选择性COX-2抑制剂引起心血管风险的研究进展

非甾体抗炎药(non-steroid anti-inflammatory drugs,NSAIDs)是一种有效的、广泛使用的抗炎镇痛药物,其对环氧合酶(cyclo-oxygenase,COX)亚型(COX-1、COX-2)的抑制作用将引起不同的反应,选择性COX-2抑制剂将显著增加不良心血管事件的风险,随着此类药物使用的增加和临床循证证据的积累,其带来的心血管风险引起了越来越多学者的关注。笔者通过归纳分析最新发表文献对选择性COX-2抑制剂引起心血管风险的研究进行综述,以期辅助临床合理用药,减少不良反应,提高用药安全性。

COX6B2在胃癌组织中高表达并影响患者的远期预后:基于抑制p53信号调控胃癌细胞的增殖及细胞周期

目的分析COX6B2在胃癌组织中的表达对患者远期预后的影响及其作用机制。方法基于公共数据库、患者病历资料分析COX6B2在胃癌和癌旁组织中表达量及其对患者预后的影响;富集分析COX6B2在胃癌中可能发挥的作用;应用慢病毒转染技术干预COX6B2的表达;通过CCK-8、流式细胞术及免疫印迹实验验证其生物学功能。结果TCGA数据库、免疫组化、免疫印迹和荧光定量PCR检测显示,COX6B2在胃癌组织中高表达(P<0.05);Kaplan-Meier plotter数据库和K-M曲线显示,COX6B2高表达组生存期短(P<0.05);统计分析发现COX6B2在胃癌组织高表达与临床病理分期、CEA及CA19-9密切相关(P<0.05),COX6B2高表达、CEA≥5μg/L及CA19-9≥37 kU/L均是影响患者术后5年生存率的独立危险因素(P<0.05)且COX6B2表达量对患者远期预后有一定预判价值(P<0.05);GO及KEGG富集结果显示,COX6B2主要参与细胞周期的调控等;CCK-8和流式检测显示,上调COX6B2促进细胞增殖,通过增加G1/S期细胞比例调控细胞周期(P<0.05)。免疫印迹结果显示,COX6B2抑制胃癌细胞中p53和p21的表达(P<0.05)。结论COX6B2在胃癌组织中高表达且影响患者远期预后,其可能通过调控细胞周期而影响胃癌恶性增殖的过程。

lincRNA Cox2通过miR-129-5p/AMPK调控BCG感染的巨噬细胞糖酵解进程

[目的]探究lincRNA Cox2对BCG(Bacillus Calmette-Guérin)感染的RAW264.7巨噬细胞糖酵解进程的调控作用,阐明Mtb与巨噬细胞之间的相互作用,为结核病的诊断和治疗提供新的靶点。[方法]利用小干扰RNA敲减lincRNA Cox2的表达,以及使用miR-129-5p mimics过表达载体,结合BCG感染,通过实时荧光定量PCR检测lincRNA Cox2、miR-129-5p和促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达量;乳酸含量检测试剂盒检测乳酸(LD)的分泌情况;平板涂布法检测巨噬细胞菌载量情况;双荧光素酶报告基因系统验证lincRNA Cox2与miR-129-5p以及miR-129-5p与AMPK的互作关系;蛋白免疫印迹检测AMPK(AMP依赖蛋白激酶)及糖酵解途径中关键基因HK1(己糖激酶1)、PKM2(丙酮酸激酶2)和LDHA(乳酸脱氢酶)的表达变化。[结果]BCG感染12 h能够极显著上调RAW264.7巨噬细胞中lincRNA Cox2的表达(P=0.000013),与BCG组相比,siRNA+BCG组中AMPK(P=0.000771)、HK1(P=0.00323)、PKM2(P=0.000135)和LDHA(P=0.002532)的表达量以及乳酸的分泌量(P=0.020802)发生显著上调,而促炎因子IL-1β(P=0.000451)、TNF-α(P=0.000147)、IL-6(P=0.0001)的表达发生显著下调,菌载量试验表明siRNA+BCG组中的巨噬细胞菌载量显著下调(P=0.000127)。双荧光素酶报告基因系统表明lincRNA Cox2和miR-129-5p存在相互作用关系并以AMPK为靶基因。BCG感染RAW264.7巨噬细胞12 h后极显著下调miR-129-5p的表达(P=0.000156),与BCG组相比,miR-129-5p mimics+BCG组中AMPK(P=0.000262)、HK1(P=0.019524)、PKM2(P=0.001658)和LDHA(P=0.000887)表达量以及乳酸分泌量(P=0.044952)发生显著下调。[结论]lincRNA Cox2通过海绵吸附miR-129-5p并靶向AMPK,促进BCG感染的RAW264.7巨噬细胞糖酵解进程。

