杜鹃兰Cremastra appendiculata化学成分的分离

采用硅胶、凝胶柱色谱及HPLC对杜鹃兰(Cremastra appendiculata)的干燥假磷茎——山慈菇进行化学分离,根据化合物波谱数据鉴定其结构.结果表明,从山慈菇乙醇提取物乙酸乙酯萃取部分中分离得到4个化合物,分别为7-羟基-2,4-二甲氧基菲(7-hydroxy-2,4-dimethoxyphenanthrene,Ⅰ),24-甲基环菠萝蜜醇(cyclolaudanol,Ⅱ),N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇(aurantiamide acetate,Ⅲ),1-(4-羟苄基)-2,7-二羟基-4甲氧基菲(1-(p-hydroxybenzyl)-2,7-dihydroxy-4-methoxyphe-nanthrene,Ⅳ),4个化合物均为首次从该种植物中分离得到.

山慈菇Cremastra appendiculata化学成分

目的:研究人工种植山慈菇的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱法分离纯化,薄层色谱比较及波谱法进行结构鉴定。结果:从山慈菇乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部分中分离得到6个化合物,鉴定为异赫尔西酚(isohircinol,Ⅰ),4甲氧基菲-2,7-二醇(flavanthrinin,Ⅱ),对羟基苯乙醇(phydroxyphenylethylalcohol,Ⅲ),3,4-二羟基苯乙醇(3,4-dihydroxyphenylethylalcohol,Ⅳ),胡萝卜苷(daucosterol,Ⅴ),β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅵ)。结论:化合物Ⅱ～Ⅵ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅰ为首次从天然资源中分离得到。

Three new phenanthrenes from Cremastra appendiculata (D.Don) Makino

与一已知的菲一起，三新菲从 Cremastra appendiculata (D. 唐) 的 tubers 的 ethanolic 摘录被孤立 Makino。他们的结构根据广泛的分光镜的分析被阐明。混合物 14 被测试为在 vitro 对人的肺(A549 ) 的细胞毒素的活动，冒号(HCT-116 ) ，肝(HepG2 ) ，和胸(MCF-7 和 MDA-MB-231 ) 癌症房间线。

Rare and Precious Chinese Materia Medica: Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones

Shan Ci Gu(山慈菇Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones),a rare and precious traditional Chinese medicine,has attracted attention for the treatment of various cancers and bacterial infections.According to the Pharmacopoeia of the People's Republic of China,Pseudobulbus Cremastrae seu Pleionesis sourced from the pseudobulbs of three plants in the Orchidaceae family:Cremastra appendiculata(D.Don)Makino,Pleione bulbocodioides(Franch.)Rolfe,and Pleione yunnanensis Rolfe.Extracts from Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones are used for the treatment of tumors,burns,and frostbite.The aims of this review are to provide information on the historical and herbological origins of Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones,to summarize research conducted on its phytochemical and biological activities over the last twenty years,and to detail planting efforts.

辐毛小鬼伞对杜鹃兰种子萌发的促进作用

目的:研究辐毛小鬼伞对杜鹃兰种子萌发的促进作用,提供一种简便培育杜鹃兰幼苗的方法。方法:收集铺满棕色“地毯状”菌丝且长有能变黑自溶蘑菇(疑似辐毛小鬼伞)的腐木,将其切段后放入自封袋中,撒上杜鹃兰种子进行共生培养,待种子萌发形成原球茎后,分离内生菌,并用内生菌接种菌包培育其子实体,进行形态学观察及ITS序列鉴定,再进行促进杜鹃兰种子萌发试验。结果:此菌株能促进杜鹃兰种子萌发,培育出的子实体特征与原收集的菌株一致。根据形态学特征及ITS序列鉴定此菌株为辐毛小鬼伞Coprinellus radians。结论:辐毛小鬼伞能促进杜鹃兰种子萌发,为促进杜鹃兰繁育提供了有效的方法。

