NEW CYCLOARTANE SAPOGENIN AND ITS SAPONINS FROM CURCULIGO ORCHIOIDES

From rhizomes of Curculigo orchioideg(Xian Mao)six new cyclo- artane glycosides named curculigosaponin A～F were isolated.The new triterpenoidal sapogenin named curculigenin A,whlch is common to curculigo- saponin A～F,was formulated as 3β,11α,16β-trihydroxycycloartane-24-one by HR-MS and 2D-NMR technical analysis.On the basis of chemical evidence and spectral data,the structures of these saponins were elucidated.

基于重金属及有害元素对不同产地仙茅的质量评价

目的 对云南、贵州、四川等产地仙茅药材中的重金属及有害元素进行测定分析和评价,为仙茅药材中重金属及有害元素的质量标准研制提供科学依据。方法 采用微波消解法对样品进行前处理,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法对各产地样品的重金属及有害元素进行检测和分析。结果 不同产地仙茅药材中的重金属及有害元素含量存在一定的差异,以《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》(2004)为参照,砷、铅、汞、铜的含量均符合该项标准,7个产地镉的含量则高于0.3 mg/kg的标准。结论 实验研究建立的仙茅药材重金属及有害元素的检测方法具有快速、简便、准确等优点,不仅可用于仙茅药材质量评价,也可为其他种类中药材重金属及有害元素含量测定及评价提供参考。

仙茅酒蒸炮制工艺研究

目的:优选酒蒸仙茅最佳工艺。方法:采用正交试验设计法,以加酒量、闷润时间、蒸制时间为考察因素,以仙茅苷、苔黑酚龙胆二糖苷、苔黑酚葡萄糖苷及醇溶性浸出物含量为考察指标,优化仙茅酒蒸炮制工艺。结果:仙茅酒蒸最佳工艺为取生仙茅饮片适量,置密闭容器内,加入黄酒(每100 kg饮片加入黄酒20 kg)拌匀,闷润1 h,置锅中蒸制1 h,取出放凉,50℃干燥。结论:优化所得酒蒸仙茅炮制工艺稳定可行,仙茅酒蒸后有效成分的含量高于仙茅生品和酒炙品,酒蒸工艺优于传统酒炙工艺。

仙茅盐蒸炮制工艺优选

目的 采用正交试验设计法优选盐蒸仙茅最佳工艺。方法 采用正交试验设计法,以盐水比例、闷润时间、蒸制时间为考察因素,以仙茅苷、苔黑酚龙胆二糖苷、苔黑酚葡萄糖苷及醇溶性浸出物含量为考察指标,优化盐蒸仙茅炮制工艺。结果 仙茅盐蒸最佳工艺为取生仙茅饮片适量,置于密闭容器内,加入盐水(盐水比例1∶17.5,每100 kg仙茅饮片用2 kg食盐)拌匀,闷润1 h,置于锅中蒸制1 h,取出放凉,50℃干燥,即得。结论 优化所得盐蒸仙茅炮制工艺稳定可行,且仙茅盐蒸后有效成分的含量高于仙茅生品、传统酒炙品和盐炙品,盐蒸工艺优于盐炙工艺。

外源激素对仙茅未成熟种子愈伤组织诱导不定芽分化的影响

为缩短仙茅育苗周期,建立高频再生体系。以未成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,添加不同的激素浓度配比诱导产生愈伤组织,再用愈伤组织诱导出不定芽,摸索激素种类、浓度和配比对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,为仙茅无性繁殖体系的建立奠定基础。结果表明,仙茅未成熟种子的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,出愈率为74%;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,平均增殖系数达11.7。该研究可为仙茅组培快繁技术提供一种新方法和途径。

