巴豆叶乙酸乙酯提取物抗血吸虫活性的初步研究

目的 研究巴豆叶乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract from the leaves of Croton tiglium, EAELCT)体内外抗血吸虫的活性及对血吸虫感染小鼠血清Th1/Th2型细胞因子分泌的调节作用。方法 体外抗血吸虫试验采用人工脱尾制备的血吸虫童虫,滴加于6孔培养板,45条童虫/孔,分为不同浓度EAELCT组、空白对照组、DMSO组以及吡喹酮组,比较各组童虫的死亡率;体内抗血吸虫试验采用血吸虫尾蚴腹部贴片法感染小鼠,建立血吸虫感染小鼠模型,感染后小鼠随机分为模型组、吡喹酮组、EAELCT高剂量组(0.3 g/kg)、EAELCT中剂量组(0.15 g/kg)和EAELCT低剂量组(0.075 g/kg)组。体内杀血吸虫童虫和成虫试验分别在感染后第1天和感染后第29天用不同剂量EAELCT连续灌胃7 d,并分别采集感染前、感染后第14天、第29天及感染后第21天、第42天的血液,分别于第29天和42天处死小鼠,收集肝门静脉和肠系膜静脉内的虫体,计算杀虫率。采用ELISA检测小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-5、IL-13细胞因子的含量。收集左肝进行HE染色,镜下观察肝纤维化病变的程度,并通过Imagine-pro图像软件测定肝组织中虫卵肉芽肿面积。结果 体外试验显示,EAELCT对血吸虫童虫有明显杀灭效果,培养48 h和72 h后各浓度EAELCT组中血吸虫童虫的死亡率均显著高于空白对照组和吡喹酮组(P<0.05)。体内试验显示,与模型组相比,EAELCT各浓度组均显示较好的杀虫效果,每鼠虫荷数显著减少(P<0.05);EAELCT各剂量组血清中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平较模型组明显增加(P<0.05),Th2型细胞因子IL-5、IL-13表达水平明显下降(P<0.05);EAELCT各剂量组与模型组比较,肉眼可见小鼠肝脏的颜色较红润,肝脏表面的虫卵结节数目减少,HE染色显示肝脏虫卵肉芽肿面积下降明显(P<0.05)。结论 EAELCT体内外具有较好的抗血吸虫活性,可通过上调Th1型细胞应答和下调Th2型细胞应答,从而有效抑制血吸虫病肝纤维化的病变和程度。

巴豆提取物对4种储粮害虫的生物活性研究

研究巴豆4种溶剂无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、石油醚提取物对玉米象、谷蠹、长角扁谷盗、锯谷盗4种储粮害虫的驱避作用和触杀作用,结果表明:巴豆4种溶剂的提取物对4种试虫具有一定的驱避作用和触杀作用,60 h的平均驱避等级最高达到Ⅴ级,对4种试虫的触杀死亡率最高达到87.63%。

巴豆粉及其溶剂提取物对玉米象的防治效果

用巴豆粉、提取物进行拌粮,研究对玉米象Sitophilus zeamais(Motschulsky)的防效。试验结果表明:巴豆粉在8000mg/kg稻谷使用剂量下,玉米象成虫的校正死亡率为46.7%,对子代的种群抑制率为65.7%;巴豆4种溶剂提取物对玉米象成虫及子代均具有很明显的控制作用,其中以无水乙醇提取物的效果最明显;1000mg/kg稻谷处理剂量下,玉米象成虫的校正死亡率为88.7%,对子代的种群抑制率为87.5%。

巴豆提取物对人肠上皮细胞生物学特性的影响

目的研究巴豆提取物对人肠上皮细胞生物学特性的影响。方法应用MTT法观察巴豆提取物对体外培养的人肠上皮细胞生长的影响。采用递增剂量(4mg·L 1～40mg·L^1)巴豆提取物作用细胞6wk后,用流式细胞术观察细胞增殖周期变化,同时用光镜和透射电镜观察细胞形态学的改变。结果大剂量巴豆提取物(80mg·L^1)可致培养的人肠上皮细胞全部死亡,中等剂量(20mg·L 1～40mg·L^1)明显抑制细胞的生长1.3,5,7d时OD值依次为:(20mg·L^1)0.040±0.003,0.081±0.012,0.147±0.022,0.0240±0.016;(40mg·L^1)0.033±0.004,0.056±0.012,0.104±0.010,0.189±0.006;对照为0.031±0.008,0.096±0.012,0.173±0.009,0.300±0.016,P<0.01-0.0001),且呈剂量依赖关系,其IC_(50)为52mg·L^1;小剂量(4mg·L^1)对细胞的生长无明显影响(1、3、5、7d时OD值依次为:0.053±0.005,0.089±0.009,0.166±0.002,0.262±0.008,P>0.05),用递增剂量(4mg·L^1～40mg·L^1)巴豆提取物持续作用细胞6wk后,可见其G_1—S期进程加快,G_1期细胞的数分数由0.604减少为0.584,S期细胞的数分数由0.302增加为0.336,P>0.05,DI增高为1.15;光镜下见细胞体积变小,核大质少,核浆比例失调;电镜下可见宽大突起的细胞膜,表面微绒毛丰富,长短不一,胞核明显增大,核仁增多,并可见病理性核分裂相。结论巴豆提取物对人肠上皮细胞生长的影响呈剂量依赖性,大剂量可致细胞生长延缓或死亡,小剂量无明显影响。长期使用递增剂量巴豆提取物可诱导细胞增殖加快,异倍体DNA含量增加,促使细胞发生恶性转化。

两种植物提取物不同比例混合对柑橘全爪螨的毒杀活性

试验测定了使君子Quisquabis indical和巴豆Croton tiglium在碱水溶液中的提取物对柑橘全爪螨的毒杀活性,并且测定了使君子和巴豆不同比例混合物对柑橘全爪螨的毒杀作用和增效作用。测定结果表明使君子和巴豆的碱水提取液在10mg/L时单独使用对柑橘全爪螨24h的校正死亡率分别为94.50%、100%,不同比例混合试验显示:对柑橘全爪螨触杀毒性最强的是使君子和巴豆提取物以1∶2的比例混合的混合物。其LC50值和LC95值分别为0.8545、2.9500mg/L,混剂的供毒系数为270.2589。此外当使君子和巴豆的提取物以1∶1的比例混合时,其LC50值和LC95值分别为0.8150、3.7843mg/L,混剂的供毒系数为279.8057,说明使君子和巴豆以1∶1到2∶1之间的比例混合时有较强的增效作用。

巴豆总蛋白质提取工艺优选

目的:优选巴豆总蛋白质的最佳提取工艺。方法:以巴豆总蛋白得率为评价指标,采用单因素和正交试验考察提取溶剂、料液比、提取溶剂pH、提取转速及时间对得率的影响并确定最佳提取工艺。结果:单因素试验结果表明,以PBS缓冲液提取、转速8 000 r·min^(-1)、料液比1∶70、时间15 min、提取溶剂pH为8.0时,巴豆总蛋白质得率最高。正交试验得出各因素对巴豆总蛋白质得率的影响程度大小依次为:pH>提取转速>料液比>时间,巴豆总蛋白质的最佳工艺条件为:PBS缓冲液pH为8.0,料液比1∶70、提取转速8 000 r·min^(-1),提取时间20 min。结论:通过单因素试验和正交试验确定了巴豆总蛋白质的最佳提取工艺,该工艺操作简单、省时,为巴豆蛋白质的进一步深层次研究提供了基础。