cyclin D2、Bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达意义

目的研究细胞周期蛋白D2(cyclin D2)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达意义。方法采用回顾性分析,观察对象为2017年3月至2022年3月入东莞市人民医院就诊的80例DLBCL患者与20例淋巴组织反应性增生(RLH)患者,分别设定为研究组与对照组,两组患者均经术后病理检查确诊,术前未行任何治疗。选取免疫组织化学法测定两组cyclin D2、Bcl-2蛋白表达情况,对cyclin D2、Bcl-2表达之间的相互关系及与DLBCL患者病理特征相关性进行分析。结果研究组cyclin D2蛋白阳性率、Bcl-2蛋白阳性率分别为33.75%(27/80)、62.50%(50/80),对照组cyclin D2蛋白阳性率、Bcl-2蛋白阳性率分别为5.00%(1/20)、10.00%(2/20);研究组cyclin D2蛋白阳性率、Bcl-2蛋白阳性率较对照组更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。cyclin D2蛋白表达、Bcl-2蛋白表达与DLBCL患者的免疫分型、Ann Arbor分期有明显相关性(P<0.05),与组织类型、肿瘤部位、性别及年龄无明显相关性(P>0.05)。DLBCL中cyclin D2与Bcl-2的表达呈正相关(r=1.000,P<0.05)。结论cyclin D2、Bcl-2在DLBCL中呈高表达,可能参与了DLBCL的发生及发展,两者具有协同作用,可辅助评价生物恶性程度。

p57^(kip2)和cyclin D2在人脑胶质瘤中的表达和临床意义

目的:探讨p57kip2蛋白和CyclinD2蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况及其临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测p57kip2,CyclinD2在55例人脑胶质瘤和10例正常脑组织中的表达.结果:在55例胶质瘤中,p57kip2蛋白阳性率为38.2%(21/55),低于正常脑组织(80%,P<0.05).低度恶性(I～II级)与高度恶性(III～IV级)间及不同生存时间组间阳性率差异有统计学意义(P<0.05).CyclinD2蛋白阳性率为52.7%(29/55),高于正常脑组织(0%,P<0.01).脑胶质瘤不同恶性程度组间阳性率差异有统计学意义(P<0.05),不同生存时间组间差异无统计学意义(P>0.05).p57kip2蛋白的表达与CyclinD2蛋白的表达无相关(P>0.05).结论:p57kip2蛋白和CyclinD2蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用.且与肿瘤的分化程度,预后相关.

Cyclin D2在人脑胶质瘤的亚细胞表达及意义

目的 研究细胞周期素D2 (cyclinD2 )在人脑胶质瘤中的亚细胞表达。方法 采用免疫组化方法检测 5 2例人脑胶质瘤及 8例正常人脑组织中cyclinD2蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。结果 正常人脑组织中无cyclinD2表达 ,而在胶质瘤细胞胞核和胞浆中均发现cyclinD2的阳性表达 ,并随肿瘤恶性程度增高而表达增强。其中 11例 ( 2 1.2 % )出现胞核染色 ,高恶性度胶质瘤 (Ⅲ～Ⅳ级 )与低度恶性胶质瘤 (Ⅰ～Ⅱ级 )标记指数与阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;胞浆染色阳性率为4 2 .3% ( 2 2 / 5 2 ) ,低、高恶性度组标记指数间差异显著 (P <0 .0 5 ) ,各相邻级别之间无显著差异 (P >0 .0 5 )。二元相关性检验显示cyclinD2胞浆染色标记指数与PCNA标记指数呈正性相关 (r =0 .4 78,P <0 .0 1)。结论 人脑胶质瘤细胞胞核和胞浆中均存在cyclinD2的表达 ,其中胞浆表达与肿瘤细胞的增殖活性密切相关 ,提示其可能在肿瘤细胞细胞质中发挥重要正性调控作用。