山慈菇药理作用及临床应用研究进展

《中华人民共和国药典》中收载的中药材山慈菇Cremastra appendiculata,为兰科植物杜鹃兰Cremastra appen⁃diculata(D.Don)Makino或独蒜兰Pleione bulbocodioides(Franch)Rolfe或云南独蒜兰Pleione yunnanensis Rolfe的干燥假鳞茎,味甘、微辛,性凉,归肝、脾经,作为传统中药具有清热解毒、化痰散结等功效,常用于治疗痈肿疔毒、瘰疬痰核、蛇虫咬伤、癥瘕痞块等。近年来,随着对山慈菇及其提取物生物活性研究的不断深入,其抗肿瘤、抗氧化、神经保护、抗菌、抗痛风、降脂降糖、提高造血功能及增强免疫等药理作用受到广泛关注;此外,山慈菇还常与其他中药组成复方,在呼吸系统、消化系统、内分泌代谢系统等疾病的治疗方面疗效确切,临床应用前景广阔。目前对于山慈菇的研究较多,但大多以抗肿瘤和抗氧化作用的研究开发为主,且存在缺乏基因研究、信号通路研究与大样本随机对照临床研究等问题,故文章通过分析和总结山慈菇最新研究文献,从其药理作用的基础研究和复方的临床研究两个方面进行综述,并总结目前研究中存在的不足之处,以期为山慈菇的临床应用和新药研发提供参考。

山慈菇药理作用及临床应用研究述评

山慈菇作为一味清热解毒药,具有清热解毒、化痰散结等功效,传统上常用于治疗痈肿疔毒、瘰疬痰核、蛇虫咬伤、癥瘕痞块等。近年来,随着对山慈菇及其提取物生物活性研究的不断深入,其抗肿瘤、抗氧化、增强免疫、抗痛风及降脂降糖等药理作用受到广泛关注。山慈菇在呼吸、消化、内分泌代谢等系统疾病治疗方面疗效确切,临床应用前景广阔。故文章通过分析和总结山慈菇最新研究文献,从药理作用和临床应用方面进行综述,为后续进一步开发研究提供参考。

杜鹃兰叶总黄酮提取工艺的优化及抗氧化活性研究

目的:对杜鹃兰叶总黄酮的提取工艺进行优化,并研究其抗氧化活性。方法:采用超声辅助提取杜鹃兰叶总黄酮,考察单因素水平,结合响应面分析法对杜鹃兰叶总黄酮提取工艺进行优化。在采用三个单因素水平基础上,以乙醇浓度、液料比、提取时间为自变量,杜鹃兰叶总黄酮提取量为响应值,采用三因素三水平的Box-Behnken响应面法对杜鹃兰叶总黄酮的提取工艺进行优化。结果:当乙醇浓度为74%时,超声29 min,液料比为47∶1 mL/g,杜鹃兰叶总黄酮平均提取率可达到(24.34±1.37)mg/g,与预测值24.53 mg/g接近,偏差0.74%,同时,测得杜鹃兰叶提取液对DPPH和ABTS自由基的IC50分别为0.196、0.080 mg/mL。结论:优化后的提取工艺效果较好,杜鹃兰叶总黄酮具有较强的抗氧化作用。

基原为杜鹃兰的山慈菇质量控制研究

目的:建立山慈菇UHPLC指纹图谱,并同时测定2个成分的含量。方法:采用CORTECS T3(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;以0.1%甲酸溶液-甲醇∶乙腈(1∶2)溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL/min;进样量为2μL;检测波长为260 nm。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行相似度评价,并进行系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),筛选质量差异成分,并对其进行含量测定。结果:35批山慈菇指纹图谱共标定了11个共有峰,指认了色谱峰6、7分别为4-甲氧基菲-2,7-二醇、blestriarene C。35批样品与对照图谱的相似度为0.739~0.998。HCA及PCA分析均将35批样品分为5类,通过OPLS-DA确定4-甲氧基菲-2,7-二醇、blestriarene C对区分不同产地山慈菇的贡献较大。35批山慈菇中上述2个成分含量分别为0.7329~69.4868μg/g、2.3272~81.6388μg/g。结论:该研究建立的指纹图谱结合化学模式识别分析及含量测定方法准确可靠,能够较全面的评价山慈菇的质量,为其质量控制提供参考。

武当山地区山慈菇药材质量研究

目的:建立武当山地区山慈菇的质量标准,以便为其质量控制提供参考。方法:采用性状和显微鉴别的方法对药材的特征进行观察描述,采用薄层色谱法对药材进行定性鉴别,参照《中国药典》相关方法测定其灰分和浸出物的含量,并使用紫外分光光度法测定山慈菇不同生长年份总黄酮、总酚、总生物碱的含量。结果:山慈菇大多呈圆球或圆锥形,显微鉴别可依据草酸钙针晶长短、导管种类及大小、淀粉粒大小等特征;两批次山慈菇的总灰分含量分别为4.78%、4.53%,酸不溶性灰分含量为0.87%、1.28%;水溶性浸出物(冷浸、热浸法)的平均含量分别为10.9%、7.3%,醇溶性浸出(冷浸、热浸法)的平均含量分别为2.0%、3.8%;一年生的山慈菇总黄酮、总酚、总生物碱含量最高,分别为4.695、7.408、0.605 mg/g。结论:上述鉴别和含量测定的方法操作简便、准确,可用于武当山慈菇的质量控制。

