虎头兰组培快速繁殖技术的研究

以虎头兰杂交种"黄色热带"为材料,应用组培技术对原球茎的诱导、继代增殖和芽的分化、原球茎的切割方式、试管苗生根及移栽进行了研究,初步建立一套快繁技术体系。结果表明:以MS+6BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L利于继代增殖,繁殖系数高达4.5,有50%原球茎直接分化成完整植株,既可保持较高的繁殖系数又可直接获得生根苗用于移栽;适宜生根的培养基为MS+NAA1.0mg/L+AC0.5%,生根率为95%;第一、二代继代培养添加香蕉匀浆汁天然复合物对虎头兰原球茎增殖有明显作用;采用纵切方式切割原球茎,有利于提高原球茎的增殖;活性炭对试管苗的生根有促进作用;苔藓是虎头兰移栽较好的基质,在适宜的温度和湿度条件下,试管苗移栽成活率可达95%。

黄蝉兰与素花虎头兰正反交育种及其种子无菌萌发效果的研究

选择黄蝉兰和素花虎头兰作为亲本，采用正反交杂交法进行此两种兰花的杂交育种试验，并在无菌条件下对其所获得的杂交种子进行培养。结果表明：此两种兰花的花粉亲和力较强，其杂交蒴果的结果率为79％～86％，无明显差异，且正反交对两种杂交种子的萌发率没有明显影响；1／2MS＋6-BA2．5mg／L＋NAA0．5mg／L适合于此两种兰花杂交种子的初代培养以及原球茎的扩繁。

外施CO_2时光照度对大花蕙兰试管苗生长和叶片气孔特征的影响

以大花蕙兰(Cymbidium hookerianum)为试材,在外施CO2条件下使用CP培养容器,比较不同光照度(14.4,30.6,54.0μmol.m-2.s-1)对大花蕙兰试管苗生长和叶片气孔特征的影响.结果显示,改善CP容器内CO2浓度水平后,提高光照度可明显促进大花蕙兰试管苗的生长.高光照度(54.0μmol.m-2.s-1)下培养的试管苗与标准光照度(30.6μmol.m-2.s-1)相比,气孔密度虽较低,但其形态指标、叶绿素指数、气孔器大小和面积等重要测定指标却有明显提高;与低光照度(14.4μmol.m-2.s-1)相比,高光照度下培养的试管苗除株高、叶数、根长和气孔密度外,其它重要指标也均有明显提高,表明外施CO2条件下高光照度对促进大花蕙兰试管苗的生长和提高其品质效果明显.

碧玉兰×虎头兰种间杂交胚培养技术研究

以兰科兰属碧玉兰(Cymbidium lawianum)为母本,虎头兰(C.hookerianum)为父本进行杂交,分期采收种子进行培养,研究兰属附生兰杂交胚培养技术。结果表明,杂交种子完全成熟约需1年时间,授粉90 d的幼胚即具有良好的萌发能力;添加活性炭可促进杂交胚萌发,提高成活率,早期胚培养以1/2 MS+NAA 1 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+活性炭2 g/L萌发最佳;芽、根分化培养则以1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L+香蕉泥100 g/L效果最好;壮苗培养基中加入香蕉汁和2,4-D效果明显,以1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA0.5 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L+香蕉泥100 g/L最理想;注意光、温、湿的配合,炼苗成活率达90%以上。

虎头兰菌根中酸性磷酸酶的定位及活性变化

为揭示虎头兰与共生的菌根真菌间的相互作用,应用细胞化学的方法定位研究了虎头兰菌根中入侵的菌丝被消化过程的酸性磷酸酶(AcPase)活性变化,结果表明:AcPase反应出现在虎头兰菌根皮层细胞的细胞壁和膜系统上.在菌根真菌侵入虎头兰根部细胞,入侵菌丝被溶酶体包围并消解,直到被消解成空腔或彻底解体,最后溶酶体也随之消失的过程中,虎头兰细胞内的细胞壁、胞间隙、细胞膜、胞间连丝等处AcPase的活性呈现由高到低,最后完全消失的变化;在溶酶体和菌丝细胞上AcPase的活性则表现出由低到高,然后又逐渐降低直至完全消失.被菌丝侵入的虎头兰细胞发生了一系列的变化:细胞壁严重扭曲变形,线粒体、叶绿体及大量小液泡等细胞器消失,细胞核变形逐渐降解直至消失;溶酶体大量出现并包围和消解菌丝细胞,菌丝细胞被彻底消化,溶酶体消失;细胞内又重新出现线粒体、液泡、更新核等细胞器,更新核还可不断的进行有丝分裂.

