丽产特色中药材及饮片中33种禁用农药残留分析

建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法和气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法评价丽产特色中药材及饮片中33种禁用农药残留情况。用乙腈高速匀浆提取低温浓缩,并结合亲水亲油平衡材料固相萃取柱净化。结果表明,33种禁用农药线性良好,相关系数均大于0.990,加标回收率为75.7%~119.7%,RSD为2.6%~9.8%。160批丽产特色中药材及饮片中有8批检出禁用农药(检出率为5%),其中1批样品超出限度(不合格率为1%),禁用农药残留情况整体良好,需重点关注灵芝孢子粉中硫丹残留。

反相高效液相色谱法测定青钱柳中黄酮化合物含量

用反相高效液相色谱法 ,对我国特有保健食品资源青钱柳中的异槲皮甙、槲皮素和山柰酚的含量进行了测定。色谱条件为AlltimaC18柱 ( 5μm ,150mm× 4 .6mm) ,流动相A为H2 O∶HOAc=98∶2 (V/V) ,流动相B为CH3CN。洗脱程序为 :8%B→ 3 0min→ 50 %B→ 5min→ 50 %B→ 5min→8%B。检测波长为 3 60nm ,流速为 0 .6mL/min。该方法的平均回收率和RSD为 98.6%和 1.57%。测得 :青钱柳甲醇提取物中黄酮含量为异槲皮甙 0 .543 % ,槲皮素 0 .0 615% ,山柰酚 0 .0 3 87% ;水提取物中异槲皮甙 0 .4 64 % ,槲皮素 0 .0 60 3 % ,山柰酚 0 .0 3 3 7%。

青钱柳叶中黄酮化合物结构及含量研究

研究青钱柳 (Cyclocaryapaliurus (Batal.)Iljinsk .)叶中的黄酮化合物结构及含量分布。采用溶剂萃取及多种色谱技术分离纯化 ,根据理化性质和光谱分析方法鉴定其结构 ,确定从青钱柳中分离得到山柰酚、槲皮素和异槲皮苷 3个黄酮单体化合物 ,并用反相高效液相色谱法对其含量进行了测定 ,测得各自在甲醇和水提取物中的含量 :山柰酚 0 .0 387% ,0 .0 337% ;槲皮素 0 .0 6 1 5 % ,0 .0 6 0 3% ;异槲皮苷 0 .5 4 3% ,0 .4 6 4 %。

青钱柳多糖组分生物活性及其元素化学形态分析

为了从青钱柳(CP)中提取降血糖功能活性物质,并获得其中多种降血糖相关性微量元素的化学形态信息.本研究通过四氧嘧啶糖尿病小鼠模型进行青钱柳提取物生物活性验证,用流动注射 电感耦合等离子体质谱法(FIA ICP MS)对功能提取物中的相关元素进行表征.结果表明:青钱柳提取物具有显著的降血糖活性,提取物在IR光谱中显示典型的多糖吸收特征,得率为9.6%.连续四周腹腔注射青钱柳提取物后,小鼠血糖值比糖尿病模型组降低了41.3%.多糖复合物中降血糖相关性元素以可溶态为主.在可溶态元素中,镁主要以无机形态存在,而锰、铜和锌主要以有机形态分布.

青钱柳提取物对家兔实验性糖尿病模型降血糖作用的研究

分别以每天8g/kg体重剂量的青钱柳水提物和醇提物灌饲糖尿病模型家兔,以血糖、体重、糖耐量为指标研究青钱柳提取物的降糖作用。结果表明,经5周试验,灌饲青钱柳提取物家兔的血糖浓度明显低于糖尿病模型对照组,其中青钱柳醇提取物的降糖效果更好(P<0.01)。青钱柳提取物还能减缓实验性糖尿病家兔体重下降,对试验性家兔的糖耐量具有显著的增强作用。

青钱柳多糖组分及其降血糖活性研究

采用超声波萃取法 ,从胡桃科植物青钱柳中提取一种具有降血糖活性的多糖复合物 ,提取物得率为9.6 %。用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型验证了青钱柳多糖的生物活性 ,ig青钱柳提取物 4周后 ,小鼠血糖值比糖尿病模型组降低了 41.3 %。葡萄糖耐量实验表明

