Rare and Precious Chinese Materia Medica: Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones

Shan Ci Gu(山慈菇Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones),a rare and precious traditional Chinese medicine,has attracted attention for the treatment of various cancers and bacterial infections.According to the Pharmacopoeia of the People's Republic of China,Pseudobulbus Cremastrae seu Pleionesis sourced from the pseudobulbs of three plants in the Orchidaceae family:Cremastra appendiculata(D.Don)Makino,Pleione bulbocodioides(Franch.)Rolfe,and Pleione yunnanensis Rolfe.Extracts from Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones are used for the treatment of tumors,burns,and frostbite.The aims of this review are to provide information on the historical and herbological origins of Pseudobulbus Cremastrae seu Pleiones,to summarize research conducted on its phytochemical and biological activities over the last twenty years,and to detail planting efforts.

山慈菇多糖对肝癌腹水荷瘤小鼠症状的改善机制

目的 探讨山慈菇多糖对肝癌腹水荷瘤小鼠症状的改善作用并阐明其可能的机制。方法 于55只C57BL/6雄性小鼠中随机选择5只腹腔注射肝癌腹水型H_(22)细胞,随机选择10只作为正常组,剩余小鼠通过腹水接种诱导肝癌腹水荷瘤小鼠模型。成功建模后,随机分为模型组、山慈菇多糖低剂量(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))、高剂量组(400 mg·kg^(-1)·d^(-1))及环磷酰胺组(20 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组各10只,正常组及模型组小鼠均腹腔注射等体积生理盐水0.2 mL,1天1次,连续14 d。末次给药结束后,观察小鼠一般体征并称定质量;记录小鼠腹水体积;检测外周血红细胞(RBC)、白细胞(WBC)总数;处死后,剥离肿瘤称定质量,计算抑瘤率;摘取脾脏、胸腺称定质量,计算脏器指数;HE染色观察肿瘤组织学变化;TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡情况;免疫组化技术检测肿瘤组织中血小板内皮细胞粘附分子1(CD31)抗原表达情况;Western blot法检测肿瘤组织中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、Beclin1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白相对表达情况。结果 成功构建肝癌腹水荷瘤小鼠模型;与正常组比较,模型组小鼠腹胀、消瘦及皮肤暗沉发黄,被毛无光泽;血性腹水量多,外周血RBC总数减少,WBC总数增加,肿瘤体质量增加(P<0.05),免疫器官脾脏及胸腺指数均降低(P<0.05),肿瘤细胞生长良好,异型性高,周围血管丰富,分布密集,且肿瘤组织中mTOR通路相关蛋白p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、Bcl-2及VEGF蛋白相对表达水平升高,Beclin1及Bax蛋白相对表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,山慈菇多糖2组及环磷酰胺组小鼠临床症状有所改善,腹水减少,外周血RBC总数升高,WBC总数降低,肿瘤体质量减少(P<0.05),抑瘤率分别为25.31%、45.57%、55.06%,脾脏指数及胸腺指数升高(P<0.05),肿瘤生长不良,细胞坏死,细胞凋亡指数逐渐增大,血管生成逐渐减少(P<0.05),肿瘤组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、Bcl-2及VEGF蛋白相对表达水平降低,Beclin1及Bax蛋白相对表达水平升高(P<0.05)。山慈菇多糖低剂量、高剂量组及环磷酰胺组对肝癌腹水荷瘤小鼠的症状改善作用效果逐渐加强。结论 山慈菇多糖可抑制肝癌腹水荷瘤小鼠肿瘤生长,提高机体免疫,改善肝组织病理症状,其机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR通路激活进而诱导自噬、抑制肿瘤血管生成并促进肿瘤细胞凋亡有关。

