3种驴寄生圆线科线虫体表结构观察及其遗传进化研究

为了探究寄生于驴消化道的3种圆线科线虫的体表结构及其分子生物学分类,试验对采自我国新疆地区驴(Equus asinus)肠道的槽形盅口线虫(Cyathostomum alveatum)、蒙氏盅口线虫(Cyathostomum montgomeryi)和双冠双冠线虫(Cylicodontophorus bicoronatus)标本使用扫描电镜观察并测量,同时对3种线虫的ITS基因进行PCR扩增,阳性产物测序后进行同源性分析并构建系统发育树。结果表明:槽形盅口线虫外叶冠细长,约为21枚,雄虫交合伞较短,生殖锥背唇有指状附属物,腹唇有乳突状突起,交合刺呈线状,远端有钩;蒙氏盅口线虫外叶冠细长,蜷曲向外,共21枚,雄虫交合伞较长,生殖锥背唇有1对囊状附属物,每个附属物上有1个乳突状凸起,交合刺呈线状,远端有钩;双冠双冠线虫口领与体部相接处只有1个较细的环沟,外叶冠约为30枚,雄虫生殖锥发育良好,腹唇呈圆锥形且有1个丘状突,背唇上有两个对称的刺状附属物,交合刺粗壮。测序得到的ITS基因序列与NCBI中其他双冠双冠线虫ITS基因序列的相似性为99.88%~100%,与盅口亚科其他种类线虫ITS基因序列的相似性为86.46%~96.45%;槽形盅口线虫和蒙氏盅口线虫ITS基因序列与盅口亚科其他种类线虫ITS基因序列的相似性分别为85.38%~96.42%和85.38%~96.11%。槽形盅口线虫和蒙氏盅口线虫与盅口属、杯冠属和冠环属线虫聚为一支,双冠双冠线虫与双冠属线虫聚为一支。说明使用扫描电镜可以对3种圆线科线虫体表结构进行精确观察,基于ITS基因的系统发育分析结果与形态学分类结果一致。