4种姜黄属药材挥发油中莪术醇含量比较

目的 建立准确测定姜黄属 4种中药材挥发油中莪术醇含量。方法 以高效毛细管柱程序升温气相色谱法测定莪术醇的含量。结果 本法能准确地测定莪术醇的含量 ,回收率为 10 1.4 % ,RSD为 0 .4 % ,还测定了 4种姜黄属药材 (温郁金 ,姜黄 ,桂莪术 ,蓬莪术 )中莪术醇的含量 ,发现 4种药材中莪术醇的含量差异显著。结论 为姜黄属药材质量的分析控制提供可行的含量测定方法。

温莪术挥发性成分的闪蒸-气相色谱-质谱法测定研究

采用闪蒸-气相色谱-质谱法(FE-GC-MS)对温莪术挥发性化合物进行了分析研究,并对主要影响因素如闪蒸温度、样品量和样品粒度等进行优化。结果显示,0.4 mg的粉末样品,在200℃下闪蒸,经色谱分离后得到60余种成分。对FE-GC-MS、水蒸气蒸馏法(SD)-GC-MS和固相微萃取(SPME)-GC-MS这3种方法进行比较,利用质谱解析结合保留指数鉴定出的化合物数量分别为40、38和36种。由FE-GC-MS得到的莪术油主要活性成分如莪术烯、莪术醇、β-榄香烯酮、吉马酮和莪术二酮的含量与SD、SPME法所得结果相近。结果表明,闪蒸法样品用量少而得到的挥发性成分较多,且无需任何前处理。

不同产地温郁金遗传多样性的SRAP分析

目的:构建不同产地温郁金的DNA指纹图谱,探讨利用SRAP技术在温郁金亲缘关系研究中的可行性。方法:采用SRAP分子标记对不同产地温郁金样品进行基因组DNA多态性分析。结果:筛选出5对引物组合,构建了不同产地温郁金的SRAP指纹图谱,聚类结果表明,不同产地温郁金的遗传差异不明显。结论:SRAP技术可以为温郁金品种的保护与利用提供一定的理论依据。

温郁金的石灰土栽培及其营养元素动态变化初步研究

为探索原产浙江温州地区的药用植物温郁金是否能在石灰土上生长,通过盆栽试验对比研究了温郁金在石灰土和红壤上生长及其生长过程中N、P、K、Ca、Mg、Fe 6种元素含量的动态变化。结果表明:温郁金不但可以在石灰土上生长,而且其药用部位(莪术之一)的产量、莪术油的含量及莪术油中主要药用组分β-榄香稀等的含量都较大;石灰土上生长的温郁金在生长前期较快地表现出老叶明显发黄的缺肥症状,而红壤植株在追加N、P、K 3种大量元素后功能叶子呈现黄白色,且夹带有褐色斑点的缺肥症状;石灰土中Fe元素有效态含量比红壤低一个数量级,但在石灰土上种植的温郁金植株其Fe元素含量并不比红壤上的低。由此认为:(1)温郁金基本可以在石灰土上引种栽培;石灰土种植温郁金对施加化肥诱发的土壤元素缺乏具有较强的抵抗性;(2)温郁金元素的吸收受地质背景制约。

川芎、高良姜等挥发油的水蒸汽蒸馏法和超临界流体萃取法比较研究

目的 :确定川芎、高良姜、片姜黄和羌活的挥发油提取最佳条件。方法 :用水蒸汽蒸馏法和超临界流体萃取的方法提取挥发油。结果 :(1)水蒸汽蒸馏法提取挥发油的最佳条件确定为 :川芎 :浸泡时间 12h ,粉末粒度细 ,提取时间 3h ,加水比 1∶10 ;高良姜 :浸泡时间 0h ,粉末粒度粗 ,提取时间 3h ,加水比 1∶10 ;片姜黄 :浸泡时间 2 4h ,粉末粒度中 ,提取时间1.5h ,加水比 1∶5 ;羌活 :浸泡时间 0h ,粉末粒度粗 ,提取时间 3h ,加水比 1∶10。 (2 )超临界流体萃取法提取挥发油的最佳条件确定为 :川芎 :温度为 6 0℃ ,粉末粒度细 ,压力 2 5MPa ,提取时间 1.5h ;高良姜 :温度为 6 0℃ ,粉末粒度中 ,压力2 5MPa ,提取时间 0 .5h ;片姜黄 :温度为 6 0℃ ,粉末粒度细 ,压力 2 0MPa ,时间 1h ;羌活 :温度为 6 0℃ ,粉末粒度细 ,压力2 5MPa ,提取时间 1h。结论 :超临界流体萃取法要优于水蒸汽蒸馏法。