不同培养基支持体对大花蕙兰试管苗生长的影响

在常规培养条件下进行大花蕙兰试管苗培养,培养基支持体采用琼脂(CK)、Gellangum、蛭石、蛭石与珍珠岩的混合物(体积比为1∶1)和水草.结果表明:Gellangum和琼脂处理试管苗的株高、根数、根长等形态指标及地上部、根部、总体鲜干质量、叶绿素指标等显著高于其他处理;但Gellangum和琼脂试管苗之间的差异不显著.试管苗的根系活力以Gellangum最高,其次,水草、琼脂(对照)处理的根系活力相对较低,但水草处理试管苗的其它测定指标均显著低于琼脂处理;对蛭石和蛭石与珍珠岩的混合物处理试管苗来说,其叶片气孔密度或气孔大小和面积显著高于琼脂外,其它指标都显著低于对照处理.Gellangum可以替代琼脂作为大花蕙兰试管苗的培养基支持体,但水草、蛭石、蛭石与珍珠岩(体积比为1∶1)的混合物不适于作大花蕙兰培养基的支持体.

虎头兰组培快繁技术体系研究

通过对虎头兰无胚乳种子无菌萌发过程中原球茎诱导、继代增殖、试管苗生根等不同发育时期的培养基配方筛选研究,初步建立了一套组培快繁技术体系,结果表明:虎头兰无胚乳种子在温度(25±2)℃、光照强度1 500～2 000 lx、光照时间12 h/d的条件下,较适宜的原球茎诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,适宜的增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,适宜的生根培养基为1/2MS+NAA1.0 mg/L。

影响大花蕙兰试管苗培育的因素研究

试验结果表明ＭＳ、１／２ＭＳ、ＫＣ、ＶＷ四种培养基对大花蕙兰（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ）原球茎增殖倍数没有明显影响，但其发芽率与生根率表现各异。原球茎增殖培养基中加入０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１ｍｇ／１Ａｄ有利于原球茎增殖倍数的提高，但降低生根率。单独施用０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ明显提高原球茎增殖倍数与生根率。四种不同细胞分裂素处理中，以１ｍｇ／ＬＢＡ最有利于原球茎增殖倍数的提高。２５℃较２０℃有利于原球茎增殖。井字型切割缩短继代培养周期，有利于原球茎增殖周期，有利于原球茎增殖。大花蕙兰试管苗在采用一般炼苗方法可获得９５％以上的移栽成活率。

大花蕙兰催花栽培试验

试验表明:夏季海拔800m以上地区的高日温、低夜温和较大的昼夜温差有利于大花蕙兰花芽的分化和形成,及时抹芽和合理施肥是大花蕙兰催花栽培的关键技术措施。夏季炎热地区,利用高山基地进行大花蕙兰的催花栽培,是一种可行方法。

大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子无菌萌发及成苗途径

采用无菌播种技术,对粉绿红唇大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子进行萌发试验,并设计配制多种培养基进行原球茎继代增殖、丛芽分化、生根试验。通过对种子萌发、原球茎发育及成苗过程的观察,得出杂交子代的繁殖技术及成苗途径。

大花蕙兰栽培技术探讨

从介绍大花蕙兰形态特征及生物学特性出发,阐述了其栽培技术要点,包括温室大棚的搭建、栽培介质、栽培及日常管理等方面,为大花蕙兰生产提供了技术参考。

虎头兰白化茎诱导、再生及人工种子制作

以虎头兰(Cymbidium hookerianum)类原球茎为材料,研究不同激素及激素浓度对类原球茎诱导产生白化茎的影响、后续白化茎的再生以及利用白化茎进行人工种子制作和保存。结果表明,NAA和6-BA各添加0.1 mg/L,类原球茎诱导产生白化茎效率最高,产生的白化茎段在NAA/6-BA为2.0/0.1 mg/L时获得最高的类原球茎诱导率,平均为80.40%,并且类原球茎诱导个数较高,平均为1.36个。产生的白化茎尖在培养基上都能再生成无根植株并且这些无根植株在1/2MS+20.0 g/L蔗糖+7.5 g/L琼脂的培养基上可生根和壮苗。利用白化茎尖包埋产生的人工种子在MS+1.0 mg/L 6-BA培养基上萌发率最高,平均为86.67%。保存6周后,在4℃下保存的人工种子萌发率最高,平均为48.00%。

虎头兰类原球茎诱导、增殖及保存

以虎头兰组培苗为试材,采用单因素和正交实验设计,研究了添加不同种类激素和含量对类原球茎诱导的影响以及不同培养基类型、不同激素含量、活性炭含量对类原球茎增殖的影响,并对诱导出的类原球茎进行包埋保存,以期为虎头兰的组培繁殖和种质保存提供新的方法。结果表明:无菌苗诱导类原球茎添加3mg·L^-1 TDZ最佳,30d诱导率到达80%,90d达到100%;类原球茎增殖的最佳培养基为花宝1号3g·L^-1+0.1mg·L^-1 NAA+3mg·L^-16-BA+1g·L^-1活性炭,增殖系数可达4.03;类原球茎通过3.5%海藻酸钠溶液和0.1mol·L^-1 CaCl2包埋在4℃黑暗条件下保存120d,萌发率可以达到48%,植株再生率可达44%。