过表达连接子蛋白40(Cx40)通过引起细胞周期阻滞抑制H9c2大鼠心肌细胞增殖

目的 建立过表达连接子蛋白40(Cx40)的H9c2心肌细胞稳定株,初步探讨慢病毒载体介导的Cx40蛋白过表达对H9c2细胞增殖的影响及其相关机制。方法 采用实时定量PCR从H9c2细胞株扩增Cx40基因片段,与慢病毒载体质粒pLVX-IRES-Puro连接,获得重组pLVX-Flag-Cx40表达载体。通过与包装质粒共转染人胚肾HEK293T细胞,获得携带Flag-Cx40的重组慢病毒颗粒。感染的H9c2细胞经嘌呤霉素(puromycin)筛选出稳定表达株(H9c2-Flag-Cx40细胞)。采用Western blot法检测Cx40蛋白表达情况;通过CCK-8法检测Cx40对H9c2细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期的变化;实时定量PCR检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的mRNA表达;Western blot法检测cyclin D1蛋白表达;免疫共沉淀(Co-IP)实验检测H9c2细胞Cx40和Yes相关蛋白(YAP)的相互结合情况;分离胞质、胞核蛋白,利用Western blot法检测Cx40对YAP细胞定位的影响。结果 测序结果显示成功构建重组pLVX-Flag-Cx40表达载体,Flag-Cx40重组慢病毒可在H9c2细胞过表达,H9c2-Flag-Cx40稳定细胞株构建成功。与对照组相比,过表达Cx40明显降低H9c2细胞的增殖速率,细胞周期阻滞在G0/G1期,cyclin D1表达量降低。H9c2-Flag-Cx40稳定转染细胞的胞质中YAP表达量明显增多,而在胞核中的表达量明显减低,Cx40通过在胞质中与YAP结合,阻止其进入细胞核发挥转录共激活作用。结论 慢病毒介导Cx40基因过表达使H9c2细胞的细胞周期阻滞在G0/G1期,并抑制其增殖。

自发性高血压大鼠外周血CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比率增加且连接子蛋白40(Cx40)和炎症因子水平升高

目的探讨连接子蛋白40(Cx40)与自发性高血压大鼠(SHR)外周血CD4^+T细胞和CD8^+T淋巴细胞亚群及炎症因子之间的关系。方法采用流式细胞术检测Wistar京都(WKy)大鼠和SHR外周血CD4^+T细胞和CD8^+T细胞及其表面Cx40的表达;采用ELISA检测炎症因子白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-6表达。结果 SHR收缩压显著高于WKy大鼠,SHR外周血CD4^+T细胞百分率、CD4^+/CD8^+T细胞比率显著高于WKy大鼠,而CD8^+T细胞百分率显著低于WKy大鼠;SHR血清IL-2、IL-4、IL-6水平均显著高于WKy大鼠,IFN-γ无明显差异;SHR外周血CD4^+T细胞和CD8^+T细胞中Cx40表达均显著高于WKy大鼠。结论 SHR外周血CD4^+/CD8^+T淋巴细胞比率增加,且Cx40和IL-2、IL-4、IL-6水平明显升高。

硫化氢对糖尿病大鼠心肌纤维化及CX40和CX45表达的影响

目的探讨气体信号分子硫化氢(H2S)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌纤维化及缝隙连接蛋白C×40和C×45的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、糖尿病大鼠组(STZ组)、硫化氢干预糖尿病大鼠组(STZ+H2S组)及硫化氢干预正常大鼠组(H2S组)。腹腔注射STZ(40 mg/kg)建立糖尿病模型;糖尿病模型建立后,STZ组与H2S组每天腹腔注射浓度为100μmol/kg硫氢化钠溶液(H2S供体);8 w后处死大鼠。碱水解法检测羟脯氨酸表达水平;Western印迹检测CX40和CX45蛋白的表达。结果与对照组相比,STZ组大鼠心肌组织羟脯氨酸表达明显增加(P<0.01),CX40表达明显下降(P<0.001),而CX45表达明显增多(P<0.01)。与STZ组相比,硫化氢干预后的STZ+H2S组大鼠心肌组织羟脯氨酸明显下降(P<0.01),CX40表达明显升高(P<0.01),CX45表达有下调趋势,但结果未显示出统计学意义。结论 H2S可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,同时上调CX40蛋白的表达,可能参与糖尿病大鼠的心肌纤维化和缝隙连接重构的调控。

