3株茶藨生柱锈重寄生木霉菌的形态鉴定及ITS序列分析

[目的]探讨更为客观的木霉菌鉴定手段。[方法]在形态分类的基础上结合分子鉴定手段(rDNA-ITS序列分析),对3株茶藨生柱锈重寄生木霉菌进行分类鉴定。[结果]依据TR1的培养性状和显微特征描述,初步鉴定该菌株为深绿木霉(T.atroviride);TR2、TR3的培养性状和显微特征在一定程度上相似,依据其形态特征,初步鉴定这2个菌株为绿色木霉(T.viridePers.ex Fr.)。从Genbank中深绿木霉和绿色木霉的6个菌株与TR1、TR2T、R3所作的系统发育树可知,TR1应该归为深绿木霉,TR2和TR3属同种真菌,应该归为绿色木霉,这与形态学观察结果一致。[结论]形态特征结合ITS序列分析可作为木霉菌分类鉴定的依据。

2株重寄生木霉菌丝生长的生物学特性

对2株茶藨生柱锈菌（Cronartium ribicola J．C．Fischer）重寄生木霉（Trichoderma spp．）TR1、TR2菌株菌丝生长及产孢条件进行单因素筛选及正交实验。结果表明：TR1菌丝生长速度快，且极易产生分生孢子；TR2菌丝生长速度相对较慢，产孢受一定条件限制。光照和VB2能明显刺激TR2分生孢子的产生。2株菌在以大麦粉、黄豆粉、KH2PO4、复合VB为培养基，5％接种量、120r／min、pH为6的条件下菌丝生长最佳。TR1和TR2菌丝生长的最适温度范围及水势分别为25～30℃、-2．32MPa和20～25℃、-4．54MPa。

茶藨生柱锈重寄生木霉分生孢子萌发的生物学特性

3株茶藨生柱锈菌（Cronartium ribicola J.C.Fischer）重寄生木霉（Trichoderma spp.）（TR1、TR2、TR3）的分生孢子在水琼脂、葡萄糖、PDA、改良Fries、华山松树皮浸汁和锈孢子培养基上均能萌发,TR1在各种培养基上的萌发率最高,萌发速度最快,而TR2和TR3在水琼脂和葡萄糖培养基上的萌发则较差;3个菌株孢子萌发的最适温度范围为20-30℃,其中TR1的萌发温度范围最广,在15-35℃内均能较好地萌发;3种孢子萌发的最适pH范围为4-5,相对湿度范围35%-100%（50%以上较易萌发）;黑暗和交替黑暗能刺激TR1孢子萌发,连续光照则有利于TR2和TR3孢子的萌发。