播种期对夏天无(Corydalis decumbens)块茎生长及主要药效成分的影响

研究不同播种期对夏天无块茎生长及主药效成分的影响,旨在为改良夏天无栽培技术提供理论依据。结果表明:(1)随着夏天无播种期的推迟,其出苗和新块茎形成时间相应推迟,但播种期对其地上部枯萎时间无影响;另外,播种早的材料能够开花,而播种晚的材料不能开花。(2)在3月下旬,不同播种期夏天无块茎生长均呈迅速上升的趋势,而从4月5日起,10月23日和11月4日2个时期播种的块茎其生长量呈现下降趋势,11月14日和11月25日两播种期播种的块茎生长呈现继续缓慢上升趋势;另外,开花前块茎生长迅速,开花后则块茎生长量下降,在花期对夏天无进行摘花处理可显著增加块茎产量。(3)不同播种时间对夏天无主药效成分原阿片碱和延胡索乙素含量的影响差异不显著。试验表明,夏天无在10月下旬至11月上旬播种为宜。

夏天无生物碱的高速逆流色谱分离纯化

采用pH-区带精制逆流色谱与常规高速逆流色谱相结合的方法快速分离纯化夏天无总生物碱。利用pH-区带精制逆流色谱对夏天无总生物碱进行分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶2∶8,V/V,上相加5mmol/L三乙胺,下相加5mmol/LHCl)为溶剂系统,上样量3.0g,分离得到1个混合物和3个高纯度的生物碱单体:原阿片碱(375mg)、苏元胡碱甲(362mg)和比枯枯灵(246mg),其纯度分别为97.5%,95.6%和97.1%。所得混合物850mg经常规高速逆流色谱二次分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶0.8∶1.1∶1,V/V)为溶剂系统,得到比枯枯灵(105mg)和四氢巴马亭(470mg)单体,纯度分别为99.1%和99.7%。从该药材分得苏元胡碱甲,两种制备分离模式相结合,提高了夏天无生物碱的分离效率。

夏天无对坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境的影响

目的研究夏天无Corydalis decumbens(Thunb.)Pers.对坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境的影响。方法 30只小鼠随机均分为模型组、夏天无组、假手术组,Masson染色检测损伤区胶原纤维、炎性细胞、神经纤维分布,免疫荧光染色检测层黏连蛋白(LN)、施万细胞标记物S-100、小G蛋白Rac1表达及轴突再生情况,HE染色检测神经功能恢复情况。结果与模型组比较,夏天无组胶原纤维、炎性细胞减少,神经纤维有序,LN、Rac1、S-100表达,再生轴突数量,腓肠肌纤维横截面积和腓肠肌质量显著增加(P<0.05)。结论夏天无可通过减少胶原纤维生成和炎症细胞浸润,增加LN、Rac1、S-100表达,改善坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境来促进轴突再生和神经功能恢复。

HPLC测定夏天无中原阿片碱和延胡索乙素含量

目的 :建立夏天无中原阿片碱和延胡索乙素的含量测定方法 ,为夏天无质量标准的研究提供科学依据。方法 :采用高效液相色谱法分离并测定了中药夏天无中原阿片碱和延胡索乙素的含量。色谱条件 :SupelcosilLC 18 DB柱 ,以甲醇 乙酸钠 /冰乙酸缓冲溶液 (75∶2 5 ,pH5 .0 )为流动相 ;检测波长 2 85nm。 4 86型紫外检测器检测。 结果 :此方法线性良好 ,平均加样回收率分别为 98.0 4 % ,99.6 3%。结论 :本方法精密度高 ,分离度良好 。

夏天无注射液对血管性痴呆大鼠海马血管生成素-1表达的影响

目的:观察夏天无注射液(Corydalis decumbens Pers In jection,CDPI)对血管性痴呆(vascu lar dem entia,VD)大鼠学习记忆能力和海马血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)表达的影响,探讨其防治VD的作用机制。方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法制作VD大鼠模型,Morris水迷宫试验观察CDPI对大鼠空间辨别学习记忆能力的影响,HE染色观察海马的组织病理学变化,免疫组化染色,图像分析半定量测定Ang-1的表达。结果:CDPI 2 mg/kg、5 mg/kg治疗VD大鼠1个月和2个月后,显著缩短逃避潜伏期和搜索距离;治疗2个月后,明显增加海马内Ang-1的表达。结论:CDPI可明显改善VD大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与增加海马内Ang-1的表达有关。