扶芳藤合剂对兔病态窦房结综合征Cx45、Cx43及Cx40蛋白表达的影响

目的观察复方扶芳藤液对兔病态窦房结综合征模型心率(HR)及窦房结电生理、及心脏窦房结组织Cx45、Cx43及Cx40蛋白表达的影响,并探讨其作用机制。方法将40只清洁级健康日本大耳白兔采用随机、平行对照的方法,按随机数字表分为空白对照组、模型组、心宝丸组及复方扶芳藤液组(中药组)高、低剂量组,每组各8只。造模成功后空白对照组、模型组分别予生理盐水15mL/d,心宝丸组予心宝丸悬浮液,中药组高、低剂量组分别予复方扶芳藤液连续灌胃14d。取各组兔上下腔静脉之间的窦房结组织,常规切片,免疫组化检测窦房结组织Cx45、Cx43及Cx40蛋白表达。结果大剂量组窦房结组织Cx45、Cx43及Cx40蛋白表达明显高于模型组(P<0.05);小剂量组干预后窦房结组织Cx45、Cx43及Cx40蛋白表达较模型组增高,其中,Cx40较模型明显增高(P<0.05)。结论复方扶芳藤可上调损伤兔窦房结组织Cx45、Cx43及Cx40蛋白的表达,可能是治疗病态窦房结综合征的机制之一。

心源性猝死者窦房结组织病理学观察及其Cx40和Cx45表达与意义

目的观察心源性猝死者窦房结病理学改变及连接蛋白Cx40、Cx45的表达及其意义。方法应用苏木精-伊红染色及Masson染色方法,对14例心源性猝死者的窦房结组织进行病理学观察,并行Cx40、Cx45免疫组织化学染色。以交通事故损伤致死8例、心脏破裂4例、肝破裂3例、脾破裂2例(共17例)作为对照组。结果两组窦房结组织病理改变相比较无明显差异。心源性猝死者窦房结Cx40和Cx45表达与对照组相比均显著减少,差异有显著性(Z=3.548、2.757,P<0.01),且两者呈正相关(r=0.551、0.562,P<0.05)。结论心脏传导系统病理改变是引起心源性猝死的重要原因之一,Cx40和Cx45表达的改变与心源性猝死的发生显著相关。

UF-100尿沉渣分析仪和CX40相差显微镜联合检测鉴别血尿来源的应用价值

目的探讨全自动尿沉渣分析仪和相差显微镜联合检测在鉴别肾源性血尿与非肾源性血尿中的应用价值。方法利用Sysmex UF-100尿沉渣分析仪和Olympus CX40相差显微镜联合检测79例不同来源血尿标本,通过检测和鉴别尿红细胞数、尿红细胞形态大小及尿红细胞前向散射光强度(RBC-Fsc),帮助判断血尿的性质及来源。结果43例肾源性血尿,尿RBC畸形率为85.39%(>80%),当RBC-Fsc≤70ch时,敏感性91.5%,特异性84.6%,诊断符合率93.3%;36例非肾源性血尿,RBC畸形率为13.8%,RBC-Fsc通常>84ch;其中11例混合性血尿,RBC畸形率为67.4%,126ch>RBC-Fsc>84ch。结论UF-100尿沉渣分析仪与CX40相差显微镜联合检测分析尿RBC数、尿RBC形态、RBC-Fsc及提供的定量信息和散点图、直方图数据等指标,能客观、准确地鉴别和诊断血尿的来源。

风湿性心脏病心房颤动患者左、右心房肌Cx40、Cx43表达的对比研究

通过对伴或不伴心房颤动 (简称房颤 )的风湿性心脏病 (简称风心病 )二尖瓣病变患者左、右心房肌细胞缝隙连接蛋白 (Connexin ,Cx)Cx4 0、Cx4 3表达进行对比研究 ,探讨房颤对Cx表达的影响。选择 31例接受心脏瓣膜置换术的风心病患者为研究对象并分为三组 :实验Ⅰ组 11例 ,为阵发性房颤或房颤持续时间≤ 6个月者 ;实验Ⅱ组12例 ,房颤持续时间 >6个月 ;对照组 8例 ,为窦性心律。分别于手术中切取左、右心房肌标本。用免疫印迹法检测Cx4 0、Cx4 3的表达量。结果 :每例患者自身左、右心房肌比较 ,其Cx4 0及Cx4 3的表达量无显著差异 (P均 >0 .0 5 ) ;而每组中左、右心房肌Cx4 0、Cx4 3表达量均值也无显著性差异 ;其中实验Ⅰ、Ⅱ组与对照组比较 ,Cx4 0表达量明显降低 (左心房 :5 94 9.2± 832 .9,4 16 9.0± 95 5 .9Int×mm2 vs 86 74 .8± 10 0 8.3Int×mm2 ;P <0 .0 5和 <0 .0 1;右心房 :5 992 .1± 80 6 .5 ,4 12 0 .2± 95 4 .9Int×mm2 vs 86 17.4± 10 0 4 .7Int×mm2 ;P <0 .0 5和 <0 .0 1) ;Cx4 3的表达量在三组间无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :Cx4 0表达下调可能参与了房颤的发生与维持。