苔黑酚葡萄糖苷通过抑制糖皮质激素受体入核保护地塞米松诱导成骨细胞损伤作用

目的 考察苔黑酚葡萄糖苷对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导成骨细胞损伤的保护作用,并探讨其调控机制。方法 从新生小鼠颅盖骨提取并培养原代成骨细胞(osteoblast,OB),用DEX(1μmol·L^(-1))诱导成骨细胞损伤为模型。采用CCK-8法测定不同浓度苔黑酚葡萄糖苷及有无DEX干预下对成骨细胞增殖的影响;采用试剂盒进行成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性测定;采用茜素红S染色观察骨矿化结节的形成;采用Annexin V-FITC法检测细胞凋亡情况;采用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察细胞内糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的入核情况;采用Western blot法检测GR在细胞核、细胞质和全细胞中的蛋白表达,以及细胞中成骨特征蛋白CollagenⅠ、Runx2、Osterix(Osx)和Dlx5的表达。结果 与对照组相比,DEX组成骨细胞增殖、分化和矿化均明显降低(P<0.05、0.01),细胞凋亡明显升高(P<0.01);与模型组相比,苔黑酚葡萄糖苷组成骨细胞增殖、分化和矿化均明显升高(P<0.01),细胞凋亡明显降低(P<0.05)。与对照组相比,DEX组成骨细胞中GR在核内的表达明显升高(P<0.01),而GR在全细胞和细胞质中的表达明显降低(P<0.01),同时成骨特征蛋白表达也明显降低(P<0.01);与模型组相比,苔黑酚葡萄糖苷组GR在成骨细胞核内的表达明显降低(P<0.01),而GR在全细胞和细胞质中的表达明显升高(P<0.01),成骨特征蛋白的表达均明显升高(P<0.01),且呈剂量依赖关系。结论 苔黑酚葡萄糖苷能够改善DEX诱导的成骨细胞增殖、分化和矿化的抑制作用,并减少其凋亡,其作用机制与苔黑酚葡萄糖苷抑制GR入核,从而调控成骨相关蛋白表达有关。

仙茅苯甲酸酯类酚苷对去卵巢骨质疏松大鼠的作用(英文)

目的:评价仙茅苯甲酸酯类酚苷(benzylbenzoate glucosides from Curculigo orchioides,COBG)对去卵巢大鼠的抗骨质疏松作用。方法:70只3月龄的Sprague-Dawley大鼠被随机分为正常对照组和去卵巢组。再将去卵巢大鼠分为6组,连续12周分别灌胃给予蒸馏水,1mg/kg尼尔雌醇,6、18和54mg/kgCOBG,3.0g/kg仙茅乙醇提取物。用双能X线吸收仪测定骨密度,并制备胫骨切片进行骨形态计量分析,采用试剂盒测定血清和尿的生化指标。结果:去卵巢大鼠骨质流失和骨组织结构退化显著,其血清碱性磷酸酶活性升高,尿钙排出增加,血清抗氧化物水平降低(P<0.05,P<0.01)。6、18和54mg/kgCOBG使去卵巢大鼠骨密度显著增加,骨组织微结构得到改善,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的损耗减少,并抑制氧化产物丙二醛的增加,减少尿钙排出(P<0.05,P<0.01)。结论:COBG通过改善去卵巢大鼠的抗氧化状态防止骨丢失,COBG有可能成为防治绝经后骨质疏松的有效药物。

仙茅有效成分含量与土壤因子相关性研究

目的:探索影响仙茅有效成分含量的关键土壤因子。方法:以20个不同居群野生仙茅为材料,对根茎中的仙茅苷、总黄酮和总多酚含量及其11个土壤指标进行测定,应用聚类分析法、灰色关联度分析法和Pearson相关性方法分析影响仙茅有效成分含量的关键土壤因子。结果:不同居群间的仙茅有效成分和土壤因子含量存在显著差异。仙茅生长土壤中有机质、全氮、碱解氮和缓效钾含量丰度较高;全磷、全钾含量丰度中等;有效磷、速效钾含量丰度较低。聚类分析显示,20个不同居群野生仙茅的土壤聚为三大类。灰色关联度分析表明海拔、pH、速效钾、全钾、全磷和交换性钙是影响仙茅有效成分的土壤因子。相关性分析表明仙茅有效成分与全钾、海拔呈正相关,与全磷、有机质、交换性钙呈负相关。结论:生产实践中应重视生态因子和土壤环境对仙茅药材质量的影响,种植过程中可通过适当控制有机质、全磷和交换性钙的含量以及合理增施钾肥等措施促进仙茅有效成分的形成和积累,本研究为仙茅科学种植、品质提升和药用价值保护提供了理论依据。

仙茅的化学成分研究

从仙茅 (CurculigoorchioidesGaertn .)根茎的乙醇提取物中分离鉴定了 7个己知化合物 ,它们是 :curculigosideⅠ (1) ,orcinolglucoside(2 ) ,3,3′,5 ,5′ tetramethoxy 7,9′:7′ ,9 diepoxy lignan 4 ,4′ di O β D glucopyranoside (3) ,3 hydroxy 5 methyl phenol 1 O [β D glucopyranosyl (1→ 6 ) β D glucopyranoside](4) ,2 ,3,4 ,7 tetramethoxyxanthone(5 ) ,1,3,7 trimethylxanthine(6 ) ,daucosterol(7)。其中化合物 3～ 7均为首次从该植物中分离得到。

