Research Progress and Prospects on the Anti-liver Fibrosis,Blood Circulation-promoting and Stasis-resolving Effects of Curcuma kwangsiensis Based on W-P Bodies

Liver fibrosis is a necessary stage in the progression of chronic liver disease to cirrhosis.So far,no satisfactory drugs have been found to intervene in liver fibrosis.Liver microcirculation disorders are one of the important pathogenesis of chronic liver disease,and hepatic sinusoidal endothelial cells(HSECs)are the main cells that constitute the liver microcirculation barrier.In clinical practice,W-P bodies have been detected in HSECs of most patients with liver fibrosis.W-P bodies serve as a site for the synthesis and storage of vW factors,ET-1 and other cytokines that promote liver fibrosis.They can disrupt the structure and function of HSECs,cause liver microcirculation disorders,and exacerbate the progression of liver fibrosis.Previous studies have found that the Guangxi specialty ethnic medicine,C.kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang,has definite effects in promoting blood circulation,resolving blood stasis,and resisting liver fibrosis.Based on this,a further research idea has been derived,stating that the blood circulation-promoting,blood stasis-resolving,and anti-liver fibrosis effects of C.kwangsiensis are produced by affecting the formation of W-P bodies,the synthesis and storage of contents in W-P bodies,and intervening in their exocytosis capacity.

广西莪术和蓬莪术中药超分子“印迹模板”特征研究

目的基于中药超分子“气析”理论结合化学计量学对广西莪术和蓬莪术挥发油成分“印迹模板”的特征进行分析和研究。方法采用水蒸气蒸馏法提取广西莪术和蓬莪术挥发油,并用气质联用法建立其指纹图谱。应用总量统计矩法对2种莪术“印迹模板”的印迹性进行对比;计算各批莪术挥发油的物芯指数(CI),结合化学计量学对2种莪术“印迹模板”的拓扑结构特征进行对比。结果广西莪术和蓬莪术的挥发油提取率无明显差异;两者的总量零阶矩分别为(1.907±0.177)×10^(8)、(1.979±0.413)×10^(8)μV·s,表明两者挥发油成分总含量无明显差异;总量一阶矩分别为(30.969±0.962)、(33.198±0.409)min,总量二阶矩分别为(56.176±11.368)、(43.891±4.113)min^(2),表明两者挥发油成分含量配比及种类有显著差异;2种莪术总量统计矩相似度大多低于界定值,表明两者挥发油的整体化学成分与其构成比存在差异性;主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析可明显将广西莪术和蓬莪术分为两类;通过P值与变量重要性投影值分析,确定广西莪术和蓬莪术的Xvp四阶、Xvpc五阶、Xvpc六阶、Xvpc七阶、Xvc三阶、Xvpc四阶6个阶数的CI值为主要差异性数值。结论通过对中药超分子“印迹模板”进行“印迹性”及“拓扑特征”的表征并结合化学计量学分析可成功区分广西莪术和蓬莪术,并找到2种莪术“印迹模板”差异性的CI值。

