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Hydrogen promotes the activation of Cu, Zn superoxide dismutase in a rat corneal alkali-burn model
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作者 Takeshi Arima Tsutomu Igarashi +4 位作者 Masaaki Uchiyama Maika Kobayashi Ikuroh Ohsawa Akira Shimizu Hiroshi Takahashi 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2020年第8期1173-1179,共7页
AIM: To investigate the effects of hydrogen(H2) on Cu, Zn superoxide dismutase(SOD1) activation in a rat model of corneal alkali burn. METHODS: In each rat, one cornea was subjected to alkali exposure. Physiological s... AIM: To investigate the effects of hydrogen(H2) on Cu, Zn superoxide dismutase(SOD1) activation in a rat model of corneal alkali burn. METHODS: In each rat, one cornea was subjected to alkali exposure. Physiological saline(saline group) or H2-dissolved saline(H2 group) was instilled continuously on the cornea for 5 min before and after alkali exposure. Inflammatory cells, neovascularization, and cytoplasmic SOD1 levels were evaluated immunohistochemically in enucleated eyes from both groups. Three-dimensional ultrastructural tissue changes in the eyes were analyzed using low-vacuum scanning electron microscopy.RESULTS: The numbers of both inflammatory and vascular endothelial cells were significantly reduced in the corneas of the H2 group(P<0.01). Furthermore, H2 treatment increased both cytoplasmic SOD1 levels(P<0.01) and activity in corneal epithelial cells(P<0.01). Notably, the SOD1 activity level in the H2 group was approximately 2.5-fold greater than that in the saline group.CONCLUSION: H2 treatment suppresses inflammation and neovascularization in the injured cornea and indirectly suppresses oxidative insult to the cornea by upregulating the SOD1 enzyme protein level and activity. 展开更多
关键词 HYDROGEN alkali burn cu zn superoxide dismutase low-vacuum scanning electron microscopy rats
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hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白的制备、穿膜效应及其抗氧化、抗炎症功效
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作者 张洁 姚君妍 +4 位作者 杨英桂 王飞 郑清友 李欣 柳长柏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1059-1069,共11页
目的 探究人源性细胞膜穿透肽hPP10携带人源性抗氧化蛋白Cu,Zn-SOD的穿膜效应并观察其抗氧化、抗炎功效。方法利用RT-PCR技术扩增人源性SOD基因片段、酶切连接法构建重组质粒pET15b-Cu,Zn-SOD,pET15b-hPP10-Cu,Zn-SOD;利用镍柱亲和层析... 目的 探究人源性细胞膜穿透肽hPP10携带人源性抗氧化蛋白Cu,Zn-SOD的穿膜效应并观察其抗氧化、抗炎功效。方法利用RT-PCR技术扩增人源性SOD基因片段、酶切连接法构建重组质粒pET15b-Cu,Zn-SOD,pET15b-hPP10-Cu,Zn-SOD;利用镍柱亲和层析法、分子筛方法纯化Cu,Zn-SOD、hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白并利用Western blotting法鉴定其正确性;利用免疫荧光法、荧光共定位实验、Western blotting法鉴定hPP10-Cu,Zn-SOD在细胞中的穿膜效应;利用Western blotting法鉴定hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白穿膜时间梯度和浓度梯度效应;利用SOD酶活性测定试剂盒检测hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后的SOD酶活性;利用MTT法检测hPP10对细胞活性的影响。