基于网络药理学分子对接探讨山慈菇抗三阴性乳腺癌的分子机制

本研究基于网络药理学与分子对接的方法探讨山慈菇治疗三阴性乳腺癌的作用机制。利用TCMSP数据库和文献中获得山慈菇化学成分,在Swiss Target Prediction平台上搜索活性成分靶点;采用OMIM、GeneCards数据库检索三阴性乳腺癌靶点,并通过String构建蛋白质互作网络,使用DAVID数据库对核心靶点进行GO分析和KEGG通路富集分析;另外选取部分化合物和靶点使用Autodock软件进行分子对接验证;运用Western blot法检测相关调控靶点蛋白的表达。结果显示,共筛选出12个山慈菇活性成分,97个关键靶点,分子对接发现主要靶点HSP90AA1、EGFR、MAPK1、JUN和PIK3CA均与活性成分对接较好。山慈菇的作用靶点富集于PI3K-AKT信号通路,山慈菇通过降低p-AKT和p-PI3K的表达水平进行调控乳腺癌细胞的增殖、凋亡和迁移。本研究初步预测了山慈菇的有效活性成分、关键靶点和作用机制,可为山慈菇治疗三阴性乳腺癌的临床应用提供依据。

山慈菇活性成分微波提取工艺优化、指纹图谱与抗植物病菌活性分析

本文综合运用单因素和Box-Behnken响应面试验,以山慈菇提取率和其中3种主要化学成分:双[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-葡萄糖苷(dactylorhin A)、双[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine)和秋水仙碱的含量为综合权重指标,对其微波提取工艺进行考察。同时,利用高效液相色谱技术建立13批不同产地山慈菇的指纹图谱,明确其主要成分含量分布情况。最后,运用滤纸片扩散法,对制备的山慈菇提取物进行抗菌活性评价。结果表明:山慈菇的最佳微波提取工艺条件:乙醇浓度55%、料液比1:30 g/mL、提取时间17 min。在此条件下,山慈菇的提取率为12.83%。指纹图谱结果表明,山慈菇中3种化学成分的含量分布趋势一致,其中militarine为13批山慈菇中的共有化学成分,而dactylorhin A和秋水仙碱分别在1个产地样品中未检出,表明不同产地山慈菇中主要化学成分分布具有差异性。抗菌实验结果显示,山慈菇提取物对胶孢炭疽菌、辣椒疫霉菌、灰葡萄孢菌、茄链格孢菌、荧光假单胞菌、水稻白叶枯菌和禾谷镰孢菌均没有显示抗菌活性(抑菌圈小于6 mm),对雷尔氏菌具有较好的抑制活性(抑菌圈8.5 mm),表现出一定的抗菌选择性。本研究确定了微波提取山慈菇的最佳工艺,建立的山慈菇中3种成分同步含量分析方法稳定可行,研究结果可为山慈菇药材的质量标准建立和综合开发利用提供参考。