桂郁金醇提物对脂多糖致小鼠肺损伤的保护作用研究

[目的]研究桂郁金醇提物对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。[方法]将54只雄性昆明小鼠随机分成6组:空白组、模型组、地塞米松阳性对照组及桂郁金醇提物低(2 g/kg)、中(4 g/kg)、高(40 g/kg)剂量组,每组9只。给药组小鼠分别灌胃给予地塞米松(5 mg/kg)或相应浓度桂郁金醇提物混悬液(0.2 mL/10 g),空白组和模型组小鼠灌胃给予相应体积的0.5%羧甲基维生素钠(CMC-Na),连续灌胃5 d。末次给药1 h后,除空白组外,其余各组小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS,12 h后麻醉并处死小鼠,剖取肺脏组织。试验中观察造模前后小鼠一般情况变化,统计小鼠体重变化、肺脏指数,测定肺脏重湿/干比。通过HE染色观察小鼠肺脏组织病理学变化并进行肺损伤评分;利用实时荧光定量PCR检测肺脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、髓样分化因子88(MyD88)、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)mRNA表达水平。[结果]与空白组相比,模型组小鼠体重增长率极显著下降(P<0.01),肺脏指数、肺脏重湿/干比和肺损伤总评分均极显著升高(P<0.01),肺脏组织相关炎症因子mRNA相对表达量均显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01),成功构建ALI小鼠模型。与模型组相比,桂郁金醇提物各剂量组小鼠体重增长率显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);桂郁金醇提物中、高剂量组小鼠肺脏指数、肺脏重湿/干比均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);桂郁金醇提物高剂量组小鼠肺损伤总评分和肺脏组织中TNF-α、IL-6基因mRNA表达量显著降低(P<0.05);桂郁金醇提物中剂量组小鼠肺脏组织中NF-κB基因mRNA表达量显著降低(P<0.05)。[结论]桂郁金醇提物对LPS诱导的小鼠ALI具有保护作用,其作用机制可能与桂郁金醇提物减轻TLR4/MyD88/NF-κB信号通路介导的炎症损伤有关。

不同温度和化学试剂对广西莪术种子萌发及幼苗生长的影响

研究不同温度和化学试剂对广西莪术种子萌发和幼苗生长的影响,为广西莪术实生苗繁育提供科学依据。以广西莪术种子为材料,设置不同温度条件,用不同浓度的赤霉素(GA_(3))、生长素(IAA)、水杨酸(SA)、褪黑素(MT)、脱落酸(ABA)浸种处理后进行发芽试验,测定发芽率、发芽势、发芽指数、胚根长、胚芽长及幼苗鲜重,分析不同温度和化学试剂对广西莪术种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,广西莪术种子萌发适宜温度为20~30℃,其中25℃是广西莪术种子萌发最佳温度,播种后第5天开始发芽,发芽率为28%;50、100mg/L GA和50 mg/L IAA能显著促进种子萌发和幼苗生长,发芽率提高至32%~33%,其他试剂(浓度)处理没有促进反而抑制广西莪术种子萌发和幼苗生长。研究结果可为广西莪术繁殖育苗提供技术支持。

广西莪术全长转录组测序及生物信息学分析

目的:获取广西莪术的全长转录组信息,了解其转录组的整体水平,挖掘姜黄素类生物合成通路基因。方法:利用Pacbio Sequel测序平台对广西莪术根、茎、叶、花4个部位的混合样品进行全长转录组测序,结合生物信息学等方法进行功能注释、代谢通路分析、简单序列重复(SSR)分析。结果:共获得原始数据14.47 Gb,经纠错、过滤、去冗余得到高质量一致性序列151218条。对所有转录本在非冗余蛋白(NR)、核苷酸序列(NT)、基因本体(GO)、真核生物相邻类的聚簇(KOG)、蛋白家族(Pfam)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)和SwissProt七大功能数据库进行注释及分类,结果有128414个基因被注释,占比84.92%。共有325个基因参与姜黄素的生物合成,编码4-香豆酸-辅酶A连接酶、苯丙氨酸解氨酶、姜黄素合成酶、二酮-辅酶A合成酶、肉桂酸-4-羟化酶和咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶6个关键酶。MISA分析共发现32459个SSR位点,以单核苷酸重复数量最多,占全部重复类型的38.63%;1~3个核苷酸重复序列占主导位置,占总SSR位点的93.58%。结论:在高通量全长转录组水平对广西莪术进行研究,对姜黄素合成相关基因进行了挖掘,为后续阐明广西莪术姜黄素生物合成分子机制提供依据,为进一步研究广西莪术的分子标记和优良基因挖掘提供数据基础。

广西莪术成分、药效、分析和临床应用进展

广西莪术(Curcuma kwangsiensis)是广西道地药材之一,有行气破血、消积止痛的功效,其药用历史悠久、临床应用广泛,可用于治疗肿瘤、血栓、消化不良和闭经等多种疾病。本文从化学成分、药理作用、质量分析方法和临床应用4个方面对广西莪术现有研究进行归纳和阐述,旨在为广西莪术的深入开发及推广应用提供参考。

