姜黄素甲基化-β-环糊精包合物制备工艺研究

目的制备姜黄素甲基化-β-环糊精包合物,改善其在水中溶解度。方法采用饱和溶液法制备姜黄素甲基化-β-环糊精包合物,以包合物溶解度为评价指标,筛选最佳包合处方和工艺,以差示扫描量热法(DSC)和X射线衍射法对包合物进行确证。结果最佳包合工艺:姜黄素和甲基化-β-环糊精投料摩尔比为1∶2,包合温度为45℃,反应时间为2 h。测得姜黄素甲基化-β-环糊精包合物的水中溶解度约为10 mg/ml。结论姜黄素经包合后在水中溶解度提高了约500倍。

姜黄素超分子包合物的结构鉴定及其抗氧化活性

采用β-环糊精聚合物制备姜黄素超分子包合物并对其抗氧化活性进行测定。应用高效液相色谱法(HPLC)检测包合物中姜黄素的含量,并运用差示扫描量热仪(DSC)、傅立叶红外光谱仪(FT-IR)和X-射线衍射仪(XRD)对包合物进行结构鉴定。运用分光光度法测定包合物对ABTS和DPPH自由基的清除能力。研究表明,所制备的包合物得率和包合率分别为63.5%和34.5%。经DSC、FT-IR和XRD鉴定包合物已形成。抗氧化活性实验表明,包合物对ABTS自由基和DPPH自由基具有较好的清除能力,呈浓度和时间依赖性。实验结果表明,采用本实验方法可以成功获得具有一定抗氧化活性的姜黄素超分子包合物,这为姜黄素的剂型改善及其应用提供了新的技术手段和理论参考数据。

姜黄素水溶性制剂的工艺研究

采用饱和水溶液法,制备出水溶性姜黄素-β-环糊精包合物,并用紫外光谱、红外光谱和荧光分析等方法加以鉴定.结果表明姜黄素-β-环糊精包合物的产率为86.07±0.20%,包合物在水中的溶解度明显大于姜黄素单体.

响应曲面法优化姜黄素包合物的制备

目的:探讨姜黄素羟丙基β-环糊精包合物curcumin HP-β-cyclodextrin inclusion complex,CUR-HP-β-CD)的包合工艺。方法:以包合物的产率为考查指标,考查温度、搅拌时间、乙醇浓度对产率的影响。采用响应曲面法对实验进行设计,采用饱和水溶液法制备包合物,通过紫外扫描和差示扫描量热法对包合物进行验证。结果:制备姜黄素羟丙基β-环糊精包合物的最佳条件为乙醇浓度为40%,饱和温度50℃,反应时间4 h。紫外扫描和差示扫描量热法证明了所得产物为包合物;结论:本工艺适用于制备姜黄素羟丙基β-环糊精包合物。

姜黄素超分子包合物抑制HepG2肝癌细胞的增殖

对姜黄素超分子包合物抑制HepG2肝癌细胞增殖的作用进行研究。采用MTT法考察不同浓度的姜黄素超分子包合物(40～640μg/mL)处理HepG2细胞不同时间(24h、48h和72h)后对其细胞存活率的影响。然后,采用流式细胞术和测定Caspase 3/8/9酶活来探讨姜黄素超分子包合物抑制HepG2细胞增殖的作用机理。实验结果表明,随着姜黄素超分子包合物处理时间和浓度的增加,HepG2细胞的存活率呈现出逐渐下降的趋势,当处理时间为72h,姜黄素超分子包合物浓度为640μg/mL时,细胞的存活率达到最低为9.81%±1.00%。进一步的流式细胞术分析得知,HepG2细胞内的凋亡细胞数目随着姜黄素超分子包合物浓度的增加而增加,当细胞经640μg/mL姜黄素超分子包合物处理72h后,其细胞内凋亡细胞的数目(Sub-G1)达到最高为93.43%。通过对Caspase 3/8/9的酶活进行检测发现,Caspase 3/8/9的酶活也是随着姜黄素超分子包合物浓度的增加而增加,当640μg/mL姜黄素超分子包合物处理细胞72h后,Caspase 3/8/9的酶活达到最大。进一步地Western blot实验结果也表明,随着姜黄素超分子包合物浓度的增加,Caspase 3/8/9的蛋白表达水平呈升高趋势。上述实验结果表明,姜黄素超分子包合物是通过线粒体途径和死亡受体途径来诱导细胞发生凋亡从而抑制HepG2细胞增殖。

