棉花SSR-PCR反应体系的优化

为探索适宜棉花的SSR-PCR反应体系,采用L_9(3~4)正交实验设计,研究了棉花SSR-PCR反应体系的主要成分对扩增结果的影响。试验结果表明,棉花SSR-PCR最适反应体系为:在20μL反应体系中,Taq DNA聚合酶用量为1U、dNTP浓度0.2 mmol/L、引物浓度0.6μmol/L、Mg^(2+)浓度1.0 mmol/L和模板DNA 50 ng;引物退火温度为55℃～58℃。利用六种棉花材料和10条不同引物验证此反应体系,8%聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,扩增结果在100～300 bp,反应体系的稳定性和可重复性较好。

一种适于SSR-PCR的棉花基因组DNA提取法

本文是一种适合于棉花这样高含酚类植物进行DNA提取的方法,提取程序中增加了DIECA、PVP40等对棉花酚类物质氧化有抑制作用的试剂,简化并改进了本实验室常用的棉花总DNA提取方法的步骤,使棉花总DNA能够快速高质量提取,避免了以往的棉花总DNA提取过程中棉酚的氧化对DNA提取质量的影响,提取的DNA能很好地进行SSR-PCR分析。本法提取的棉花总DNA呈乳白、疏松的丝状、干后为透明状,能很好的溶解在TE或ddH2O中。用本方法提取的棉花总DNA作为模板用JESPR系列SSR标记对其进行SSR-PCR扩增,可以扩增出清晰的条带。

利用SSR标记鉴定棉花品种和纯度研究进展

概述了SSR标记在棉花(Gossypium spp.)的指纹图谱构建、遗传多样性分析、品种纯度检测、品种间差异性相关分析等方面的研究进展,并对其应用前景进行了展望,旨在为今后的研究提供借鉴。