中药莪术GC-MS指纹图谱研究

目的研究中药莪术的GC-MS指纹图谱。方法运用GC-MS分析3种基原的18个莪术样品,所得TIC图谱采用“中药色谱指纹图谱计算机相似性评价系统”软件进行模式分析及相似度计算。通过质谱数据与文献对照检识出主要特征峰成分,并根据主要特征成分对18个样品进行SPSS聚类分析。结果3种基原18个莪术样品的相似度(全谱)计算结果较低;通过聚类分析结果可将莪术分为两类,温郁金和蓬莪术各为一类,广西莪术样品则无法成类。因此基于聚类分析结果,建立了温郁金和蓬莪术的指纹图谱共有模式,并分别具有较高的相似度,而广西莪术6个样品因成分差异较大,暂未建立指纹图谱共有模式。结论共有指纹图谱是多基原中药质量控制的基础,但多基原中药莪术GC-MS指纹图谱无法建立,提示不同基原莪术化学成分差异与药理作用的关系值得研究。

桂郁金化学成分研究Ⅰ

目的研究中药桂郁金的化学成分。方法通过大孔树脂、反复硅胶柱色谱、ODS柱色谱和重结晶的方法进行分离纯化,通过化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果分离得到7个化合物,分别为zedoarolide B（Ⅰ）,zedoarondiol（Ⅱ）,zedoalactone A（Ⅲ）,alismoxide（Ⅳ）,isozedoarondiol（Ⅴ）,curcumenol（Ⅵ）和β-谷甾醇（Ⅶ）。结论化合物Ⅰ-Ⅵ均为首次从本植物中分离得到。

4种姜黄属药材挥发油中莪术醇含量比较

目的 建立准确测定姜黄属 4种中药材挥发油中莪术醇含量。方法 以高效毛细管柱程序升温气相色谱法测定莪术醇的含量。结果 本法能准确地测定莪术醇的含量 ,回收率为 10 1.4 % ,RSD为 0 .4 % ,还测定了 4种姜黄属药材 (温郁金 ,姜黄 ,桂莪术 ,蓬莪术 )中莪术醇的含量 ,发现 4种药材中莪术醇的含量差异显著。结论 为姜黄属药材质量的分析控制提供可行的含量测定方法。

广西莪术多糖水提工艺优化及不同产地多糖含量测定

为了优化广西莪术多糖(Curcuma kwangsiensis polysaccharide,CKP)的水提工艺条件,以CKP含量为评价指标,采用正交试验考察料水质量比、提取温度、提取时间3个因素对CKP含量的影响并获得各条件的最佳组合。以6个产地CKP含量为考察指标,采用优化的水提工艺条件提取CKP,用H2O2水浴脱色,用Sevage法除蛋白质,用苯酚-硫酸比色法在490 nm波长下测定CKP含量。结果表明,最佳的水提工艺条件为料水质量比1∶5、在70℃下水提1.5 h,在此条件下,CKP平均含量为0.073 mg/g。6个不同产地CKP含量的差异较大,上思县思阳镇的CKP含量最高,为0.073 mg/g,横县南乡镇的CKP含量最低,为0.031 mg/g。正交试验优选的CKP水提工艺条件是科学可行的,广西境内不同产地的CKP含量存在差异,可为广西莪术的资源利用和质量控制提供理论依据。

桂郁金多糖抗凝血及纤溶活性研究

目的研究桂郁金多糖体内抗凝血作用和含药血清体外纤溶活性。方法小鼠连续3 d灌胃给予高、中、低剂量桂郁金多糖,分别检测全凝血时间(CT)、凝血因子Ⅱ(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和凝血因子Ⅰ(Fbg),并将含药血清用纤维蛋白平板法进行体外纤溶试验。结果桂郁金多糖能明显延长CT、APTT和TT(P<0.05),对PT和Fbg无明显影响;含药血清体外无纤溶活性。结论桂郁金多糖具有显著的体内抗凝血活性,该药通过内源性凝血途径和共同凝血途径发挥抗凝血作用。