仙茅的酚苷和木脂素类成分的分离和鉴定

目的:分离鉴定仙茅Curculigo orchioides Gaertn.的酚苷和木脂素类成分。方法:利用硅胶和Sephadex LH-20凝胶柱层析,以及半制备HPLC方法分离化学成分,通过理化性质和光谱方法确定所分离化合物的结构。结果:仙茅乙醇提取物中得到5个酚苷类成分,1个木脂素类成分,1个甾醇类成分。经鉴定分别为2,6-二甲氧基苯甲酸(1)、仙茅苷(2)、仙茅苷乙(3)、仙茅素A(4)、2,4-二氯-5-羟基-3-甲基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、3,3′,5,5′-四甲氧基-7,9′:7′,9-二环氧木脂素-4,4′-二-O-β-D-葡萄糖苷(6)、β-谷甾醇(7)。结论:从仙茅乙醇提取物中分离出7个化合物,其中化合物(5)为一新的含氯酚类成分,命名为仙茅素D。

仙茅多糖对阿霉素致小鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨仙茅多糖(COP)对阿霉素(ADM)诱导小鼠中毒性心肌损伤的保护作用及其机制。方法选用ADM建立小鼠心肌损伤模型。测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)和一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、心肌SOD、MDA等生化指标,并观察心肌结构变化。结果 ADM可致血清CK、LDH、GOT和NOS活力升高(P<0.01),同时血清和心肌SOD活力下降而MDA含量升高(P<0.01)。COP能降低血清CK、LDH、GOT和NOS活力(P<0.05或P<0.01),增加心肌SOD活力和降低MDA含量(P<0.05或P<0.01)。光镜也证实了COP的保护作用。结论 COP对ADM引起的心肌损伤具有明显保护作用,其作用机制可能与抗自由基、抑制脂质过氧化作用有关。

仙茅多糖对氟尿嘧啶增效减毒作用

本文探讨了仙茅多糖(COP)对氟尿嘧啶的增效减毒作用。实验中建立小鼠S180实体瘤模型,连续给药10 d,测定小鼠瘤重,体质量、白细胞、红细胞、胸腺指数、脾脏指数以及小鼠脾脏中的超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。同时建立小鼠S180腹水瘤模型,连续给药30 d,记录小鼠存活天数,计算生命延长率。结果显示,仙茅多糖能改善氟尿嘧啶引起的小鼠白细胞减少、胸腺萎缩、脾脏肿大(P<0.05或P<0.01);但联用高剂量组使小鼠脾脏中SOD活力(P<0.01)降低,联用低、中剂量组使MDA含量增加(P<0.05)。COP和5-FU均延长荷瘤小鼠的生存期,(5-FU+COP)联合用药组生命延长率比5-FU单独用药组明显增高,且与联用的COP剂量呈量效关系。从而表明仙茅多糖对氟尿嘧啶具有一定的增效减毒作用,机制可能与其能调节机体免疫力有关,而与过氧化反应无关。

仙茅苷对自由基的清除作用

目的研究仙茅(Curculigo orchioidesGaertn.)主要成分仙茅苷(curcu ligoside)对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用。方法分别采用比色法及电子顺磁共振技术(ESR)测定仙茅苷对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除效果。结果仙茅苷对羟自由基和超氧阴离子自由基均有良好的清除作用,其清除率略低于茶多酚。结论仙茅苷对自由基具有明显的清除作用,是一种有效的天然抗氧化剂。

高效液相色谱法测定仙茅中仙茅苷的含量

目的 :建立中药材仙茅中仙茅苷含量的反相高效液相色谱法。方法 :甲醇为溶剂 ,超声提取 ,Sep PakC18柱净化 ,色谱柱IntertsillODS 3,流动相甲醇 水 冰醋酸 (4 5∶80∶1) ,流速 1.0mL·min-1,检测波长 2 83nm。结果 :平均回收率为 99.2 % ,RSD =1.7% (n =5 ) ,6个不同来源的仙茅药材中仙茅苷的含量在 0 .11%～ 0 .35 %。结论 :可作为仙茅药材的质量控制方法。

