Triterpene Acids from Cynoglossum amabile

Cynoglossum amabile Stapf et Drumm is widely distributed in southern China, which has been used as an anti-inflammatory, antihepatitis, anticystitis agent in Chinese folk medicine. However, only a few phytochemical researches have been performed . Therefore, a systematic chemical investigation of it was carried out. In this work, we further investigated the chemical constituents and ten compounds were obtained, three of which were triterpene acids.

基于UPLC-QTOF-MS^(E)的倒提壶指纹图谱的建立和多指标含量测定

目的对倒提壶进行化学成分分析,建立倒提壶高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并对5种成分进行定量分析,对不同来源的倒提壶进行质量评价。方法采用超高效液相色谱四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-QTOF-MSE)结合UNIFI数据库对倒提壶的化学成分进行鉴定;采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速为1 mL·min^(-1);柱温为30℃;检测波长为354 nm;进样量为10μL。建立15批倒提壶的HPLC指纹图谱,进行相似度评价,采用2种化学模式识别方法综合分析不同来源倒提壶的差异,并对5种成分进行定量分析。结果在正离子模式下共鉴定出8个化合物,负离子模式下鉴定出16个化合物;建立了倒提壶HPLC指纹图谱共有模式,确定了14个共有峰,指认了5种成分,相似度均大于0.900,5种成分定量分析方法符合方法学要求。结论基于UPLC-QTOF-MS^(E)分析结果所建立的HPLC指纹图谱和多指标成分定量分析方法准确可靠,可为倒提壶的质量控制提供参考。

小花琉璃草多糖提取工艺研究

[目的]优选小花琉璃草的多糖提取工艺。[方法]以小花琉璃草主茎粉末为原料,采用热水浸提法提取小花琉璃草多糖,选取提取温度、提取时间、料液比和提取次数4个影响因素进行单因素试验,通过L9(34)正交试验确定小花琉璃草多糖提取的最佳提取工艺;并用苯酚-硫酸测定多糖含量。[结果]提取次数对小花琉璃草多糖含量影响最大,其次依次为料液比、提取时间和提取温度。最佳提取工艺条件为:提取次数2次,料液比1∶30(g/ml),提取温度90℃,提取时间3 h。[结论]在最佳提取条件下,多糖提取率最高可达2.28%。

倒提壶(紫草科 Boraginaceae)提取物抗菌活性的初步研究

采用抑菌圈法和抑制菌丝生长速率法,研究倒提壶地上部分醇提物的石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相和水相4个极性部位对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌5种细菌及可可葡萄座腔菌、尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、多主棒孢霉和尖孢炭疽菌5种植物病原真菌的抑制作用。结果表明:不同溶剂提取物的抑菌活性差异较大。石油醚相对5种供试的细菌菌株均无作用;氯仿相对大肠杆菌和普通变形杆菌具有抑制作用,其最低抑菌质量浓度(MIC)均为3mg/mL;乙酸乙酯相对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和普通变形杆菌均有不同程度的抑制作用,其最低抑菌质量浓度(MIC)均为2mg/mL;水相仅对大肠杆菌具有抑制作用,其最低抑菌质量浓度(MIC)为20mg/mL。氯仿相对腐皮镰刀菌的抑菌作用最强,EC50为1.48mg/mL;乙酸乙酯相对可可葡萄座腔菌和多主棒孢霉抑菌作用最强,EC50分别为1.78mg/mL和0.63mg/mL;石油醚相和水相的抑真菌活性相对较弱。石油醚相、氯仿相和水相对供试真菌中的部分菌种具有促进生长的作用。

倒提壶化学成分研究

目的研究民族药倒提壶(Cynoglossum amabile)的化学成分。方法用硅胶色谱技术分离化学成分,经理化常数测定、波谱解析等方法进行结构鉴定。结果分离得到7个化合物,鉴定了其中5个,分别为豆甾醇(stigmasterol,1)、正二十八烷酸(octacosanoic acid,2)、胡萝卜苷(daucosterol,3)、邻羟基苯甲酸(o-hydroxybenzoic acid,4)和3,4-二羟基苯甲酸(3,4-dihydroxybenzoic acid,5)。结论化合物2、4、5为首次从该属植物中分离得到。

树脂法分离纯化倒提壶生物碱的研究

采用阳离子交换树脂和大孔吸附树脂联用的方法,将倒提壶生物碱提取液依次经过阳离子交换树脂和两次大孔吸附树脂,对其中的天芥菜碱和毛果天芥菜碱进行分离纯化。结果表明,倒提壶生物碱溶液采用阳离子交换树脂经过水洗和NaCl洗脱与大孔吸附树脂两次经乙醚和50%乙醇洗脱后,毛果天芥菜碱与天芥菜碱的纯度分别从0.73%和2.2%提高至81.6%和79.2%,提取量分别由4.6 mg/g和10.7 mg/g提高至50.6mg/g和92.7 mg/g。该文所建立的分离纯化方法具有成本低、污染小、周期短、操作简便和分离纯化效率高等特点,适合工业化生产。