反相高效液相色谱法同时测定不同产地夏天无药材中原阿片碱和延胡索乙素的含量

[目的]建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)法同时测定夏天无药材中原阿片碱与延胡索乙素含量的方法,并对不同产地夏天无药材中原阿片碱与延胡索乙素含量进行了考察。[方法]采用kromasilCl8色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液(pH=6.5)为流动相连续梯度洗脱,流速1.0mL/min;检测波长280nm,柱温35℃。[结果]原阿片碱的回归方程为Y=823332.1X+9694.4,r=0.9997(n=5),线性范围为0.22～1.10μg;延胡索乙素回归方程为Y=1047499X-15305.6,r=0.9996(n=5),线性范围为0.174～0.870μg。样品的平均回收率分别为98.9%,99.7%,峰面积(RSD)分别为1.6%,1.8%(n=5)。[结论]此法简便、准确、快速,可用于药材中延胡索乙素与原阿片碱含量的测定,也可用于含这两种生物碱的药材的质量评价;两种生物碱含量在不同产地及来源夏天无药材中有较大差别。

不同激素和浓度对夏天无愈伤组织诱导的影响

以夏天无块茎、芽及叶柄作为外植体,采用不同激素浓度配比对夏天无进行愈伤组织诱导的研究,摸索夏天无组培快繁的条件。结果表明:(1)对夏天无块茎愈伤组织诱导效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS+6-BA(2 mg/L)+NAA(1 mg/L);平均诱导率达59.38%,形成愈伤组织的时间约20 d,但后期愈伤组织未分化出芽。(2)对夏天无的芽进行愈伤组织诱导研究表明,效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS+6-BA(3.5 mg/L)+NAA(0.1 mg/L);平均诱导率为100%,愈伤组织7 d左右形成,且后期大多分化出芽。(3)对夏天无叶柄愈伤组织诱导效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS+6-BA(3 mg/L)+2,4-D(2 mg/L);平均诱导率仅为13.89%,且后期愈伤组织未能分化成芽。

夏天无注射液对小鼠脑缺血和神经元保护作用的实验研究

目的观察夏天无注射液对小鼠脑缺血和神经元损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法采用小鼠断头张口喘气模型初步筛选ICDP对动物脑缺血的影响,分光光度法测定脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)和蛋白含量;原代培养乳鼠神经元制备低糖缺氧模型,MTT染色测定神经元细胞活力,流式细胞仪观察神经元凋亡。结果静脉注射ICDP2mg/kg、5mg/kg组后可明显延长小鼠张口喘气时间,且ICDP5mg/kg组断头张口喘气模型小鼠脑组织内AchE活性明显降低。低糖缺氧6h后,ICDP(含生物碱5ng/ml～500ng/ml)明显增加神经元的存活率,并可抑制神经元凋亡。结论ICDP对脑缺血损伤有保护作用,可降低脑组织内AchE活性,保护神经元、抗神经元凋亡可能是其抗脑缺血损伤的机制之一。

夏天无总生物碱阳离子树脂复合物的体外释放特性

目的制备夏天无总生物碱树脂复合物并对其指标性成分进行体外释药动力学考察。方法静态交换法制备夏天无总生物碱树脂复合物,以原阿片碱、延胡索乙素为指标性成分,对夏天无总生物碱树脂复合物在不同温度(37、45℃)、不同离子强度释放介质(去离子水、0.15 mol.L-1NaCl、0.6 mo.lL-1NaCl)、不同反离子溶液(0.15 mo.lL-1NaCl、0.15 mol.L-1KCl、0.15 mol.L-1盐酸)中的释药动力学进行了考察。结果体外释药动力学表明,夏天无总生物碱树脂复合物中原阿片碱和延胡索乙素的释药速率随温度的升高而加快,随溶出介质中的离子强度的增大而增大,且释药速率随反离子离子半径增大而减慢(K+<Na+<H+)。结论夏天无总生物碱树脂复合物中的原阿片碱和延胡索乙素释药速率与释放介质的离子强度、反离子种类、介质温度有关。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定夏天无中的4种生物碱

