RP-HPLC法测定尿液中非蛋白氮代谢产物的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定尿液中尿素、肌酸、肌酐、尿酸和马尿酸5种非蛋白氮代谢产物。方法色谱柱为Century C18柱 （200 mm×4.6 mm,5 μm），以乙腈-20 mmol·L^-1 乙酸铵缓冲液（pH 6.8）为流动相，进行梯度洗脱，检测波长为220 nm。结果肌酸、肌酐、尿酸和马尿酸的质量浓度在2～100 mg·L^-1内、尿素的质量浓度在100～1000 mg·L^-1内线性关系良好，方法平均回收率为97.6%～105.7%，RSD均小于4.2%。结论该法灵敏、准确，适用于临床尿液中非蛋白氮代谢产物的检测。

高效液相色谱法同时测定尿液中4种非蛋白氮的含量

建立了高效液相色谱（HPLC）同时测定尿液中4种常见的非蛋白氮物质——肌酸（Cr）、尿肌酐（Cn）、尿酸（Ua）及假尿嘧啶核苷（Pu）含量的方法.尿液首先经丙酮沉淀法除去大分子化合物,然后冷冻干燥,复溶后直接进行HPLC分析.色谱分离选用Waters RP18 Column（150 mm×4.60 mm,3.5 μm）,以10.0 mmol/L磷酸缓冲溶液（pH 4.78）和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,于220 nm波长下检测,可在7 min内完成4种非蛋白氮的快速分离分析.结果表明Cr、Cn、Ua、Pu在0.1～250 mg/L范围内线性关系均良好（相关系数均大于0.999）,检出限分别为9.31、26.19、4.70、6.30 μg/L,加标回收率为81％ ～ 111％,峰高的相对标准偏差（RSD,n=3）为0.23％～ 2.78％,满足定量要求.该法简便、快速,结果准确可靠,为2型糖尿病（T2DM）患者肾功能损坏的研究提供了检测手段.

高效毛细管电泳测定尿液中非蛋白氮代谢产物

采用高效毛细管区带电泳法分离分析了尿液中的肌酸、肌酐、尿素和尿酸这四种非蛋白氮代谢产物。在优化的条件下,使用50mmol L的低pH(pH4.0)醋酸缓冲液,在非涂层毛细管(21cm×75μmi.d.)中,15kV,25℃和200nm下,13min内可对尿液中上述4种物质同时进行定量。尿液样品仅用缓冲溶液1:1稀释后直接用于分析。各物质的迁移时间和峰面积的RSDmax均≤1%,检出限(S N=3)和线性范围分别为:肌酸(5μmol L,10～1000μmol L);肌酐(0.8μmol L,5～3000μmol L);尿素(100μmol L,1000～30000μmol L);尿酸(5μmol L,10～1500μmol L)。可用于临床上病人尿液的日常分析和早期肾病的监测。

高效液相色谱法同时测定血清中肌酸、尿酸和肌酐

报道了快速、简便同时测定血清中肌酸，尿酸和肌酐的ＨＰＬＣ法．以０．０２ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ６．５）为流动相，三种物质可在２ｍｉｎ内分离，检出限分别为：肌酸０．６９μｇ／ｍＬ，尿酸０．２１μｇ／ｍＬ，肌酐０．１０μｇ／ｍＬ．

BUN、Cr、UA、β2-MG变化及血清CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平与慢性高血压并发重度先兆子痫的相关性分析

