CpG 7909/铝佐剂对新型冠状病毒灭活疫苗的免疫增强作用

目的:评价CpG 7909和铝佐剂联用对新型冠状病毒灭活疫苗免疫原性的影响。方法:制备含有CpG 7909和/或铝佐剂的新型冠状病毒灭活试验疫苗,于d 0和d 21采用肌内注射方式免疫小鼠,在初次免疫后14,28,35和42 d采血,通过体外中和实验评价CpG 7909联合铝佐剂对新型冠状病毒灭活疫苗的体液免疫应答增强效果;在初次免疫后d 42取脾脏,通过流式细胞技术和ELISPOT评价其对新型冠状病毒灭活疫苗的细胞免疫应答增强效果。结果:与单独使用铝佐剂或CpG佐剂的新型冠状病毒灭活试验疫苗相比,CpG 7909和铝佐剂的联合应用在体液免疫方面可以显著提高小鼠体内中和抗体水平,并对Delta株表现出强交叉中和活性;在细胞免疫方面,可以显著诱导特异性白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)和生发中心B细胞(GCB)的活化。结论:CpG 7909联合铝佐剂能协同增强新型冠状病毒灭活疫苗诱导的体液和细胞免疫应答,并对Delta株具有良好的交叉中和活性。

siRNA沉默ATM增强CpG ODN 7909对肺癌A549细胞的放射增敏作用

目的:研究siRNA沉默毛细血管扩张—共济失调突变(atxia-telangiectasia mutated,ATM)基因的表达增强胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸寡脱氧核苷酸(cytosine-phophate-guanine oligodeoxynucleotide,CpG ODN)7909对人非小细胞肺癌A549细胞的放射增敏作用。方法:将ATM-siRNA转染至A549细胞中,Western blotting检测A549细胞中ATM蛋白的表达。A549细胞随机分为6组:对照组、CpG组、X射线(IR)组、CpG+IR组、ATM-siRNA+CpG+IR组和NC-siRNA+CpG+IR组,克隆形成分析法检测各组细胞克隆形成率,Graphpad prism 5.0软件进行单击多靶模型和L-Q线性模型拟合辐射后A549细胞的生存曲线,以D0、Dq、N、α/β及SF2等参数分析A549细胞辐射损伤修复能力,流式细胞术检测A549细胞的凋亡。结果:ATM-siRNA转染可明显抑制A549细胞中ATM蛋白的表达(P<0.01)。X射线可剂量依赖性抑制A549细胞的克隆形成能力(P<0.05);且CpG+IR组A549细胞的克隆形成能力进一步降低(P<0.01);ATM-siRNA转染后,CpG处理的A549细胞克隆形成能力再度降低[10 Gy时,(0.05±0.00)%vs(0.71±0.00)%,P<0.01]。辐射损伤剂量生存曲线结果显示,ATM-siRNA转染后,ATM-siRNA+CpG+IR组较CpG+IR组A549细胞的α/β值明显增大(1.48 vs 0.97,P<0.05),对放射损伤修复能力明显减弱。CpG+IR组较IR组细胞凋亡率显著升高[(9.18±0.16)%vs(6.56±0.33)%,P<0.01];ATM-siRNA+CpG+IR组A549细胞凋亡率进一步升高[(10.45±0.40)%vs(9.18±0.16)%,P<0.05]。结论:siRNA沉默ATM的表达可增强CpGODN 7909对A549细胞的放射增敏作用,ATM可作为肺癌治疗的潜在靶点。