人脑胶质瘤中cyclin D2的表达及其与细胞增殖的关系

目的 :研究人脑胶质瘤中cyclinD2蛋白的表达与肿瘤恶性程度的关系及其对细胞增殖活性的影响 .方法 :采用免疫组化方法检测 5 2例人脑胶质瘤和 8例正常人脑组织标本中cyclinD2和PCNA的表达水平 ,计算两者标记指数 ,统计分析两者之间及其与胶质瘤病理分级之间的关系 .结果 :正常脑组织中无cyclinD2或PCNA表达 .随着人脑胶质瘤病理分级的增高 ,cyclinD2平均标记指数明显升高 .在WHO分级Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤中 ,Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅲ级与Ⅳ级、Ⅰ级与Ⅲ级以及低度恶性胶质瘤 (Ⅰ～Ⅱ )与高度恶性胶质瘤 (Ⅲ～Ⅳ )之间标记指数存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) .类似cyclinD2 ,PCNA标记指数随脑胶质瘤恶性程度增高而升高 .cyclinD2与PCNA的平均标记指数呈明显正相关 (r =0 .6 5 4 ,P <0 .0 1 ) .结论 :人脑胶质瘤中cyclinD2的表达与细胞增殖活性和病理学分级密切相关 ,很可能参与了人脑胶质瘤细胞的恶性转化 .

p16和cyclin D2在卵巢颗粒细胞瘤中的表达及临床意义

目的研究p16和细胞周期蛋白D2(cyclin D2)在人卵巢颗粒细胞瘤中的表达及临床意义。方法实验组选取80例经病理医师诊断为卵巢颗粒细胞瘤的石蜡切片,用免疫组织化学法检测其中的p16和cyclin D2表达的变化,并与健康对照组比较。结果p16和cyclin D2在卵巢颗粒细胞瘤组的表达率分别为12.50%和81.25%,在对照组的表达率分别为27.78%和38.89%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。p16与cyclin D2在卵巢颗粒细胞瘤中的表达呈负相关关系。结论人卵巢颗粒细胞瘤中cyclin D2表达明显增高,而p16的表达明显降低,对研究卵巢颗粒细胞瘤的发病,发生具有重要意义。

雄激素对卵巢颗粒细胞cyclin D2 mRNA表达的影响

目的 :探讨是否过量雄激素可阻断FSH调节卵巢颗粒细胞cyclinD2mRNA表达的功能 ,来抑制颗粒细胞增殖。方法 :未发育成熟小鼠的颗粒细胞 ,被DHT(dihydrotesterone) ,forskolin和DMSO处理。Northernblot ,测定细胞中CyclinD2mRNA的表达。结果 :颗粒细胞单独被forskolin处理后 ,cyclinD2mRNA的表达显著高于对照组。DHT处理后 ,cyclinD2mRNA的表达明显被抑制 ,并随浓度的增加 ,其抑制作用也增强。细胞被DHT和forskolin共同处理后显示 ,DHT可明显抑制forskolin的作用。结论 :过量的雄激素可影响颗粒细胞的正常增殖通道 ,即cAMP/PKA/cyclinD2的通道 ,使细胞内cyclinD2的表达降低 ,颗粒细胞的增殖速度减慢 。

基于生物信息学分析CCND2在甲状腺乳头状癌中的表达及其对免疫浸润的影响

目的探讨凋亡相关基因细胞周期蛋白D2(CCND2)在甲状腺乳头状癌中的表达及其与临床病理的联系。方法通过公共数据库TCGA、TIMER 2.0和UALCAN获取CCND2的表达情况;采用ROC曲线对甲状腺乳头状癌(PTC)组织和癌旁组织进行鉴别;使用基因本体功能注释(GO)对CCND2相关差异基因(DEGs)进行富集分析;使用TIMER数据库和CIBERSORT数据源分析甲状腺癌中CCND2的肿瘤免疫浸润情况;采用RT-qPCR和Western blot检测人甲状腺正常细胞系Nthy-ori-3-1和人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1、BCPAP中CCND2表达量;采用免疫组织化学SABC法检测PTC及癌旁组织中CCND2表达,并探讨其与临床病理的联系。结果TCGA、TIMER2.0、UALCAN分析显示,与癌旁组织相比,CCND2 mRNA在甲状腺癌中高表达(P<0.001),并且与Stage分期、性别、年龄、病理亚型及区域淋巴结受累情况有关(P<0.05);ROC结果显示,截断值为4.983时,CCND2的灵敏度、特异度和准确度分别为83.6%、94.9%和78.5%;GO分析表明CCND2的差异表达与免疫功能有关;TIMER数据库显示,CCND2表达与B细胞、CD4^(+)T细胞、巨噬细胞呈正相关(partial.cor>0,P<0.001),而与CD8^(+)T细胞呈负相关(partial.cor<0,P<0.01)。CIBERSORT数据库显示,CCND2表达与B细胞记忆渗透水平、CD4^(+)T细胞记忆激活状态、M2巨噬细胞表达水平、肥大细胞静息状态和肥大细胞激活状态显著相关(P<0.05)。RT-qPCR及Western blot结果显示,CCND2在细胞系TPC-1、BCPAP中的表达量高于Nthy-ori-3-1(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,CCND2在PTC中的阳性表达高于癌旁组织(P<0.05)且与肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05)。结论PTC中CCND2表达上调可能与肿瘤进展及免疫细胞浸润密切相关。