仙茅根茎DNA的提取及其ISSR-PCR反应体系的优化

为了改进仙茅基因组DNA的提取方法,从而为其遗传多样性研究提供参考依据,以仙茅根茎为材料,采用CTAB法探讨了仙茅根茎DNA大量提取中CTAB浓度、PVP用量及Na Cl浓度对其DNA质量的影响情况。结果表明,仙茅根茎DNA的大量提取方法的最优组合为:CTAB的浓度为2%,PVP的加入量为0.20 g,Na Cl的浓度为4 mol/L。为了得到仙茅的最佳ISSR-PCR反应体系,以(CT)8 RG为引物,采用单因素实验与正交实验相结合的方法,得到的最优反应体系(25μL)为:1×PCR Buffer,模板DNA浓度为50 ng,Mg2+浓度为2.50 mmol/L,d NTPs浓度为0.20 mmol/L,引物浓度为0.40μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为1.50 U。

仙茅属13个种群遗传多样性ISSR分析

为了解我国仙茅属植物种质资源分布情况及其亲缘关系,利用ISSR技术对来自湖南、广西、四川、云南、江西的13个种群的134份野生样本的遗传多样性进行了研究。利用筛选出的15条引物共扩增出256条清晰、重复性好的条带,多态性条带百分比达到91.79%;在种内水平上,多态性位点百分比为4.69%~29.30%,Shannon信息指数为0.028 3~0.160 5。13个种群中遗传多样性最高的为四川宜宾种群,多态性位点百分率为29.30%,Shannon多样性指数为0.160 5;云南9号种群遗传多样性最低,多态性位点百分率为4.69%,Shannon多样性指数为0.028 3。13个种群之间的遗传距离为0.187 1~0.513 1。根据遗传距离进行UPGMA聚类分析,13个种群共聚为2大类,四川宜宾与江西武功山种群最先聚在一起,二者的亲缘关系最近;广西雅长与四川盐边的种群聚在一起,说明二者亲缘关系较云南的较近。

大孔树脂富集、纯化仙茅总皂苷

目的研究大孔树脂富集、纯化仙茅总皂苷的工艺条件及参数。方法以仙茅总皂苷的洗脱率为指标,考察大孔树脂富集、纯化仙茅总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果仙茅提取液17.1ml(2.48mg.ml-1)上大孔树脂柱(15mm×90mm,干重2.54g),用蒸馏水100ml、50%乙醇50ml依次洗脱,仙茅总皂苷富集于50%乙醇洗脱液部分,且除杂质能力强。结论通过大孔树脂富集与纯化后,仙茅总皂苷洗脱率在96%以上。所用方法可较好地纯化仙茅总皂苷。

仙茅补肾壮阳有效成分的初步研究及仙茅素A的含量测定

目的初步研究仙茅补肾壮阳的有效成分,并测定其有效成分仙茅素A的含量。方法采用大孔吸附树脂及反复常压硅胶柱层析分离纯化仙茅乙醇提取物,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定;采用HPLC法测定药材中仙茅素A的含量,色谱柱为Agilent C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-1%磷酸(21:79),流速1.0 ml.min-1,检测波长285 nm。结果从仙茅中分得4个已知化合物,分别为仙茅苷、仙茅苷乙、仙茅素A及2,6-二甲氧基苯甲酸;仙茅素A的含量为0.0084%。结论所用方法简便、可靠,可用于仙茅药材的质量控制。

高效液相色谱法测定金骨颗粒剂中仙茅苷的含量

目的 :高效液相色谱法测定金骨颗粒剂中仙茅苷的含量。方法 :本品以甲醇提取 ,提取物加水溶解后用醋酸乙酯萃取 ,萃取液进行高效液相色谱法分析。色谱柱AlltimaC1 8(5 μm ,4 6mm× 2 5 0mm) ,流动相为甲醇 -异丙醇 -水 (2 0∶5∶75 ) ,流速 :0 8mL·min- 1 ;柱温 :30℃ ;检测波长 :2 83nm。结果 :加样平均回收率为 98 6 8% ,RSD为 2 1% (n =5 )。结论 :实验结果表明 ,该法灵敏度高、专属性好、操作简便、重现性好。

仙茅的药理作用研究进展

仙茅是石蒜科多年生草本植物,富含多糖、皂苷、酚类、酚苷、萜类等多种重要的生物活性物质,在多个国家已被药用,《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)亦有收录。中药药理学提示仙茅具有行血消肿、补肾助阳、强筋骨、益精血等功效,用于肾阳不足、腰脊冷痛、寒虚崩漏、带下、疮疡肿痛、肾虚内伤、筋骨疼痛等临床病症。现代药理研究证实,仙茅具有抗炎、抗氧化、抗骨质疏松、抗抑郁、免疫调节、保护血管内皮细胞等疗效,对心血管、骨质疏松、糖尿病、风湿等相关疾病的治疗具有重要意义。本文针对仙茅的现代药理作用及毒副作用进行综述,旨在为仙茅的临床运用提供研究基础。