利用H2O2建立HEK293氧化应激细胞模型,通过流式细胞分析术(FCM)分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后细胞凋亡情况;并RT-qPCR分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后凋亡相关因子的表达情况;通过ROS检测分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后抗氧化能力。TPA诱导建立小鼠耳部炎症模型(5只/组,共4组),然后RT-qPCR分析hPP10-Cu,Zn-SOD穿膜后,NFκB,IL-1β、IL-6、TNFα因子的转录情况;Western blotting检测NFκB p65、p-NFκB p65、IL-1β、TNFα基因的表达;免疫组化分析炎性因子p-NFκB p65、TNFα基因的表达。结果 成功构建了重组质粒pET15b-Cu,Zn-SOD,pET15b-hPP10-Cu,Zn-SOD,并获得Cu,Zn-SOD蛋白和hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白;免疫荧光试验结果表明5μmol/L浓度的hPP10-Cu,Zn-SOD转导HEK293细胞具有明显的穿膜效应;荧光共定位实验显示融合蛋白hPP10-Cu,Zn-SOD入胞后定位在细胞膜内,部分蛋白定位在细胞核内;Western blotting实验结果表明hPP10-Cu,Zn-SOD转导Hela(P<0.05),HEK293(P<0.01)细胞具有浓度依赖性,细胞内hPP10-Cu,Zn-SOD存在可持续24 h;5μmol/L的hPP10-Cu,Zn-SOD转导细胞具有较好的抗氧化活性(P<0.01);MTT结果显示高达10μmol/L浓度的hPP10-Cu,Zn-SOD对于细胞活力的影响小。在氧化应激模型中,FCM结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞降低了细胞的早期凋亡(P<0.01)和晚期凋亡(P<0.05);RT-qPCR结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞使Bcl2、Mcl1、Deptor等抗凋亡因子升高(P<0.05),降低了Bad、P21、P27等促凋亡因子的表达(P<0.05);ROS结果显示hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白孵育细胞显著降低了细胞内的活性氧含量(P<0.01)。在炎症模型中,hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白可显著降低IL-1β、IL-6、TNFα因子的转录(P<0.05);p-NFκB p65、IL-1β及TNFα的表达都呈现了抑制作用(P<0.05);hPP10-Cu,Zn-SOD融合蛋白处理组较Cu,Zn-SOD蛋白处理组,降低了炎性因子p-NFκB p65及TNFα基因的表达(P<0.05)。结论 融合蛋白hPP10-Cu,Zn-SOD具有明显的穿膜入胞、抗氧化、抗炎功效,且对细胞毒副作用很小。这些结果为hPP10作为新的递送载体奠定基础,也为hPP10-Cu,Zn-SOD应用于护肤品等提供了理论依据。 展开更多
关键词 人源性细胞膜穿透肽hPP10 铜锌超氧化物歧化酶cu zn-SOD 抗氧化 抗炎 酶活力测定
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Inhibition effect of expression of Cu/Zn superoxide dismutase from rice on synthesis of Glutathione in Saccharomyces cerevisiae
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作者 艾玉卓 都业杰 +1 位作者 祖元刚 安志刚 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2008年第1期63-66,共4页
The expression of a rice Cu/Zn superoxide dismutase (Cu/Zn-SOD) in Saccharomyces cerevisiae regulated by GAPDH promoter, involved in the inhibition of endogenous Glutathione (GSH) synthesis, and the competitive ex... The expression of a rice Cu/Zn superoxide dismutase (Cu/Zn-SOD) in Saccharomyces cerevisiae regulated by GAPDH promoter, involved in the inhibition of endogenous Glutathione (GSH) synthesis, and the competitive expression was detected by constructing the expression vector transferred Cu/Zn-SOD gene into wild-type S. cerevisiae. Transcription and expression of the Cu/Zn-SOD gene in S. cerevisiawere were confirmed by northern blot and SDS-PAGE, respectively, and activity of the Cu/Zn-SOD from crude extracts was enzymatically detected based on the effect of nitroblue tetrazolium (NBT) after running a native polyacrylamide gel. The GSH synthesis was also tested by DTNB (5, 5'-Dithiobis (2-nitrobenzoic acid)) method. Results showed that GSH synthesis was evidently suppressed by the expression of Cu/Zn-SOD gene in both control and heat shock strains. It implied that the expression of the Cu/Zn-SOD gene in S. cerevisiae has more potential facility in response to oxidative exposure than that of endogenous GSH, although Cu/Zn-SOD and GSH were both contributed to the function of oxygen radical oxidoreduction. 展开更多
