青钱柳多糖调节胰岛和肝脏葡萄糖转运蛋白4转位干预2型糖尿病大鼠的作用机制

目的 观察青钱柳多糖调节胰岛和肝脏葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)转位改善2型糖尿病(T2DM)大鼠外周胰岛抵抗的作用。方法 建立T2DM大鼠模型(给予高脂饲料后注射链脲佐菌素35 mg·kg^(-1)),将造模成功的大鼠随机分为模型对照组,青钱柳多糖提取物小、大剂量组(5,10 g·kg^(-1))和盐酸二甲双胍组(0.25 g·kg^(-1)),每组9只,给药8周。测定空腹血糖、血脂变化;苏木精-伊红染色法观察胰岛和肝脏病理形态的改变;免疫组化法观察胰岛磷酸化磷酯酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶1(p-Akt1)、GLUT4蛋白的表达;免疫荧光观察肝脏和胰岛GLUT4转位。结果 与模型对照组比较,青钱柳多糖提取物小、大剂量组和盐酸二甲双胍组大鼠胰岛和肝脏结构较完整,血糖下降(P<0.05),高密度脂蛋白升高(P<0.05),胰岛p-PI3K、p-Akt1、GLUT4蛋白表达升高(P<0.05),肝脏和胰岛GLUT4转位增强(P<0.05)。结论 青钱柳多糖可调节T2DM大鼠糖脂紊乱,其机制可能是增强胰岛p-PI3K、p-Akt1、GLUT4蛋白的表达,促进肝脏和胰岛GLUT4转位,从而调节外周胰岛抵抗。

青钱柳多糖提取工艺的研究

以江西修水青钱柳粉末为原料,采用热水浸提法提取青钱柳多糖,研究了提取温度、提取次数、提取时间和料液比对青钱柳多糖得率的影响,并以提取次数、提取时间和料液比为考察因素,在90℃下,采用L9(33)正交试验确定了热水浸提法提取青钱柳多糖的最佳工艺参数,即提取次数为三次,提取时间为150min,液料比为1:8。在上述提取条件下,热水浸提法提取青钱柳多糖得率可达到6.54%。

青钱柳多糖降血脂作用的研究

通过体内和体外试验研究青钱柳多糖降血脂作用。胰脂肪酶活力测定法体外检测青钱柳多糖降血脂效果,高脂乳剂喂养小鼠2周造成高脂血症动物模型,尔后分组给药,多糖高剂量组(300 mg/kg)、中剂量组(200 mg/kg)、低剂量组(100 mg/kg)、辛伐他汀组(3 mg/kg)、辛伐他汀+多糖中剂量组(3 mg/kg+200 mg/kg)、模型组,持续喂养4周,每2周检测小鼠血清中胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量。结果表明,在体外试验中,青钱柳多糖对脂肪酶活性具有一定的抑制作用。动物试验表明青钱柳多糖能极显著地降低高脂血症动物的TC、LDL值(P<0.01);且在治疗高血脂时呈现一定的量效关系,以高剂量(300 mg/kg/d)最佳。降脂作用与辛伐他汀相当,且具有辅助辛伐他汀降脂的作用。

青钱柳多糖对人宫颈癌HeLa细胞和人脐带内皮细胞生长的影响

目的:研究青钱柳多糖(polysaccharides isolated from Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskjk,PCP)对人宫颈癌HeLa细胞和人脐带内皮细胞(HUVEC)生长的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)法,观察不同浓度、不同提取方法获得的PCP对HeLa细胞和HUVEC细胞生长的影响。结果:PCP I、II在50、100、200、400μg/ml浓度条件下,均可极显著性抑制HeLa细胞生长(p<0.01)。PCP I、II对HUVEC细胞生长有一定影响,但增殖抑制率不高;在PCP抑癌作用最高的浓度处(200μg/ml),PCP对HUVEC细胞的生长没有影响。结论:PCP极显著性抑制HeLa细胞的生长;在P C P抑癌作用最高的浓度处,P C P对H U V E C细胞的生长没有影响。

青钱柳多糖组分及其降血糖活性研究

采用超声波萃取法 ,从胡桃科植物青钱柳中提取一种具有降血糖活性的多糖复合物 ,提取物得率为9.6 %。用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型验证了青钱柳多糖的生物活性 ,ig青钱柳提取物 4周后 ,小鼠血糖值比糖尿病模型组降低了 41.3 %。葡萄糖耐量实验表明

青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂肪酸合成酶(FAS)表达影响

为探讨青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂肪酸合成酶基因表达的影响,通过建立高血脂模型,每天以不同剂量的多糖(100、200和400 mg/kg体重)进行灌胃,以辛伐他汀(4 mg/kg体重)做为阳性对照,持续喂养四周,采用半定量PCR和Western Blot检测小鼠肝脏和脂肪组织FAS mRNA和蛋白表达水平。结果表明,青钱柳多糖能抑制小鼠肝脏组织中FAS mRNA表达水平(P>0.05),而对脂肪组织中FAS mRNA表达水平影响不明显;青钱柳多糖能显著抑制小鼠肝脏组织中FAS蛋白表达水平,以高剂量的多糖效果最佳,与模型组相比,差异极显著(P<0.01);同时也能轻微抑制脂肪组织中FAS蛋白表达水平。结果提示,青钱柳多糖对高脂血症小鼠各内脏中FAS mRNA和FAS蛋白表达具有一定的影响作用。