山慈菇药理作用及临床应用研究进展

《中华人民共和国药典》中收载的中药材山慈菇Cremastra appendiculata,为兰科植物杜鹃兰Cremastra appen⁃diculata(D.Don)Makino或独蒜兰Pleione bulbocodioides(Franch)Rolfe或云南独蒜兰Pleione yunnanensis Rolfe的干燥假鳞茎,味甘、微辛,性凉,归肝、脾经,作为传统中药具有清热解毒、化痰散结等功效,常用于治疗痈肿疔毒、瘰疬痰核、蛇虫咬伤、癥瘕痞块等。近年来,随着对山慈菇及其提取物生物活性研究的不断深入,其抗肿瘤、抗氧化、神经保护、抗菌、抗痛风、降脂降糖、提高造血功能及增强免疫等药理作用受到广泛关注;此外,山慈菇还常与其他中药组成复方,在呼吸系统、消化系统、内分泌代谢系统等疾病的治疗方面疗效确切,临床应用前景广阔。目前对于山慈菇的研究较多,但大多以抗肿瘤和抗氧化作用的研究开发为主,且存在缺乏基因研究、信号通路研究与大样本随机对照临床研究等问题,故文章通过分析和总结山慈菇最新研究文献,从其药理作用的基础研究和复方的临床研究两个方面进行综述,并总结目前研究中存在的不足之处,以期为山慈菇的临床应用和新药研发提供参考。

山慈菇的化学成分和药理作用研究进展

山慈菇为兰科植物杜鹃兰、独蒜兰和云南独蒜兰的干燥假鳞茎,中医将其广泛应用于抗癌处方中。其化学成分主要为菲类、联苄类,此外还有少量苷类、木脂素类及黄烷类化合物。生物活性研究表明其所含化学成分具有抗肿瘤、抗血管生成、降压、抗菌作用,以及对乙酰胆碱受体M3的阻断作用,对酪氨酸酶的激活作用和对造血系统的作用。

山慈菇多糖对荷H22肝癌小鼠的抗肿瘤机制研究

研究山慈菇多糖对H22肝癌实体瘤小鼠的抗肿瘤作用及其机制。制作小鼠H22实体瘤肝癌模型,通过脾脏指数、胸腺指数分析其对小鼠免疫器官的影响,Elisa检测血清白介素-2(IL-2)含量、肿瘤坏死因子(TNFα)含量,免疫组化法观察(Bcl-2)表达水平。山慈菇多糖的低、中、高剂量组抑瘤率分别为43.74%、37.57%、30.76%,;能增强血清中IL2、TNFα活性;抗凋亡因子Bcl-2的表达量不同程度地减少。山慈菇多糖对H22肝癌小鼠具有一定的肿瘤抑制作用,本次实验不体现剂量依赖性,显示山慈菇多糖无毒副作用,能增强机体的抗肿瘤能力,降低肿瘤的持续增殖能力。

山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180体内生长抑制作用

目的:探讨山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180的抑制作用。方法:噻唑蓝法及吞噬中性红法测定小鼠脾淋巴细胞增殖能力及脾巨噬细胞活性;体内肿瘤抑制实验检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长、脾脏指数和胸腺指数的影响;流式细胞术及酶联免疫吸附测定法检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群及血清细胞因子水平的影响。结果:山慈菇多糖可以增强淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞活性;同时,山慈菇多糖也可以抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长,增加小鼠脾脏指数和胸腺指数;此外,山慈菇多糖还可以增加荷瘤小鼠CD4+、CD8+T细胞浓度,提高CD4+/CD8+比值及白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ水平。结论:山慈菇多糖具有明显的肿瘤抑制作用,其对肿瘤细胞生长的抑制作用与提高免疫能力有关。

山慈菇-蜂房药对抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭转移的机理研究

目的研究山慈菇-蜂房药对对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响及其作用机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测山慈菇-蜂房药对大鼠含药血清对细胞活力的影响,Transwell小室法测定其侵袭力,实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)基因的表达。结果山慈菇-蜂房药对组MDA-MB-231细胞体外生长杀伤率为35.86%;能明显抑制MDA-MB-231细胞的侵袭能力(P<0.01),其抑制率为34.8%;MMP-9 mRNA明显降低,TIMP-1 mRNA明显升高,MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA值显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论山慈菇-蜂房药对能够抑制MDA-MB-231细胞侵袭能力,其机制可能与下调MMP-9mRNA表达,上调TIMP-1mRNA的表达,降低MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA比值有关。