关键词 cu/zn superoxide dismutase GAPDH promoter Saccharomyces cerevisiae GLUTATHIONE
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Significance of Cu/Zn-Superoxide Dismutase Levels in Hemodialysis Patients: A Mini Review
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作者 Yuya Nakamura Masahiro Inagaki +8 位作者 Sachiyo Kenmotsu Shiho Yamadera Isao Ohsawa Hiromichi Gotoh Yoshikazu Goto Naoki Sato Tatsunori Oguchi Mayumi Tsuji Yuji Kiuchi 《Modern Research in Inflammation》 2017年第2期9-13,共5页
Cu/Zn-superoxide dismutase (Cu/Zn-SOD) is an enzyme that is ubiquitously present in the cytoplasm and causes dismutation of superoxide radicals, therefore Cu/Zn-SOD is primarily used as an antioxidant marker. Levels o... Cu/Zn-superoxide dismutase (Cu/Zn-SOD) is an enzyme that is ubiquitously present in the cytoplasm and causes dismutation of superoxide radicals, therefore Cu/Zn-SOD is primarily used as an antioxidant marker. Levels of Cu/Zn-SOD are higher in the serum of hemodialysis patients than in serum of healthy volunteers. The increase of serum Cu/Zn-SOD levels is related to the decrease of kidney function with aging and arteriosclerosis in hemodialysis patients. Moreover, infection, vascular puncture, and hemostasis may be related to the increase in serum Cu/Zn-SOD levels. As it is associated with numerous factors in hemodialysis patients, Cu/Zn-SOD may serve as a complex marker for arteriosclerosis, vascular, and inflammatory conditions. It is important to investigate various agents that decrease serum Cu/Zn-SOD levels to improve the life-span of hemodialysis patients. 展开更多
关键词 cu/zn-superoxide dismutase HEMODIALYSIS Complex MARKER
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Partial characterization of superoxide dismutase activity in the Barber pole worm-Haemonchus contortus infecting Capra hircus and abomasal tissue extracts
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作者 Sadia Rashid Malik Irshadullah 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2014年第9期718-724,共7页
Objective:To determine the activity of superoxide dismutase(SOD) in the male and female haematophagous caprine worms,Haemonchus contortus infecting Capra hircus,and their E/S products and also to analyse the effect of... Objective:To determine the activity of superoxide dismutase(SOD) in the male and female haematophagous caprine worms,Haemonchus contortus infecting Capra hircus,and their E/S products and also to analyse the effect of Haemonchus infection on the level of host SOD.Methods:The SOD activity was analysed by using the pyrogallol autoxidation assay and non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis followed by specific enzyme staining by riboflavin-nitroblue tetrazolium method.Results:The adult females were found to have higher enzyme activity than the