青钱柳多糖对人胃癌MGC_803细胞生长的影响

本文研究青钱柳多糖(polysaccharides isolated from Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskjk,PCP)对人胃癌MGC_803细胞生长的影响。采用噻唑蓝(MTT)法检测PCP对MGC_803细胞生长的影响;Annexin法检测PCP对MGC803细胞诱导凋亡的作用。实验结果表明PCP在50、100、200、400μg/mL浓度条件下,均可极显著性抑制人胃癌MGC_803细胞生长(P<0.01),抑制率可达65.07%,细胞凋亡率可达25.44%。说明青钱柳多糖具有抑制人胃癌MGC803细胞生长的生物活性。

超声波法提取青钱柳多糖

利用超声波法提取青钱柳多糖,研究了超声时间、超声功率、料液比对青钱柳多糖得率的影响,并采用正交试验对青钱柳多糖提取工艺进行优化设计。结果表明,超声波法提取青钱柳多糖的最佳条件为:超声时间70 m in,超声功率1 200 W,料液比1∶10。超声功率和超声时间对提取青钱柳多糖的影响分别为显著差异和极显著差异,因此利用超声波法提取青钱柳多糖可以缩短提取时间,提高得率。

青钱柳多糖降血糖作用研究

目的:探讨胡桃科植物青钱柳中是否含有具有降血糖作用的多糖复合物。方法:采用超声波萃取法提取多糖成分。用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型验证青钱柳多糖的生物活性。结果:青钱柳中多糖复合物含量为9.6％。灌胃青钱柳多糖四周后,小鼠血糖值比糖尿病模型组降低了41.3％。给予小鼠葡萄糖后,青钱柳多糖组小鼠血糖值显著低于糖尿病模型组。结论:青钱柳中含有多糖复合物。这种复合物具有显著的降血糖活性并能增强糖尿病小鼠对葡萄糖的耐受力。

微波提取青钱柳多糖的研究

使用微波辅助提取技术,通过单因素实验和L9(34)正交试验对多糖提取工艺进行了优化,并与常规热水提取法进行比较。结果表明:以水为溶剂,青钱柳多糖提取的最佳工艺为:提取功率为1400 W,提取时间为30 min,料液比质量体积1 g∶20 mL,提取得率为2.55%,;与常规提取法相比,微波辅助提取法具有提取时间短、提取率高等优点。

青钱柳多糖活性炭脱色工艺

采用热水浸提法提取青钱柳多糖,用活性炭脱色,以脱色率和多糖保留率为指标,在单因素试验的基础上采用正交试验法对多糖脱色的最佳工艺进行优选。结果表明:活性炭吸附法对青钱柳多糖具有良好的脱色效果,最佳工艺条件为:温度为40℃,吸附时间40min,活性炭用量1%,pH值3.5。在此条件下脱色率可达(80.3±2.1)%,多糖保留率为(55.6±2.5)%,预测模型的计算结果和试验结果基本一致。

富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠血糖、血脂和免疫力的影响

研究富硒青钱柳多糖(selenium polysaccharide from Cyclocarya paliurus(Batal)Ijinskaja,Se-CPP)对糖尿病模型小鼠血糖、血脂和免疫力的影响。高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌霉素建立小鼠糖尿病模型,以生理盐水、青钱柳多糖(Cyclocarya paliurus(Batal)Ijinskaja polysaccharide,CPP)、CPP+亚硒酸钠、亚硒酸钠、Se-CPP低、中、高剂量(0.2、0.6、1.8 g/(kg·d))、消渴丸连续灌胃给药42 d。末次给药后检测小鼠葡萄糖耐量、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)含量、甘油三酯(triglyceride,TG)含量、抗氧化酶活力、免疫器官指数及小鼠脾淋巴细胞转化指数。结果表明:连续给药42 d后,Se-CPP低、中剂量组小鼠血糖、血清TC和TG水平均低于CPP组和CPP+亚硒酸钠组,Se-CPP较CPP具有更好的抗氧化活力和提高糖尿病小鼠免疫力的功效。

青钱柳多糖的提取及含量测定

采用苯酚硫酸法,对青钱柳叶多糖的水提取法、提取工艺以及不同采集期的多糖含量进行了研究.结果表明,水提法的精密度RSD%为2.89%,重现性RSD%值为1.72%,稳定性RSD%值为3.1%;通过L9（3^4）正交试验得出水提法提取青钱柳多糖的最佳提取时间为7h,料液比为1∶20,pH 9;青钱柳叶在5～8月的多糖含量为2.19%.