姜黄素超分子包合物对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用

本文考察了姜黄素超分子包合物(Curcumin/Cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护作用。采用MTT法建立乙醇诱导LO2细胞损伤的模型,通过谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)等试剂盒考察了CUR/CDP对乙醇诱导LO2细胞损伤的保护效果。结果表明,经CUR/CDP(80μg/mL)处理后,LO2细胞的存活率从54.75%±8.97%(模型对照组)提高到85.27%±2.64%,且细胞培养液中ALT、AST和LDH活力分别从(26.47±0.90)、(41.02±4.41)、(63.77±4.95)U/L(模型对照组)降低到(16.17±0.42)、(22.62±0.79)、(32.25±1.69)U/L(P<0.01),LO2细胞内GSH-PX、SOD活力分别从(21.82±1.34)、(8.45±1.11)U/mg prot(模型对照组)升高到(36.70±0.56)、(16.47±1.27)U/mg prot,LO2细胞内MDA和ROS含量分别从(1.19±0.15)nmol/mg prot、(198.02%±11.76%)(模型对照组)降低到(0.72±0.05)nmol/mg prot、(110.87%±10.22%)(P<0.01)。综上所述,CUR/CDP通过提高LO2细胞相关抗氧化酶的活力和降低细胞内ROS含量来改善乙醇诱导LO2细胞的损伤。

姜黄素超分子包合物改善乙醇诱导LO2肝细胞DNA损伤的作用机制

该文主要考察了姜黄素超分子包合物(curcumin/β-cyclodextrin polymer inclusion complex,CUR/CDP)保护乙醇诱导LO2肝细胞损伤的分子机制。采用流式细胞仪检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞损伤后细胞周期分布的影响;Western blot检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞内蛋白表达水平变化的影响;活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测CUR/CDP预处理对乙醇诱导细胞内ROS水平的影响。结果发现,乙醇能显著提高细胞内G_(2)/M期细胞数目,从空白对照组的(8.83±0.46)%提高到(21.86±0.13)%。而经80μg/mL CUR/CDP预处理后乙醇诱导的细胞损伤显著降低,发现其细胞内G_(2)/M期细胞数目从乙醇处理组的(21.86±0.13)%降低到(4.76±0.36)%。进一步研究发现,CUR/CDP能够显著下调乙醇处理组中的p21、p-ATM、p-P53、γ-H2AX以及p-p38MAPK的蛋白表达量和上调cyclin B1和p-MDM2的蛋白表达量。此外,CUR/CDP作用于细胞后其细胞内ROS的荧光强度显著减弱,表明CUR/CDP能够抑制乙醇诱导细胞内ROS的产生。综上所述,CUR/CDP通过抑制细胞内ROS的产生下调细胞内与DNA损伤相关蛋白的表达,从而改善乙醇诱导的肝细胞损伤。

采用超临界CO_2制备姜黄素羟丙基-β-环糊精包合物

采用超临界CO2制备姜黄素羟丙基-β-环糊精包合物,以增加姜黄素在水中的溶解度。利用单因素法和BoxBehnken响应面设计法以溶解度为评价指标优化包合物的制备工艺。结果表明,最佳制备工艺为包合温度57℃,包合时间2 h,压力24 MPa,药物与羟丙基-β-环糊摩尔比0.96∶1。所得包合物中姜黄素溶解度为34.24βg/ml,约是原药的400倍。差示扫描量热分析结果表明,药物与羟丙基-β-环糊精形成了包合物。

姜黄素-羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其理化性质研究

目的:制备姜黄素-羟丙基-β-环糊精包合物并考察其理化性质。方法:采用冷冻干燥法制备姜黄素-羟丙基-β-环糊精包合物,对其进行鉴别并考察其包合率、稳定性及水溶性等。结果:包合物冻干粉经鉴别已形成包合物,包合率为96·58%,姜黄素的稳定性及水溶性均得到改善。结论:所制包合物能显著增加药物在水中的溶解度,提高药物的稳定性。

