RP-HPLC法测定川牛膝中杯苋甾酮的含量

目的 :首次测定川牛膝中主要成分杯苋甾酮的含量。方法 :采用反相高效液相色谱法。色谱柱YWGC18,流动相为甲醇 -水 (35∶6 5 ) ,流速 1mL·min-1,检测波长 2 43nm。结果 :杯苋甾酮在 0 0 34～ 0 2 7μg范围内线性良好。杯苋甾酮的平均加样回收率为 98 35 % ,RSD为± 1 6 % (n =5 )。结论 :本方法简便、快捷 。

HPLC法测定川牛膝中杯苋甾酮的含量

用反相高效液相色谱法对 16个不同产地的川牛膝中所含的杯苋甾酮进行了含量测定。色谱柱为 HypersilODS柱 ,流动相 :乙腈 -水 (1∶ 4.9) ,流速 :0 .9m L/ min,检测波长 :2 43nm,线性范围 1.91～ 38.2 8μg,r=0 .9999,平均回收率 93.1% (n=6 )。本法简便、快速、灵敏 。

川牛膝的HPLC指纹图谱研究

目的:应用HPLC建立川牛膝的指纹图谱,为川牛膝药材的质控提供依据。方法:采用Dia-monsilC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温30℃在210 nm波长下检测。测定10批药材的色谱图,确立标准指纹图谱。结果:川牛膝药材有17个共有峰,多数峰可以达到较好分离。该分析方法具有很好的精密度、重现性和稳定性,各批次间共有峰的相对保留时间的RSD均小于1%,相对峰面积符合指纹图谱相关要求。结论:建立的指纹图谱检测标准可以作为川牛膝质量评价和品种鉴别的主要依据之一。

HPLC法测定杯苋甾酮的血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定杯苋甾酮在家兔血浆中的药物浓度。方法血浆样品用乙腈提取,流动相为乙腈20g、水80g、磷酸二氢钠1.20g,流速1mL/min,检测波长243nm。结果家兔口服给药后血浆中可检出杯苋甾酮,杯苋甾酮在0.565～9.040μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9990(n=5),日内RSD为±3.9%,日间RSD为±7.3%;血浆最低检测浓度为0.28μg/mL。结论本法快速、准确、重现性好,为该药物的药代动力学研究提供依据。

牛膝中甾酮类提取物的HPLC测定

建立怀牛膝和川牛膝中的杯苋甾酮和β-蜕皮甾酮的HPLC的分离条件,并用于同时测定杯苋甾酮和β-蜕皮甾酮的含量。使用CN色谱柱和安捷伦LC1200仪器,确定以色谱纯的乙腈作为流动相,流速为1.5 m L/min,柱温30℃,通过仪器的全波长扫描确定242 nm为最佳检测波长。在优化的色谱条件下,杯苋甾酮浓度在9.4~47.0 ppm之间与峰面积线性关系良好,回归方程为y=15.8x-21.14,R^2=0.9992;β-蜕皮甾酮浓度在99.64~169.6 ppm之间与峰面积线性关系良好,回归方程为y=10.843x-462.17,R^2=0.9894。该方法准确、快速、灵敏,可用于同时测定两者中的杯苋甾酮及β-蜕皮甾酮的含量。

川牛膝的品质研究

目的 研究川牛膝及含川牛膝中成药的质量分析与评价的新方法。方法 采用硅胶柱色谱进行分离 ,理化性质及光谱特征确定结构。结果 从川牛膝乙醇提取物中分离并鉴定了 3个化合物 :β-谷甾醇 ,杯苋甾酮 ,羟基杯苋甾酮。以杯苋甾酮为指标成分 ,对 2 2个川牛膝样品及含川牛膝的中成药进行了薄层定性和HPL C定量测定 ,从而确定其内在质量。结论 此法简单 ,易行 。

大孔吸附树脂富集纯化川牛膝中杯苋甾酮的研究

目的应用大孔吸附树脂富集纯化川牛膝中有效成分杯苋甾酮。方法川牛膝醇提取液回收乙醇后上大孔吸附树脂柱,以水和不同浓度的乙醇依次洗脱,再用硅胶柱进一步分离纯化。结果杯苋甾酮集中在75%乙醇洗脱部分,且纯度较高,能够最大限度地去粗取精。结论采用大孔吸附树脂方法富集、纯化川牛膝中杯苋甾酮可行。