揽香烯乳治疗晚期恶性肿瘤的Ⅱ期临床试用结果

对299例晚期恶性胸腔积液、腹腔积液、浅表肿瘤及子宫颈癌患者用揽香烯乳进行了国内多中心前瞻性Ⅱ期临床研究。治疗恶性胸腔积液按200mg/m^2,腹腔积液按400mg/m^2,注射1～2次/周。治疗局部浅表病灶包括皮肤结节及子宫颈癌,则采用局部注射,25～50mg/次,1次/d,连用5～10d。结果表明,该制剂对恶性胸腔积液的疗效为74.8％,对恶性腹腔积液的疗效为75.0％;接受局部注射的患者,有效率为63.5％。本品无骨髓毒性,但有可被大多数患者耐受的胃肠道反应、发热和局部疼痛。

石油醚提取过50目和过325目筛温莪术粉挥发油收率比较

目的探讨并比较石油醚回流提取温莪术粗粉和微纳米粉体挥发油的最佳工艺。方法将温莪术粉碎为过50目筛的粗粉与过325目筛的微粉，采用L18（2^1×3^7）表之正交实验设计，以温莪术挥发油的提油率为考察指标，以粉碎度、提取时间、加石油醚质量倍数及提取次数为工艺考察对象。结果以温莪术的挥发油提取率为考察指标，由直观分析可知各因素对提取的影响作用大小依次为提取次数〉加石油醚质量倍数〉提取时间〉粉碎度。方差分析结果表明，在石油醚回流提取温莪术挥发油的工艺中，提取次数和加石油醚的质量倍数对提油率有高度显著影响，提取时间和粉碎度有显著影响。提油率为：2．09％～3．62％，以过325目筛温莪术粉体，加20倍量石油醚，回流2h，提取3次的提油率最高，提油率为3．62％。结论该法的最佳工艺为：过325目筛温莪术微纳米粉体，加加倍质量倍数的石油醚，回流2h，提取3次。

温郁金的研究进展

通过对近年来有关温郁金研究的文献检索,总结了温郁金的采收加工、主要化学成分及药理活性的研究进展。表明温郁金具有多种活性成分和广泛的药理作用,应用前景广阔。

温郁金化学成分研究进展

综述了温郁金化学成分研究,并对其今后研究开发的方向作了初步探讨。

HPLC法测定姜黄、郁金、广西莪术中姜黄素的含量

目的 测定不同产地姜黄、郁金、广西莪术中姜黄素的含量。方法 采用超声提取法 ,色谱柱 Supelcosil TML C1 8柱 (5μm ,4 .6 m m× 2 5 0 mm ) ,流动相为甲醇 -异丙醇 - 0 .5 %醋酸溶液 (19∶ 2 5∶ 5 6 ) ,流速 0 .6 m L /m in,测定波长 4 2 0 nm,柱温 35℃。结果 姜黄素在 14～ 5 6 μg范围内线性关系良好 (r=0 .9995 ) ,平均回收率 99.82 % ,RSD为 1.5 7%。结论 本法准确、快速 ,为控制中药原料药姜黄、郁金。

8种生物农药对温郁金叶枯病病原菌的室内毒力测定

为了筛选出有效防治温郁金弯孢霉叶枯病的药剂,采用菌丝生长速率法测定8种生物农药对温郁金弯孢霉叶枯病病原菌(Curvularia clavata)的抑菌效果。8种生物农药对温郁金叶枯病病原菌抑菌效果好的为0.5%氨基寡糖素AS、3%中生菌WP、荧光假单胞杆菌WP和枯草芽孢杆菌WP。毒力最强为荧光假单胞杆菌WP,EC50值为0.93 mg/L;其次为哈茨木霉菌WP、枯草芽孢杆菌WP、0.5%氨基寡糖素AS和3%中生菌素WP,EC50分别为1.30、3.27、6.14、8.42 mg/L。荧光假单胞杆菌、0.5%氨基寡糖素AS、枯草芽孢杆菌和3%中生菌素WP均可有效抑制温郁金叶枯病病原菌的生长,可进一步用于田间试验。

