姜黄素对肝癌Hep1细胞增殖及凋亡的影响

目的进一步探讨姜黄素的抗肿瘤作用机制。方法CCK-8法检测不同浓度姜黄素作用不同时间肝癌Hep1细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测Hep1细胞凋亡率以及各周期时相变化。结果姜黄素作用后Hep1细胞增殖抑制率明显升高,呈时间剂量效应关系;15μmol/L作用后,G0+G1期细胞显著增多,而G2+M期细胞显著减少,细胞凋亡率增高(P均<0.05)。结论姜黄素可有效抑制Hep1细胞的生长和增殖,且具有明显的量效关系;其机制可能为干扰细胞周期进程,促进细胞凋亡。

姜黄素对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的双重作用

目的:研究姜黄素(Cur)对过氧化氢(H2O2)诱导的血管内皮细胞ECV304的作用及可能机制;方法:胎盘兰计数法分组观察在不同的时间点加入姜黄素后对H2O2诱导的ECV304细胞氧化损伤的作用.流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率的变化,试剂盒检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超歧化物氧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性的变化.结果:姜黄素0～100 μmol·L-1与H2O2 500 μmol·L-1同时作用5 h,随姜黄素浓度升高细胞存活率升高;25～100 μmol·L-1姜黄素预先作用1 h,再换为H2O2 500 μmol·L-1作用4 h,细胞存活率明显下降;H2O2500 μmol·L-1作用4 h,再加入25～100 μmol·L-1姜黄素作用1 h,细胞存活率也升高.姜黄素对H2O2诱导的细胞凋亡没有明显的影响,但同时作用组、H2O2先作用组S期细胞所占比例升高,姜黄素先作用组S期细胞所占比例下降.同时作用组、H2O2先作用组的SOD、NO、GR水平相对升高,MDA水平下降,姜黄素先作用组的SOD、NO、GR水平相对下降,MDA水平升高.结论:姜黄素对H2O2诱导的血管内皮细胞ECV304有双重效应,即有保护效应也有细胞毒效应,与其作用时间点有关.

姜黄素致HepG-2细胞的凋亡作用及对bcl-2／bax表达的影响

目的:研究姜黄素致人肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及bax与bcl-2mRNA表达的变化,为姜黄素的临床应用提供实验依据。方法:当HepG-2细胞处于对数生长期时,分别加入不同浓度(0、2.5、5、10、20、30mg/L)的姜黄素处理48h,MTT试验检测细胞的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测bax和bcl-2mRNA的含量。结果:随着姜黄素浓度的增高,其对HepG-2细胞的抑制作用逐渐增强。当姜黄素浓度为30mg/L时,其抑制率达到(58.23±2.56)%,IC50=25.44mg/L,而细胞的凋亡率由对照组的(1.1±0.3)%上升到(38.4±1.5)%;bax和bcl-2分别是对照组的(5.00±0.55)倍和(0.28±0.05)倍。结论:姜黄素能抑制HepG-2细胞的生长,诱导细胞凋亡,它的分子机制可能是上调bax基因和下调bcl-2基因的表达。

莪术基源及其活性成分开发利用

本文就莪术的植物种源,种质多样性,无性快繁和高产细胞悬浮体系的建立,活性成分分析、鉴别和结构解析,成分提取和分离,生理活性及其作用机理,剂型和结构改造等方面的研究成果进行了综述,对尚待深入研究的一些问题进行了探讨。

姜黄素抗小鼠黑色素瘤分子机制的初步研究

目的:探究姜黄素抗小鼠B16黑色素瘤生长与Bcl-2、P53、肿瘤细胞内谷胱甘肽的关系。方法:构建C57BL/6 J移植性小鼠B16黑色素瘤模型考察姜黄素对黑色素瘤体生长的影响,MTT法检测姜黄素对B16细胞的增殖活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2、P53基因的表达,HPLC分析技术检测姜黄素对C57BL/6 J小鼠B16黑色素瘤组织内GSH水平的影响。结果:姜黄素对C57BL/6 J移植性小鼠B16黑色素瘤生长的抑制作用呈剂量及时间依赖性;姜黄素作用B16细胞24h,Bcl-2蛋白表达减弱,P53蛋白表达增强;姜黄素使C57BL/6 J小鼠B16黑色素瘤组织内的GSH含量下降。结论:姜黄素体内抑制小鼠B16黑色素瘤的生长;体外抑制B16细胞的生长,并能诱导部分细胞凋亡,其作用机制可能与其下调Bcl-2蛋白的表达,上调P53蛋白的表达及耗竭肿瘤组织内GSH含量有关。