氧化苦参碱通过COX-2/PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬对MG63骨肉瘤细胞的促凋亡机制

目的基于环氧合酶2(COX-2)/PTEN诱导激酶1(PINK1)/帕金森病蛋白2(Parkin)信号通路介导的线粒体自噬研究氧化苦参碱对人骨肉瘤MG63细胞的促凋亡机制。方法取MG63细胞经2.0、4.0、8.0 mg/mL的氧化苦参碱和6μmol/L的5-氟尿嘧啶(5-FU)作用后,检测细胞凋亡率、凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]表达水平、线粒体膜电位降低比例、线粒体自噬水平以及PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达水平。采用PINK1小干扰RNA(PINK1 siRNA)干扰PINK1的表达,将细胞分为对照组、PINK1 siRNA组、氧化苦参碱组、PINK1 siRNA+氧化苦参碱组,检测细胞中PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表达水平和线粒体膜电位降低比例以及细胞凋亡率。采用慢病毒感染使COX-2过表达,将细胞分为对照组、氧化苦参碱组、COX-2组、COX-2+氧化苦参碱组,检测细胞中COX-2、PINK1和Parkin蛋白表达水平以及线粒体膜电位降低比例。结果经氧化苦参碱干预后,细胞凋亡率,Bax、PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表达水平,线粒体自噬水平和线粒体膜电位降低比例均显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与氧化苦参碱组比较,PINK1 siRNA+氧化苦参碱组细胞中PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表达水平和细胞凋亡率以及线粒体膜电位降低比例均显著降低(P<0.05)。与氧化苦参碱组比较,COX-2+氧化苦参碱组细胞中COX-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),PINK1、Parkin蛋白表达水平和线粒体膜电位降低比例均显著降低(P<0.05)。结论氧化苦参碱可通过抑制COX-2表达,介导线粒体自噬信号通路PINK1/Parkin的过度活化,从而促进骨肉瘤细胞凋亡。

PGE2、COX-2表达与牙槽骨成骨活性、内氧水平的关系

目的:探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达与牙槽骨成骨活性、内氧水平的关系。方法:选择2021年3月—2023年3月收治的56例慢性牙周炎且牙槽骨感染的患者为试验(牙周炎)组,同一时段53例健康牙槽骨为对照组。采用组织块培养法进行成骨细胞培养,采用改良Kaplow碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色鉴定细胞,利用ELISA试剂盒检测COX-2、PGE2、破骨细胞抑制因子(osteoclastogenesis inhibitory factor,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κb ligand,RANKL)等的表达,比较2组患者PGE2、COX-2、OPG、内氧水平、ALP和RANKL的表达水平,并分析其相关性。采用SPSS 27.0软件包对数据进行统计学分析。结果:牙周炎组的PGE2、COX-2、RANKL显著高于对照组,而OPG、内氧水平、ALP显著低于对照组(P<0.05)。PGE2、COX2呈高度正相关,与OPG、内氧水平和ALP呈高度负相关,但与RANKL呈高度正相关(P<0.05)。结论:PGE2、COX-2表达与ALP、内氧水平呈高度负相关,可考虑通过增加内氧水平,加大氧分压,并通过药物调节ALP水平,改变牙周炎或其他类似疾病的炎症状况。