水蒸气蒸馏提取过50目筛与过325目筛温莪术挥发油收率比较

目的探讨并比较水蒸气蒸馏提取温莪术粗粉和微纳米粉体挥发油的最佳工艺。方法将温莪术制成过50目筛粗粉与过325目筛微粉,采用L18（2^1×3^7）表之正交实验设计,以温莪术挥发油的提油率为考察指标,以粉碎度、蒸馏时间、加水质量倍数及浸泡时间为工艺考察对象。结果以温莪术挥发油的提油率为考察指标,由直观分析可知各因素对提取的影响作用大小依次为蒸馏时间〉药材粉碎度〉加水质量倍数〉浸泡时间。方差分析结果表明：在本工艺中,药材粉碎度、蒸馏时间和加水质量倍数对提油率有高度显著影响,而浸泡时间对提油率无显著影响。过50目筛提油率为1.25%-1.90%,过325目筛提油率为1.02%-1.65%;以过50目筛温莪术粉,加8倍水,蒸馏12 h的工艺路线,莪术的挥发油收率最高。结论水蒸气蒸馏法提取莪术中的挥发油,不必将莪术微纳米化,只要粗粉即可。而浸泡时间,由于其对挥发油的提取无明显影响,故在确定提取工艺时可以不予考虑。该方法的最佳工艺为：过50目筛温莪术粉,加8倍量的水,蒸馏12 h。

超临界CO_2萃取温莪术粉体挥发油收率的比较

目的比较过50与过325目筛温莪术的粉体采用CO2超临界萃取法提取的挥发油收率。方法温莪术洗净、切片,50℃烘干,于-30℃低温下用HFM-6超微粉碎振动磨,过50目筛与325目筛;生物显微镜观察其细胞壁破碎情况;JL-1178干法激光粒度仪检测其粒径;HA121-50-01超临界萃取装置实施超临界CO2萃取挥发油。结果过50目筛后的温莪术平均粒径为90.65μm,细胞壁未破,过325目筛的平均粒径为37.27μm,细胞壁已破;过50目筛和过325目筛的温莪术的平均挥发油收率分别为3.69%和4.05%。结论过325目筛的温莪术的挥发油平均收率较比过50目筛的收率高0.36%。

温郁金SCoT-PCR反应体系的正交优化

以温郁金为试材,运用L25(56)正交设计在5个水平上对影响温郁金SCoT-PCR反应的模板DNA、Mg2+、dNTPs、Taq酶和引物5个因素进行优化试验,对PCR结果进行极差分析。建立并优化温郁金的目标起始密码子多态性-聚合酶链式反应(SCoT-PCR)体系,以期为温郁金的遗传多样性分析及分子鉴定等研究提供技术支持。结果表明:建立了温郁金SCoT-PCR的最佳反应体系(20μL):引物0.8μmol/L,dNTPs 0.4mmol/L,Mg2+1.5mmol/L,Taq酶0.5U,模板DNA 40ng,且确定各因素对温郁金SCoT-PCR反应效果的影响大小依次为:dNTPs>Taq酶>引物>Mg2+>模板DNA,其中dNTPs对体系影响最大。优化的温郁金SCoT-PCR反应体系在多个温郁金品种遗传多样性研究中得到了验证,结果表现出良好的稳定性、重复性和多态性丰富等特点,可用于今后温郁金品种遗传多样性分析、系统发育分析、遗传图谱构建、基因定位和分子标记辅助育种等研究。

郁金提取物对小鼠的镇痛作用及其机制的研究

【摘要】目的观察郁金提取物对疼痛小鼠的干预作用及其机制的探讨。方法采用甲醛实验，观察各组小鼠I、Ⅱ相累计舔足时间；行为学观察后取血处理，用放射免疫法测定外周血清TNF-α的含量并进行比较。结果单侧足底皮下注射甲醛能使小鼠出现明显的两相伤害性行为反应；郁金提取物能抑制甲醛引起的第Ⅱ时相疼痛行为反应，3个剂量组的镇痛作用和模型组相比，差异均具有统计学意义（均P〈0．01）；其中郁金提取物300mg／kg剂量组镇痛作用与阿司匹林组相比，差异具有统计学意义（P〈0．05）。各组小鼠外周血清中TNF-α含量与空白组相比，均有明显升高，差异均有统计学意义（均P〈0．01）；与造模组相比，郁金提取物各组均能明显降低小鼠血清TNF-α含量（均P〈001）；其中郁金提取物300mg／kg剂量组降低至正常水平，与空白对照组相比，无统计学差异（P〉0．05），甚至明显低于阿司匹林组TNF-α含量（P〈005）。结论郁金提取物具有明显的镇痛作用，其作用部位可能在外周，镇痛机制可能跟降低炎症细胞因子的表达，参与抑制炎症反应有关。