male worms.Appreciable amount of SOD activity was also detected in the worm culture medium and female worms secreted more SOD in comparison to the male parasites.The SOD activity was negatively correlated to the worm burden.Statistically significant decrease in SOD activity(P<0.05) was observed in the heavily infected host tissue in comparison to the control non-infected host tissue.SOD profile of the crude extracts of both the sexes revealed polymorphism and a fast migrating activity band being characteristic of E/S products.The SOD activities were found highly sensitive to potassium cyanide indicating the Cu/Zn form of SOD.Conclusions:Haemonchus contortus is a key model parasite for drug and vaccine discovery.The presences of SOD activity in appreciable amount in the parasite as well as its E/S products indicate that it has a well-developed active antioxidant system to protect itself from the host immune attack.SOD could be the target for vaccine development which is the need of the hour as mass drug administration for parasite control has resulted in anthelmintic resistance across the globe and threatens the viability of sheep and goat industry in many regions of the world.The infection with Haemonchus causes a drastic reduction in SOD activity of the host tissue thus effecting its protective potential.One characteristic SOD band was found in the females which was not present in any other preparations and thus could be exploited for further studies on diagnostic/control measures. 展开更多
关键词 superoxide dismutase HAEMONCHUS contortus POLYACRYLAMIDE gel ELECTROPHORESIS cu/zn 3-D densitogram
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妇科肿瘤血清Cu、Zn及CuZn-SOD活力的检测
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作者 赵锐 刘雁飞 +2 位作者 刘絮 梁铁彪 王晓玲 《世界元素医学》 2005年第4期27-28,共2页
目的:本研究探讨妇科肿瘤患者血清Cu、Zn及CuZn-SOD活力的变化及其意义。方法:采用原子吸收分光光度法和黄嘌呤氧化酶法测定患者与正常对照组血清Cu、Zn及CuZn-SOD的活力。结果:妇科良、恶性肿瘤血清Cu含量均高于正常对照组,妇科恶... 目的:本研究探讨妇科肿瘤患者血清Cu、Zn及CuZn-SOD活力的变化及其意义。方法:采用原子吸收分光光度法和黄嘌呤氧化酶法测定患者与正常对照组血清Cu、Zn及CuZn-SOD的活力。结果:妇科良、恶性肿瘤血清Cu含量均高于正常对照组,妇科恶性肿瘤血清Cu高于妇科良性肿瘤。妇科良恶性肿瘤Zn、CuZn-SOD活力均低于正常组,妇科恶性肿瘤血清Zn、CuZn-SOD活力低于妇科良性肿瘤。结论:妇科肿瘤的发生发展与微量元素、自由基紊乱有关。 展开更多
关键词 妇科肿瘤cu zn cuzn-SOD 自由基
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杨梅Cu/Zn超氧化物歧化酶基因(MrSOD1)cDNA的克隆及表达分析 被引量:12
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作者 王芳 董乐 +2 位作者 戴聪杰 林娈 林静 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第22期27-33,共7页
以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/... 以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/ZnSOD的特征信号序列;序列同源性分析表明,其与GenBank中注册的Cu/ZnSOD序列的同源性均在77%以上。该基因命名为MrSOD1(GenBank登录号:GQ404510)。半定量RT-PCR分析显示,MrSOD1在4种组织中表达量为:果>叶>花>枝条。本试验为进一步研究MrSOD1的时空表达特性、调控途径及杨梅抗氧化伤害的分子机理奠定基础。 展开更多
关键词 杨梅 cu/zn超氧化物歧化酶 基因克隆 组织表达
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盐胁迫下花花柴 miR398 对 Cu/Zn 超氧化物歧化酶基因的调控研究 被引量:5
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作者 杜驰 廖茂森 +1 位作者 张霞 张富春 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期682-688,共7页