分阶段三联疗法联合益生菌对幽门螺旋杆菌胃炎患者的效果及其对COX-2和E-cadherin的影响

目的:探讨分阶段三联疗法联合益生菌在幽门螺旋杆菌(Hp)胃炎患者中的治疗效果及其对环氧化酶2(COX-2)和钙粘附蛋白E(E-cadherin)的影响。方法:选取92例幽门螺旋杆菌胃炎患者作为研究对象,按照治疗方式不同分为对照组与观察组,每组各46例。对照组采用分阶段三联疗法治疗;观察组联合益生菌治疗,两组患者均治疗两个疗程(31 d为1个疗程),比较两组患者胃肠激素、C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、COX-2、E-cadherin、Hp根除率及不良反应发生情况。结果:干预后,两组患者PGⅠ、PGⅡ及G-17均降低,且观察组低于对照组(P<0.05);PGR水平均升高,且观察组高于对照组(P<0.05);干预后,两组炎症反应减轻及COX-2、E-cadherin水平均降低,且观察组低于对照组(P<0.05);疗程完毕后,观察组Hp根除率高于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率无统计学差异(P>0.05)。结论:分阶段三联疗法联合益生菌用于Hp胃炎患者中,能调节胃肠激素,降低炎症反应和COX-2、E-cadherin水平,可提高Hp根除率,且药物安全性较高,值得推广应用。

环氧化酶2抑制剂parecoxib对C2C12骨骼肌细胞分化的影响及机制研究

目的:探讨环氧化酶2抑制剂帕瑞昔布(parecoxib)对C2C12小鼠骨骼肌细胞分化的影响及其分子机制。方法:CCK-8法检测不同浓度的parecoxib处理后C2C12细胞的活力;分化培养基诱导C2C12小鼠骨骼肌细胞48 h后,将细胞分为对照组(control组)和parecoxib组继续分化48 h。免疫荧光检测肌管细胞分化成熟的标志蛋白肌球蛋白重链(MyHC),qPCR和Western印迹分别检测My HC、肌原纤维Ⅰ型(Myh7)、Ⅱa型(Myh2)、Ⅱb型(Myh4)、Ⅱx型(Myh1)、肌生成决定因子(MyoD)、肌生成因子5(Myf5)、肌生成素(myogenin)的基因和蛋白表达。结果:0、100、150、200、250、300μmol/L的parecoxib均不影响细胞活力。与对照组相比,parecoxib组MyHC阳性肌纤维数量减少,肌管融合受损,分化程度降低,MyHC、MyHCⅡa、MyHCⅡb、MyHCⅡx、MyoG、MyoD和Myf5的mRNA水平降低(t=19.04、53.93、72.38、33.72、15.32、3.061、18,均P<0.05),MyHCⅠ的mRNA水平升高(t=17.12,P<0.01)。Western印迹结果显示,与对照组相比,parecoxib组MyHC、MyHCⅡa、MyHCⅡb、MyHCⅡx、MyoG和MyoD蛋白水平降低(t=7.297、7.852、11.43、227、80.14、11.76,均P<0.01),MyHCⅠ蛋白水平升高(t=5.891,P<0.01)。结论:Parecoxib可能通过下调MyoG、MyoD和Myf5的表达,抑制C2C12骨骼肌细胞的分化。

ESR、CRP和COX-2对骨科创伤术后感染诊断价值及与SIRS相关性

目的探究血清红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、环氧合酶-2(cycloxygenase-2,COX-2)指标水平对骨科开放性损伤患者术后感染诊断价值与全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)评分的相关性。方法选取中国人民武装警察部队重庆市总队医院骨科2019年7月至2022年7月诊治的98例骨科开放性损伤患者作为研究对象,根据患者术后是否感染分为感染组和未感染组。感染组43例,男25例,女18例;年龄21~65岁,平均(56.19±4.33)岁。未感染组55例,男29例,女26例;年龄21~66岁,平均(56.37±4.49)岁。采用双抗体酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA)检测患者血清ESR、CRP和COX-2水平;对患者行常规血液检查和生命体征的监测,计算SIRS评分;对比两组ESR、CRP和COX-2水平;分析血清ESR、CRP和COX-2对骨科创伤患者术后感染诊断价值;对比骨科创伤感染组和未感染组手术前后SIRS评分差异;Pearson分析ESR、CRP和COX-2与SIRS评分相关性。结果术后两组ESR、CRP和COX-2水平均升高,且感染组表达明显高于未感染组(P<0.05);ESR、CRP和COX-2联合检测在骨科术后感染患者中诊断评估中的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under curve,AUC)为0.899,具有较高的特异性以及敏感度,显著高于单独ESR、CRP检测,且联合诊断对骨科术后感染患者具有高度一致性(P<0.05);术后3 d两组SIRS评分均升高,且感染组评分明显高于未感染组(P<0.05);Pearson分析骨折术后感染患者ESR、CRP和COX-2与SIRS评分相关性,发现均与SIRS评分存在显著正相关(P<0.001)。结论血清ESR、CRP和COX-2在骨科术后感染患者中呈现高表达,联合检测对患者感染发生诊断价值较高;且血清ESR、CRP和COX-2与SIRS评分呈现显著正相关,临床可对患者实行指标及时检测,以降低术后感染的发生率。