川牛膝酒炙和盐炙前后HPLC化学指纹图谱及其主要药效成分量变化研究

目的揭示川牛膝药材经酒炙和盐炙前后的化学成分变化规律,为修订和完善川牛膝质量标准提供参考。方法采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,检测波长266 nm,体积流量0.5 m L/min,建立HPLC指纹图谱,记录各色谱峰的保留时间和峰面积数据。采用对照品指认主要色谱峰物质,采用向量夹角法计算指纹图谱相似系数,采用主成分分析和聚类分析方法进行模式识别。结果从24批次样品中一共提取出25个主要色谱峰,指认了其中的葛根素、杯苋甾酮、大豆苷元3个色谱峰。主成分分析、聚类分析以及相似度结果显示,酒炙和盐炙对川牛膝化学成分的整体组成与其量水平具有显著影响。葛根素、杯苋甾酮、大豆苷元3个已知的药效成分在经酒炙后其量均未得到显著提升,经盐炙后仅有葛根素的量得到一定程度地提升。结论现行药效指标成分对于川牛膝酒炙品和盐炙品的质控作用较弱,有关川牛膝炮制品的质控指标成分还需进一步筛选。实验所建立的HPLC化学指纹图谱及其分析方法可以用于川牛膝生品、酒炙品、盐炙品之间的鉴定及其质量控制。

HPLC-DAD多波长切换指纹图谱结合化学计量学评价不同产地川牛膝的药材质量

目的:通过HPLC指纹图谱结合化学计量学评价不同产地川牛膝的药材质量,为川牛膝的产地质量差异和评价提供参考依据。方法:采用高效液相色谱-二极管陈列检测器(HPLC-DAD)多波长切换法测定30批次不同产地及年份来源的川牛膝,并进行相似度评价和主成分分析。结果:选取了18个色谱峰作为指纹图谱共有峰,相似度评价得出以对照图谱R为对照,金口河产川牛膝(S1~S14)相似度均低于0.56,其余产地产川牛膝(S15~S30)相似度均大于0.84,而S1~S14川牛膝与其生成的对照图谱R1相似度均大于0.977,S15~S30号川牛膝与其生成的对照图谱R2相似度均大于0.930。以主成分分析得出的6个主成分对不同产地川牛膝进行综合评分并排名,且与杯苋甾酮含量排名存有差异。结论:本实验建立的对照图谱R1和R2可用以区分金口河产川牛膝和其它产地产川牛膝,仅以杯苋甾酮含量高低难以代表川牛膝的整体质量,而主成分分析对整体质量评价提供科学依据。

中药植物川牛膝基因组从头测序及分析

川牛膝是我国重要大宗药材,但近年来品质退化严重,品种真伪混杂。为深入研究川牛膝有效成分积累的分子基础,采用第二代测序技术利用Illumina Hi-seq 2000测序平台对川牛膝进行全基因组测序,使用AByss进行初步组装,得到一个包含大量基因组序列信息的数据集,并对其进行重复序列及编码序列注释。在该测序结果基础上,初步预测得到川牛膝体内甾体合成途径,并对鉴定川牛膝真伪的SCAR分子标记进行了初步定位,为研究川牛膝主要有效成分杯苋甾酮的合成途径,改良川牛膝品质提供了基础。

基于UPLC指纹图谱结合化学模式识别的不同产地与不同部位川牛膝及其混淆品差异性分析

目的建立不同产地川牛膝Cyathula officinalisUPLC指纹图谱,并与不同部位川牛膝及混淆品进行对比分析。方法采用Waters acquity UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,波长为210 nm,柱温为30℃,进样量为4μL。结合相似度评价、聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别式分析(orthogonal partial least squares methoddiscriminant analysis,OPLS-DA)比较不同产地、不同部位川牛膝及其混淆品的差异。结果UPLC指纹图谱共标定了川牛膝19个特征峰,并指认了2-羟基-3-[(4-羟基-3-甲氧基苯甲酰)氧基]琥珀酸、杯苋甾酮、滨蒿内酯、2-(苯甲酰基)-3-[(4-羟基-3-甲氧基苯甲酰)氧基]琥珀酸4个特征峰。通过相似度分析发现,川牛膝的不同产地、不同部位及混淆品样品均存在一定的差异,CA、PCA、OPLS-DA可将62批样品根据主产地、部位、基原进行区分,通过OPLS-DA项下的投影中的变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)各筛选出9个差异性标志物。结论建立的指纹图谱方法能准确有效区分川牛膝的不同产地、不同部位及其混淆品,为川牛膝的质量评价及鉴别提供参考。