建立了高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱同时测定夏天无中4种生物碱的分析方法。夏天无样品用甲醇超声提取,提取溶液过滤并用甲醇稀释后分析。色谱分离采用C18反相色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为0.2%乙酸水溶液和乙腈,梯度洗脱。电喷雾串联质谱在多反应监测(MRM)模式下检测目标分析物,以保留时间和特征离子对(母离子和两个碎片离子)信息比较进行定性分析和定量分析。4种生物碱的检出限(LOD)为0.02～0.2μg/L,定量限(LOQ)为0.07～0.66μg/L,加标回收率为93.6%～103.5%,相对标准偏差小于3.8%。该方法简便、准确、灵敏,可用于夏天无中药材的质量控制。

刻叶紫堇的生物碱成分分析

Thirteen alkaloid compounds isolated from whole plant of Corydalis incisa(Thunb.)Pers.were identified.These compounds are(+)-14-epicorynoline(Ⅰ),N-trans-feruloyltyramine(Ⅱ),corynoline(Ⅲ),acetylcorynoline(Ⅳ),corynoloxine(Ⅴ),protopine(Ⅵ),corycavine(Ⅶ),(+)-corytuberine(Ⅷ),corydamine(Ⅸ),corysamine(Ⅹ),coptisine(Ⅺ),dehydrocheilanthifoline(Ⅻ) and 12-hydroxycorynoline(ⅩⅢ).CompoundⅡ,Ⅷ and Ⅻ are obtained from C.incisa for the first time.

5种中药注射液对脂质过氧化及活性氧自由基作用的影响

本文用比色法和化学发光分析法测定丹皮酚、柴胡、当归、天麻、夏天无注射液对大鼠肝匀浆过氧化脂质（LPO）影响及对H2O2-鲁米诺发光体系中H2O2的清除作用。体外实验结果表明：5种中药注射液均可抑制大鼠肝匀浆在37℃振荡温浴条件下引起的丙二醛升高，与对照组相比有显著性差异（P＜0．01）；对H2O2有不同程度的清除作用。说明5种注射液有抗氧化作用，其抗炎作用可能与抗氧化作用有关。

夏天无对神经系统疾病作用研究进展

夏天无药理作用广泛,临床常用于中风偏瘫、头痛、跌扑损伤、风湿痹痛、腰腿疼痛等病症的治疗。实验研究表明,夏天无对神经系统疾病疗效明显,具有显著的神经保护作用,但在此方面研究仍较为凌乱,无系统性的阐述。通过检索查阅国内外近十年夏天无对神经系统疾病作用研究的相关文献,对其疗效与机制进行总结概括,旨在为夏天无作用于神经系统疾病的进一步研究提供参考。随着现代科学技术的发展,多学科、多领域进行夏天无神经保护作用机制研究将成为现实,从基因水平探讨夏天无防治神经系统疾病将可能成为一条新的途径,也为其各类制剂在临床应用中实现新的突破。

夏天无愈伤组织诱导的初步研究

以传统中药夏天无为试材,研究了不同消毒方法、不同外植体和不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响。结果表明:叶片消毒以0.1%氯化汞浸泡10min较好,块茎、叶柄以消毒8min为好;叶柄作为外植体比块茎、叶片更适合;叶片诱导愈伤组织的最佳激素配比为0.5mg/L NAA+1.5mg/L 6-BA,诱导率为43.3%,而叶柄诱导愈伤组织的最佳激素配比为1.0mg/L NAA+1.5mg/L 6-BA,诱导率高达80%。

基于Critic⁃G1法结合响应面法优选夏天无醋炙工艺

目的:采用Box⁃Behnken设计⁃响应面法(BBD⁃RSM)优选夏天无的最佳醋炙工艺。方法:通过单因素试验确定炮制过程中的关键影响因素以及范围,结合响应面试验设计法对醋用量、浸润时间、炒制温度、炒制时间4个因素进行考察,以水分、灰分、浸出物、生物碱(原阿片碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素、比枯枯灵碱)含量为衡量指标,以Critic法结合G1法计算权重系数,通过综合评分优选夏天无醋炙工艺;结果:夏天无醋炙的最佳炮制工艺为加30%醋浸润1 h,于170~190℃炒制5 min,OD值为95.33,3次验证性试验得到的OD值分别为95.05、96.51、95.36,RSD为0.80%,说明BBD⁃RSM优化得到夏天无醋炙工艺回归模型的预测值与实测值接近,重复性良好,模型预测效果较好,具有合理性和可行性。结论:该研究可为规范夏天无的炮制工艺提供参考;且建立的同时测定夏天无中4种生物碱类成分含量的方法快速可靠,可用于夏天无药材的质量控制。

