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苏云金杆菌cry Ⅰ A(a)、cry Ⅰ A(b)和cry Ⅰ A(c)基因型的PCR分析鉴定 被引量:2
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作者 黄志鹏 黄必旺 关雄 《福建农业大学学报》 CSCD 1998年第4期440-443,共4页
根据苏云金杆菌(Bacilusthuringiensis)杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了cryⅠ基因5′端特异引物和3′端共同引物,利用PCR扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物,通过扩增产物片段的分子量大... 根据苏云金杆菌(Bacilusthuringiensis)杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了cryⅠ基因5′端特异引物和3′端共同引物,利用PCR扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物,通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型.本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的20个菌株进行了cryⅠA(a~c)基因类型的PCR鉴定.结果表明:4个菌株含有cryⅠA(a)、cryⅠA(b)和cryⅠA(c)基因,2个菌株含有cryⅠA(a)和cryⅠA(c)基因,其余菌株不含所鉴定的基因类型. 展开更多
关键词 苏云金杆菌 cryⅰ基因型 PCR
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Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of CryⅠA(b) gene to Trichoderma harzianum
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作者 GAOXingxi YANGQian 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第23期2491-2494,共4页
In this study, CryⅠA(b) gene was successfully transferred into the biocontrol fungus Trichoderma har- zianum with an efficiency of 60—180 transformants per 106 spores by using Agrobacterium tumefaciens-mediated tran... In this study, CryⅠA(b) gene was successfully transferred into the biocontrol fungus Trichoderma har- zianum with an efficiency of 60—180 transformants per 106 spores by using Agrobacterium tumefaciens-mediated trans- formation. Putative transformants were analyzed to test the presence of CryⅠA(b) gene by Southern blot. Most trans- formants contained a single T-DNA copy. RT-PCR analysis showed that the CryⅠA(b) gene was transcribed. Antifungal activities and insecticidal activities of the transformants were examined. There was no obvious difference in antifungal activities between the transformants and their wild strains. The modified mortalities of the transformants T1 and T2 were 69.57% and 91.30%, respectively. The tranformation system mediated by A. tumefaciens proved to be a powerful tool for the filamentous fungi transformation and functional genomic study with its high transformation frequency, sim- plicity of T-DNA integration, and genetic stability of transformants. 展开更多
关键词 cryⅰA(b)基因 遗传变异 杀虫剂 生物效应 环境污染
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银腺杨转Cry I Ac和API双价抗虫基因的研究 被引量:9
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作者 李科友 樊军锋 +2 位作者 赵忠 李玲 朱海兰 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2007年第5期699-704,共6页
在建立以银腺杨(84K)叶片为外植体的再生系统基础上,通过农杆菌介导法把CryⅠ4c和API双价抗虫基因导人银腺杨(84K)基因组中。转化杨树叶片,在含有卡那霉素的培养基上诱导不定芽和诱导生根,获得了400株卡那霉素抗性转化再生植株... 在建立以银腺杨(84K)叶片为外植体的再生系统基础上,通过农杆菌介导法把CryⅠ4c和API双价抗虫基因导人银腺杨(84K)基因组中。转化杨树叶片,在含有卡那霉素的培养基上诱导不定芽和诱导生根,获得了400株卡那霉素抗性转化再生植株。抗性植株经PCR检测,有70株呈阳性。通过Southern杂交和ELISA检测进一步证明CryⅠ4c和API双价抗虫基因已整合到银腺杨(84K)基因组中,拷贝数1~2个,并得到了表达。转化植株用杨扇舟蛾幼虫进行饲虫试验,结果表明昆虫幼虫的死亡率高达60.0%~80.0%。同时,存活幼虫的生长发育也受到了明显抑制。本研究结果为杨树抗虫育种提供了新的种质资源。 展开更多
关键词 银腺杨(84K) cryⅰ 4c和API基因 转化 抗虫性
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苏云金杆菌4.0718质粒上杀虫晶体蛋白基因的PCR分析 被引量:4
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作者 夏立秋 张何 +2 位作者 刘全兰 陈宇 莫湘涛 《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第2期35-37,46,共4页
苏云金杆菌 (BacillusThuringiensis) 4 .0 718由本实验室选育是对鳞翅目 (Lepidopteran)昆虫有高毒性的菌株。采用SDS温和提取方法提取此菌株的质粒 ,电泳纯化后获得了其 4种不同分子量的质粒P1,P2 ,P3,P4。利用序列分析软件对已知的c... 苏云金杆菌 (BacillusThuringiensis) 4 .0 718由本实验室选育是对鳞翅目 (Lepidopteran)昆虫有高毒性的菌株。采用SDS温和提取方法提取此菌株的质粒 ,电泳纯化后获得了其 4种不同分子量的质粒P1,P2 ,P3,P4。利用序列分析软件对已知的cryI类型基因进行阵列比较 ,根据其高度保守区域设计了 1对通用引物 ,对cryI类型基因的扩增产物为 2 77bp左右的片段 ,用此引物对Bacillusthuringiensis 4.0 718的 4种不同质粒进行了PCR分析 ,发现质粒P1,P2 ,P3扩增阳性 ,都产生了 2 77bp的扩增片段 ,而质粒P4没有扩增产物 ,这为进一步的基因定位打下了基础。 展开更多
关键词 苏云金杆菌4.0718 质粒 杀虫晶体蛋白 PCR分析 cryⅰ基因
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