光敏化促进姜黄素诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡

目的:探讨光敏化促进姜黄素诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡及其机制。方法:用MTT法检测光敏化姜黄素对胃癌MGC-803细胞株的增殖抑制率,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态的变化,流式细胞术检测细胞的凋亡率、线粒体膜电位、细胞内活性氧和Ca2+;比色法检测caspase-3、8和9酶活性;Western blotting分析细胞色素C、Bcl-2、Bax和热休克蛋白70(HSP70)水平。结果:单纯姜黄素(5.0μmol/L)对MGC-803细胞增殖抑制率为(29.74±2.30)%,在光学显微镜下可见部分凋亡细胞,凋亡率为(12.54±1.75)%。而光敏化姜黄素组细胞增殖抑制率则为(44.93±3.61)%,在光学显微镜下能见明显细胞核形态改变,染色质凝集,凋亡小体形成,凋亡率为(26.58±2.67)%,细胞周期主要阻滞于G0/G1期。光敏化姜黄素显著降低线粒体膜电位,显著增加细胞色素C、细胞内活性氧和Ca2+以及caspase-3、8和9酶活性,与单纯姜黄素组比较,差异显著(P<0.01)。Western blotting结果显示光敏化姜黄素同时显著抑制Bcl-2和HSP70蛋白表达水平。结论:光敏化姜黄素通过Bcl-2和线粒体途径增强其诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的作用。

葡聚糖凝胶柱色谱法测定姜黄素囊泡包封率

目的:建立姜黄素囊泡包封率测定法。方法:以紫外分光光度法为分析手段,采用葡聚糖凝胶柱色谱法测定姜黄素囊泡包封率。结果:葡聚糖凝胶柱色谱法能有效地将姜黄素囊泡与游离药物分离,柱回收率测定结果为98.18%,3次包封率测定的平均值为85.28%,RSD为0.99%。结论:葡聚糖凝胶柱色谱法操作简单,结果重现性好,适用于姜黄素囊泡包封率的测定。

姜黄素对TGF-β_1诱导人肾小管上皮细胞转分化及分泌细胞外基质成分的影响

目的:通过研究姜黄素(curcumin,Cur)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化及分泌细胞外基质(ECM)成分的影响,探讨姜黄素在防治肾小管-间质纤维化方面可能的作用机制。方法:应用不同浓度Cur处理经TGF-β1诱导活化的HK-2细胞,通过显微镜观察细胞形态改变,免疫组化技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)的分泌。结果:(1)正常HK-2细胞表达E-cadherin,不表达α-SMA,经TGF-β1刺激后细胞表型发生转变,E-cadherin的表达明显减弱,α-SMA表达明显增强;(2)不同浓度Cur组与单纯TGF-β1刺激组相比α-SMA的表达有所减弱,而E-cadherin的表达增强;(3)不同浓度Cur抑制了ColⅠ、ColⅢ和FN的分泌,与单纯TGF-β1刺激组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:姜黄素能抑制TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质成分ColⅠ、ColⅢ和FN的合成,在一定程度上具有防治肾小管-间质纤维化的作用。

姜黄素对脂多糖刺激的肾小管近端上皮细胞分泌的相关炎症因子的影响

目的:本研究旨在观察姜黄素对脂多糖(LPS)刺激下的人肾小管近端上皮细胞分泌的单核细胞趋化因子(MCP-1)及白细胞介素8(IL-8)的表达水平变化,并初步探讨其作用机制。方法:将肾小管上皮细胞(HK-2细胞)培养于KSF培养液中,设正常对照组给予正常培养液,LPS刺激组(1ng/ml,100ng/ml和10μg/ml),姜黄素干预组(LPS100ng/ml+姜黄素5μM或50μM),分别培养4～24h后收集细胞,应用Real-time PCR检测各组细胞MCP-1及IL-8的表达。ELISA检测细胞培养上清液中MCP-1及IL-8的表达。结果:在不同浓度的LPS刺激HK-2细胞24h后即可明显升高MCP-1及IL-8的mRNA表达水平,随着LPS浓度(1ng/ml,100ng/ml和10μg/ml)增加,MCP-1 mRNA表达分别上升为对照组的1.74、2.15和14.7倍(P<0.01);IL-8 mRNA表达上升为对照组的2.74、5.4和16.45倍(P<0.01)。而以100ng/ml的LPS刺激HK-2细胞4～24h,观察姜黄素的干预作用,可见不同浓度的姜黄素(5μM和50μM)均可显著抑制LPS所诱导的HK-2细胞MCP-1及IL-8 mRNA的表达,且以50μM姜黄素干预组为明显。同时ELISA检测细胞上清液中MCP-1蛋白水平,可见5μM姜黄素组在24h时较相应对照组下降9.5%(P<0.05),而50μM姜黄素组在8h时即较相应对照组下降19.5%(P<0.01)。而在4h和12h时,5μM的姜黄素干预组较相应对照组IL-8的表达下降的11.72%(P<0.05)和7.58%(P<0.01),在50μM姜黄素干预组则为32.90%和18.79%(P<0.01)。结论:姜黄素可抑制LPS所诱导的肾小管上皮细胞MCP-1及IL-8的表达,提示姜黄素在肾脏炎症过程中具有抑制肾小管上皮细胞炎症因子分泌及潜在抗纤维化作用。