广西莪术化学成分的分离与鉴定

目的对姜科植物广西莪术（Curcuma kwangsiensis S．G．LeeetC．F．Ling）的根茎化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱、SephadexLH-20柱色谱以及HPLC进行分离和纯化，并依据理化性质和波谱数据鉴定其化学结构。结果从广西莪术根茎的体积分数为95％的乙醇溶液提取物中分离得到6个化合物，分别鉴定为蓬莪术环二烯（furanodiene，1）、吉马酮（germa-crone，2）、蓬莪术环二烯酮（furanodienone，3）、蓬莪术环氧酮（zederone，4）、对羟基苯甲酸（4-hydroxybenzoicacid，5）、对羟基桂皮酸（p-hydroxycirmamicacid，6）。结论化合物1、3～6为首次从该植物中分离得到。

温度调控对南岭莪术根茎开花与花芽分化的影响

【目的】研究在贮藏、催芽及水养阶段温度调控对南岭莪术根茎休眠、花芽分化、开花及品质的影响,为南岭莪术生产开发,尤其是作为年宵花卉早春促成栽培提供指导。【方法】设置南岭莪术根茎贮藏、催芽阶段温度与时间的组合处理,测量品质指标,并对不同发育阶段花芽分化过程进行外观和解剖形态学观察。【结果】15℃贮藏30 d是南岭莪术根茎完成休眠的最短时间,贮藏时间超过60 d,开花率略有下降;根茎贮藏处理后,再经25—30℃催芽10—30 d可诱导花芽分化,并极显著地缩短了根茎定植到开花和展叶的时间;尤其是15℃贮藏50 d再经过30℃催芽30 d的根茎开花率高达92%,且花期可控制在春节。芽体发育到阶段1的南岭莪术根茎常温水培不能开花,此时为花芽分化起始期;发育到阶段2和阶段3的根茎分别进入花序原基及苞叶原基分化期和花蕾原基分化期,常温水培开花率分别为50%和66%;阶段4的根茎进入花器官分化期,花芽分化不可逆转,在常温水养开花率为100%。【结论】南岭莪术根茎贮藏可缩短休眠时间,高温诱导花芽分化,30℃培养至第4阶段进行市场交易,可成为高品质早春开花的水培花卉。

不同品系桂郁金药材性状、挥发油含量及成分分析

目的对3种不同品系桂郁金药材性状、挥发油含量及挥发油成分分析。方法观察测量3种不同品系桂郁金药材性状,水蒸气蒸馏法提取挥发油,运用GC-MS方法比较3种不同品系桂郁金挥发油各成分相对百分含量。结果不同品系桂郁金外形为纺锤形、卵圆形、类球形,断面颜色为白色,横切宽为2 cm左右,纵切面长为3.5～9.8 cm,挥发油得油率为0.07%～0.15%。从A10中鉴定了10个成分,占挥发油总含量的86.12%;从A18中鉴定了11个成分,占挥发油总含量的79.15%;广成中鉴定了18个成分,占挥发油总含量的62.74%,3个不同品系桂郁金共有的成分有6个。结论 3种不同品系桂郁金不仅药材性状存在一定差异,挥发油含量、挥发油成分也存在一定的差异,本研究可为进行分子水平种质研究提供前期基础,为进一步筛选优良桂郁金提供科学依据。

广西莪术叶与根茎、块根挥发油的比较研究

目的对广西莪术叶中挥发油成分进行系统的分析,并与其传统的用药部位块根和根茎的挥发油成分对比,寻找广西莪术叶作为代替性药材的可能性,尽可能的扩大广西莪术的药用部位。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,运用GC/MS方法比较叶与根茎,块根的化学成分及其各成分的相对百分含量。结果从广西莪术叶中分离得到38个色谱峰,鉴定出24个成分,三者有10个共有成分。结论莪术叶挥发性成分与根茎、块根的差别很大,但仍有许多活性成分,如桉精油,有一定的药用价值。

