广西莪术挥发油GC-MS指纹图谱研究

目的:探讨气相-质谱(GC—MS)联用技术在广西莪术挥发油质量控制方面应用的可行性,建立广西莪术挥发油的共有指纹图潜,方法:采用 GC—MS 方法对广西道地产区的10批次广西莪术样品进行比较分析,并采用国家药品监督管理局推荐的"中药色谱指纹图谱计算机相似性评价系统"进行模式分析及相似度计算。结果:广西莪术挥发油指纹图谱检测出20个共有特征峰,特征峰峰面积之和占总峰面积的93%以上,10批次样品具有较高的相似度(>90%);其精密度、稳定性、重复性均符合有关规定。结论:10批次广西莪术挥发油的指纹图谱中各成分均得到了较好分离,具有特征性和唯一性,因此本方法可作为广西莪术挥发油的质量控制方法。

广西莪术的叶、根茎和块根中挥发油GC-MS对比分析

目的:对广西莪术叶中挥发油成分进行系统的分析,并与其传统的用药部位块根和根茎的挥发油成分对比,寻找广西莪术叶作为代替性药材的可能性,尽可能的扩大广西莪术的药用部位,提高广西莪术整株植物的经济效益。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,运用GC/MS方法比较叶与根茎,块根的化学成分及其各成分的相对百分含量。结果:从广西莪术叶中分离得到38个色谱峰,鉴定出26种成分。结论:首次从广西莪术叶中鉴定出26种挥发性成分,叶中所含成分与根茎、块根的差别较大,但也含有部分抗肿瘤成分。

广西莪术SSR-PCR反应体系优化和引物筛选研究

以广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)嫩叶为材料,采用单因素和正交试验设计建立和优化SSR-PCR反应体系和反应程序,对最适宜退火温度(Tm)进行筛选优化,对17对已公布的姜黄属通用性引物进行扩增试验,筛选出多态性好、条带清晰的引物。结果表明,建立了适合广西莪术SSR分析的反应体系和扩增程序,即在15μL体系中,DNA模板为30 ng/μL,3μL,Mix(包含DNTP、Mg2+、1×buffer、Taq酶)为5μL,dd H2O为6μL,引物为各0.5μL时,分析效果较好,扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性30 s,根据不同引物的退火温度复性30 s,72℃延伸1.5 min,共35个循环;最后72℃延伸5 min;反应结束后,4℃保存。同时筛选出在试验材料中能产生较清晰主带的引物共12对,初步验证了应用SSR分子标记分析在广西莪术遗传多样性的可行性。

HPLC法测定姜黄、郁金、广西莪术中姜黄素的含量

目的 测定不同产地姜黄、郁金、广西莪术中姜黄素的含量。方法 采用超声提取法 ,色谱柱 Supelcosil TML C1 8柱 (5μm ,4 .6 m m× 2 5 0 mm ) ,流动相为甲醇 -异丙醇 - 0 .5 %醋酸溶液 (19∶ 2 5∶ 5 6 ) ,流速 0 .6 m L /m in,测定波长 4 2 0 nm,柱温 35℃。结果 姜黄素在 14～ 5 6 μg范围内线性关系良好 (r=0 .9995 ) ,平均回收率 99.82 % ,RSD为 1.5 7%。结论 本法准确、快速 ,为控制中药原料药姜黄、郁金。

利用SSR分子标记初步分析广西莪术种质资源的遗传多样性

利用简单重复序列分子标记技术对广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)种质资源进行了遗传多样性分析。结果表明,筛选出的14对引物在50份广西莪术种质资源中共扩增出78个条带,其中60条呈现多态性,多态性比率为76.92%,反映出广西莪术种质资源在分子水平上存在较大的差异;广西莪术不同种质资源间的差异主要由遗传因素决定,但也与环境因素有关。聚类结果将50份广西莪术种质资源分成2大类,揭示了它们之间的遗传差异,这为今后广西莪术优良品种的选育提供了依据。

广西莪术试管内诱导根状茎形成的研究

目的提纯复壮广西莪术种质资源,提高良种组培苗移栽成活率,方便组培苗生产的贮藏和管理。方法调节MS培养基中大量元素和蔗糖的量,使组培苗在试管内直接诱导广西莪术小根状茎的形成。结果培养基中大量元素和蔗糖的量是试管内直接诱导广西莪术小根状茎形成的重要影响因素。以1/2 MS和6%蔗糖结根状茎率最高,根状茎最粗,组培苗壮且根系发育良好,直接移栽的成活率最高。结论能够在试管内诱导广西莪术形成根状茎。

超临界流体萃取广西莪术挥发油中β-榄香烯

目的采用超临界流体萃取广西莪术挥发油中的β-榄香烯。方法采用正交试验设计对萃取条件进行了优化。结果确定了最佳萃取条件萃取压力为25MPa、萃取温度60℃、CO2流量8L/h、萃取时间90min;并用GC/MS测定了各试验条件下β-榄香烯。结论与水蒸汽蒸馏法相比较,超临界萃取法具有萃取率高、耗时少等优点。

广西莪术油抑制植物病原真菌活性的研究

广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)为姜科姜黄属植物.通过抑菌实验和电镜技术等方法测定研究了广西莪术油对6种植物病原真菌的抑制作用,结果表明:广西莪术油具有较强的抗真菌活性,对植物病原真菌孢子萌发和菌丝生长均有显著的抑制作用.最低抑制浓度(MIC)的莪术油6.25mL/L对植物病原真菌孢子萌发和菌丝生长均有显著的抑制作用.半抑制率IC50表明广西莪术油对松赤枯病菌的抑制作用最强,最弱的是小麦赤霉病菌.电镜下观察菌丝的横切面表明,处理菌丝的细胞壁消失,原生质解体.研究结果表明广西莪术具有开发为生物农药的潜力.