青钱柳嫩叶中多糖的含量测定

目的建立青钱柳叶中多糖含量的测定方法。方法采用苯酚-浓硫酸显色法,于490nm处测吸光度。结果青钱柳嫩叶中多糖含量为0.6532%;平均回收率99.03%;r=0.9991。结论方法简便、快速,结果准确、可靠,适合多糖的含量测定。

青钱柳多糖对体外诱导肝细胞脂肪变性的影响

目的探讨青钱柳多糖对体外诱导肝细胞脂肪变性的影响。方法以人肝L-02细胞作为研究对象,用四环素建立肝细胞脂肪变性模型。将实验分为诱导组、继续诱导组及脱离诱导组,用油红0染色观察细胞形态和细胞内脂滴的形成情况,并测定细胞内三酰甘油(TG)含量的变化。结果青钱柳多糖(40～120μg/mL)可明显降低细胞内TG值,并呈剂量依赖性。结论青钱柳多糖可能通过减少细胞内TG的生成阻止肝细胞脂肪变性。

青钱柳质量标准的研究

目的建立青钱柳Cyclocarya paliurus(Batal.)ljinsk.的质量标准。方法测定12批样品水分、灰分、浸出物含有量,TLC法定性鉴别槲皮素和山柰酚,HPLC法定量测定其含有量,苯酚-浓硫酸显色法测定多糖含有量。结果水分、总灰分、酸不溶性灰分、水浸出物、醇浸出物平均含有量分别为11.05%、5.81%、1.70%、11.25%、10.16%。TLC斑点清晰,专属性强。槲皮素、山柰酚分别在0.004 953~0.022 29、0.005 748~0.028 74 mg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率分别为97.1%(RSD=2.59%)、97.9%(RSD=2.86%);多糖在0.021 22~0.095 58 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均加样回收率97.2%(RSD=2.42%)。在各批样品中,3种成分含有量均有明显差异。结论青钱柳中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水浸出物、醇浸出物含有量分别不得超过13.0%、7.0%、2.0%、13.5%、12.0%,而槲皮素、山柰酚、多糖含有量以干燥品计,分别不得低于0.040%、0.070%、0.60%。

富硒青钱柳多糖对α-葡萄糖苷酶及HepG2细胞葡萄糖消耗的影响

以α-葡萄糖苷酶和Hep G2细胞作为体外受体模型,研究富硒青钱柳多糖(Se-CPP)体外降血糖活性,并与青钱柳多糖(CPP)、CPP+硒酵母、CPP+亚硒酸钠复配物比较。结果表明,Se-CPP对α-葡萄糖苷酶活性具有良好的抑制效果且呈现明显的剂量依赖性,其半抑制浓度(IC50)为0.054 mg/m L,低于阿卡波糖、CPP、CPP+硒酵母、CPP+亚硒酸钠复配物。适宜浓度的Se-CPP可促进胰岛素抵抗状态Hep G2细胞对葡萄糖的消耗,效果显著优于CPP、CPP+硒酵母、CPP+亚硒酸钠复配物(p<0.05)。

富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠降血糖研究

目的:探究富硒青钱柳多糖(Se-CPP)对糖尿病模型小鼠降血糖的影响。方法:高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌霉素建立小鼠糖尿病模型,随机分为模型组、普通青钱柳多糖(CPP)组、无机硒组、无机硒+CPP组、SeCPP低、中、高剂量组及消渴丸组,分别以生理盐水、CPP、CPP+无机硒、无机硒、Se-CPP低、中、高剂量及消渴丸连续灌胃给药42 d。检测给药21 d、35 d及42 d的小鼠口服葡萄糖耐量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,小鼠脾淋巴细胞转化指数SI。结果:给药21 d时,消渴丸组和Se-CPP中剂量组AUC均明显低于模型组(P<0.05);给药35 d时,消渴丸组、Se-CPP低、中剂量组AUC均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);给药42 d时,各给药组AUC均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)。各给药组小鼠血清GSH-Px活力均高于模型组(P<0.01),其中Se-CPP中剂量组GSH-Px活力最高。在淋巴细胞转化实验中,Se-CPP中、高剂量组小鼠SI值均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。SeCPP对正常小鼠血糖无不良影响。结论:Se-CPP降血糖效果优于CPP、无机硒、CPP+无机硒,其中Se-CPP中剂量组效果最为显著。

国内近10年青钱柳多糖研究进展

青钱柳多糖在降血脂、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等方面表现出较强的生物学活性,其中降血脂和降血糖作用已成为近年来研究热点。本文对国内近10年报道的青钱柳多糖提取纯化、含量测定及生物学活性研究进行综述,以期为青钱柳多糖深入研究及产业开发提供参考。

青钱柳叶片解剖结构及黄酮、三萜和多糖的组织化学定位观察

青钱柳〔Cyclocarya paliurus（Batal.）Iljinskaja〕隶属于胡桃科（Juglandaceae）青钱柳属（Cyclocarya Iljinskaja）,为中国特有的单种属植物,具有较高的药用、材用和观赏等价值[1];青钱柳叶片中含有多种次生代谢成分,具有多种药理活性.目前,对于青钱柳次生代谢成分的研究主要集中在提取、分离和纯化及不同种源间次生代谢成分的变化规律等方面,其中,