植物miRNA能够参与盐胁迫下基因表达的调控。在盐胁迫条件下盐生植物花花柴miR398(KcmiR398)呈现显著性差异表达,为了探讨rniR398的靶基因及其对靶基因的调控方式,通过生物信息学分析(http://plant—grn.noble.Org/psRNATar... 植物miRNA能够参与盐胁迫下基因表达的调控。在盐胁迫条件下盐生植物花花柴miR398(KcmiR398)呈现显著性差异表达,为了探讨rniR398的靶基因及其对靶基因的调控方式,通过生物信息学分析(http://plant—grn.noble.Org/psRNATarget/),预测KcmiR398的靶基因分别为Cu/Zn超氧化物歧化酶(SOD)基因CSDl和CSD2。利用RACE技术从花花柴中克隆到CSDl和CSD2基因全长序列,分别命名为KcCSDl和KcCSD2。qRTPCR结果表明:(1)KcmiR398在盐胁迫的花花柴茎中上调表达,在新叶中下调表达;KcCSDl在盐胁迫的老叶中上调表达,而在老茎和根中下调表达;KcCSD2在盐胁迫的老茎和根中上调表达。(2)300mmol/I,NaCl胁迫24~48h,KcmiR398与对照无显著差异;KcCSDl的表达为对照的3倍以上,而KcCSD2的表达没有显著差异。研究表明,花花柴的KcmiR398和KcCSDl、KcCSD2有组织差异性表达,盐胁迫可以影响KcmiR398和KcCSDl、KcCSD2基因的表达以适应盐胁迫产生的氧化危害。 展开更多
关键词 花花柴 盐胁迫 miR398 cu/zn超氧化物歧化酶 表达分析
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Cu^(2+)、Zn^(2+)对罗氏沼虾鳃中SOD同工酶的影响 被引量:7
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作者 俞亚东 许燕 杨洁 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2009年第2期189-192,共4页
采用生态学单因子梯度试验方法,研究了水环境中添加0.01mg/L,0.08mg/L,0.64mg/L,5.12mg/L的Cu2+,Zn2+对罗氏沼虾鳃中超氧化物歧化酶(SOD)同工酶活力和酶谱的影响.结果显示:随着Cu2+,Zn2+浓度的增加鳃中SOD酶活力均呈先增加后减少的变化... 采用生态学单因子梯度试验方法,研究了水环境中添加0.01mg/L,0.08mg/L,0.64mg/L,5.12mg/L的Cu2+,Zn2+对罗氏沼虾鳃中超氧化物歧化酶(SOD)同工酶活力和酶谱的影响.结果显示:随着Cu2+,Zn2+浓度的增加鳃中SOD酶活力均呈先增加后减少的变化趋势,分别在0.64 mg/L Cu2+和0.08 mg/L Zn2+时SOD酶活力达到最大(73.57±0.12 U/mg和53.63±0.17 U/mg),且均与对照组有显著差异(P<0.05);低浓度Cu2+处理组SOD同工酶酶谱出现SOD酶带变宽、颜色加深现象,并在0.08 mg/L和0.64 mg/L浓度组中新增一条酶带(SOD2),而高浓度组(5.12mg/L)明显抑制SOD酶带活性,新增的条带也缺失;同样低浓度的Zn2+使得SOD酶谱的条带变宽,颜色加深,但没有出现新增酶带,而高浓度(5.12 mg/L)Zn2+使得条带变窄,颜色变淡.结果表明:这两种金属离子对罗氏沼虾鳃中SOD同工酶活力及酶谱的影响与浓度有关,Cu2+对SOD的影响明显大于Zn2+,SOD同工酶活力和酶谱的变化可以灵敏地反映Cu2+的胁迫程度和毒性. 展开更多
关键词 罗氏沼虾 cu2+ zn2+ 同工酶 超氧化物歧化酶
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miRNA398调控烟草Cu/Zn-SOD基因的表达 被引量:2
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作者 周小龙 魏春阳 +8 位作者 黄佳 史艳梅 王皓 罗朝鹏 李锋 王燃 杨军 陈继峰 林福呈 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2014年第4期99-102,共4页
模式植物miRNA398可以抑制靶基因Cu/Zn-SOD的表达。为揭示烟草miRNA398的生物学功能,采用荧光定量PCR技术分析了烟草品种CB-1和B37在干旱胁迫条件下miRNA398和Cu/Zn-SOD基因的表达量,并预测了烟草miRNA398结合Cu/Zn-SOD基因的位点。结... 模式植物miRNA398可以抑制靶基因Cu/Zn-SOD的表达。为揭示烟草miRNA398的生物学功能,采用荧光定量PCR技术分析了烟草品种CB-1和B37在干旱胁迫条件下miRNA398和Cu/Zn-SOD基因的表达量,并预测了烟草miRNA398结合Cu/Zn-SOD基因的位点。结果表明:烟草miRNA398与Cu/Zn-SOD基因5非翻译区的21个碱基序列互补,从而抑制该基因的表达;在干旱胁迫条件下,CB-1的miRNA398表达水平上升,B37的miRNA398表达水平下降,Cu/Zn-SOD基因表现出与miRNA398相反的表达趋势,说明抗旱能力存在差异的两个品种中miRNA398均可抑制Cu/Zn-SOD基因表达,并且对干旱胁迫响应具有两种不同的方式。 展开更多
关键词 烟草 miRNA398 cu zn-SOD基因
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透析法和稀释法复性重组人Cu,Zn-SOD包含体 被引量:1
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作者 刘建荣 赵晓瑜 +2 位作者 王之宇 刘建国 静天玉 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第4期411-414,419,共5页
以稀释法和透析法对在E.coli中以包含体形式表达的重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)进行复性.以8 mol/L尿素溶解分离纯化的包含体(纯度达80%以上),对其稀释或透析至尿素终浓度为1.0 mol/L后,在稀释样品中补加终浓度50μmoL/L的Cu2+和5.0μmo... 以稀释法和透析法对在E.coli中以包含体形式表达的重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)进行复性.以8 mol/L尿素溶解分离纯化的包含体(纯度达80%以上),对其稀释或透析至尿素终浓度为1.0 mol/L后,在稀释样品中补加终浓度50μmoL/L的Cu2+和5.0μmoL/L的Zn2+,在透析样品中补加终浓度5.0μmoL/L的Cu2+和0.5μmoL/L的Zn2+,分别获得了比活3 300 u/mg和4 300 u/mg的复性rhSOD.该复性样品经铜螯合亲和层析柱纯化可获得更高比活性的rhSOD. 展开更多