基于Cox健康行为互动模式心理干预对T2DM患者疾病不确定感自我表露状况及应对方式的影响

目的探讨基于Cox健康行为互动模式的心理干预对2型糖尿病患者疾病不确定感、自我表露状况及应对方式的影响。方法将88例2型糖尿病患者按抛币法随机间分为研究组和对照组,各44例。两组均给予常规干预,研究组在此基础上给予基于Cox健康行为互动模式的心理干预,干预6个月。干预前后检测血糖(空腹血糖、糖化血红蛋白及餐后2 h血糖)水平,采用疾病不确定感量表评估疾病不确定感,采用医学应对方式问卷评估患者的应对方式,采用痛苦表露指数量表评估自我表露状况。结果干预后两组空腹血糖、糖化血红蛋白及餐后2 h血糖水平均较干预前显著降低(P<0.01),但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。干预后两组疾病不确定感程度较干预前显著改善(P<0.01),研究组疾病不确定感显著优于对照组(P<0.05)。干预后两组医学应对方式问卷的屈服、回避评分显著低于干预前(P<0.01),面对评分显著高于干预前(P<0.01),研究组显著优于对照组(P<0.01)。干预后两组自我表露状况较干预前显著改善(P<0.01),研究组自我表露状况显著优于对照组(P<0.01)。结论基于Cox健康行为互动模式的心理干预能有效改善2型糖尿病患者的疾病不确定感及应对方式,提高其自我表露水平,有效促进其心身健康发展。

基于ERK/COX-2信号通路研究电针干预原发性痛经机制

目的观察电针对原发性痛经(PDM)大鼠子宫组织ERK/COX-2信号通路相关蛋白及因子表达的影响,探讨电针治疗PDM的可能机制。方法将40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组和布洛芬组,每组10只。筛选处于动情间期的大鼠进行造模,除空白组外,其余组连续10 d于股部皮下注射苯甲酸雌二醇,第11日腹腔注射缩宫素诱发疼痛,空白组注射0.9%氯化钠溶液。电针组造模同时电针“关元”“三阴交”,20 min/d,布洛芬组造模同时予布洛芬灌胃,连续10 d。观察各组大鼠行为学变化,HE染色观察子宫组织病理变化,ELISA检测子宫组织前列腺素(PG)F2α和PGE2含量,Western blot检测子宫组织ERK1/2、p-ERK1/2和环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠扭体次数、扭体评分显著增加(P<0.01);子宫内膜大量空泡样变性、坏死,中性粒细胞浸润,病理评分显著升高(P<0.01);子宫组织PGF2α含量显著增加,PGE2含量显著减少(P<0.01),ERK1/2、p-ERK1/2、COX-2蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组和布洛芬组大鼠扭体潜伏期显著延长,扭体次数、扭体评分显著降低(P<0.05,P<0.01);子宫内膜较少空泡样变性、坏死,内膜剥脱范围较小,水肿、炎症程度减轻,病理评分显著降低(P<0.05,P<0.01);子宫组织PGF2α含量显著减少,PGE2含量显著增加(P<0.01),ERK1/2、p-ERK1/2、COX-2蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论电针可能通过抑制ERK/COX-2信号通路相关蛋白表达调节PG水平,有效缓解PDM大鼠疼痛症状,改善子宫病理损伤。