姜黄素在兔眼玻璃体腔内的药代动力学研究

目的研究姜黄素在兔眼玻璃体内的代谢过程。方法将36只新西兰白兔随机分为标准及质控组3只兔(6只眼)和实验组33只兔(66只眼)。实验组再随机分为11组,每组3只兔(6只眼)。标准及质控组动物无须手术操作,实验组动物穿刺抽取玻璃体0.1mL后玻璃体腔内注入姜黄素0.1mL(含0.1mg)。注药后0、1、3、7、12、24、36、48、72、96及120h分别摘除眼球并制备玻璃体待检样品。应用高效液相色谱技术(HPLC)检测玻璃体腔内药物质量浓度。用DAS软件计算主要的药代动力学参数。结果姜黄素与玻璃体内源性物质之间的色谱峰分离良好,姜黄素保留时间为4.4min。提取回收率约90%,日内和日间变异较小。玻璃体内姜黄素质量浓度在0.01～4μg/mL范围内呈线性关系,标准曲线为y=143973x+603.32(r=0.9991)。在上述时间点测得的清除率分别为1.06%、4.02%、9.44%、19.77%、23.90%、35.44%、57.54%、70.63%、84.65%、91.76%及96.34%。半衰期t1/2=(26.68±2.66)h。结论HPLC法检测玻璃体内姜黄素质量浓度特异性好。姜黄素在玻璃体内半衰期较长,0.1mg注射后整个代谢过程先为零级动力学代谢,48h后为一级动力学代谢。

姜黄素抗血吸虫病肝纤维化作用机制的研究

目的探讨姜黄素(CUR)在血吸虫病肝纤维化治疗中的作用。方法将60只小鼠随机分为6组,分别为对照组,感染组,溶剂组,CUR组(分低、中、高3个剂量)。CUR组于感染后第4周末开始通过灌胃给予CUR,感染后第10周末处死各组小鼠,剖取肝脏测定肝组织羟脯氨酸(Hyp),并检测肝脏基质金属蛋白酶-1 (MMP-1)mRNA和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达水平。结果与感染组比较,肝组织中Hyp、胶原在CUR(低、中、高)组降低显著(t_(Hyp)=4.52、3.16、2.52,P<0.05、P<0.01;t_(胶原)=33.72、23.54、18.80,P<0.05、P<0.01);反转录PCR结果显示,随着CUR剂量的增加,MMP-1 mRNA的表达逐渐升高,TIMP-1 mRNA的表达逐渐降低,与感染组相比差异有统计学意义(t_(MMP-1)=16.98、21.43、25.49,P<0.05、P<0.01;t_(TIMP-1)= 40.20、37.59、34.23,P<0.05、P<0.01)。结论CUR有减轻肝组织损伤程度,延缓和阻止肝纤维化发生发展的作用,此作用可能与上调MMP-1,阻止TIMP-1的产生有关。

大鼠尾静脉注射姜黄素固体脂质纳米粒的药动学研究

目的:研究SD大鼠尾静脉注射姜黄素固体脂质纳米粒后的药动学情况。方法:大鼠尾静脉注射姜黄素固体脂质纳米粒和游离药姜黄素后,不同时间点取血浆,HPLC测定血浆中姜黄素的含量,得其药时曲线,并以DAS软件分析处理药动学数据。结果:姜黄素固体脂质纳米粒和游离药姜黄素的药动学参数分别如下:AUC0-t为(173.09±44.81)μg·h/L和(114.83±13.19)μg·h/L,AUC0-∞为(196.56±35.25)μg·h/L和(120.66±13.95)μg·h/L,t1/2为(5.95±2.05)h和(1.46±0.03)h,姜黄素固体脂质纳米粒的AUC0-t、AUC0-∞和t1/2分别提高了1.50、1.63、4.08倍。结论:姜黄素固体脂质纳米粒在大鼠体内消除慢,能明显提高姜黄素的生物利用度。