慢性粒细胞白血病cyclin D2基因的表达研究

目的 研究cyclinD2基因表达与慢性粒细胞白血病 (CML)特征性的P2 10 BCR ABL蛋白酪氨酸激酶活性之间的相关性。方法 以RT PCR、免疫印迹法及流式细胞术检测cyclinD2基因在BCR ABL +K5 6 2细胞系中的表达。通过表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的模型即K5 6 2 ib eGFP细胞 ,检测cyclinD2表达的变化。结果 在P2 10 BCR ABL 蛋白酪氨酸激酶活性受抑制的K5 6 2 ib eGFP细胞中 ,cyclinD2的表达 (18.90 % )明显低于K5 6 2细胞组 (48.10 % ) ,且K5 6 2 ib eGFP组S期细胞比例(40 4 0 % )也明显低于K5 6 2细胞组 (6 4 .34% )。结论 cyclinD2可能是CMLP2 10 BCR ABL 蛋白酪氨酸激酶下游相关信号传递分子 ,其表达增高可能促进了CML细胞的过度增殖。

微RNA-29b通过调控cyclin D2表达参与宫颈癌发生的机制研究

目的:分析微RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在宫颈癌组织中的表达情况,并探讨miR-29b在宫颈癌发生过程中的作用及其可能的机制。方法:利用实时荧光定量PCR法检测miR-29b在50例宫颈癌组织标本中的表达情况,分析miR-29b表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系。在宫颈癌SiHa细胞中转染miR-29b模拟物,然后采用CCK-8法、FCM法、细胞划痕实验及Transwell法检测miR-29b过表达对宫颈癌细胞增殖、周期分布和迁移的影响。通过Targetscan软件预测miR-29b的靶基因,然后采用双荧光素酶报告基因实验和蛋白质印迹法明确miR-29b在SiHa细胞中与该靶基因的相互作用。实时荧光定量PCR法检测miR-29b的靶基因在宫颈癌组织中的表达情况。结果:miR-29b在宫颈癌组织中的表达水平与相应癌旁正常组织相比明显下降(P<0.05)。模拟物转染后miR-29b过表达,能明显抑制宫颈癌细胞的增殖和迁移,且提高G1期细胞所占百分率(均P<0.05)。miR-29b与其靶基因细胞周期蛋白D2(cyclin D2,CCN D2)相互作用,在宫颈癌细胞中二者表达呈负相关性(r2=0.225,P<0.05)。宫颈癌组织中CCN D2表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论:miR-29b水平在宫颈癌组织中显著下调。初步的体外实验结果提示,它可能作为一种抑癌基因,通过下调CCND2表达,参与宫颈癌的发生与发展。因此,预测miR-29b可能将作为宫颈癌诊断和治疗的新的作用靶点。

B淋巴增殖性疾病的SOX11、cyclin D1、cyclin D2和cyclin D3的表达研究

目的 探讨各B淋巴增殖性疾病（B-LPD）中SOX11、cyclin D1、cyclin D2和cyclin D3表达的差异和相关性,以及与慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者临床特征的关系.方法 采用实时定量逆转录PCR（qRT-PCR）技术检测154例B-LPD患者与12例健康对照SOX11、cyclin D1、cyclin D2和cyclin D3基因的表达水平;应用免疫组织化学技术对15例B-LPD患者组织标本进行SOX11蛋白核表达水平的检测.结果 套细胞淋巴瘤（MCL）患者SOX11表达水平较高,与CLL、弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、毛细胞白血病（HCL）、脾边缘区淋巴瘤（SMZL）和健康对照的差异存在统计学意义（P1=0.002、P2=0.017、P3=0.015、P4=0.008、P5=0.008）;MCL患者cyclin D1的表达明显高于CLL、DLBCL、HCL、SMZL和健康对照（P1＜0.001、P2=0.008、P3=0.020、P4＜0.001、P5=0.005）;DLBCL患者的cyclin D1和cyclin D2表达高于SMZL患者（P1=0.049,P2=0.005）;SOX11的表达与cyclin D1、cyclin D2和cyclin D3呈显著正相关（r1=0.444,P1＜0.001;r2=0.279,P2＜0.001;r3=0.425,P3＜0.001）;15例患者标本SOX11核蛋白表达的检测结果显示,4例MCL中有3例为阳性,1例阴性;其余12例均为阴性,包括7例DLBCL、2例粘膜相关组织（MALT）淋巴瘤、2例SMZL.CLL患者中,ZAP70阳性患者SOX11的表达水平明显高于ZAP70阴性的患者（P=0.021）.结论 MCL患者SOX11和cyc1in D1 mRNA的表达水平较高,并特异性的表达SOX11核蛋白.