定心胶囊对房颤大鼠心房肌组织Ca^2＋-ATP酶及Cx40基因表达影响的实验研究

目的：探讨中药定心胶囊对房颤大鼠心房肌组织Ca^2＋-ATP酶及缝隙连接蛋白40（Cx40）基因表达的影响，揭示益气养阴活血中药定心胶囊预防和治疗房颤的作用机理。方法：采用氯化钙-乙酰胆碱混合液以鼠尾静脉给药的方式建立房颤的动物模型。筛选具有典型房颤心电图表现的大鼠，随机分为房颤模型组、定心胶囊治疗组、维拉帕米对照组、加正常对照组，共4组。定心胶囊治疗组、雏拉帕米对照组给药治疗，4周后，测定心房肌组织中Ca^2＋-ATP酶及Cx40基因表达。结果：①治疗组（包括西药、定心胶囊组）与模型组比较能明显升高心房肌组织Ca^2＋-ATP酶基因表达及降低Cx40基因表达（P〈0．05），说明两组有显著性差异。②定心胶囊组与西药对照组比较P〈0．05，说明定心胶囊治疗组的疗效优于维拉帕米对照组。结论：定心胶囊组能够明显改善房颤大鼠心肌组织Ca^2＋-ATP酶及Cx40基因表达，说明了益气养阴活血中药对房颤有一定的治疗作用。

人类CX40基因生物信息学分析及其法医学研究意义

目的利用生物信息学方法分析和预测人类CX40(connexin 40)全长基因及其编码蛋白的结构和功能特征,用于指导其生物学功能的实验研究,并探索其在法医学猝死案例中研究的应用前景。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士的生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY)中相关的基因、蛋白的序列和结构信息以及各种分析工具,分析该基因的结构并预测其编码蛋白质的结构和功能特征等。结果该基因全长1077bp,编码358个氨基酸,含有四个跨膜区,其理论分子量为40380.3Da,具有较稳定的理化性质。结论应用生物信息方法分析人类CX43基因的功能和结构,有法医学意义。

环孢霉素A干预钙调神经磷酸酶信号通路对持续心房起搏犬心房Cx40/Cx43表达的影响

目的:观察钙调神经磷酸酶抑制剂环孢霉素A(CsA)对持续心房起搏(atrial tachypacing,ATP)模型犬心房中Cx40/Cx43表达分布的影响,探讨CsA抑制钙调神经磷酸酶信号通路(CaN)激活是否具有一定的抗心房重构的作用。方法:健康杂种犬18只,随机分为对照组(sham组)、心房快速起搏组(ATP组,植入固律型单腔起搏器,以400次/min持续起搏8周)及CsA干预组(在快速心房起搏组处理因素的基础上,喂食CsA 8周),每组6只。8周后,处死所有实验犬,采用免疫荧光染色法及蛋白印迹法,检测各组实验犬心房组织中Cx40/Cx43表达及分布的情况。结果:持续快速心房起搏8周,可导致犬左右心房中Cx40的表达明显增加(P<0.01),但CsA干预组Cx40表达增加的程度明显小于ATP组(P<0.05)。Cx40的分布方式,ATP组和CsA干预组均呈现出明显的异质性,均有端端连接减少,侧侧连接增加的现象。Cx43蛋白表达的趋势与Cx40不同:快速起搏8周后,犬左右心房组织中Cx43的表达均明显减少(P<0.01),但减少的程度CsA干预组小于ATP组(P<0.05)。Cx43的分布方式,ATP组及CsA干预组均表现为异质性增加,端端连接减少,侧侧连接增加。结论:CsA可减少ATP导致的Cx40/43表达的重构性变化,提示CsA可能具有一定的抑制心房重构的作用。