姜黄素对大鼠硒性白内障的影响

背景姜黄素能清除机体中产生的自由基和超氧负离子，从而抑制脂质过氧化反应。研究证实姜黄素具有抗晶状体氧化损伤的作用，但其对年龄相关性白内障的作用尚不清楚。目的观察姜黄素对实验性大鼠硒性白内障的影响。方法选用12日龄健康SD大鼠30只，按随机数字表法将其随机分为空白对照组、模型对照组、姜黄素组，每组10只。除空白对照组外，模型对照组和姜黄素组大鼠均采用皮下注射亚硒酸钠的方法建立硒性白内障模型，并于造模的同时，给予姜黄素组大鼠质量分数0．005％姜黄素灌胃，每131次，共2周。于实验开始后第4、7、10、14天在裂隙灯显微镜下观察各组大鼠晶状体的混浊程度并进行评分。在实验结束后摘出大鼠晶状体，用生化测定法测定晶状体中丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性。结果空白对照组大鼠晶状体在整个实验过程中保持透明。与模型对照组大鼠比较，姜黄素组大鼠Ⅲ、Ⅳ、V级晶状体混浊的时间明显延迟，差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验结束时，3个组MDA含量及SOD、GSH—Px活性的总体比较差异均有统计学意义（MDA：F=215．42，P〈0．01；SOD：F=46．83，P〈0．01；GSH—Px：F=44．29，P〈0．01）。模型对照组、姜黄素组晶状体中SOD的活性明显低于空白对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05），但姜黄素组SOD活性明显高于模型对照组（P〈0．05）；模型对照组和姜黄素组晶状体中MDA含量均高于空白对照组（P〈0．01），姜黄素组中MDA含量较模型对照组低（P〈0．01）；模型对照组GSH—Px活性较空白对照组显著下降（P〈0．01），姜黄素组GSH—Px活性较模型对照组高（P〈0．01）。结论姜黄素能显著延缓大鼠硒性白内障的形成过程，但不能抑制硒性白内障的发生发展。姜黄素延缓大鼠硒性白内障形成的机制可能为提高大鼠晶状体的抗氧化能力。

姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力及大脑中Aβ_(42)表达的影响

目的观察姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力和大脑β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)42表达的影响,探讨姜黄素在阿尔采末病(Alzheimer’sdisease,AD)防治中的作用。方法将20只6月龄APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组10只。姜黄素饲喂组每天饲喂姜黄素(500 mg·L-1),6个月后采用Morris水迷宫实验方法及恐惧实验方法检测小鼠的学习记忆能力,采用免疫组化法检测小鼠大脑Aβ42表达的变化。结果与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠空间学习和记忆能力有明显改善(P<0.01),大脑中Aβ42表达明显减少。结论姜黄素能降低APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠大脑中Aβ42的表达,进而改善小鼠的学习记忆能力。

姜黄素治疗糖尿病肾病研究进展

目的综述姜黄素治疗糖尿病肾病的研究进展。方法检索2000年1月至2017年2月维普、万方、中国知网、Cochrane图书馆等数据库中关于姜黄素应用在糖尿病肾病方面的文献资料,调查糖尿病肾病的相关特点,总结其主要致病因素及姜黄素在其治疗中的应用价值。结果糖尿病肾病为常见且需要引起重视的疾病,结合使用姜黄素能有效提升治疗效果,改善患者的血糖,稳定病情,具有较高的医学价值。结论糖尿病肾病在治疗过程中,需通过有效方法控制好患者的病情。姜黄素具有调血脂、抗凝、抗氧化、利胆、抗癌等作用,能极大地改善糖尿病肾病患者的病情,值得临床推广。