姜黄素羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其性质研究

目的制备姜黄素-羟丙基-β-环糊精(CUR-HP-β-CD)包合物,并对其进行性质考察。方法采用搅拌-冷冻干燥法制备CUR-HP-β-CD包合物,以HPLC法测定姜黄素(CUR)的量;运用正交试验法,以包合率和包合物收率为综合指标,优化CUR-HP-β-CD包合物的制备工艺;采用紫外光谱、X射线衍射分析、熔点测定验证包合物;通过相溶解度法考察包合物中主客体分子之间的包合物物质的量之比,并对其油水分配系数、表观溶解度和水溶液的稳定性进行了考察。结果采用搅拌-冷冻干燥法,在温度40℃、CUR与羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)质量比为1∶5(mg/g)、包合时间3 h的条件下制备CUR-HP-β-CD包合物。经验证包合率达97%、包合物得率达99%,其冻干粉经鉴别已形成包合物,工艺优化成功。25℃下能形成物质的量之比为1∶1的包合物,相溶解度图呈AL型,表观溶解度35μg/mL。样品溶液在室温(25～30℃)自然放置50 d后测得包合物质量分数为95%,而CUR原料药则全部分解。结论以最佳工艺条件制备的CUR-HP-β-CD包合物重现性好,工艺稳定,能显著提高CUR的溶解度及稳定性。

姜黄素-羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其体外抗肿瘤活性评价

目的：优选姜黄素-羟丙基-β-环糊精（CUR-HP-β-CD）包合物的制备工艺,并对其体外抗肿瘤活性进行评价。方法：采用乙醇-水共溶剂孵育-冻干法制备CUR-HP-β-CD包合物;以包合率为评价指标,运用正交试验优化CUR-HP-β-CD包合物的制备工艺;采用紫外分光光度法和荧光分光光度法验证包合物的形成;利用噻唑蓝（MTT）法检测CUR和CUR-HP-β-CD包合物对不同肿瘤细胞（人子宫颈癌细胞株He La细胞和人肝癌细胞株Hep G2细胞）处理不同时间（24 h和48 h）后细胞活性的影响。结果：CUR-HP-β-CD包合物的最佳制备工艺为CUR与HP-β-CD的摩尔比1∶3,溶剂比（无水乙醇-水）1∶9,包合温度40℃,包合时间12 h;CUR包合率42.2%,其冻干品经鉴别已形成包合物。MTT试验结果表明随着药物浓度的增加,CUR和CUR-HP-β-CD包合物能明显降低He La细胞和Hep G2细胞的活性,且二者的半抑制浓度接近,说明CUR-HP-β-CD包合物对肿瘤细胞的增殖具有很好的抑制作用。结论：优选的包合物制备工艺简单可行、重复性好,制备的CUR-HP-β-CD包合物很好地保留了CUR的生物活性。

紫外分光光度法测定姜黄素磺丁基醚-β-环糊精包合物的含量

建立测定姜黄素磺丁基醚-β-环糊精包合物中利福平含量的方法。采用紫外分光光度法测定含量,测定波长为426nm。姜黄素在426nm处有最大吸收,在1.05—7.35μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为:A=0.1309C+0.0306(r=0.9991);平均回收率为99.40%(n=9),RSD为0.69%;测得姜黄素-磺丁基醚-β-环糊精的包合率为91.71%,RSD为0.38%。本方法操准确、简便、迅速,适用于姜黄素磺丁基-β-环糊精包合物中姜黄素含量的测定。

紫外分光光度法测定姜黄素二甲基-β-环糊精的包合率

建立姜黄素二甲基-β-环糊精的包合率测定方法。采用紫外分光光度法测定姜黄素二甲基-β-环糊精的包合物中姜黄素的含量,由此计算包合率。结果表明姜黄素在426 nm处有最大吸收,浓度在1.05—7.35μg/mL时与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为:A=0.1309C+0.0306,r=0.9991(n=7);平均回收率为99.23%,RSD为0.67%。本方法操作简便易行,具有良好的重现性和精密度。