PGE_(2)在环氧合酶-2抑制剂保护脓毒症肠屏障功能中的作用

目的探讨PGE_(2)在环氧合酶-2抑制剂保护脓毒症肠屏障功能中的作用及机制。方法按随机数字表法将大鼠分为六组,假手术组、帕瑞昔布钠对照组、脓毒症组、帕瑞昔布钠治疗组、COX-2抑制剂组和帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组,每组8只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,ELISA检测大鼠血清和肠组织中TNF-α、IL-6水平和抗炎细胞因子IL-10水平,蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测前列腺素E_(2)(PGE_(2))、前列腺素合酶-1(mPGES-1)和前列腺素受体EP4的蛋白表达,于假手术或CLP术后24 h取四组大鼠肠组织,RT-PCR法检测PGE_(2)、mPGES-1、EP4的mRNA表达水平。结果与假手术组比较,脓毒症大鼠血清和肠组织中TNF-α、IL-6和IL-10增加(P<0.05),帕瑞昔布钠治疗后能够降低TNF-α、IL-6水平(P<0.05),IL-10水平增加(P<0.05);术后24 h时脓毒症组大鼠肠组织PGE_(2)、mPGES-1、EP4和EP2 mRNA表达水平比假手术组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与脓毒症组比较,帕瑞昔布钠治疗脓毒症大鼠后,肠组织PGE_(2)、mPGES-1、EP4的mRNA水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肠组织前列腺素E_(2)(PGE_(2))、前列腺素合酶-1(mPGES-1)和前列腺素受体EP4的蛋白表达水平比假手术组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),帕瑞昔布钠治疗后,肠组织前列腺素E_(2)(PGE_(2))、前列腺素合酶-1(mPGES-1)和前列腺素受体EP4的蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);术后24h时,与假手术组比较,脓毒症组、帕瑞昔布钠治疗组、COX-2抑制剂组及帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组肠组织TNF-α、IL-10和IL-6的水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与脓毒症组比较,帕瑞昔布钠治疗组、COX-2抑制剂组及帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组肠组织TNF-α、IL-6的水平明显降低,IL-10的水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与帕瑞昔布钠治疗组比较,COX-2抑制剂组及帕瑞昔布钠-COX-2抑制剂组肠组织TNF-α、IL-6的水平降低,IL-10的水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论帕瑞昔布钠可通过抑制炎症反应来减轻脓毒症时肠屏障功能的损伤,其机制可能通过COX-2-mPGES-1-PGE_(2)-EP4通路发挥抗炎的作用。

五味子甲素对炎性肠病小鼠结肠NF-κB/COX-2信号通路的影响

目的:考察五味子甲素对三硝基苯磺酸所致炎性肠病小鼠核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/环氧合酶2(cyclooxygenase,COX-2)通路的抑制作用。方法:采用三硝基苯磺酸灌肠诱导小鼠炎性肠病,采用ELISA、免疫组化、WB法测定小鼠体内NF-κB及COX-2表达,采用RT-PCR法测定小鼠结肠组织NF-κB及COX-2 mRNA表达,观察小鼠体质量、腹泻症状和疾病活动指数。结果:炎性肠病小鼠体内NF-κB、COX-2含量、蛋白及其mRNA表达增多,五味子甲素可抑制NF-κB、COX-2 mRNA和蛋白表达,抑制炎性肠病小鼠体质量减轻和疾病活动指数,改善小鼠腹泻情况。结论:五味子甲素可通过抑制NF-κB/COX-2通路的激活而抑制炎症反应,对三硝基苯磺酸诱导的炎性肠病小鼠具有治疗作用。