山慈菇外敷治疗骨转移癌疼痛的临床观察

目的评价山慈菇配合三阶梯止痛和单纯三阶梯止痛治疗骨转移癌疼痛的有效性。方法观察山慈菇粉外敷联合盐酸羟考酮控释片(奥施康定)治疗肿瘤骨转移癌疼痛的临床疗效。通过对有中、重度疼痛的41名肿瘤骨转移患者随机分组,连续观察14 d,采用χ2检验,对两组疼痛缓解情况、盐酸羟考酮控释片(奥施康定)用药剂量、体力状况评分情况进行观察和分析。结果治疗后治疗组疼痛缓解情况明显优于对照组(P<0.05);治疗组奥施康定使用量增加率远低于对照组(P<0.05);两组治疗后体力状况评分提高率比较,治疗组高于对照组(P<0.05)。结论山慈菇粉外敷对治疗骨转移癌疼痛有明显提高止痛作用的效果,减少强阿片类药物奥施康定的使用剂量,对提高患者生存质量有重要意义。

山慈姑体外抑菌活性的初步研究

目的探讨山慈姑的体外抑菌活性。方法将山慈姑提取物经大孔树脂（D-101）分离得到4个组分A，B，C和D，用倍比稀释法测定其抑菌活性。结果金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）对组分D有很强的敏感性，MIC≤12．5mg／ml，对组分B有中等强度的敏感性，MIC为12．5～25mg／ml；白色念珠菌（Candida albicans，ATCC-10231）对组分B和组分D有中等强度的敏感性，MIC为12．5～25mg／ml，大肠杆菌（Escherichia coli）对各组分的敏感性都较低，MIC〉50mg／ml。结论山慈姑提取物B和D对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌具有较强的抑菌效果。

山慈菇提取物通过下调AEG-1表达抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭

目的本研究旨在观察山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨其分子机制。方法取人结直肠癌SW480细胞作为研究对象,采用划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,采用短发夹RNA(Short hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默SW480细胞中星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)基因的表达,利用Western blot法检测基质金属蛋白酶-2,9(matrix metalloproteinase-2,9,MMP-2,9)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)和AEG-1等蛋白的表达变化。结果山慈菇提取物可使人结直肠癌SW480细胞愈合率、迁移率和侵袭率均显著下降(P<0.05),下调MMP2、MMP9和AEG-1蛋白表达水平(P<0.05)以及上调E-cadherin蛋白表达水平(P<0.05),上述作用均具有浓度依赖性。经shRNA干扰AEG-1基因表达后,SW480细胞中AEG-1蛋白表达水平显著下降(P<0.05);同时AEG-1干扰SW480细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),MMP2和MMP9蛋白表达水平均显著下降,同时单独或者联合山慈菇提取物组的细胞迁移率、侵袭率也降低(P<0.05)。结论山慈菇提取物能浓度依赖性地抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭,这可能与山慈菇提取物抑制AEG-1蛋白表达,继而下调MMP2、MMP9蛋白表达和上调E-cadherin蛋白表达有关。

山慈姑醇提取液对SGC-7901细胞的抗肿瘤机制

目的探讨山慈姑醇提取液对胃癌SGC-7901细胞的抗肿瘤机制。方法用山慈姑提取液对SGC-7901细胞进行干预,分为空白组、山慈姑提取液0.75、1、1.5 mg/mL组,MTT检测,激光共聚焦显微镜观察山慈姑提取液对胃癌细胞凋亡情况,透射电镜观察4组肿瘤细胞的超微结构变化。结果 MTT显示1.5 mg/mL组抑制率为62.39±2.56,与0.75 mg/mL及1 mg/mL组比较,P<0.05,呈剂量依赖性;激光共聚焦显微镜观察胃癌细胞1.5 mg/ml组凋亡细胞荧光强度最强,细胞核呈圆形或椭圆形变;透射电镜观察1.5 mg/mL组最明显,胃癌细胞核异染色质边聚成半月状,线粒体缩小明显,电子密度增加。结论山慈姑提取液能诱导胃癌细胞的凋亡,具有抗肿瘤作用。