姜黄素防治脂肪肝家鸭模型的量效关系及安全性的研究

目的：探讨姜黄素防治脂肪肝家鸭模型的量效关系及安全性。方法：复制家鸭脂肪肝模型。整个实验分为两部分完成。第一次实验用成人等效剂量2倍、4倍、8倍的姜黄素进行干预，第二次实验用16倍、32倍的姜黄素干预。考查不同剂量姜黄素对脂肪肝家鸭肝指数、肝脏甘油三酯（TG）、血清甘油三酯（TG）、血清游离脂肪酸（FFA）、肝脂酶（HL）水平的影响，以及实验二中姜黄素对肝、肾功能的影响。并进行统计分析。结果：不同剂量姜黄素组与模型组比较均能明显降低肝指数、肝TG、血TG、血清FFA，提高HL活性。并对剂量具有依赖性，在剂量为20-80mg时随剂量递增，效果渐佳；但在剂量为160-320mg时随剂量增加效果降低。并且姜黄素组较模型组能明显改善肝肾功能指标。结论：姜黄素有较强的抗脂肪肝作用，其抗脂肪肝作用与剂量相关，最佳剂量范围为80-160mg。口服给药安全。

姜黄素对卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的增敏作用及其机制的研究

目的：探讨姜黄素对卵巢癌耐药细胞系COC1／DDP的增敏作用并探讨其机制。方法：采用MTT法检测姜黄素对COC1／DDP细胞的增敏作用；用流式细胞仪检测单用顺铂、单用姜黄素、顺铂与姜黄素合用作用于COC1／DDP细胞48h后的细胞凋亡率；Westernblot法检测单用顺铂及顺铂与姜黄素合用后各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3、Survivin的表达。结果：姜黄素浓度在15～35μmol／L以内时以一定的剂量一效应关系对COC1／DDP有明显的增殖抑制作用。顺铂的浓度在1．25～5mg／L时加入20μmol／L姜黄素后耐药细胞生存率下降明显（P〈0．05），尤以2．5mg／L顺铂和20μmol／L姜黄素联合作用时，耐药细胞生存率下降最明显；COC1／DDP中顺铂与姜黄素联合用药与单独用顺铂及单用姜黄素相比，凋亡率明显增加（P〈0．05）；顺铂与姜黄素联合用药与单独用顺铂相比Bcl-2、Survivin蛋白的表达明显降低（P〈0．05），Caspase-3蛋白的表达明显增高（P〈0．05）。结论：姜黄素能够显著抑制COC-／DDP增殖，并能增强该细胞系对顺铂的敏感性，其机制可能与降低Bcl-2、Survivin蛋白的表达，增加CasDase-3蛋白的表汰有关。

姜黄素对佐剂性关节炎大鼠滑膜病理和免疫器官质量的影响

目的探讨大鼠佐剂性关节炎(AA)模型滑膜组织苏木素-伊红(HE)染色及免疫器官质量(胸腺、脾脏)变化,探讨姜黄素的免疫药效学作用。方法将SD大鼠用弗氏完全佐剂(CFA)造模后,分为正常组、模型组、姜黄素组,姜黄素组每日予姜黄素液腹腔注射,正常组和模型组分别给予生理盐水、10%二甲基亚砜溶剂1ml腹腔注射,正常饲养;15d后将大鼠处死,取滑膜组织,固定、包埋、切片、染色、镜检,观察滑膜组织病理学的变化;取胸腺、脾脏,电子天平称重,计算质量。结果H E染色后光镜下滑膜病理比较,姜黄素组炎性细胞浸润较模型组低,并有明显的形态学差异;姜黄素组胸腺质量较模型组低。结论姜黄素可以减轻AA大鼠滑膜组织炎性细胞浸润,并可以降低AA大鼠胸腺质量,从而发挥免疫抑制作用。

姜黄色素的防腐性研究

以熟羊肉、面包、豆腐、葡萄汁四种具有代表性的食品为供试材料,探讨姜黄色素的防腐性能。结果表明:浓度在0.025%以上的姜黄色素碱水溶液对熟羊肉、面包、豆腐具有良好的防腐性,浓度在0.050%以上的姜黄色素碱水溶液对葡萄汁具有一定的防腐性,姜黄色素在加热煮沸的条件下失去防腐功效。

姜黄素对人黑素瘤A375细胞增殖及凋亡的影响

目的研究姜黄素抑制人黑素瘤A375细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法体外培养人黑素瘤A375细胞,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖抑制作用;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡。结果姜黄素可使A375细胞体积缩小,细胞变圆;姜黄素对人A375细胞的生长增殖有明显的抑制作用,并且这种作用呈时间和剂量依赖性;Annexin V/PI双染法证实姜黄素可以诱导A375细胞发生凋亡。结论姜黄素对人黑素瘤A375细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。