关键词 重组人cu zn—SOD 复性 包含体
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葡萄糖和Cu^(2+)对蛹虫草Cu,Zn超氧化物歧化酶在E.coli中表达的影响 被引量:1
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作者 王尊生 何卓晶 +1 位作者 宋聿文 袁勤生 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期522-524,共3页
对含有蛹虫草Cu,Zn-超氧化物歧化酶(cm-SOD)基因的重组E.coli培养条件进行了初步优化。结果表明,LB培养基国含有Cu^(2+)可明显提高超氧化物歧化酶比活力;而在菌体培养中补加葡萄糖,可提高重组蛋白表达量和细胞生物量。在含有0.6mmol/... 对含有蛹虫草Cu,Zn-超氧化物歧化酶(cm-SOD)基因的重组E.coli培养条件进行了初步优化。结果表明,LB培养基国含有Cu^(2+)可明显提高超氧化物歧化酶比活力;而在菌体培养中补加葡萄糖,可提高重组蛋白表达量和细胞生物量。在含有0.6mmol/L Cu^(2+)、Zn^(2+)的LB培养基中补加22mmol/L葡萄糖,每200ml培养液可获得lg湿细胞,超氧化物歧化酶比活力达到3305u/mg。 展开更多
关键词 cu zn-超氧化物歧化酶 蛹虫草 表达
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小球藻病毒PBCV-1编码的Cu,Zn-SOD酶学稳定性
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作者 刘建荣 贾红玉 +2 位作者 陈慧慧 刘晓飞 康明 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第3期304-310,共7页
将小球藻病毒模式株PBCV-1编码的Cu, Zn-SOD截短突变体tcvSOD克隆到大肠杆菌表达载体pET23a(+)后,经IPTG诱导在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达得到了可溶性tcvSOD重组蛋白.该蛋白具有典型的SOD活性,能强烈抑制邻苯三酚的自氧化作用,最... 将小球藻病毒模式株PBCV-1编码的Cu, Zn-SOD截短突变体tcvSOD克隆到大肠杆菌表达载体pET23a(+)后,经IPTG诱导在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达得到了可溶性tcvSOD重组蛋白.该蛋白具有典型的SOD活性,能强烈抑制邻苯三酚的自氧化作用,最高抑制率为97%,反应体系中酶蛋白终质量浓度为0.2μg/mL时达到最大抑制,由此计算出其比活力为16 050 U/mg.tcvSOD的热稳定性和对蛋白变性剂SDS胁迫的反应与酶蛋白在反应体系中的质量浓度有关.终质量浓度为1μg/mL时tcvSOD可以耐90℃、30 min以及质量分数2%~10%的SDS处理而活性保持不变或略有丧失,终质量浓度为0.05和0.1μg/mL时则对上述处理非常敏感. 0.05、0.1、1μg/mL 3种质量浓度的tcvSOD对反应体系中pH4~12的变化,以及2~10 mol/L尿素和1~4 mol/L盐酸胍胁迫处理,酶活性保持恒定.实验结果表明tcvSOD具有较强热稳定性和pH稳定性,对常见蛋白变性剂也有良好抗性,有进一步开发利用的潜能. 展开更多
关键词 铜锌超氧化物歧化酶(cu zn-SOD) 小球藻病毒 热稳定性 pH稳定性 蛋白变性剂抗性
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低强度激光血管内照射对脑梗塞患者血浆GMP-140、Cu-ZnSOD、ET-1的影响
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作者 方群 霍晓丽 《放射免疫学杂志》 CAS 2000年第1期9-11,共3页
目的 :观察脑梗塞患者经532nm低强度激光血管内照射(ILLLI)后 ,血浆GMP -140、Cu -ZnSOD、ET-1水平的改变 ,探讨ILLLI治疗脑梗塞的疗效机制。方法 :应用放射免疫分析法检测单纯药物治疗组30例和药物 +ILLLI组35例患者的GMP -140、Cu -Zn... 目的 :观察脑梗塞患者经532nm低强度激光血管内照射(ILLLI)后 ,血浆GMP -140、Cu -ZnSOD、ET-1水平的改变 ,探讨ILLLI治疗脑梗塞的疗效机制。方法 :应用放射免疫分析法检测单纯药物治疗组30例和药物 +ILLLI组35例患者的GMP -140、Cu -ZnSOD、ET -1值 ,并对各数据进行比较分析。结果 :532nmILLLI对抑制血小板活化无明显作用 ,可明显升高血清Cu_ZnSOD含量(P<0.01) ,并可显著降低血浆ET-1的含量(P<0.01)。结论 :在特定波长(532nm) ,特定照射强度(1.72×104J/cm2/day)及特定的疗程条件下得出的结果 ,认为ILLLI在治疗脑梗塞患者中有重要意义。 展开更多
关键词 ILLLI MP-140 cu-znSOD 内皮素 脑梗塞
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Effect of Excipients on Stability and Structure of rhCuZn-SOD Encapsulated in PLGA Microspheres
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作者 LIU Ling 1,2 ,GE Yu 1 and YUAN Qin-sheng 1 1. State Key Laboratory of Bioreactor Engineering and Institute of Biochemistry,East China University of Science and Technology,Shanghai 200237,P. R. China 2. Public Health School,Nanjing Medical University,Nanjing 210029,P. R. China 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2004年第3期323-327,共5页