山慈菇的本草考证及伪品鉴别

由于山慈菇的记载较混乱,品种较多,混淆使用明显,本文从本草考证方面,对真、伪品鉴别,供临床医师正确运用。

山兰对3种常见病原菌抑菌作用的研究

目的研究山兰对3种常见病原菌的抑菌作用,为山兰的开发利用提供理论依据。方法将山兰、独蒜兰、云南独蒜兰、杜鹃兰提取物经D-101大孔树脂分离,每种植物分别得到四个不同组分,分别为组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。然后采用液体小培养法测定这16种组分对3种常见病原菌的抑菌活性。结果16种组分中的12种醇提取物均对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有较强抑菌活性,但全部对大肠埃希氏菌没有抑菌活性。结论山兰与山慈菇的这3种原植物对常见的病原菌抑菌活性相近。

基于商品规格等级的山慈菇本草考证及近现代文献研究

以历代本草著作、近现代专著及现有标准为基础,考证山慈菇进行本草及文献,为其开发利用提供参考和依据。经考证山慈菇基原在唐宋时期较明确,为兰科植物杜鹃兰Cremastra appendiculata(D.Don)Makino的假鳞茎;明代之后增加老鸦瓣(光慈姑)、丽江山慈菇(地方习用品)等来源,直至清代《植物名实图考》将异科异属植物黄独作为山慈菇药材来源,表明古时山慈菇同名异物、异物同名现象较多,且品种混乱不清,混伪品较多。近代逐步确定山慈菇基原与2020年版《中华人民共和国药典》的基原规定一致。山慈菇历代以江苏、浙江为佳,之后产区扩大至江西、湖南、广西,近代推崇四川、贵州地区所产;多在夏秋6—8月采挖,除去地上部分及泥沙,分开大小置沸水锅中蒸煮至透心,干燥,以假鳞茎入药,炮制品多为生品。经产地及市场调查发现,山慈菇商品均为统货,未分规格等级。由于现有标准未规定含量测定指标,且山慈菇药材伪品、混用品及地方习用品较多,亟须明确其特征性品质指标,同时结合商品规格等级,进一步提升山慈菇药材的质量标准,以促进药材整体的优质优价,有效地临床应用及安全性评价。

山地柏搽剂的制备及质量控制

目的建立山地柏搽剂的制备及质量控制方法。方法采用薄层色谱法(TLC法)对该制剂中的山慈菇、地骨皮、黄柏进行定性鉴别,以薄层-紫外分光光度法测定样品中盐酸小檗碱的含量。结果薄层色谱中斑点清晰,易于识别,空白无干扰。盐酸小檗碱浓度线性范围为3.2～9.6μg/mL,r=0.9999,平均回收率为99.7%,RSD为0.84%。结论该方法简便、重现性、专属性、可靠性好,可用于该制剂的质量控制。

山慈菇化学成分及其药理作用研究进展

山慈菇,又名毛慈菇、冰球子等,味甘、微辛,归肝、脾经,其植物来源分别为兰科植物杜鹃兰、独蒜兰、云南独蒜兰。现代医学证实,山慈菇是一味治疗癌症的高效药物,能治疗多种癌症,常作为治疗癌症的基础用药。除此之外还具有抗菌、降压及治疗痛风等作用,具有广阔的开发前景。该文将近年来国内外学者对其化学成分、药理作用现状研究进行归纳和论述,为山慈菇的进一步研究及临床应用提供参考。