桂郁金石油醚和醋酸乙酯部位化学成分的研究

目的对桂郁金的石油醚和醋酸乙酯部位进行化学成分研究。方法用硅胶柱层析和制备HPLC分离桂郁金石油醚和醋酸乙酯部位的化学成分,用现代波谱技术鉴定化学成分的结构。结果从桂郁金的石油醚部位分离得到3个化合物,分别是ComosoneⅡ(1),5,10-双甲基-2-甲氧基-7-甲基-1,4-蒽二酮(2)和Curcuzedoalide(3);从醋酸乙酯部位分离得到2个化合物,分别是邻苯二甲酸二丁酯(4)和β-谷甾醇(5)。结论有4个化合物为首次从该植物中分得。

三种姜黄属花卉根茎贮藏对开花的影响

研究了贮藏温度和时间对广西莪术、南岭莪术、所罗门姜黄3种姜黄属根茎水养期间开花率、花枝寿命等指标的影响。结果表明:广西莪术根茎在15℃下贮藏60d,南岭莪术根茎在15℃下贮藏30d以上,所罗门姜黄根茎在15℃下贮藏0～60d,均可提高开花率。3种姜黄属花卉在常温下贮藏均诱导叶芽分化,开花率均较低。

广东产广西莪术鲜、干品挥发油的含量测定及其GC-MS分析

目的测定广西莪术鲜、干品挥发油的质量分数并对其化学成分进行分析。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,通过GS-MS法对挥发油的成分进行分析,并用归一化法测定其相对质量分数。结果广东清远和广州产的广西莪术鲜品挥发油得率分别为1.72%和1.86%;而干品挥发油得率分别为1.22%和1.42%。在广西莪术鲜品挥发油中鉴定出约38个成分;而在广西莪术干品挥发油中鉴定出约32个成分。结论广西莪术挥发油鲜品得率高于干品,其化学成分组成及其相对质量分数均存在差异。

姜黄及其3种近源品种的姜黄素类成分薄层色谱鉴别及HPLC特征图谱分析

目的:鉴别分析姜黄及其3种近源品种(蓬莪术、温莪术、广西莪术)的姜黄素类成分。方法:以姜黄对照药材,姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对照品为对照进行薄层色谱鉴别;以姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对照品为对照物质,采用HPLC对10批姜黄进行特征图谱研究,建立HPLC特征图谱共有模式,进行相似度比较,并将姜黄与3种近源品种进行相似度比对。色谱条件:采用月旭AQ-C18(200mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1mL·min-1,检测波长270nm,柱温30℃。结果:供试品色谱中,姜黄与3种莪术的斑点位置、颜色、数量有明显差别;建立了姜黄的HPLC特征图谱,确定了7个共有峰,10批姜黄药材样品的平均相似度在0.97,姜黄与3种近源品种的相似度均低于0.8,特征图谱差异明显。结论:姜黄及其3种近源品种的薄层色谱及HPLC特征图谱差异明显,且方法简便、准确、专属性强,可作为姜黄及其3种近源品种的鉴别,同时也为姜黄对照药材标定技术标准的建立提供了科学依据。

广西莪术叶斑病病原鉴定及生物学特性研究

目的：明确广西莪术叶斑病病原菌种类，掌握其生物学特性。方法：依据柯赫氏法则进行致病性测定和病原菌验证，通过形态学特征观察、rDNA—ITS序列分析来确定病原菌；设置不同的培养基、温度、PH值、湿度，观测菌丝生长及孢子萌发，进行生物学特性研究。结果：病原菌为大豆拟茎点种腐病菌（Phomopsis longicolla）；菌株在PDA培养基生长良好，加了莪术汁的PDA培养基更利于生长及产孢，温度20～30℃、PH值5～6条件下适宜菌丝生长及孢子萌发，RH为80％时孢子萌发率最高、。结论：广西莪术叶斑病病原菌鉴定为Phomopsis longicolla；中温、潮湿、偏弱酸性环境条件适宜该菌生长。