CpG-c41对TLR9信号通路的干扰作用及其机制探究

目的探讨Cp G-c41分子对TLR9信号通路的干扰作用及其机制。方法获取小鼠骨髓巨噬细胞,M-CSF刺激使骨髓细胞向单核巨噬细胞分化,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测诱导成功的巨噬细胞的比例;培养Raw264.7细胞,ELISA法检测Cp G-c41分子对TLR9激动剂Cp G-1826刺激小鼠来源骨髓巨噬细胞和Raw264.7细胞诱发的炎症因子TNF-α和IL-6的影响;Western blot检测Cp G-c41对TLR9-My D88依赖型信号通路中磷酸化NF-κB蛋白表达的影响;ELISA法检测非Cp G-ODN分子对Cp G-1826刺激Raw264.7细胞诱发的炎症因子TNF-α和IL-6的影响;免疫荧光检测Cp G-c41与TLR9的共定位情况以及Cp G-c41对Cp G-1826与TLR9结合的影响。结果 Cp G-c41抑制Cp G-1826诱导的炎症因子TNF-α和IL-6的释放(P<0.01);Cp G-c41抑制TLR9信号通路中NF-κB的磷酸化表达;非Cp G-ODN不影响Cp G-1826诱导TLR9释放TNF-α和IL-6;Cp G-c41通过与TLR9竞争性结合抑制Cp G-1826与TLR9识别。结论 Cp G-c41通过竞争性结合TLR9干扰TLR9-My D88信号通路的活化。