应用蛋白质组学分析化痰祛瘀法干预肝癌大鼠血清蛋白的差异表达

【目的】观察化痰祛瘀法对肝癌大鼠血清蛋白差异表达的影响,探讨其药效学机制。【方法】将30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、化痰祛瘀组,每组10只。采用自由饮用二乙基亚硝胺(DEN)法复制大鼠肝癌模型。从造模第4周开始,化痰祛瘀组大鼠给予山慈菇、莪术水提液(剂量为3.12 g·kg-1·d-1)灌胃,模型组给予9 g/L生理盐水灌胃(1 m L/d),每周6 d。于第16周末,将大鼠全部处死,取血清样本。将3组大鼠血清样本进行TMT肽段标记,质谱鉴定,应用KOBAS软件分析3组差异表达蛋白质的生物信息学。【结果】共鉴定到1 151个蛋白点。与正常组比较,模型组差异表达明显的蛋白共234个,包含正调控蛋白151个,负调控蛋白83个;与模型组比较,化痰祛瘀组差异表达明显的蛋白共138个,包括正调控蛋白60个,负调控蛋白78个。对差异表达蛋白对应的基因于PubMed数据库逐一进行检索,发现这些差异表达蛋白参与代谢、免疫调控、炎症反应、自噬、热休克、氧化应激、细胞周期与凋亡、基质降解、血管生成、肿瘤转移、癌相关等。信号通路分析涉及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)代谢、糖酵解、ATP合成等多条代谢相关通路,纤溶酶原激活物联转导通路,免疫调控相关Toll样受体(TLRs)通路,低氧诱导因子1(HIF-1)信号通路,经典肿瘤通路如P53、Wnt、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路、Ras通路等,亦涉及细胞因子介导的炎症反应、细胞黏附分子、细胞基质受体互动、自噬、细胞凋亡等通路。【结论】化痰祛瘀法可有效干预大鼠肝癌转移,具有多靶点、多中心的调控作用。

山慈菇化学成分及其抗肿瘤作用机制研究进展

中草药山慈菇具有清热解毒、化痰散结的功效,是临床常用的抗肿瘤中药之一,疗效肯定。通过查阅国内外公开发表的相关研究报道,从化学成分及抗肿瘤作用机制方面对山慈菇杜鹃兰品种进行分析、归纳和总结,以期为进一步研究提供思路,更好地指导临床应用。

复方山慈菇醇提物对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨复方山慈菇醇提物对人三阴性乳腺癌(TNBC)MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响。方法:将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为溶剂对照组和复方山慈菇醇提物组,0.1%DMSO或不同浓度的复方山慈菇醇提物作用于MDA-MB-231细胞24 h、48 h后,CCK-8法检测细胞活性;Hoechst33342染色法观察细胞形态学变化;Annexin V-APC/7-AAD双染色流式分析检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达。结果:复方山慈菇醇提物可浓度和时间依赖性地抑制MDA-MB-231细胞的增殖(P<0.05),24 h、48 h的IC50分别为0.51 mg生药/mL和0.26 mg生药/mL;0.25 mg生药/mL、0.5 mg生药/mL、1.0 mg生药/mL复方山慈菇醇提物处理24 h后,Hoechst33342染色显示细胞出现凋亡样变化;流式细胞术检测结果表明,与溶剂对照组比较,复方山慈菇醇提物可浓度依赖性地增加MDAMB-231细胞凋亡率(P<0.05);Western blot法显示,与溶剂对照相比,0.5 mg生药/mL复方山慈菇醇提物组Bax、Caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降(均P<0.05)。结论:复方山慈菇可体外抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖,机制可能与其下调Bcl-2及上调Bax、Caspase-3蛋白表达而诱导凋亡有关。

基于网络药理学探讨山慈菇-皂角刺药对治疗肺癌的作用机制

目的:基于网络药理学的研究方法,探讨山慈菇-皂角刺药对治疗肺癌的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台检索山慈菇和皂角刺的药物活性成分,收集其作用靶点,通过Uniprot数据库将收集的靶点进行"蛋白-基因名"转换;对于肺癌疾病的靶点,通过人类孟德尔遗传综合数据库、Gene Cards数据库筛选与肺癌相关的基因靶点;将靶点与疾病靶点利用Draw Venn Diagram网站绘制VENN图获得交集靶点后,利用String数据、Metascape在线数据库进行富集分析,最终采用Cytoscape3.7.2将所得结果可视化,呈现所筛选的核心靶点及蛋白质-蛋白质相互作用网络。结果:山慈菇-皂角刺药对共获得活性成分10种,潜在作用靶点202个;作用于肺癌的可能靶点141个,筛选出核心靶点20个;经过基因本体功能富集分析,涉及生物过程851个;经过京都基因与基因组百科全书通路富集分析,涉及信号通路110个,其中主要通路中IL-17通路、MAPK信号通路以及VEGF通路是在肺癌发生发展过程中常被探讨的通路。结论:山慈菇-皂角刺药对通过多靶点多通路干预肺癌治疗,其潜在机制可能与抑制肿瘤分裂生长、抑制肿瘤附近血管生成以及控制肿瘤转移等相关。