温郁金根腐病生物药剂的筛选

[目的]筛选温郁金根腐病有效的生物药剂。[方法]采用生长速率法测定7种生物药剂对温郁金根腐病病原菌的室内毒力。[结果]0.5%施特灵氨基寡糖素AS和哈茨木霉菌WP对根腐病菌抑制作用较好,其EC50值分别为1.14和3.61 mg/L;其次为3%中生菌素、3%氨基寡糖素和荧光假单胞杆菌,EC50分别为11.64、13.52和16.61 mg/L。[结论]0.5%施特灵氨基寡糖素AS和哈茨木霉菌WP对温郁金根腐病菌具有较好的抑制作用,可进一步用于大田试验。

醋炙蓬莪术和醋炙温莪术CO_2超临界萃取物的化学成分比较研究

目的:比较研究醋炙蓬莪术和醋炙温莪术CO2超临界萃取物的化学成分。方法:采用CO2超临界萃取法提取醋炙蓬莪术和醋炙温莪术的挥发油,用GC-MS法进行化学成分比较研究。结果:醋炙蓬莪术SFE提取物有71个化合物,醋炙温莪术SFE提取物有84个化合物,二者在相同的保留时间有44个相同的化合物,如1,8-桉树脑、樟脑、异龙脑、β-榄香烯、吉马烯-D、吉马烯-B、吉马酮、新莪术二酮、臭樟脑、γ-谷甾醇等。结论:醋炙蓬莪术和醋炙温莪术的挥发油成分有差异,其挥发油的化学成分值得研究。

不同产地莪术挥发油气相色谱-质谱联用分析

目的:对三种不同产地温莪术、蓬莪术以及广西莪术挥发油的化学成分进行了GC-MS分析比较。方法:采用水蒸气蒸馏法提取三种不同产地的莪术挥发油,并通过气相色谱-质谱联用技术,对其中的化学成分进行分析鉴定。结果:初步鉴定了三种不同产地莪术挥发油中的主要成分,不同产地莪术挥发油成分有一定差异。结论:为莪术药材的质量评价提供依据。

HPLC测定不同产地温郁金中吉马酮和莪术二酮的含量

高效液相色谱法(HPLC)测定10批不同产地道地性温郁金药材中的吉马酮和莪术二酮的含量,比较不同产地的含量差异,为质量评价和临床合理应用提供合理依据。运用水蒸气蒸馏法,采用Purospher STAR~LP C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为0.8m L/min,检测波长225nm,柱温35℃,进样量10μL。虽同为道地性药材,但不同产地温郁金中化学成分的含量仍有差异,吉马酮和莪术二酮含量最高的产地是均为乐清,平均含量分别为0.020%和0.039%。该方法简便易行,采用重复蒸馏,测量结果相对准确,可作为测定温郁金药材中吉马酮、莪术二酮含量的相对准确的方法。

温郁金脱毒组织培养技术研究

为了建立温郁金脱毒组培苗的快繁体系,以温郁金主根茎为材料,采用高温预处理催芽结合茎尖培养技术获得脱毒苗。结果表明:茎尖培养的最适培养基为MS+BA(6-苄基嘌呤)2.0 mg/L+NAA(萘乙酸)0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂5.0 g/L;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂5.0 mg/L;脱毒苗生根诱导最适培养基为MS+6-BA(6-苄基嘌呤)1.5 mg/L+NAA(萘乙酸)2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂5.0 g/L,用超薄电镜切片法和RT-PCR法检测病毒率,该茎尖再生苗脱毒率达78.6%。试管苗移栽后植株的成活率达90%以上,植物生长健壮,抗性增强,为温郁金种苗进一步工厂化快速繁殖提供了重要参考价值。