肺静脉肌袖Cx40/Cx43与心房颤动的相关性研究进展

肺静脉肌袖内肌纤维走形紊乱,厚度不均及肌纤维的不连贯性都促进了心律失常的发生,而增龄使局部发生的淀粉样变和瘢痕化加剧了此效应。肺静脉肌袖遍布缝隙连接蛋白,其中Cx43的表达浓度较高,Cx40的表达较弱;而随着年龄的增加缝隙连接蛋白发生三维重排,导致肺静脉内传导速度和各向异性增加,从而成为心房颤动的解剖学基质;心房颤动促进肺静脉内缝隙连接蛋白的重构,而其重构又促进了心房颤动的维持。

一氧化氮抑制大鼠T淋巴细胞TNF-α和IL-6的释放并下调连接子蛋白40(Cx40)水平

目的探讨一氧化氮(NO)对淋巴细胞上连接蛋白40(Cx40)表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)释放的影响。方法取WKY大鼠腹主动脉外周血,收集淋巴细胞进行体外培养,分为对照组、伴刀豆球蛋白A(Con A)处理组、Con A联合NO处理组。ELISA检测培养基上清中TNF-α和IL-6水平,免疫荧光技术检测淋巴细胞Cx40的表达和分布,流式细胞术检测淋巴细胞Cx40表达频率的变化,Western blot法检测淋巴细胞Cx40的蛋白水平。结果与对照组相比,Con A处理组TNF-α和IL-6水平升高,Con A联合NO处理组较Con A处理组降低;Cx40表达在淋巴细胞的细胞质和细胞核,与对照组相比,Cx40蛋白表达水平和表达频数均增加,与Con A处理组淋巴细胞相比,Con A联合NO处理组Cx40蛋白表达水平和表达频数均明显降低。结论 NO抑制促炎因子TNF-α和IL-6释放,同时伴随下调淋巴细胞上Cx40的表达,提示Cx40可能参与NO的抑炎作用。

硫氢化钠抑制大鼠外周血淋巴细胞TNF-α和IL-6的释放并下调连接子蛋白40(Cx40)和Cx43水平

目的探讨硫氢化钠(NaHS)对淋巴细胞连接子蛋白40(Cx40)和Cx43表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)释放的影响。方法选取清洁级Wistar京都(WKY)大鼠6只,采集腹主动脉外周血;密度梯度法分离淋巴细胞,分为对照组、伴刀豆球蛋白A (ConA)组、ConA联合NaHS组。ELISA检测培养细胞上清中IL-6和TNF-α的水平,免疫荧光染色技术检测淋巴细胞Cx40、Cx43表达和定位,流式细胞术检测淋巴细胞Cx40、Cx43表达频数,Western blot法检测淋巴细胞Cx40、Cx43的蛋白水平。结果与对照组相比,ConA组IL-6和TNF-α水平升高,ConA联合NaHS组较ConA组降低; Cx40主要表达在细胞质和细胞核,而Cx43主要表达在细胞膜上;与对照组相比,ConA组淋巴细胞Cx40和Cx43表达均明显增强、Cx40和Cx43表达频数及蛋白水平均升高;与ConA组相比,ConA联合NaHS组淋巴细胞Cx40和Cx43表达均降低、Cx40和Cx43表达频数及蛋白水平均降低。结论 NaHS处理抑制ConA处理引起的TNF-α和IL-6释放,下调淋巴细胞上Cx40和Cx43的表达。

定心胶囊对房颤大鼠心房肌组织Ca^(2+)-ATP酶及Cx40基因表达影响的试验研究

目的:通过动物试验观测中药制剂定心胶囊对房颤大鼠心房肌组织Ca^(2+)-ATP酶及缝隙连接蛋白40 (Connexon 40,Cx40)基因表达的影响,揭示定心胶囊防治房颤的作用机理。方法:选用体重在200～250g的健康雄性Wistar大鼠,采用乙酰胆碱-氯化钙(Ach-CaCl_2)混合液以鼠尾静脉给药的方式建立房颤的动物模型。用药4周后,观察指标变化。结果:定心胶囊治疗组和维拉帕米对照组与模型组比较,能明显升高心房肌组织Ca^(2+)-ATP酶基因表达及降低Cx40基因表达(P<0.05)。定心胶囊治疗组的疗效优于维拉帕米对照组(P<0.05)。结论:定心胶囊组能够明显改善房颤大鼠心肌组织中Ca^(2+)-ATP酶及Cx40基因表达。说明益气养阴活血中药对房颤有一定的治疗作用。

CX40和miR-155在冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死者心肌中的表达及其法医学意义