When a protein is encapsulated into poly( DL -lactide-co-glycolide)(PLGA) microspheres by means of the double-emulsion method,the harsh microspheres formation process including ultrasonification,exposure to an organic... When a protein is encapsulated into poly( DL -lactide-co-glycolide)(PLGA) microspheres by means of the double-emulsion method,the harsh microspheres formation process including ultrasonification,exposure to an organic solvent and a polymer may cause the denaturation of the protein. In this study,we investigated the enzymatic activity change and the effect of the excipients on the stability of recombinant human Cu,Zn-superoxide dismutase(rhCu,Zn-SOD) during the emulsification. The specific activity recovery was found to be concentration dependent and the excipients involved such as PEG 600 and Tween 20,and trehalose were shown to increase the stability of rhCu,Zn-SOD. The protein structural integrity within the microspheres was analyzed by FTIR. The structure of rhCu,Zn-SOD within PLGA microspheres containing trehalose was found to be similar to that of the native solid state,whereas the protein encapsulated during the preparation in the absence of any excipient changed due to the possible hydrophobic interaction with the polymer. The results suggest that a rational stability strategy for protein to be encapsulated into microspheres should aim at different processes. 展开更多
关键词 Poly( DL -lactide-co-glycolide)(PLGA) microsphere Recombinant human cu zn-superoxide dismutase(rhcu zn-SOD) Fourier transform infrared(FTIR) spectroscopy Protein stability EXCIPIENT
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以硅胶和Agarose 6B为载体金属螯合亲和层析分离纯化重组人Cu,Zn-SOD 被引量:2
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作者 黄竹 袁勤生 《药物生物技术》 CAS CSCD 2001年第5期255-259,共5页
以层析硅胶Agarose 6B ,制备了Cu2 + 螯合亲和载体 ,利用合成的Cu2 + IDA 硅胶亲和柱和Cu2 + IDA Agarose 6B亲和柱分离纯化了重组人Cu ,Zn SOD ,并比较了这两 2亲和载体的纯化效果和性能。硅胶纯化SOD的比活、纯化倍数和回收率分别为... 以层析硅胶Agarose 6B ,制备了Cu2 + 螯合亲和载体 ,利用合成的Cu2 + IDA 硅胶亲和柱和Cu2 + IDA Agarose 6B亲和柱分离纯化了重组人Cu ,Zn SOD ,并比较了这两 2亲和载体的纯化效果和性能。硅胶纯化SOD的比活、纯化倍数和回收率分别为 75 86U/mg·protein、6 .5倍和 86 .7% ;而Agarose 6B纯化SOD的比活、纯化倍数和回收率则分别为 6 2 2 3/mg·protein、5 .8倍和 93.0 %。 2种亲和载体 5次使用后 。 展开更多
关键词 金属螯合亲和层析 层析硅胶 Agarose6B 重组人cu zn-SOD
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PEP-1肽介导人Cu,Zn-SOD转导入大鼠离体缺血再灌注损伤心脏 被引量:5
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作者 柯尊平 王家宁 +4 位作者 郭凌郧 唐俊明 黄永章 王磊 杨建业 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2007年第4期450-455,I0001,共7页
