响应面法优化羰基还原酶产生菌Cyberlindnera saturnus发酵培养基

(13R,17S)乙基仲醇是合成甾体类避孕药物左炔诺孕酮的手性中间体,可利用Cyberlindnera saturnus ZJPH1807菌株催化乙基二酮不对称还原制备(13R,17S)乙基仲醇。为进一步提高该菌株的羰基还原酶活力,采用单因素实验和响应面优化法对其发酵培养基中碳源、氮源及无机盐等主要成分和添加量进行优化,得到最优培养基组成(g/L):葡萄糖34.36、酵母膏14.89、NH4Cl30.34、KH2PO41.01。采用优化后的发酵培养基,菌体比酶活达0.27 U/g(以1 g细胞计),生物量为6.13 g/L,分别比优化前提高了233.33%和20.39%,为高效合成左炔诺孕酮提供了基础。

酵母菌菌株4-41的分类属性鉴定及其对灰霉菌的防病机制研究

为明确一株对灰霉菌具有明显抑菌效果的酵母菌菌株4-41的分类地位,明晰其抑菌防病机制,通过形态特征和26S rDNA序列分析对其进行鉴定,并利用平板对峙法检测其抗菌谱,借助灰霉菌与圣女果互作体系验证其在果实上的抑菌活性,检测其在果实伤口处的定殖动态,产挥发性抑菌物质、氨气、铁载体的能力以及溶磷、溶锌和生物成膜能力,揭示其抑菌机制。结果表明,菌株4-41为Cyberlindnera saturnus,该菌株对6种植物病原菌具有抗性,其中对灰霉菌(Botrytis cinerea)拮抗能力最强,能显著抑制灰霉菌对圣女果果实的侵染。菌株4-41能产挥发性抑菌物质,具有产铁载体和氨气的能力,能溶解培养基中的磷酸盐和氧化锌,具有生物膜形成能力,能诱导圣女果中过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶(CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性升高,抑制多酚氧化酶(PPO)活性。综上,拮抗酵母菌Cyberlindnera saturnus 4-41能够有效抑制灰霉菌的生长,可作为灰霉菌生物防治的有效拮抗菌材料。