青钱柳中黄酮甙和维生素含量的测定

采用化学和仪器分析方法，对不同产地青钱柳叶中黄酮甙、胡萝卜素、维生素E和维生素C的含量进行了测定。结果表明：江西修水和井冈山所产青钱柳叶中黄酮甙的含量分别为6.26mg/g和6.05mg/g；胡萝卜素分别为：2.08mg/100g和3.07mg/100g；维生素E分别为：7.02 mg/100g和7.57 mg/100g；维生素C分别为：3.08mg/100g和3.42mg/100g。

青钱柳化学成分的研究

利用柱层析、硅胶薄层层析和Sephadex LH-20柱层析对青钱柳(Cyclocarya paliurus)叶中的化学成分进行研究,分离得到五个化合物,并通过核磁共振波谱法鉴定化合物的结构。五个化合物经鉴定为:α-乳香酸(Ⅰ),β-乳香酸(Ⅱ),齐墩果酸(Ⅲ),4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(Ⅳ)和3,6,3’,5’-四甲氧基-5,7,4’-三羟基黄酮醇(Ⅴ)。化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ为首次从该植物中分离得到。

青钱柳黄酮化合物结构及含量

研究了我国特有的胡桃科植物青钱柳(Cyclocaryapaliurus(Batal.)Iljinsk.)叶中的黄酮化合物结构及含量分布。采用溶剂萃取及各种色谱技术分离纯化,根据理化性质和光谱分析方法鉴定其结构。用反相高效液相色谱法对青钱柳中的山柰酚、槲皮素和异槲皮苷的含量进行了测定。色谱条件为AlltimaC18柱(5μm,150×4.6mm),流动相A为H2O:HOAc=98:2,流动相B为CH3CN。洗脱程序为:8%B→30min→50%B→5min→50%B→5min→8%B。检测波长为360nm,流速为0.6mL/min。该方法的平均回收率和RSD为98.6%和1.57%。首次从青钱柳中分离得到3个黄酮单体化合物:山柰酚(kaempferol,I)、槲皮素(quercetin,Ⅱ)和异槲皮苷(isoquercitrin,Ⅲ),其在甲醇和水提取物中的含量分别为:山柰酚0.0387%,0.0337%;槲皮素0.0615%,0.0603;异槲皮苷0.543%,0.464%。

青钱柳多糖降血糖作用研究

目的:探讨胡桃科植物青钱柳中是否含有具有降血糖作用的多糖复合物。方法:采用超声波萃取法提取多糖成分。用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型验证青钱柳多糖的生物活性。结果:青钱柳中多糖复合物含量为9.6％。灌胃青钱柳多糖四周后,小鼠血糖值比糖尿病模型组降低了41.3％。给予小鼠葡萄糖后,青钱柳多糖组小鼠血糖值显著低于糖尿病模型组。结论:青钱柳中含有多糖复合物。这种复合物具有显著的降血糖活性并能增强糖尿病小鼠对葡萄糖的耐受力。

10个采收期青钱柳HPLC指纹图谱建立及4种成分测定

目的建立10个采收期(3月末、5月初、7月初、8月末、9月初、9月末、10月初、10月末、11月初、11月中)青钱柳Cyclocarya paliurus(Batal)Iljinsk的HPLC指纹图谱,并测定4种成分含有量。方法青钱柳80%甲醇提取液的分析采用Agilent C18色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm);乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长365nm(指纹图谱)和254 nm(含有量测定);体积流量1.0 m L/min;柱温35℃。再对指纹图谱中的共有峰进行主成分分析。结果 10批样品指纹图谱中有15个共有峰,相似度0.920~0.981,4个主成分累计贡献率达92.82%,峰1、2(绿原酸)、12、14的权重值较大。绿原酸、异槲皮苷、槲皮素、山柰酚分别在0.008 492~0.566 1、0.004 370~0.291 3、0.000 551 5~0.036 77、0.001 287~0.085 77 mg/m L范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.2%、97.5%、96.3%、97.0%,RSD分别为1.35%、1.14%、2.21%、1.74%。各采收期样品中4种成分含有量差异明显,其中绿原酸与异槲皮苷在7月初最高,而槲皮素和山柰酚分别在8月末和9月初最高。结论该方法可用于青钱柳的质量控制,并为筛选其最佳采收期提供依据。

