隔山消治疗溃疡性结肠炎的机制:基于UPLC-QE-MS、网络药理学及代谢组学技术

目的基于UPLC-QE-MS与网络药理学挖掘隔山消防治溃疡性结肠炎(UC)的靶点及通路,并结合代谢组学技术探讨作用机制。方法采用UPLC-QE-MS技术鉴定隔山消醇提物化学成分,基于Swiss Target Prediction、GeneCards、Pubchem等数据库筛选相应靶点,获取核心PPI,进行GO、KEGG富集分析。将40只雄性C57小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组(0.2 g/kg)、隔山消组(2.28 g/kg),每组10只,除正常组外,其余各组自由饮用2.5%DSS诱导UC模型,造模期间给药组给予药物灌胃干预。通过体质量变化率、DAI得分评价治疗效果;HE及AB-PAS染色观察结肠组织病理变化;Western blotting技术检测JAK2、STAT3蛋白水平;代谢组学技术鉴别差异代谢物并挖掘代谢通路。结果鉴定出隔山消醇提物化学成分240个,其中甾体类(高含量)19个,得到隔山消(甾体类)靶点177个,UC基因5406个,隔山消与UC交集基因117个,JAK2、STAT3等为核心PPI,在脂质与动脉粥样硬化等通路富集显著。动物实验结果显示,经隔山消治疗后,小鼠体质量变化率上升、DAI评分显著下降(P<0.05),肠组织病理改变明显缓解,JAK2、STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05)。鉴定出正常组、模型组及隔山消组之间交集差异代谢物83个,以甘油磷脂、类花生酸、氨基酸成分为主,与甘油磷脂代谢等通路相关。整合分析显示隔山消治疗UC的核心靶点参与了代谢物的调节。结论隔山消可通过调节JAK2、STAT3等核心靶点表达及内源性代谢物水平来缓解脂质及氨基酸代谢紊乱,发挥治疗UC的作用。

基于UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS隔山消化学成分的鉴定

目的采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)对苗药隔山消中的化学成分进行定性分析。方法隔山消75%甲醇提取液采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;进样量2μL。质谱采用ESI源,在正、负离子模式下分别采集数据。通过比对特征碎片离子及各类化合物的一般裂解规律,结合相关文献对化学成分进行定性鉴别。结果共鉴别出64个化合物,包括甾类、苯乙酮类、香豆素类等。结论该研究采用UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS技术鉴定隔山消中的化学成分,为进一步阐明隔山消中的有效物质基础提供依据。

隔山消不定根多糖提取工艺优化及提取物的抗氧化活性研究

为优化隔山消多糖提取工艺,该研究以生物反应器培养的隔山消不定根为实验材料进行闪式提取,并以多糖得率为指标,利用正交设计法对提取温度、料液比、提取时间进行了优化。结果表明:提取温度为60℃、料液比为1∶40(g∶mL)、提取时间为70 s时,多糖得率最高,达到7.24%。为了将隔山消不定根应用于产品生产中,开展了抗氧化活性评价研究。结果表明:DPPH和ABTS^(+)清除力和铁离子螯合力随提取物浓度的增加而增加,清除DPPH和ABTS^(+)自由基的半数效应浓度分别为0.39和16 mg/mL。该研究结果表明隔山消不定根在抗氧化产品的开发及生产中具有很好的应用价值。

隔山消水溶性部位对阿托品抑制小鼠胃肠功能的影响

目的:研究隔山消水溶性部位对阿托品所致小鼠胃肠运动及胃肠激素分泌抑制的影响。方法:将实验小鼠随机分为空白组、模型组(硫酸阿托品)、阳性药组(多潘立酮组)、隔山消水溶性部位低、中、高剂量组,多潘立酮组以0. 5 mg/10 g灌胃给予多潘立酮混悬液,隔山消低、中、高组灌胃分别给予0. 18、0. 36及0. 72 g/kg隔山消水溶性部位提取物混悬液,空白组和模型组均给予生理盐水,连续给药4 d,每天2次;末次给药30 min后,除空白组外其余5组小鼠均腹腔注射硫酸阿托品建立胃肠功能障碍模型(0. 5 mg/kg),取血、取胃及小肠组织,采用酚红测定各组胃排空率、小肠推进率,同时检测血清中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、血管活性肠肽(VIP)的含量。结果:与模型组相比,隔山消水溶性部位低、中、高剂量组胃排空率和小肠推进率均显著提高(P<0. 01),其中中剂量组与多潘立酮组相当;胃肠激素水平测定结果表明隔山消水溶性部位中、高剂量组显著提高了模型小鼠的MTL、GAS含量(P <0. 05或P <0. 01),降低了VIP含量(P <0. 05)。结论:隔山消水溶性部位提取物能促进小鼠胃排空和肠推进,其机制可能与促进胃肠道MTL及GAS的释放和抑制VIP的释放有关。

隔山消总黄酮的提取工艺优化及其抗氧化特性

采用乙醇回流法提取隔山消(Cynanchum wilfordii)的总黄酮,通过正交实验优化了总黄酮的提取工艺,并就总黄酮对活性氧自由基的清除作用进行了初步研究.结果表明:总黄酮的最佳提取工艺参数为乙醇体积分数60%,提取温度75℃,提取时间60 min,料液比1∶30(g/m L);在此条件下总黄酮的平均提取率为10.79%,平均加样回收率为98.78%;总黄酮对羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O-2·)的清除率可分别达到29.2%和36.7%,说明总黄酮对·OH和O-2·有较好的清除能力.