复方山慈菇对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及网络药理学分析

目的探讨复方山慈菇对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其潜在的作用机制。方法将人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤模型随机分为模型组、阳性对照多柔比星(doxorubicin,DOX)组和复方山慈菇醇提物(compound cremastra appendiculata ethanol extraction,CCAEE)高剂量组(1.8 g/kg)以及低剂量组(0.9 g/kg),每组5只。按照分组连续灌胃给药21 d后,处死裸鼠并计算各组裸鼠移植瘤体积、重量和抑瘤率。采用TCMSP 2.3数据库选出复方山慈菇有效成分及其对应的作用靶点,OMIM、GeneCards 5.14、DrugBank 5.1.10、TTD数据库筛选关键靶点并利用STRING11.5数据库构建蛋白质相互作用(PPI)网络,然后筛选核心靶点,以构建“药物-成分-靶点”网络并筛选出核心有效成分。利用Metascape 3.5平台进行GO和KEGG富集分析。结果各组荷瘤裸鼠分别给药处理21 d后,与模型组比较,DOX组和CCAEE高、低剂量组裸鼠移植瘤体积、重量均明显减小(均P<0.05),抑瘤率分别为89.67%、67.39%和43.48%。通过网络药理学分析获得复方山慈菇有效成分27个,抗乳腺癌关键靶点108个,其中核心靶点23个,主要包括TP53、MAPK3、MAPK1、RELA、AKT1、FOS、ESR1、TNF、IL6、MAPK14等;核心有效成分5个,分别为槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、2-甲氧基-9,10-二氢菲-4,5-二醇、去氧鬼臼毒素。GO和KEGG富集分析显示复方山慈菇主要通过激素调节等生物过程以及PI3K-AKT、MAPK等信号通路发挥抗乳腺癌作用。结论复方山慈菇能抑制人乳腺癌移植瘤生长,其可能通过槲皮素、山柰酚等核心有效成分作用于TP53等核心靶点及PI3K-AKT、MAPK等信号通路而发挥抗乳腺癌作用。

杜鹃兰化学成分及其生物活性研究

目的 研究杜鹃兰化学成分,发现其抗肿瘤活性成分。方法 杜鹃兰经95%乙醇提取、硅胶柱层析、半制备HPLC和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化,波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱、和质谱)确定结构;应用MTT法,对部分化合物进行体外抗肿瘤活性筛选。结果 从杜鹃兰分离鉴定12个化合物,分别为bisbenzopyran (1),(22E)-ergosta-6, 22-dien-3β, 5α, 8α-triol (2), 3β-hydroxycholesta-5-ene (3), β-sistosterol (4),pinoresinol (5),5,4′-dihydroxy-7-(4-hydroxybenzoyl)-3′-methoxyflavone (6),4-methoxy-2,3,7-trihydroxyphenanthrene(7), 2-hydroxy-4, 7-dimethoxyphenanthrene(8), 4, 4′-dimethoxy-[1, 1′-biphenanthrene]-2,2′,7,7′-tetrol (9),4,7,4′,9′-tetramethoxy-[1,1′-biphenanthrene] 2,2′,7,7′-tetrol(10),Bavachinine (11),3-hydroxyphenpropionic acid-(2′-methoxy-4′-carboxy-phenol) ester (12);化合物7~12抗肿瘤活性测试结果表明9和10对MCF-7/S细胞株显示了很好的抑制活性。结论 化合物2,3,5,7,10,12为首次从本植物中分离得到,9,10对MCF-7/S细胞株IC50分别为2.16,5.09μmol/L。

山慈菇的化学成分和药理作用研究进展

山慈菇为兰科植物杜鹃兰、独蒜兰和云南独蒜兰的干燥假鳞茎,中医将其广泛应用于抗癌处方中。其化学成分主要为菲类、联苄类,此外还有少量苷类、木脂素类及黄烷类化合物。生物活性研究表明其所含化学成分具有抗肿瘤、抗血管生成、降压、抗菌作用,以及对乙酰胆碱受体M3的阻断作用,对酪氨酸酶的激活作用和对造血系统的作用。

杜鹃兰化学成分及肿瘤细胞毒活性研究

目的:对人工种植杜鹃兰的化学成分进行分离和鉴定.方法:采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS柱等色谱分离手段对栽培杜鹃兰的化学成分进行分离、纯化,利用薄层色谱比较及多种波谱方法进行结构鉴定.结果:从杜鹃兰乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部分中分离得到8个化合物,鉴定为cirrhopetalanthrin(Ⅰ),7-羟基-4-甲氧基菲-2-O-β-D-葡萄糖(7-hydroxy-4-methoxy-phenanthrene-2-O-β-D-glucoside,Ⅱ),4-(2-羟乙基)-2-甲氧基苯-1-O-β-D-吡喃葡萄糖[4-(2-hydroxyethyl)-2-methoxyphenyl-β-D-glucopyranoside,Ⅲ],对羟基苯乙醇8-O-β-D-比喃葡萄糖(tyrosol 8-O-β-D-glucopyranoside,Ⅳ)vanilloloside(Ⅴ),对羟基苯甲醛(p-hydroxybenzaldehyde,Ⅵ),蔗糖(sucrose,Ⅶ),腺苷(adenosine,Ⅷ).结论:化合物Ⅱ～Ⅷ为首次从该植物中分离得到.cirrhopetalanthrin(Ⅰ)对结肠癌(HCT-8),肝癌(Bel7402),胃癌(BGC-823),肺癌(A549),乳腺癌(MCF-7)和卵巢癌(A2780)细胞表现出非选择性中等强度细胞毒活性,IC50在8.37～13.22μmol·L-1;其他化合物无明显毒性.