高速逆流色谱法分离小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱

目的高速逆流色谱法分离纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。方法采用高速逆流色谱法进行分离,以正已烷-乙酸乙酯-甲醇-水(8∶8∶12∶8,V/V)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,转速:800r.min-1,流速:2mL.min-1,检测波长:280nm。结果从小花黄堇总生物碱提取物中分离得到延胡索乙素和原阿片碱,纯度分别可达99.2%和99.6%。结论利用高速逆流色谱法可高效分离和纯化小花黄堇中延胡索乙素和原阿片碱。

夏天无注射液对大鼠脑缺血再灌损伤及ICAM-1 mRNA表达的影响

目的探讨夏天无注射液(Injection Coryadlis Decumbens Pers,ICDP)对大鼠脑缺血再灌的影响及其作用机制。方法制备大鼠大脑中动脉阻塞2h再灌注24h模型,应用氯化三苯四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测量脑组织梗死面积;逆转录—定量多聚酶链反应(RT-real time PCR)方法,检测ICDP对大鼠脑缺血再灌后海马细胞间粘附分子-(1 intercelluar adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA的水平。结果与模型组比较,大鼠脑缺血再灌注损伤后ICDP 0.05ml/kg、0.025 ml/kg剂量组脑梗死面积明显减少(P<0.01或P<0.05);ICDP 0.01ml/kg组脑梗死面积与模型组比较无显著差异;ICAM-1 mRNA在各组中表达无明显差异。结论夏天无注射液对脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其作用机制可能不涉及ICAM-1 mRNA的水平变化。

夏天无注射液的HPLC指纹图谱的研究

目的:研究建立夏天无注射液的指纹图谱。方法:采用反相高效液相色谱法,使用 Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相 A:乙腈,流动相 B:三乙胺醋酸溶液(每1000 mL 水中加入冰醋酸30 mL,三乙胺8 mL),进行梯度洗脱,流速:1.0 mL·min^(-1),柱温:25℃,检测波长280 nm。结果:利用2004年 A 版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》计算软件,生成了夏天无注射液的对照图谱,共有10个特征峰,各峰的分离度较好,符合指纹图谱检测要求。结论:采用 HPLC 指纹图谱技术可以有效地控制夏天无注射液的质量。

不同等级夏天无指纹图谱建立及6种成分测定

目的建立不同等级夏天无Corydalis decumbens(Thunb.)Pers.HPLC指纹图谱,并测定原阿片碱、盐酸巴马汀、比枯枯灵碱、延胡索乙素、四氢药根碱、紫堇碱的含有量。方法夏天无50%甲醇提取物的分析采用e2695型Waters-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.5%三乙胺溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长289 nm;柱温25℃。结果 42批样品指纹图谱中有12个共有峰,相似度均大于0.940。原阿片碱、盐酸巴马汀、比枯枯灵碱、延胡索乙素、四氢药根碱、紫堇碱在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率97.31%~98.23%,RSD 0.76%~1.93%。结论该方法稳定可靠,可用于夏天无的质量控制。

HPLC法同时测定夏天无注射液中3个有效成分的含量

目的:建立高效液相色谱法测定夏天无注射液中原阿片碱、延胡索乙素、巴马汀3个有效成分的含量。方法:DiamonsilC_(18)色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相 A:乙腈,流动相 B:醋酸-三乙胺溶液(每1000 mL 水中加入冰醋酸30 mL,三乙胺8 mL),进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长280 nm,柱温:25℃。结果:原阿片碱、延胡索乙素、巴马汀的线性范围分别为8.56～171.2μg·mL^(-1)(r=0.9998),7.12～142.4μg·mL^(-1)(r=0.9997),6.72～134.4μg·mL^(-1)(r=0.9996);回收率(n=3)分别为99.3%～100.4%(RSD≤1.1%),99.8%～100.0%(RSD≤1.5%),99.4%～99.9%(RSD≤0.9%)。结论:所建立的 HPLC 方法准确、快速,可用于夏天无注射液中原阿片碱、延胡索乙素、巴马汀的含量测定。