关;随同侧腋淋巴结转移量的增多,微血管密度明显增加,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论肿瘤细胞中MMP-9,p53蛋白的高表达及MVD值可以作为评估患者腋淋巴结转移及其他部位远处转移的重要指标。

凹顶藻萜提取物对荷H22肿瘤小鼠氧化应激及p53和MMP-9表达的影响

肝癌是严重危害人类生命健康的顽症之一。近年来，海洋萜类化合物的天然抗氧化、抗肿瘤活性已引起人们的广泛关注。

ARM Cortex-A9的NEON技术研究及应用

ARM Cortex-A系列处理器首次集成了NEON技术,可以有效加速多媒体应用。本文基于Cortex-A9处理器,对NEON技术进行研究,并对JM解码器进行NEON优化,提供实际优化效果。在PandaBoard开发板上对不同分辨率的多个测试序列进行了解码测试,测试结果显示,优化后的解码速率提高了,而且提高分辨率并不影响优化效果。

CD44v6、v9和P53蛋白在人喉癌中的表达及与预后的关系

目的 :探讨 CD4 4 v6、v9和 P5 3蛋白联合表达在人喉癌发生、发展及预后中的作用。 方法 :采用免疫组织化学 En Vi-sion法检测 2 2 3例喉不同病变组织标本 (喉癌 14 3例 ,喉癌前病变 32例 ,声带息肉 39例和癌周正常喉组织 9例 )中 CD4 4 v6、v9和 P5 3蛋白的表达。 结果 :(1) CD4 4 v6、v9和 P5 3在人喉癌组织中表达阳性率分别为 72 .7% (10 4 / 14 3)、5 6 .6 % (81/ 14 3)和 5 2 .4 % (75 / 14 3) ;喉癌前病变组织中为 37.5 % (12 / 32 )、31.3(10 / 32 ) %和 2 1.9% (7/ 32 ) ;声带息肉中为 17.9% (7/ 39)、12 .8% (5 / 39)和 10 .3% (4 / 39) ;癌周正常喉组织中均为 0 (0 / 9) ;3种蛋白在喉癌组织中阳性表达率均显著高于癌前病变及声带息肉组织 (P<0 .0 1)。 (2 ) CD4 4 v6、v9和 P5 3在人喉癌组织中联合表达阳性率为 4 1.3% (5 9/ 14 3) ,显著高于其他喉不同病变组织中联合表达阳性率 (8.8% ,7/ 80 ,P<0 .0 1)。 (3) CD4 4 v6、v9和 P5 3在 - 期喉癌组织中表达阳性率分别为 5 6 .5 %(35 / 6 2 )、4 0 .3% (2 5 / 6 2 )和 38.7% (2 4 / 6 2 ) ,均显著低于 - 期喉癌组织 [分别为 85 .2 % (6 9/ 81)、6 9.1% (5 6 / 81)和 6 2 .9%(5 1/ 81) ,P<0 .0 1]。 (4 ) CD4 4 v6、v9和 P5 3在伴颈淋巴结转?

MMP-9、p53在子宫内膜异位症组织中的表达及相关性研究

目的:探讨肿瘤相关蛋白基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、p53在子宫内膜异位症(EMc)发生、发展中的作用。方法:应用免疫组化SP法检测30例异位子宫内膜、25例在位子宫内膜和30例正常子宫内膜及20例卵巢癌组织标本中MMP-9、p53蛋白的表达情况。结果:(1)MMP-9在子宫内膜异位症患者异位内膜中阳性表达率为86.7%,分别高于其在内异症在位内膜中的表达44%及正常子宫内膜中的表达16.7%(P<0.01),而与其在卵巢癌组织中的表达90%差异无统计学意义(P>0.05);MMP-9在内异症在位内膜中的表达高于正常子宫内膜(P<0.05);(2)p53在子宫内膜异位症患者异位内膜中的阳性表达率为20%(6/30),高于其在正常子宫内膜及内异症在位内膜中的阴性表达(P<0.05);p53在卵巢癌组织中的阳性表达率为50%(10/20),显著高于异位内膜组织的表达(P<0.05);(3)Spearman等级相关分析显示,MMP-9与p53在内异症异位子宫内膜中的表达无相关性(rs=-0.294,P>0.05)。结论:MMP-9与p53可能通过各自不同的生物学途径参与了EMs的侵袭过程,两者在内异症的发生发展中发挥着重要作用。

拉米夫定对人肝癌细胞MMP-9及p53蛋白表达的影响

目的探讨拉米夫定作用于人肝癌细胞系Hep G2.2.15后对细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及p53蛋白表达的影响。方法不同浓度(100、200、300μg/m L)拉米夫定(拉米夫定100、200、300μg/m L组)作用于Hep G2.2.15细胞不同时间(3、6 d),并设立不应用拉米夫定的Hep G2.2.15细胞作为对照组。MTT比色法测定细胞增殖活性;ELISA法测定细胞培养上清及细胞中MMP-9及p53蛋白相对表达量。结果拉米夫定100、200、300μg/m L组与对照组不同时间细胞增殖活力比较差异无统计学意义(P均>0.05)。作用3、6 d,与对照组比较,拉米夫定各处理组Hep G2.2.15细胞及其培养液中MMP-9及p53蛋白表达水平均明显降低(P均<0.05)。结论拉米夫定作用后Hep G2.2.15细胞MMP-9及p53蛋白水平降低。