目的:构建原核表达载体pET15b-PEP-1-SOD1,观察PEP-1-SOD1融合蛋白在大鼠离体缺血再灌注损伤心肌组织内的转导能力和转导的目的蛋白是否具有酶活性。方法:构建原核表达载体pET15 b-SOD1和pET15b-PEP-1-SOD1,分别转化大肠杆菌,表达和纯化... 目的:构建原核表达载体pET15b-PEP-1-SOD1,观察PEP-1-SOD1融合蛋白在大鼠离体缺血再灌注损伤心肌组织内的转导能力和转导的目的蛋白是否具有酶活性。方法:构建原核表达载体pET15 b-SOD1和pET15b-PEP-1-SOD1,分别转化大肠杆菌,表达和纯化SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白。采用Langendorff灌流系统,大鼠离体心脏停灌30 min后复灌60 min建立缺血再灌注损伤模型。实验分为对照组,SOD1组,25,50,100μmol/L PEP-1-SOD1组。免疫荧光检测PEP-1-SOD1的转导效果,SOD试剂盒检测酶活性。结果:在荧光显微镜下,PEP-1-SOD1融合蛋白预处理组心肌组织中可见特异性的绿色荧光位于心肌细胞胞质内,25,50,100μmol/L组阳性率分别为32.6%,42.5%,60.9%。SOD1蛋白预处理组和对照组未见到绿色荧光。与对照组相比,PEP-1-SOD1各组SOD酶活性均显著增加(P<0.01),且SOD酶活性与PEP-1-SOD1浓度呈正相关,SOD1组与对照组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:PEP-1-SOD1融合蛋白以天然有活性的形式穿透进入大鼠离体缺血再灌注损伤的心肌细胞,且具有剂量依赖性。转导入细胞内的PEP-1-SOD1蛋白具有酶活性。本研究为SOD1治疗由氧化应激所导致的各种疾病提供了一种有效的递送途径。 展开更多
关键词 PEP-1肽 锌-超氧化物歧化酶 蛋白转导 心肌细胞 缺血再灌注损伤
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肌萎缩性侧索硬化症相关的Cu,Zn-SOD 被引量:3
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作者 丘创华 周勇军 +1 位作者 侯敢 黄迪南 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期107-112,共6页
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)被称为生物体内自由基的清洁剂,其主要形式Cu,Zn-SOD称SOD1.SOD1突变体可引起致死性运动神经元疾病肌萎缩性侧索硬化症(ALS).但是,SOD1的毒性机理尚未完全清楚.本文概述了SOD1、Cu分子伴侣(cop... 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)被称为生物体内自由基的清洁剂,其主要形式Cu,Zn-SOD称SOD1.SOD1突变体可引起致死性运动神经元疾病肌萎缩性侧索硬化症(ALS).但是,SOD1的毒性机理尚未完全清楚.本文概述了SOD1、Cu分子伴侣(copper chaperonefor SOD1,CCS)的分子结构和CCS活化SOD1的机理,重点分析了突变体SOD1构象变化的原因及其在ALS中的可能致病机制的最新研究进展. 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶1(SOD1) 突变 聚集 肌萎缩性侧索硬化症
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男性不育症吸烟者精浆Zn、Cu、CuZn-SOD含量的研究 被引量:4
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作者 张金萍 孟庆余 +3 位作者 张雷家 毛贻龙 孙卓祥 陈颖 《中国行为医学科学》 CSCD 2000年第3期198-199,共2页
目的 探讨吸烟对男性不育症精浆微量元素 Zn、Cu与超氧化物歧化酶 (SOD)含量的影响及相关性。方法用电位溶出法和放射免疫分析法测定男性不育症 110例非吸烟者和 191例吸烟者精浆 Zn、Cu和 Cu Zn- SOD含量。结果吸烟组较非吸烟组精浆 Z... 目的 探讨吸烟对男性不育症精浆微量元素 Zn、Cu与超氧化物歧化酶 (SOD)含量的影响及相关性。方法用电位溶出法和放射免疫分析法测定男性不育症 110例非吸烟者和 191例吸烟者精浆 Zn、Cu和 Cu Zn- SOD含量。结果吸烟组较非吸烟组精浆 Zn、Cu、Cu Zn- SOD含量明显降低 (P <0 .0 0 1) ;少量吸烟或烟龄 1~ 10年者对精浆 Zn、Cu、Cu Zn- SOD含量无明显影响 ,中、大量吸烟或烟龄 10年以上者对精浆 Zn、Cu和 Cu Zn- SOD含量有明显影响 ;其含量与吸烟量呈负相关 (P <0 .0 0 1)。结论 吸烟对精浆 Zn、Cu、Cu Zn- SOD含量的影响存在着量效与时效关系 ,中、大量吸烟或烟龄长者可能对男性生育有不良影响。 展开更多
关键词 吸烟 男性不育 精浆 zn 超氧化物歧化酶
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饮食和运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌Cu/ZnSOD mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 王磊 江钟立 招少枫 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期388-392,共5页
目的:探讨饮食和运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞Cu/ZnSODmRNA表达及其血浆酶活性的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠24只采用高糖高脂饮食后腹腔注射小剂量链脲霉素,建立糖尿病模型,随机分为4组:糖尿病高脂饲料非运动组(DFN,n=6),糖尿病... 目的:探讨饮食和运动对糖尿病大鼠骨骼肌细胞Cu/ZnSODmRNA表达及其血浆酶活性的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠24只采用高糖高脂饮食后腹腔注射小剂量链脲霉素,建立糖尿病模型,随机分为4组:糖尿病高脂饲料非运动组(DFN,n=6),糖尿病常规饲料非运动组(DRN,n=6),糖尿病常规饲料低强度运动组(DRL,n=6),糖尿病常规饲料高强度运动组(DRH,n=6)。活动平板进行耐力训练8周,测定骨骼肌Cu/ZnSODmRNA和血浆Cu/ZnSOD活性的变化。结果:两运动组骨骼肌Cu/ZnSODmRNA表达显著高于DFN组和DRN组,两运动组之间无显著差异。两运动组血浆Cu/ZnSOD活性显著高于DFN组和DRN组,DRN组血浆Cu/ZnSOD活性显著高于DFN组。结论:饮食调整加运动训练可以促进糖尿病大鼠骨骼肌Cu/ZnSODmRNA表达,提高Cu/ZnSOD酶活性,而运动强度对此无显著影响。 展开更多
关键词 运动 饮食 2型糖尿病 铜锌超氧化物歧化酶 基因表达
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