肾上腺皮质癌组织中COX-2蛋白表达与临床病理特征及预后的关系研究

目的探讨肾上腺皮质癌(ACC)组织中环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达与临床病理特征及预后的关系。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中获得51例经手术病理确诊为ACC的患者,术后随访3年。比较癌组织、癌旁组织中COX-2蛋白阳性表达率;分析不同临床病理特征ACC患者癌组织中COX-2蛋白阳性表达率的差异;多因素Cox比例风险模型分析影响ACC患者预后的因素;分析癌组织中COX-2阳性表达与ACC患者生存的关系。结果ACC患者癌组织中COX-2阳性表达率高于癌旁组织中COX-2阳性表达率(P<0.05)。低分化、Ⅲ期、CD56阳性、Syn阳性、Ki-67表达≥10%、微血管侵犯的ACC患者癌组织中COX-2阳性表达率分别高于中高分化、Ⅰ和Ⅱ期、CD56阴性、Syn阴性、Ki-67表达<10%、未合并微血管侵犯的ACC患者癌组织中COX-2阳性表达率(P<0.05)。多因素Cox比例风险模型分析结果显示,病理分级[RR=4.904(95%CI:2.018,11.918)]、分期[RR=6.025(95%CI:2.479,14.644)]、内分泌功能[RR=3.927(95%CI:1.616,9.545)]、Ki-67[RR=4.011(95%CI:1.650,9.748)]、COX-2阳性[RR=5.114(95%CI:2.104,12.429)]是影响ACC患者术后复发的危险因素(P<0.05);病理分级[RR=4.914(95%CI:2.022,11.942)]、分期[RR=6.633(95%CI:2.729,16.119)]、内分泌功能[RR=4.003(95%CI:1.647,9.728)]、COX-2阳性[RR=5.296(95%CI:2.179,12.872)]是影响ACC患者术后生存的危险因素(P<0.05)。COX-2阳性表达患者与COX-2阴性表达患者的无病生存曲线及总存活曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ACC患者癌组织中COX-2蛋白阳性表达与临床病理特征及预后有关,COX-2阳性患者预后不良风险高。

血清CKLF-1、COX-2水平对支气管哮喘患儿临床分型的价值

目的探讨血清趋化素样因子-1(CKLF-1)、环氧化酶-2(COX-2)水平对支气管哮喘患儿临床分型的评估价值。方法选取川北医学院附属医院儿科2019年9月至2020年9月收治的支气管哮喘患儿102例作为疾病组,另于同期选取90例健康体检儿童作为健康组。两组均采集静脉血进行血清CKLF-1、COX-2水平检测并对比。另以痰液嗜酸性粒细胞(EOS%)≥2%为标准将支气管哮喘患儿分为嗜酸细胞性哮喘(EA)和非嗜酸细胞性哮喘(NEA)2个亚型,对比2个亚型的年龄、性别、病程、肺功能1秒率和血清CKLF-1、COX-2水平,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CKLF-1、COX-2水平对支气管哮喘患儿EA型的评估价值。结果疾病组血清CKLF-1、COX-2水平明显高于健康组(P<0.05);结果显示102例支气管哮喘患儿中EA型为52例,占总数的50.98%,NEA型为50例,占总数的49.02%;EA型的年龄、性别、病程、肺功能1秒率与NEA型比较差异均无统计学意义(P>0.05),EA型的血清CKLF-1、COX-2水平均高于NEA型(P<0.05);ROC曲线分析结果显示血清CKLF-1与COX-2水平联合评估支气管哮喘临床EA型的灵敏度和曲线下面积(AUC)分别为94.23%、0.958,均高于单独评估(P<0.05),联合评估特异度(92.00%)与单独评估对比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论血清CKLF-1、COX-2水平均对支气管哮喘患儿临床分型具有一定的评估价值,但二者联合评估效能更高。

COX-2/sEH双抑制剂PTUPB抑制肝星型细胞活化减轻小鼠肝纤维化

目的探讨花生四烯酸(ARA)经细胞色素P450(CYPs)及环氧合酶2(COX-2)代谢途径在非酒精性脂肪肝(NAFLD)相关肝纤维化中的作用,并从肝星形细胞(HSC)活化的角度探讨其机制。方法采用雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,高糖高脂饲养(HFD)诱导小鼠NAFLD相关肝纤维化模型。给予小鼠每天皮下注射COX-2/可溶性环氧化物水解酶(sEH)双抑制剂PTUPB(5 mg/kg)。12周后观察COX-2/sEH双抑制对小鼠NAFLD相关肝纤维化的影响。记录小鼠体重变化;检测小鼠葡萄糖耐受性;HE染色观察小鼠肝组织病理损伤;油红O染色观察小鼠肝组织脂质堆积;Masson染色及Western blot法检测肝组织胶原含量;Real-time PCR法检测小鼠肝组织基质金属蛋白酶抑制因子相关基因表达;Western blot法检测PTUPB对棕榈酸(PA)诱导的肝星形细胞JS1活化的影响。结果PTUPB可显著降低HFD小鼠的体重,提高小鼠葡萄糖耐受性,减轻肝组织病理损伤、脂质堆积和胶原沉积;PTUPB亦可降低HFD小鼠肝组织基质金属蛋白酶抑制因子Timp1及Timp2的基因表达;在细胞水平观察到PTUPB可降低PA诱导的JS1细胞的活化。结论抑制ARA的COX-2/sEH代谢可减轻HFD诱导的小鼠NAFLD相关肝纤维化,其机制与抑制HSC的活化有关。

慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者外周血单个核细胞IP-10和COX-2水平变化及其临床意义探讨

目的 探讨乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血单个核细胞(PBMC)干扰素诱导蛋白-10(IP-10)和环氧化酶-2(COX-2)水平变化及其临床意义。方法 2019年1月~2021年3月我院收治的73例HBV-ACLF患者和95例慢性乙型肝炎(CHB)患者,分离PBMCs,采用RT-PCR法检测PBMC IP-10和COX-2mRNA水平,采用化学发光法检测血清HBsAg水平,采用ELISA法检测血清IFN-γ水平。结果 HBV-ACLF组血清IFN-γ及PBMC IP-10 mRNA和COX-2 mRNA水平分别为(59.3±7.9)ng/L、(0.9±0.1)和(1.6±0.2),显著高于CHB组【分别为(35.8±6.2)ng/L、(0.6±0.1)和(0.5±0.1),P<0.05】;HBV-ACLF患者PBMC IP-10和COX-2水平与血清HBsAg水平呈负相关(r=-0.828,P<0.05;r=-0.795,P<0.05);29例死亡组血清IFN-γ及PBMC IP-10 mRNA和COX-2 mRNA水平分别为(67.5±8.1)ng/L、(1.2±0.2)和(1.9±0.4),显著高于44例生存组【分别为(53.9±7.4)ng/L、(0.7±0.1)和(1.4±0.2),P<0.05】;应用PBMC IP-10和COX-2水平评估HBV-ACLF患者预后的AUC分别为0.835和0.828,两者差异无统计学意义(P>0.05);32例PBMC IP-10 mRNA≥0.9患者90 d生存率为46.9%,显著低于41例IP-10 mRNA<0.9患者的70.7%(P<0.05),38例COX-2 mRNA≥1.7患者90 d生存率为47.4%,显著低于35例COX-2 mRNA<1.7患者的74.3%(P<0.05)。结论 检测HBV-ACLF患者PBMC IP-10和COX-2水平可能能帮助预测其短期预后,值得进一步研究。

大麻素Ⅱ型受体对LPS诱导小鼠黑质区COX-2和iNOS基因表达的影响

目的探索大麻素Ⅱ型(CB2)受体对脂多糖(LPS)诱导小鼠黑质(SN)区炎症反应的作用。方法将18只8周龄雄性野生型(WT)C57BL/6小鼠随机分为WT对照组、WT LPS组和WT LPS+JWH133(CB2受体激动剂)组,12只8周龄雄性CB2受体敲除(CB2-KO)C57BL/6小鼠随机分为CB2-KO对照组和CB2-KO LPS组。对照组小鼠单次双侧SN立体定位注射生理盐水,其余各组小鼠注射等体积的LPS,然后连续腹腔注射JWH133或生理盐水14 d。应用实时荧光定量PCR技术检测各组小鼠SN中环氧化酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达。结果与WT对照组相比,WT LPS组小鼠SN区COX-2和iNOS基因表达水平升高,差异有统计学意义(F=20.9、21.4,q=5.536、5.518,P<0.01);JWH133能明显抑制LPS诱导的COX-2和iNOS基因表达上调(q=5.170、4.553,P<0.05);与WT LPS组相比,CB2-KO LPS组小鼠COX-2和iNOS基因表达明显上调,差异有统计学意义(q=4.150、5.496,P<0.05)。结论激活CB2受体能够抑制LPS诱导小鼠SN区COX-2和iNOS基因的表达,缺失CB2受体能够促进LPS诱导小鼠SN区COX-2和iNOS基因的表达。

