循环内皮微粒相关microRNA在巨噬细胞炎性反应诱发小鼠动脉粥样硬化发生的机制

目的研究循环内皮微粒(EMPs)相关microRNA在巨噬细胞炎性反应诱发动脉粥样硬化(AS)发生的作用机制。方法 SPF级雄性ApoE-/-小鼠206只,对照组50只,实验组随机分为动脉粥样硬化模型(AS模型)组、NC-miRNA组和miRNA-19b抑制剂组,每组52只。采用油红染色对AS病变小鼠的组织学进行观察,计算斑块面积相对比例;检测生化指标的表达水平,主要包括小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和甘油三酯(TG);ELISA检测血管炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、IL-6和IL-10的变化;Western blot检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤因子(Bcl-2)、细胞凋亡的标志蛋白PARP降解产物(cleaved-PARP)和B细胞淋巴瘤因子相关X蛋白(Bax)表达的变化,实时荧光定量PCR检测miR-19b表达;流式细胞法检测巨噬细胞的凋亡率。结果 miRNA-19b抑制剂组可减少由于AS引起的血管厚度增加,减少AS斑块面积比例;使血脂中的TC、TG和LDL-C水平降低,HDL-C水平则有升高;Bax、cleaved-PARP促相关的凋亡蛋白表达量下调,同时Bcl-2抗凋亡蛋白表达上调;血管中促炎症因子IL-1、IL-6和TNF-α水平降低,抗炎症因子IL-10的水平则升高;同时使血管内巨噬细胞的凋亡率下降。结论 EMPs相关miRNA-19b的存在可以减少巨噬细胞的凋亡,并且通过上调促炎因子促进组织周围炎症的发生,进而促进AS的发展进程。

TNF-α促进内皮源性微体的数量与ICAM-1表达

目的探讨高张应变调控的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对内皮源性微体(endothelial microparticles,EMPs)数量与表面细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的作用。方法采用Flexercell细胞张应变加载系统对大鼠胸主动脉内皮细胞(endothelial cells,ECs)分别施加5%(模拟正常生理状态)和18%(模拟高血压状态)幅度的周期性张应变,加载频率均为1.25 Hz,加载持续时间为24 h,实时PCR检测不同幅度张应变条件下ECs的TNF-αmRNA表达水平。之后应用TNF-α刺激大鼠胸主动脉ECs,收集上清液,超速离心提取得到内皮源性微体(endothelial microparticles,EMPs);用亲脂性苯乙烯基(lipophilic styryl)以及透射电镜对EMPs进行形态鉴定;流式细胞术对TNF-α刺激产生的Annexin V阳性EMPs进行计数,并检测EMPs表面ICAM-1的表达。结果与5%正常张应变组相比,18%高张应变条件下ECs的TNF-α表达水平显著上升。TNF-α能够显著上调ECs产生Annexin V阳性的EMPs数量,且TNF-α刺激ECs产生的EMPs表面ICAM-1表达量显著增加。结论高张应变条件下ECs高表达TNF-α可能介导了EMPs产生和表面ICAM-1高表达。研究结果为后续探讨EMPs在血管重建力学生物学机制中的作用提供新的实验证据。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压患者内皮功能标志物检测的临床意义

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并高血压患者血清一氧化氮(NO)、血浆内皮素-1(ET-1)及内皮微粒(EMP)的水平变化及其相关性,为OSAHS合并高血压的早期预防和治疗提供依据。方法选择2016年1月至12月在吉林大学第一医院就诊的OSAHS患者80例:单纯OSAHS患者(单纯OSAHS组)40例,其中男性32例,女性8例,年龄(54.5±7.8)岁;合并高血压患者(合并高血压组)40例,其中男性33例,女性7例,年龄(54.2±7.3)岁。对照组为30例健康体检者,其中男性24例,女性6例,年龄(54.2±7.5)岁。分别采用比色法检测NO,双抗体夹心法检测ET-1,流式细胞技术检测EMP。结果合并高血压组、单纯OSAHS组ET-1、EMP水平均显著高于对照组(P<0.01),NO低于对照组(P<0.01);对照组、单纯OSAHS组、合并高血压组ET-1水平依次升高(F=19.661,P<0.01),EMP水平亦依次升高(F=606.748,P<0.01),NO依次降低(F=61.601,P<0.01);合并高血压组EMP与ET-1正相关(r=0.841,P<0.05),与NO负相关(r=-0.944,P<0.05);单纯OSAHS组EMP与ET-1正相关(r=0.780,P<0.05),与NO负相关(r=-0.897,P<0.05)。结论 OSAHS患者合并高血压与ET-1、EMP、NO水平有关,联合监测上述指标早期改善OSAHS患者通气功能,能够评估OSAHS并发高血压的发生,为临床治疗提供参考。