目的鉴定在冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死者心肌中心肌连接蛋白(connexin,CX)40、免疫及炎症相关的小分子RNA(micro155)的表达及探讨其法医病理学意义。方法在2014-2015年间法医尸体解剖工作中选出22例符合冠心病猝死的心脏标本(标本严格按照冠状动脉粥样硬化性心脏病的标准进行筛选)作为试验组,再选取10例非冠心病猝死者作为对照组;对筛选出两组中所有的蜡块进行连续切片,HE染色;利用免疫组织化学染色来检测CX40在心肌中的表达;蜡块心肌组织中提取micr RNA,利用RT-PCR法检测每组中mi R-155的表达情况;数据统计学处理采用SPSS18.0统计软件分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果 HE染色观察分析:试验组切片镜下可见心肌纤维多处断裂,细胞间质充血水肿,且伴有脂肪变性和脂质沉积;有纤维斑块形成,内部有无定型的坏死崩解物质,镜下观察呈现针形空隙,底部和边缘有肉芽组织和纤维组织,并有泡沫细胞聚集和淋巴细胞浸润;对照组心肌细胞形态正常,各动脉管腔无狭窄;CX40免疫组织化学染色结果:非冠心病猝死组显示磷酸化心肌连接蛋白40大量分布于心肌闰盘处,排列整齐并有一定的规律性;冠心病猝死组显示心肌连接蛋白40在心肌梗死部位数量减少甚至完全消失,排列散乱,分布不均匀;RT-PCR结果表明mi R-155在冠心病猝死者中的表达显著上调,且在试验组和对照组中差异有统计学意义(P<0.01)。结论在冠心病猝死患者的心肌中CX40含量减少,mi R-155显著表达,为冠心病猝死法医学鉴定提供了理论依据。

针刺预处理“极泉”与“内关”穴对房颤大鼠房颤持续时间和Cx40蛋白及mRNA表达的影响

目的:探索针刺预处理“内关”穴和“极泉”穴对阵发性房颤大鼠的房颤持续时间、Cx40蛋白及mRNA表达的影响。方法:选取健康雄性wistar大鼠40只,随机分为正常组、模型组、内关组和极泉组,共4组。以Ach66μg/mL+CaCl210mg/mL混合液,连续7天经阴茎静脉注射诱发阵发性房颤大鼠模型。从造模第1天起对两针刺组分别针刺双侧穴位各20min后注射造模药物,正常组注射生理盐水,以心电图检测各组大鼠房颤持续时间。7天治疗结束后,用Western-blot法测定Cx40蛋白的表达,用Real-TimePCR法测定Cx40mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠房颤持续时间显著延长(P<0.01);与模型组比较,内关组、极泉组的房颤持续时间缩短(P<0.01)。Cx40蛋白在模型组表达最高(P<0.01),在正常组表达最低,经1周治疗后内关组、极泉组的Cx40蛋白表达水平均明显下调(P<0.01)。各组大鼠的Cx40mRNA表达水平无显著差异。结论:针刺预处理“极泉”穴与“内关”穴缩短房颤持续时间的效果相当,其机制可能与下调房颤大鼠心房肌心房缝隙连接蛋白Cx40的表达有关。

稳心颗粒联合盐酸决奈达隆片对阵发性房颤患者氧化应激、心肌纤维化和外周血单核细胞Cx40、Cx43的影响

目的:观察稳心颗粒联合盐酸决奈达隆片对阵发性房颤(PAF)患者氧化应激、心肌纤维化和外周血单核细胞缝隙连接蛋白40(Cx40)信使核糖核酸(mRNA)、缝隙连接蛋白43(Cx43)mRNA的影响。方法:选取2020年3月~2022年12月期间在我院治疗的79例PAF患者为研究对象。按照随机数字表法将患者分为对照组(39例,盐酸决奈达隆片治疗)和研究组(40例,稳心颗粒联合盐酸决奈达隆片治疗)。对比两组房颤(AF)发作次数、静息心率、AF持续时间、氧化应激指标、心肌纤维化指标和外周血单核细胞Cx40mRNA、Cx43mRNA的变化情况。结果:与对照组治疗12周后相比,研究组的AF发作次数更少,静息心率更低,AF持续时间更短,丙二醛(MDA)、Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、外周血单核细胞Cx40mRNA、Cx43mRNA更低,超氧化物歧化酶(SOD)更高(P<0.05)。结论:稳心颗粒联合盐酸决奈达隆片治疗PAF患者,可有效改善患者的临床症状,减轻患者的氧化应激、心肌纤维化损伤,调节外周血单核细胞Cx40mRNA、Cx43mRNA水平。