夏枯草联合山慈姑对甲状腺癌细胞的抗增殖作用

目的探讨夏枯草联合山慈姑对甲状腺癌细胞的抗增殖作用。方法不同浓度的夏枯草和山慈姑作用于人甲状腺癌SW579细胞48 h后,采用MTT法分别计算出夏枯草和山慈姑对SW579的半数抑制浓度(IC50);实验分为夏枯草组、山慈姑组、夏枯草与山慈姑联合处理组及阴性对照组,将各组药物分别作用于SW579细胞48 h后,倒置相差显微镜下观察各组药物作用于SW579后细胞的形态学变化;Western blot检测各组c-myc蛋白的表达。结果夏枯草对SW579细胞的半数抑制浓度IC50为21 mg/mL,山慈姑的半数抑制浓度IC50为122 mg/mL;夏枯草组与联合组能抑制SW579细胞的生长,且联合组的抑制作用较夏枯草组明显;c-myc蛋白在夏枯草组及联合组的表达均较阴性对照组低,且在联合组的表达较夏枯草组表达更低(P<0.05),小剂量山慈姑组与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论夏枯草联合小剂量山慈姑对甲状腺癌细胞增殖的抑制作用较为明显,为中药联合治疗甲状腺癌提供理论依据。

山慈菇的化学成分

为研究山慈菇药材——杜鹃兰（Cremastra appendiculata（D.Don）Makino）干燥假鳞茎的化学成分,采用硅胶、葡聚糖凝胶和反相硅胶柱色谱法分离纯化,运用现代波谱技术进行结构鉴定。本文分离得到7个化合物,分别鉴定为5-甲氧基联苄-3,3＇-二-O-β-D-吡喃葡糖苷（1）、militarine（2）、loroglossin（3）、原儿茶酸（4）、丁二酸（5）、天麻苷（6）和胡萝卜苷（7）。化合物1为新化合物,化合物2-6均为首次从杜鹃兰中分得。

山慈菇通过PI3K/Akt信号通路影响乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和凋亡

目的:研究山慈菇是否通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路影响乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和凋亡。方法:将MDA-MB-231细胞分为对照组(C组)、山慈菇组(CAM组)、胰岛素生长因子1组(IGF-1组)、山慈菇+胰岛素生长因子1组(CAM+IGF-1组)。C组不加药物处理,CAM组加入10 mg/ml山慈菇处理,IGF-1组加入100μg/L IGF-1处理,CAM+IGF-1组加入10 mg/ml山慈菇和100μg/L IGF-1共处理。噻唑蓝(MTT)测定细胞增殖,流式细胞仪和Hoechst 33258染色测定细胞凋亡,Western blot法测定细胞活化的半胱天冬氨酸3(Cleaved-Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B-细胞淋巴瘤因子(Bcl-2)、PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、p-Akt蛋白水平。结果:山慈菇抑制MDA-MB-231细胞增殖呈剂量和时间依赖性。与C组比较,CAM组MDA-MB-231细胞OD值降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),Cleaved-Caspase-3、Bax蛋白水平升高(P<0.05),Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白水平降低(P<0.05);与CAM组比较,CAM+IGF-1组MDA-MB-231细胞OD值升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Cleaved-Caspase-3、Bax蛋白水平降低(P<0.05),Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白水平升高(P<0.05)。结论:山慈菇抑制乳腺癌细胞增殖、诱导乳腺癌细胞凋亡,其机制可能与山慈菇抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。

山慈菇乙酸乙酯部位化学成分研究

目的:研究山慈菇醇提物的乙酸乙酯部位的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20柱色谱对山慈菇醇提物的乙酸乙酯部位进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物。结果:从山慈菇乙酸乙酯部位分离得到7个化合物,分别鉴定为:富马酸(1)、邻苯二甲酸二乙基己酯(2)、L-焦谷氨酸(3)、2-呋喃羧酸(4)、香草酸(5)、对香豆酸(6)、原儿茶酸(7)。结论:其中,化合物1～6为首次从该植物中分离得到。