cyclin D2和bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨cyclin D2和bcl-2在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及其意义。方法:收集2015年1月至2020年3月在保定市第一中心医院手术切除的87例DLBCL组织及23例淋巴组织反应性增生(RLH)患者组织,采用免疫组织化学法检测DLBCL和RLH组织中cyclin D2和bcl-2蛋白的表达情况,分析二者表达间的相互关系及与DLBCL患者临床病理特征的关系。结果:DLBCL和RLH中cyclin D2蛋白阳性率分别为33.3%(29/87)、2.0%(1/23),bcl-2蛋白阳性率分别为60.9%(54/87)、7.0%(3/23);DLBCL中cyclin D2、bcl-2蛋白阳性率均高于RLH,差异均有统计学意义(χ^(2)=7.566, P=0.006;χ^(2)=17.512, P<0.01)。cyclin D2和bcl-2蛋白表达与DLBCL患者Ann Arbor分期、免疫分型有关(均 P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤部位、组织类型均无关(均 P>0.05)。cyclin D2和bcl-2蛋白在DLBCL中的表达呈正相关( r=1.000, P<0.01)。 结论:cyclin D2和bcl-2可能与DLBCL的发生、发展相关,两者可能有一定的协同作用。

CyclinD1/D2/D3在大鼠脑胶质瘤组织中的表达

目的 探讨细胞周期素 (cyclin )D1/D2 /D3在大鼠脑胶质瘤动物模型肿瘤组织中的表达。方法 将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞 (细胞数为 3× 10 5个 ) ,借助动物立体定向仪接种于Wistar大鼠左侧尾状核区 ,解剖标本 ,行组织病理学检查 ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化定性监测。随后检测肿瘤组织中cyclinD1/D2 /D3蛋白表达。结果 cyclinD1/D2 /D3均呈阳性表达。cyclinD1/D3主要在细胞核表达 ;cyclinD2则主要在胞浆表达 ,部分细胞核呈阳性 ,不同存活期荷瘤鼠其瘤组织中cyclinD1/D2 /D3表达量不同。结论 cyclinD1/D2 /D3的过分表达 ,对大鼠脑胶质瘤细胞增殖的失控起着一定的调节作用。荷瘤鼠生存期与cyclinD族的表达量呈负相关关系。

CyclinD2及ER-α基因DNA甲基化在乳腺癌早期诊断中的意义

目的探讨CyclinD2及ERα基因的DNA甲基化,在乳腺癌早期诊断中的意义。方法采用RT-PCR方法和特异性MSP方法,检测乳腺癌及正常乳腺组织中cyclin-D2及ERα基因的mRNA及甲基化状态。结果⑴cyclinD2和ERαmRNA在乳腺癌中的表达明显低于正常乳腺组织;⑵cyclinD2和ERα在正常乳腺组织中无一例甲基化,在乳腺癌中的甲基化率分别为46.7%和32.4%;⑶cyclinD2、ERα的mRNA表达及甲基化状态无相关性。结论将检测cyclinD2和ERα的甲基化状态应用于乳腺癌的诊断,可以提高其早期诊断率。

CyclinD1/D2/D3在大鼠脑胶质瘤组织中的表达(英文)

目的探讨cyclinD1/D2/D3在大鼠脑胶质瘤组织中的表达。方法将体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞(细胞数为3×105个)借助动物立体定向仪接种于Wistar大鼠左侧尾状核区,解剖标本,行组织病理学检查及GFAP、cyclinD1/D2/D3免疫组化检测。结果cyclinD1/D2/D3均呈阳性表达。cyclinD1/D3主要在细胞胞核表达,cyclinD2主要在胞浆表达,部分在胞核表达,不同存活期荷瘤鼠瘤组织中cyclinD1/D2/D3表达量不同。结论cyclinD1/D2/D3过分表达参与调节大鼠脑胶质瘤增殖。荷瘤鼠生存期与cyclinD家族蛋白的表达呈负相关关系。