目的:研究血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、β2微球蛋白(β2-MG)水平变化及血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)水平、血清N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)与慢性高血压并发重度先兆子痫的相关性。方法:将360例慢性高血压孕妇纳入研究,按照是否并发重度先兆子痫分作A组(并发重度先兆子痫)89例及B组(未并发重度先兆子痫)271例。另择同期正常孕妇100例作为C组,100例单纯先兆子痫病人作为D组。比较4组基线资料,血清BUN、Cr、UA、β2-MG以及CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平,并以多因素logistic回归分析明确慢性高血压病人并发重度先兆子痫与各项影响因素的关系。并比较4组孕妇及新生儿不良妊娠结局发生情况。结果:A组年龄均高于B组、C组、D组,且B组、D组年龄高于C组(P<0.05~P<0.01);A组、D组先兆子痫史占比均高于B组、C组(P<0.01);A组高血压病程高于B组,差异有统计学意义(P<0.01)。A组、B组、D组血清BUN、Cr、UA、β2-MG以及CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平以及新生儿低出生体质量、宫内发育迟缓、胎儿窘迫、胎儿窒息、巨大儿、先天性异常及胎儿死亡发生率、孕妇不良妊娠结局总发生率均高于C组,且A组上述各项指标水平均高于B组和D组(P<0.05)。多因素logistic回归分析发现,孕妇年龄、先兆子痫病史、高血压病程以及血清BUN、Cr、UA、β2-MG以及CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平均是慢性高血压病人并发重度先兆子痫的危险因素(P<0.05~P<0.01)。Pearson相关分析发现,血清BUN、Cr、UA、β2-MG以及CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平均与慢性高血压并发重度先兆子痫呈正相关关系(P<0.01)。结论:检测血清BUN、Cr、UA、β2-MG及CK-MB、cTnI、NT-proBNP水平能有效预测重度先兆子痫的发生。

穿山龙总皂苷对痛风性关节炎大鼠尿液中生物标志物的影响

[目的]应用高效液相-紫外检测法(HPLC)和紫外分光光度法测定穿山龙总皂苷(RDN)对痛风性关节炎大鼠尿液中鸟苷、尿酸、肌酐含量的影响。[方法]60只雄性Wistar大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、穿山龙总皂苷高剂量组(160 mg/kg)、中剂量组(80 mg/kg)、低剂量组(40 mg/kg),和阳性药秋水仙碱组(0.3 mg/kg)。连续灌胃穿山龙总皂苷7 d。第3天灌胃1 h后,膝关节上方髌上韧带进针,注射0.2 m L浓度为25 g/L尿酸钠晶体混悬液到关节腔,造成实验性痛风性关节炎模型。采用苏木精-伊红(HE)和伊红染色观察关节滑膜组织病理学变化。鸟苷的测定采用Diamonsil C_(18)(5μm,250 mm×4.6 mm)色谱柱,以甲醇为流动相A,0.03 mol/L醋酸铵缓冲液(p H=4.65)作为流动相B,梯度洗脱,柱温25℃,流速为1 m L/min,检测波长254 nm;尿酸和肌酐的含量测定采紫外分光光度法检测。[结果]痛风性关节炎模型组尿液中鸟苷和肌酐含量显著降低;尿酸含量显著升高。穿山龙给药组与模型组相比,鸟苷、尿酸和肌酐含量显著升高。[结论]鸟苷、肌酐与尿酸均为痛风性关节炎发生发展的重要生物标志物,穿山龙总皂苷可通过调节其含量变化对痛风性关节炎起潜在治疗作用。

反相高效液相色谱法同时测定血清、尿液中尿酸、肌酐的含量

建立了同时测定人体血清、尿液中肌酐、尿酸含量的高效液相色谱分析方法。采用Hypersil ODS C18色谱柱,甲醇（A）-20 mmol/L乙酸铵（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,UV检测,检测波长235 nm。血清中肌酐、尿酸含量在2～20μg/mL范围内线性关系良好,尿液中肌酐、尿酸在5～1000μg/mL范围内线性关系良好;平均加标回收率在86.7%～99.0%,RSD小于5%。选择甲醇-乙酸铵作为流动相进行血清/尿液中肌酐、尿酸含量测定具有快速简便的特点,方法应用于健康人和糖尿病病人血清/尿液样本的测定,可以对临床病人进行快速监测。