苗药隔山消与白族/彝族民族药物隔山消的专利研究

记录了近二十年来针对萝藦科鹅绒藤属植物苗药隔山消和牦牛儿苗科老鹳草属植物紫地榆(亦名隔山消)的医药用途的中国专利进展,并进行了比较分析。从起源、品种、定名、民间习用、功能主治、配伍规律等对二者进行了总结,为进一步研究白族、彝族民间药紫地榆提供了展望和建议。

青阳参及其近缘种的生药学比较

目的:针对青阳参Cynanchum otophyllum Schneid.存在混淆种类的情况,对青阳参和与其相混淆的隔山消C.wilfordii(Maxim.)Hemsl.和昆明杯冠藤C. wallichii Wight进行生药学鉴别。方法:运用原植物鉴别、性状鉴别和显微鉴别方法对青阳参及其近缘种进行鉴别。结果:通过性状特征和显微组织构造比较可以区分青阳参、隔山消和昆明杯冠藤。结论:应用生药学方法可以进行青阳参及其近缘种的种间鉴别。

河北植物区系的三个首次记录植物

本文报道了两个河北新记录种和一个河北新纪录变种,它们是鹅绒藤属(白前属)的隔山消Cynanchuw wilfordii(Maxim.) Hemsl.,紫珠属的白棠子树Callicapa dichotoma(Lonr.) K.Koch,水马齿属的东北水马齿Callitriche palustris(L.) var.clegans(V.Petr.) Y.L.Chang,其中水马齿科为河北新纪录科。

隔山牛皮消、耳叶牛皮消和戟叶牛皮消中四个C_(21)-甾体苷元含量比较研究

传统中药或民间应用对隔山牛皮消(Cynanchum wilfordii)、耳叶牛皮消(Cynanchum auricutalum)和戟叶牛皮消(Cynanchum bungei)三种药材基元植物基本上做白首乌或隔山消混用,其主要活性成分为C_(21)-甾体类成分。三种药材均含有告达亭(caudatin)、去乙酰萝藦苷元(deacymetaplexigenin)、开德苷元(kidjolanin)和加加米宁(gagamine),本文利用HPLC分析技术,检测四个C_(21)-甾体化合物在三种药材中的含量,为合理使用三种药材提供依据。平均每克药材中C_(21)-甾体含量(mg/g)研究结果表明:告达亭在隔山牛皮消中含量(水解前/水解后=0.3542/9.7142)最高、耳叶牛皮消(水解前/水解后=0.2577/4.0825)次之、戟叶牛皮消(水解前/水解后=0.0734/0.1895)最少;其次开德苷元在耳叶牛皮消中含量(水解前/水解后=0.1102/0.6094)比戟叶牛皮消(水解前/水解后=0.0751/0.3225)和隔山牛皮消(水解前/水解后=0.0736/0.2813)高,而后两者含量相近;加加米宁、去乙酰萝藦苷元在三种药材中含量差别不明显。

培养基种类及IBA浓度对隔山消不定根生长及生物活性物质积累的影响

为了筛选出隔山消不定根培养的适宜培养基种类和吲哚丁酸(IBA)浓度,该研究探究了五种基本培养基种类(MS、SH、WPM、White、B_(5))和不同IBA浓度(0.5、1、1.5、2、2.5mg·L^(-1))对隔山消不定根生长和C_(21)留苷、多糖和多肽积累的影响。结果表明:在五种培养基种类中,隔山消不定根生物量、三种生物活性物质(C2i笛苷、多糖和多肽)含量及其生产量在MS培养基中均最高。在IBA浓度筛选试验中发现,添加IBA浓度为1.5mg·L^(-1)时隔山消不定根的生物量鲜重(22.2g)和生物量干重(1.7g)均达到最高,多糖及多肽含量也达到均最高,分别为168.0mg·g^(-1)DW和80.4mg·L^(-1)DW,此浓度下多糖和多肽生产量分别达到2889.2mg·L^(-1)和1383.1mg·L^(-1);然而C_(21)留苷积累在IBA2mg·L^(-1)时最佳,其含量为145.6mg·L^(-1),生产量达到2460.8mg·L^(-1)。综合考虑下,培养隔山消不定根的培养基选为MS并加人1.5mg·L^(-1)IBA较适宜。

青阳参及其近缘种的RAPD研究

目的针对青阳参Cynanchumot ophyllum Schneid.存在混淆种类和种内变异较大的情况,对青阳参和与其相混淆的隔山消C. wilfordii(Maxim.)Hemsl.和昆明杯冠藤C. wallichii Wight进行种间鉴别,并对青阳参的4个居群进行遗传多样性分析。方法运用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术进行分析,用Shannon指数和Nei指数评价青阳参的遗传多样性,用UPGMA类平均法进行聚类分析亲缘关系。结果利用筛选出的10个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到72条带,其中多态性带有70条,多态性百分率为97.22%。由Shannon指数计算青阳参4个居群内的遗传多样性比率为68.52%,高于居群间的31.48%;同时由Nei指数估计青阳参4个居群中有69.44%的遗传变异来自居群内,高于居群间的30.56%。采用UPGMA聚类法得出反映各种间亲缘关系的树状图。结论运用RAPD方法可以进行青阳参和隔山消两个种同昆明杯冠藤的种间鉴别;虽然居群间已有较高分化,但青阳参遗传变异主要分布在居群内。

白首乌的研究进展

白首乌是传统补益类中药材,具有补益肝肾、养血益精、强筋壮骨、乌须生发、抗衰老之功效,被历代医家奉为延年防老的珍品。近年来,国内学者对不同品种的白首乌进行了药理活性及物质基础的相关研究。现将白首乌近年来的研究新进展进行综述,通过对不同品种白首乌C21甾体总苷、苯酮类化合物结构和含量的差异,不同品种白首乌多糖类成分和营养物质含量的差异,以及不同化学成分的药理活性进行系统归纳,为进一步合理利用白首乌提供科学依据。