真核翻译延伸因子1A1通过调控cyclin D2表达促进肝癌细胞增殖

目的 :研究真核翻译延伸因子1A1(eukaryotic translation elongation factor1A1,eEF1A1)表达对原发性肝癌细胞周期和增殖的影响,并探讨其分子机制。方法 :免疫组织化学法检测101例肝癌及癌旁组织中eEF1A1的表达水平,并进一步分析肝癌组织中eEF1A1表达与肝癌患者临床病理参数的相关性。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测肝癌细胞Huh7、SMMC7721、MHCC97H、Hep3B和正常肝细胞HL-7702中eEF1A1 mRNA和蛋白的表达水平。在肝癌Huh7和SMMC7721细胞中分别转染特异性针对eEF1A1基因的shRNA-1/2(即eEF1A1-shRNA-1/2)和过表达质粒pcDNA3.1-eEF1A1,并采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证eEF1A1表达的变化,然后采用EdU法和FCM法分别检测肝癌细胞增殖和细胞周期的变化。另外,蛋白质印迹法检测转染eEF1A1 shRNA-1/2的肝癌Huh7细胞和转染pcDNA3.1-eEF1A1的SMMC7721细胞中cyclin D2以及信号转导与转录激活子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)通路蛋白的表达变化。结果 :肝癌组织中eEF1A1表达水平明显高于癌旁组织(P <0.001),肝癌细胞中eEF1A1表达水平明显高于正常肝细胞(P <0.001),并且eEF1A1高表达与肝癌大小及TNM分期密切相关(P <0.01,P <0.05)。eEF1A1-shRNA-1/2转染后,肝癌Huh7细胞中eEF1A1 mRNA及蛋白的表达水平明显降低(P值均<0.01),G_1期细胞所占比例明显升高(P <0.01),肝癌细胞的增殖活性明显降低(P <0.01);pcDNA3.1-eEF1A1转染后肝癌SMMC7721细胞中eEF1A1 mRNA及蛋白的表达水平明显升高(P值均<0.01),G_1期细胞所占比例明显降低(P <0.05),肝癌细胞的增殖活性明显增高(P <0.05)。随着eEF1A1基因表达下调,Huh7细胞中cyclin D2、STAT1总蛋白和核蛋白水平均明显下降(P值均<0.05);而过表达eEF1A1后,SMMC7721细胞中cyclin D2、STAT1总蛋白和核蛋白水平均明显升高(P值均<0.05);过表达eEF1A1基因的同时加入STAT1抑制剂作用后,cyclin D2、STAT1总蛋白和核蛋白水平均无明显变化(P值均> 0.05)。结论 :eEF1A1通过STAT1通路调控cyclin D2表达,从而促进肝癌细胞周期进展和细胞增殖。

细胞周期蛋白D2同源模建及其与CDKs抑制剂对接研究

细胞周期蛋白D2(CyclinD2,CCND2)在细胞中的异常表达会诱发肿瘤等疾病,设计高选择性CCND2药物对抑制肿瘤具有重要意义。本文选用PDB数据库中与CCND2一级序列同源性最高的3G33为模板蛋白建模,通过Loop环区能量优化最终得到具有较高合理性和可信度的三维蛋白结构模型,最优模型VerifyScore为100.920,预测获得10个可能的活性位点。构建药物小分子的最低能量结构,将小分子对接至蛋白活性位点,根据对接模型确定不同药物小分子与蛋白活性位点的相互作用方式,筛选细胞周期依赖性激酶(CDKs)类似物作为药物小分子配体,实验结果对进一步研究CyclinD2的结构、功能具有理论指导意义,也为相关疾病的临床治疗奠定了理论基础。

细胞周期蛋白D2对HBV复制的影响

目的研究细胞周期蛋白D2(cyclin D2)对HBV复制的影响并探讨其作用的分子机制。方法运用qRT-PCR分析细胞周期蛋白家族成员在HBV复制细胞系中的表达水平;qRT-PCR、Western blot检测HBV复制对cyclin D2表达的影响;Western blot验证cyclin D2沉默效果,Real-time PCR,Southern blot验证沉默cyclin D2对HBV复制中间体表达的影响及ELISA验证cyclin D2对HBs Ag、HBe Ag分泌的影响;并检测cyclin D2过表达对HBV复制的影响。结果在细胞周期蛋白中,HBV复制对cyclin D2表达的影响最为显著,HBV感染明显促进cyclin D2 mRNA和蛋白水平的升高,下调cyclin D2显著抑制HBV的复制中间体的表达,HBs Ag和HBe Ag的分泌,过表达cyclin D2明显促进HBV的复制。结论 HBV复制可以促进细胞内cyclin D2的表达,cyclin D2有利于HBV的复制。这一发现为降低HBV的感染率,探索治疗乙型肝炎新的靶点提供了新的策略。