芪珀生脉颗粒对房颤模型大鼠心房肌Cx40蛋白及mRNA表达的影响

目的:探索心房颤动(简称"房颤")模型发生维持机制的关键病理环节,并阐释芪珀生脉颗粒对房颤大鼠心房肌Cx40蛋白及m RNA表达的影响机制。方法:选取健康雄性SD大鼠90只,将体质量均衡大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(80只),尾静脉注射乙酰胆碱(Ach)(99μg/m L)-Ca Cl2(10mg/m L)造模7d后,将造模成功大鼠随机分为模型组、稳心颗粒组、维拉帕米组、芪珀生脉大剂量组、芪珀生脉中剂量组、芪珀生脉小剂量组,与正常组共7组,连续给药4周,期间持续尾静脉注射Ach-Ca Cl2。RM6240生物机能系统描记大鼠正常心电图,运用Western blot方法检测Af模型大鼠心房肌Cx40蛋白表达程度,用透射电镜观察心肌组织的超微结构并拍片。结果:大鼠给药治疗4周后,与正常组比较,模型组大鼠房颤持续时间显著延长(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠房颤持续时间显著缩短(P<0.01)。Cx40蛋白在模型组表达最高,在正常组表达最低,各给药组经过4周给药治疗,Cx40蛋白水平均明显下调;定量检测各组大鼠心房肌Cx40 m RNA表达水平,结果显示,各组间无显著差异。结论:芪珀生脉颗粒治疗房颤的机制为通过下调心房肌Cx40蛋白,拮抗房颤大鼠心房结构重构,

Cx45、Cx40及TNF-α在梗死心肌中表达及作用

目的检测缝隙连接蛋白Cx45、Cx40及TNF-α在梗死心肌中的表达情况,探讨三者的作用及相关性。方法应用免疫组织化学染色(S-P免疫组化染色法)及q RT-PCR检测缝隙连接蛋白Cx45、Cx40及TNF-α分别在30例早期心肌缺血猝死组、30例晚期心肌梗死猝死组及20例正常心肌组中的表达情况,并分析三者的作用及相关性。结果免疫组化结果:在两个猝死组中,Cx45表达高于正常心肌组,Cx40表达较正常心肌组明显减少,TNF-α呈高表达,三者在三组中的表达存在显著差异,有统计学意义(P<0.05)。q RT-PCR结果显示:Cx45、Cx40及TNF-α三者的mRNΑ表达与各自蛋白本身表达相一致,在三组中表达存在显著差异,差异性有统计学意义(P<0.01)。Cx45、Cx40、TNF-α在三组心肌中存在相关性。结论缝隙连接蛋白Cx45、Cx40及TNF-α将可能成为心源性猝死死因的辅助诊断指标。

纳米级与微米级二氧化硅粉尘对小鼠胚胎毒性的比较研究

目的比较研究纳米级(nm-)与微米级二氧化硅粉尘(μm-SiO2)对小鼠胚胎的影响,并观察胚胎Connexin32(Cx32)和Cx40基因有无点突变改变。方法5个实验组(零剂量粉尘组、μm-SiO250mg/m3组、μm-SiO2200mg/m3组、nm-SiO250mg/m3组、nm-SiO2200mg/m3组)共25只雌性小鼠,妊娠0日(E0)至E17日连续呼吸道染尘,观察妊娠期间母鼠体重变化,E18日取出胚胎,观察胚胎发育情况,并采用常规聚合酶链式反应(PCR)、聚合酶链式反应-单链构像多态性(PCR-SSCP)技术对胚胎的Cx32和Cx40基因进行点突变检测。结果E18日,各染尘组的母鼠体重均显著低于对照组;各染尘组的胚胎数、活胎数、胚胎体重显著低于对照组,nm-SiO2200mg/m3组活胎数显著低于nm-SiO250mg/m3组和μm-SiO2200mg/m3组,nm-SiO2200mg/m3组胚胎体重显著低于μm-SiO2200mg/m3组;nm-SiO2200mg/m3组死胎率和吸收胎率均显著高于对照组。Cx32和Cx40基因经检测未发现有突变者。结论SiO2粉尘具有小鼠胚胎毒性,微米级粒子粒径改变为纳米级后,毒性作用增强,且纳米级SiO2粉尘对小鼠胚胎有致死作用。两种粒径的二氧化硅粉体均未发现有致Cx32和Cx40基因点突变。