广西莪术挥发油的最佳提取工艺研究

目的:比较水蒸气蒸馏法和超临界CO2萃取技术从广西莪术中提取挥发油的收率,确定最佳提取工艺。方法:以莪术挥发油的收率为指标,先通过实验确定水蒸气蒸馏法中提取挥发油最大收率时的最佳条件,再采用正交试验法考察超临界CO2萃取实验装置中萃取压力、萃取温度和粉碎目数等工艺参数对萃取率的影响。结果:水蒸气蒸馏法中药材是否加水浸泡对提取挥发油的影响最大;而超临界CO2萃取的最佳条件为萃取压力25MPa,萃取温度55℃,粉碎度为60～80目。结论:超临界CO2萃取挥发油的收率高,提取工艺优于水蒸气蒸馏法,但有效成分含量高低,须进一步分析。

超高效合相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术快速分析广西莪术化学成分

采用超临界流体萃取(SFE)技术提取广西莪术根茎,应用超高效合相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPC2-QTOF-MS)分析其提取物,结合UNIFI软件的内置中药数据库和自建的姜黄属植物化学成分数据库筛查,快速分离鉴定广西莪术SFE提取物中的化学成分。本研究初步鉴定出广西莪术SFE提取物中47种化合物,其中42种是倍半萜类化合物。47种化合物中有8组同分异构体化合物,共37种化合物。UPC2采用Torus Diol 130色谱柱分离,流动相A为CO2,流动相B为甲醇/异丙醇(3∶1,V/V)+0.1%甲酸,进行梯度洗脱,在7min内实现了47种化合物的分离。本方法无需复杂的样品前处理过程,分析速度快、试剂用量少、成本低、环保,是一种全面高效的分析方法,为中药的化学成分分析提供了新方法。

广西莪术染色体的核型分析

[目的]对药用植物广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Leeet C.F.Liang)染色体核型进行研究。[方法]采用常规压片方法,并结合显微摄影对广西莪术染色体进行检测分析。[结果]广西莪术细胞染色体数为2n=84,核型公式K(2n)=84=70m+6M+4sm+4T,核型为"1B"型。[结论]广西莪术染色体的核型属于较原始的类型。

不同产地莪术挥发油气相色谱-质谱联用分析

目的:对三种不同产地温莪术、蓬莪术以及广西莪术挥发油的化学成分进行了GC-MS分析比较。方法:采用水蒸气蒸馏法提取三种不同产地的莪术挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术,对其中的化学成分进行分析鉴定。结果:初步鉴定了三种不同产地莪术挥发油中的主要成分,不同产地莪术挥发油成分有一定差异。结论:为莪术药材的质量评价提供依据。

广西莪术乙酸乙酯部位的抗血栓作用

目的探究广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)乙酸乙酯部位的抗血栓作用。方法建立角叉菜胶诱导小鼠尾血栓模型、大鼠动静脉旁路血栓模型、FeCl_3诱导大鼠体内血栓模型,观察该部位抗血栓形成的作用,ELISA法检测大鼠血清中ET-1、6-keto-PGF_(1α)、TXB2水平,硝酸还原酶法测定NO水平。再建立大鼠急性血瘀模型,观察该部位对血液流变学的影响。结果广西莪术乙酸乙酯部位可显著减少角叉菜胶诱导小鼠黑尾血栓数量和黑尾长度;大鼠动静脉旁路血栓模型、FeCl_3诱导体内血栓模型的血栓湿重显著降低,血清中NO、6-keto-PGF_(1α)水平增加,ET-1、TXB2水平降低;大鼠急性血瘀模型的全血黏度、血浆黏度显著降低。结论广西莪术乙酸乙酯部位具有显著的抗血栓形成作用,其机制可能与提高NO、6-keto-PGF_(1α)水平,减少ET-1、TXB2水平,降低全血黏度、血浆黏度有关。

电感耦合等离子体法测定桂郁金中的微量元素

以桂郁金为原料,经浓硝酸-双氧水(30%)处理后用微波消解样品,以电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定其中的Na、B、Mg、Al、P、Ca、Ti、Zn、Ba、Mn、Fe、K含量,Li、Be、Tl、Mo、Pb、Cd、Sr、V、Cr、Cu、Ni、Co等元素的含量则以电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定。方法的准确性用国家一级标准物质GBW-10015、GBW-10020对比分析证实。试验结果表明:桂郁金中富含Fe、Mn、Ti等微量元素,其中Fe含量最高为360μg/g,而Be、Cd、Mo、Tl、V含量较低,均低于1μg/g。该法快速简便、准确率高、精密度好,完全可以满足样品中元素含量测定要求。