RNA干扰阻断cyclin D1表达抑制结肠癌细胞增殖

目的：使用RNA干扰技术阻断人结肠癌细胞cyclin D1的表达，检测其对细胞生长增殖的影响和机制。方法：将人结肠癌细胞株HT-29分成3组，antisense组（转染反义链组）、sense组（转染正义链组）和对照组，免疫沉淀和蛋白质印迹法观察cyclin D1 siRNA对细胞cyclin D1蛋白质表达的影响，并对蛋白质电泳图像进行分析，MTT比色法绘制细胞生长曲线，^3H-TdR技术和流式细胞技术观测细胞周期变化。结果：反义siRNA有效抑制了cyclin Dl蛋白质表达，MTT实验显示，转染反义siRNA的细胞，生长代谢减慢，与对照组细胞差异显著（P〈0．01），而antisense组细胞24h的^3H-TdR渗入量，G0／G1期和S期细胞较对照组和sense组明显减少（^3H-TdR：1181.8±117.97 VS 1798.4±55.36，1851.4±83.46；P〈0.01;G0／G1期：79.31％ VS 60.87％，59.14％；S期：13.67％ VS 26.42％．27.93％：P〈0.01）。结论：RNA干扰技术能有效减弱cyclin D1蛋白质表达，使细胞周期受阻，并抑制结肠癌细胞的生长增殖。

小鼠卵母细胞体外成熟过程中卵丘细胞上细胞周期蛋白D2的表达

目的检测在小鼠卵母细胞体外成熟过程中卵丘细胞(CCs)上细胞周期蛋白D2(CCND2)表达水平的变化,探讨其在卵母细胞成熟中的作用。方法从3周龄雌性ICR小鼠获取GV期卵丘-卵母细胞复合体(GV-COCs),体外培养至MⅡ期卵丘-卵母细胞复合体(MⅡ-COCs)。收集对应的CCs,分成GV-CCs和MⅡ-CCs二组,实时定量逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹方法检测CCND2mRNA和蛋白水平的表达;激光共聚焦免疫荧光技术观察COCs成熟前后CCND2的亚细胞定位。结果 GV-CCs的CCND2mRNA相对表达量(7.03±1.11),显著高于MⅡ-CCs组(1.40±0.11)(P<0.01);同样,GVCCs组CCND2蛋白相对表达水平(1.98±0.16)也显著高于MⅡ-CCs组(1.16±0.14)(P<0.01)。免疫荧光显示,COCs中CCND2定位于CCs,卵母细胞亦有表达;CCs中CCND2主要定位于胞核,胞质中少量表达,且GV-CCs主要表达在内层CCs,而MⅡ-CCs则失去这种表达极性,同时MⅡ-CCs的表达强度较GV-CCs减弱。结论卵母细胞体外成熟培养过程中,其周围的CCs上CCND2表达水平下降,且伴随细胞定位的改变,提示CCs上CCND2与卵母细胞成熟密切相关,可能参与了卵母细胞成熟过程。

ABCG2在人脑胶质瘤中的表达及其与Cyclin D_2的关系

目的探讨ABCG2在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤分级和Cyclin D2表达的关系。方法实时荧光定量PCR法检测ABCG2在52例不同病理级别胶质瘤及8例正常脑组织中的mRNA表达;免疫组织化学SABC法检测ABCG2和Cyclin D2的蛋白表达;SPSS统计分析其表达的相关性。结果ABCG2在脑胶质瘤中的mRNA表达与正常脑组织相比存在过表达(P<0.05),且随着病理级别的升高而增加(P<0.05);免疫组化检测显示ABCG2在52例胶质瘤中的阳性表达率为32.7%(17/52),与病理级别具有明显相关性(χ2=4.62,P<0.05),呈亲血管分布;ABCG2的表达与Cyclin D2的表达具有一定的相关性(P<0.05)。结论ABCG2在人脑胶质瘤中的表达随着病理级别的升高而逐渐增加,且与Cyclin D2的表达呈正相关,表明以ABCG2为标志物的脑肿瘤干细胞具有较高的增殖能力。