青钱柳茎段离体培养研究

以青钱柳嫩枝茎段为外植体,研究了基本培养基、茎段部位、取样时间和植物生长调节剂对其分化的影响。当以青钱柳嫩枝茎段为外植体进行组织培养时,改良MS是适宜的基本培养基,5月份是最佳的取样时期,顶芽下1、2节的茎段分化效果较好;在培养基中添加0.5 mg.L-1反式玉米素(ZT)能有效地促进分化,萌发率最高能达到90.9%,平均每茎段分化的芽数达到1.5个。所以,茎段离体培养是青钱柳快速繁殖的有效途径。

青钱柳甜味成分的研究

从青钱柳［Ｃｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ（Ｂａｔａｌ．）Ｉｌｊｉｎｓｋ］嫩叶中分离得到３个（Ⅰ～Ⅲ）有强甜味的化合物。根据理化性质和光谱数据，确定化合物Ⅰ的结构为２０，２４－环氧－达玛烷－（３β，１２β，２０Ｓ，２４Ｒ）－１２－Ｏ－β－Ｄ－吡喃鸡纳糖基－３－Ｏ－α－Ｌ－呋喃阿拉伯糖甙，为一新化合物，命名为青钱柳甙Ｉ（ｃｙｃｌｏｃａｒｉｏｓｉｄｅＩ）。

HPLC-DAD波长切换法同时测定青钱柳提取物中5种有效成分

目的：建立HPLC—DAD波长切换技术同时测定青钱柳提取物中异槲皮苷、槲皮素、山奈酚、山奈素、熊果酸5种有效成分的含量测定方法。方法：采用ThermoSyncronisC，8色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为乙腈-0．2％磷酸水溶液，流速1．0mL·min^-1柱温35℃，进样量20仙L，异槲皮苷、槲皮素、山奈酚、山奈素检测波长为360Irlm，熊果酸检测波长为210nm。结果：醇提物中各成分含量为0．6485％、0．0467％、0．0148％、0．0017％、0．0359％，水提物中异槲皮苷含量为0．0952％。异槲皮苷、槲皮素、山奈酚、山奈素、熊果酸的质量浓度分别在15．625—625μg·mL^-1（r=0．9996）、4．05～162μg·mL-1（r=0．9998）、0．66～66μg·mL^-1（r=0．9999）、0．09～28．8μg·mL^-4（r：0．9998）、2．87-114．8μ·mL^-1（r=0．9998）内与色谱峰峰面积．呈良好的线性关系，平均回收率（n=6）均在100．24％、99．07％、101．52％、102．11％、97．24％（n=6）。结论：75％乙醇提取青钱柳中成分，基本可提取完全，残渣再用水提后只有微量的异槲皮苷；文章所建立的同时测定青钱柳中5种成分的含量，该方法简便、准确，具有较好的重复性和稳定性，为青钱柳盾量的全面评价提供了科举依据．

青钱柳离体胚的组织培养研究

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计方案对影响其萌发和成苗的4种因素进行了研究。结果表明:低温(4℃)层积有利于青钱柳离体胚的萌发,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和生长的关键因素,低温层积后的离体胚适宜培养基组合为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L、萌发率达97.5%,适宜成苗的培养基组合为改良MS+NAA0.5mg/L、成苗率达93.33%,而6-BA对离体胚成苗则有抑制作用。

不同外源激素对青钱柳茎段组织培养的影响

以改良MS培养基为基本培养基,研究不同种类、不同配比的外源激素对青钱柳当年生茎段组织培养的影响。结果表明:青钱柳茎段愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+2.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率为83.33%,不定芽诱导适宜培养基是改良MS+1.5 mg/L6-BA+0.001 mg/L NAA,诱导率为50.00%,不定根诱导的适宜培养基为改良MS+5.0 mg/LIBA,诱导率为40.00%。