孤儿核受体NR4A1通过NF-κB/COX-2对氧化应激诱导的血栓形成的保护作用及机制研究

目的 分析孤儿核受体NR4A1对氧化应激诱导的血栓形成的保护作用及机制。方法 选取健康SD大鼠30只,随机分为对照组、模型组和NR4A1组,每组10只。用FeCl_3构建颈动脉血栓大鼠模型,用NR4A1激动剂促进大鼠NR4A1的表达。称取3组小鼠的血栓重量;采用苏木精-伊红染色观察颈动脉组织切片的血栓形成情况;采用蛋白质印迹法检测核转录因子-κB(NF-κB)/环氧合酶-2(COX-2)信号轴相关蛋白表达水平;采用硝酸还原酶法检测NO水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测内皮素-1(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平;采用放射免疫分析法测定血栓素(TX)B2、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)水平。结果 对照组未形成血栓,NR4A1组大鼠血栓重量明显低于模型组,3组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组与NR4A1组大鼠颈动脉组织NR4A1蛋白表达水平均低于对照组,且模型组低于NR4A1组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组与NR4A1组大鼠颈动脉组织p-NF-κB p65及COX-2蛋白表达水平均高于对照组,且模型组高于NR4A1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组、NR4A1组大鼠血清NO、eNOS、6-keto-PGF1α水平及NO/ET-1均低于对照组,且模型组均低于NR4A1组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组、NR4A1组大鼠血清ET-1、PAI-1、TXB2水平及TXB2/6-keto-PGF1α均高于对照组,且模型组均高于NR4A1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NR4A1对NF-κB/COX-2信号通路相关蛋白表达具有负向调控作用,进而减轻大鼠深静脉血栓模型中的血栓和炎症。

经典型霍奇金淋巴瘤组织中COX-2、fascin蛋白表达水平及其与预后的相关性

目的探究经典型霍奇金淋巴瘤组织中COX-2、fascin蛋白表达水平及其与预后的相关性。方法选取经典型霍奇金淋巴瘤患者50例,采用免疫组化法检测组织COX-2、fascin蛋白表达水平,结合患者临床及随访资料分析COX-2、fascin蛋白表达与预后的相关性。结果COX-2阳性表达者42例(84%),fascin阳性表达者44例(88%)。将患者的临床特征分别与COX-2、fascin表达进行分析比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。50例CHL患者中,截止到随访结束有19例死亡患者,3年OS率为62%。COX-2、fascin表达阳性的OS率明显低于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示,COX-2阳性、fascin阳性是影响CHL患者3年OS预后独立影响因素(P<0.05)。结论CHL组织中COX-2、fascin蛋白均呈高表达,且与CHL患者的预后相关,对CHL患者的预后具有一定判断作用。

COX2和CDX2在喉鳞癌中的表达特点及其与喉鳞癌患者预后的关系

目的研究COX2和CDX2在喉鳞癌发生发展过程中的表达特点及其与喉鳞癌患者预后的关系。方法采用免疫组化和计算机图像分析技术,观察喉息肉、喉乳头状瘤及喉鳞癌中COX2和CDX2的表达特点,并对其中的25位喉鳞癌患者进行随访以期了解COX2和CDX2对患者预后的影响。结果(1)COX2在喉鳞癌中的表达低于喉息肉(P=0.004)和喉乳头状瘤(P=0.001),T3-T4期喉鳞癌COX2表达比T1-T2期高,差异有统计学意义(P=0.001);有淋巴结转移喉鳞癌组高于无淋巴结转移喉鳞癌组,低、中、高分化喉鳞癌中的表达逐渐升高,但差异均无统计学意义(P>0.05);(2)CDX2在喉息肉、喉乳头状瘤中表达均较弱,在喉鳞癌中不表达,且差异无统计学意义(P>0.05);(3)COX2蛋白表达阳性或阴性对患者的预后无影响。结论(1)COX2低表达可能与喉鳞癌的发生有关,但不能预测喉鳞癌患者的预后;(2)CDX2可能不是喉鳞癌的危险因素。