青钱柳叶提取物耦合茉莉酸甲酯对猕猴桃涂膜的保鲜效果

为研究能有效延长猕猴桃(Actinidia chinensis Planch)保质期的方法,选取壳聚糖为基质,添加一定浓度的茉莉酸甲酯和青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk)叶提取物对猕猴桃进行涂膜处理,分别采用单因素试验和正交试验,分析贮藏期间猕猴桃品质的变化规律,筛选和优化猕猴桃复合涂膜保鲜液的最佳配比组合。结果显示,壳聚糖0.8g/100mL、青钱柳叶提取物1.5g/100mL和茉莉酸甲酯0.12mmol/L的复合保鲜液对猕猴桃涂膜保鲜效果最佳;贮藏保鲜第16天时,最佳复合涂膜处理组的腐烂指数是对照组的1/4,固酸比始终低于对照组(P<0.05)。结果表明该复合涂膜保鲜液可供猕猴桃常温环境贮藏保鲜应用参考。

青钱柳叶的结构鉴定

目的研究青钱柳叶片的形态结构。方法利用叶表皮离析方法、脉序离析法、石蜡制片和扫描电镜法对青钱柳叶片的形态结构进行了研究。结果青钱柳叶表皮有许多小乳突,腺毛,盾状鳞片和非腺毛表皮毛;气孔器不规则型,仅分布于下表面;靠近表皮的叶肉组织中有规律地分布含簇晶的细胞;主脉中维管组织环状,封闭,具有一个副维管束;二级脉在叶缘内分支,相互连接形成脉环,三级脉及顶型,脉间区内充满分支的自由结束的小细脉。结论首次研究青钱柳叶的结构,利用这些叶微观结构特征能够将青钱柳和胡桃科其他植物区分开来。

青钱柳对家兔血液循环的影响

为探讨青钱柳[Cyclocarya Paliurus(Batal.)Iljinsk]对家兔动脉血压、心率及其肠系膜微循环的影响,经耳缘静脉注射0.1%青钱柳溶液后,分别观察给药后(1、5、10、20、30、60 min)家兔微动、静脉管径及血流速度、血流量变化、动脉血压、心率的变化情况。结果表明:耳缘静脉注射0.1%青钱柳溶液后,家兔动脉血压、心率显著降低(P<0.05或P<0.01),而肠系膜微动、静脉血管扩张,血液流速加快,血流量增加(P<0.05或P<0.01)。可见,青钱柳具有扩张肠系膜微动、静脉血管及加快血液流速、增加血流量、降低动脉血压和心率的作用。

香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中生理生化指标的影响及各指标的相关性分析

采用离体胚培养法,研究了在培养基中添加81.33 mg.L-1(半抑制浓度,IC50)香草酸的条件下,青钱柳〔Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.〕离体胚萌发过程中部分生理生化指标的变化,并对各指标间的相关性进行了分析。结果表明:随培养时间的延长,处理组(培养基中添加81.33 mg.L-1香草酸)及对照组离体胚的粗脂肪和蛋白质含量均呈逐渐降低的趋势,淀粉和可溶性糖含量均呈先降低后升高的趋势,异柠檬酸裂合酶(ICL)、酸性磷酸酶(AP)、碱性磷酸酶(ALP)和过氧化物酶(POD)活性以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGDH)联合活性均高于培养初期,且ICL、POD、AP和ALP活性不断提高;但处理组的粗脂肪和蛋白质含量均高于对照组且变化幅度相对较小,淀粉含量在培养前期高于对照、在培养后期低于对照,可溶性糖含量总体上高于对照,ICL、AP和ALP活性及G-6-PDH和6-PGDH联合活性的提高幅度整体上小于对照,培养后期POD活性显著高于对照。相关性分析结果表明:青钱柳离体胚萌发过程中粗脂肪和蛋白质含量与各种酶活性间均呈显著或极显著的负相关。研究结果显示:香草酸对青钱柳离体胚萌发过程中各种酶的活化产生抑制作用,导致主要贮藏物质的转化受阻,从而影响胚的萌发。