聚焦微波辅助提取/HPLC法测定倒提壶中天芥菜碱的含量

采用正交实验方法对聚焦微波辅助提取（FMAE）的实验条件进行优化，以天芥菜碱为提取目标物，HPLC法测定其含量。通过优化，得到最佳实验条件：药材粒度60目，液料比l：35，微波功率420W，微波时间50min。HPLC分析条件：以甲醇-0.05％三乙胺（pH7.5）（30：70）为流动相，在220nm处检测，天芥菜碱的线性范围为52～1040mg／L，相关系数（r）为0.9999，检出限为0.0402mg／L，其加标回收率为97.5％-103％，相对标准偏差为2.4％，方法简单、灵敏度高。

双水相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定倒提壶中8种生物碱

建立了乙醇-磷酸氢二钾双水相萃取技术结合超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定倒提壶中8种生物碱含量的方法。采用单因素实验考察了双水相的萃取条件对倒提壶中8种生物碱萃取率的影响,最佳萃取条件为:乙醇质量分数为30%,K2HPO4·3H2O的质量分数为20%,萃取剂与样品相比为6∶1,水相的pH值为4.0。以乙腈-0.1 mol/L醋酸铵为流动相进行UHPLC-MS/MS分析,8种生物碱之间具有良好的分离度,各成分在一定质量浓度范围内具有良好的线性关系(r^2>0.99)。方法的精密度、重复性及加标回收率的相对标准偏差(RSD)均小于3.0%。方法简单快捷、灵敏准确,可满足倒提壶中生物碱检测的要求。

微波辐射-溶剂回流法提取/HPLC法测定倒提壶中天芥菜碱与毛果天芥菜碱的含量

采用单因素试验,对微波辐射-溶剂回流提取法的实验条件进行优化,得到最佳提取条件：药材颗粒度100目,微波功率60%档（总功率为700 W）,微波辐射时间90 s,固液比1∶25,提取温度90℃,提取时间45 min。以天芥菜碱和毛果天芥菜碱为提取目标物,通过HPLC法测定其含量,其分析条件为：以乙腈-0.1%乙酸溶液（p H 5.6,体积比5∶95）为流动相,在220 nm处检测。毛果天芥菜碱和天芥菜碱的浓度在50~900 mg/L范围内均呈良好线性关系,检出限分别为1.50 mg/L和1.52 mg/L,加标回收率分别为95.0%~98.5%和96.5%~101%,RSD分别为1.8%和2.4%,方法简单、灵敏度高。

小花琉璃草精油成分的研究

用气相色谱－质谱联用法分析了小花琉璃草精油的化学成分，鉴定了茴香脑、爱草醚、小茴香酮、对－甲氧基－苯甲醚等６４个化合物。

DOLPA/AOT-异辛烷反胶束萃取-UPLC法测定倒提壶中4种生物碱的含量

建立了二(2-乙基己基)磷酸酯(DOLPA)/二(2-乙基己基)丁二酸酯磺酸钠(AOT)-异辛烷反胶束萃取技术结合超高效液相色谱同时测定倒提壶中天芥菜品、天芥菜碱、毛果天芥菜碱及天芥菜定含量的方法。采用单因素试验考察了表面活性剂的种类与浓度、水相p H值、盐的种类与浓度、萃取相比、萃取及反萃取时间等因素对生物碱萃取率的影响。确定最佳萃取条件为:DOLPA/AOT的总浓度为0. 6 mol/L,水相p H值为4. 0,KCl浓度为0. 2 mol/L,萃取相比4∶1,萃取和反萃取时间分别为10、30 min。在优化条件下,以乙腈-0. 2%三乙胺为流动相进行超高效液相色谱法(UPLC)梯度洗脱,可在16 min内完成色谱分析,4种生物碱色谱峰的分离度良好;天芥菜品、天芥菜碱、毛果天芥菜碱及天芥菜定4种生物碱的质量浓度与峰面积呈良好线性关系,检出限分别为0. 030、0. 050、0. 040、0. 020 mg/L,回收率分别为98. 2%～103%、97. 9%～102%、98. 1%～101%、97. 8%～104%,精密度、重复性及加标回收率的RSD均不大于2. 3%。该法简单快捷、灵敏准确,满足倒提壶中4种生物碱的检测要求。

琉璃草水溶性浸出物对小鼠抗炎镇痛作用的研究

目的 探讨琉璃草的抗炎镇痛作用机制。方法 用琉璃草的水溶性溶出物 1 0g/kg、 2 0g/kg两个剂量组分别对昆明种小鼠进行药理试验。结果 给药两个剂量组均能延长小鼠的痛反应时间、减少扭体反应次数 ,抑制鼠耳肿胀和毛细血管通透性。结论 琉璃草水溶性浸出物中嘌呤类生物碱具有抗炎镇痛的药理作用。

倒提壶及同属植物的资源调查

通过标本查询、查阅文献及实地考察等方法,对倒提壶及相关品种的植物资源分布、生境进行调查研究,为该属植物的进一步开发利用提供科学依据。

琉璃草根水提物抑菌作用及对小鼠凝血功能的影响

目的研究琉璃草根水提物的抑菌和止血作用。方法采用琼脂平板打孔法观察抑菌活性;采用琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);采用剪尾法测定小鼠出血时间(BT);采用玻片法测定小鼠凝血时间(CT);采用全自动血细胞分析仪进行血小板计数(PLT)。结果抑菌实验:1.00、0.50、0.25 g/mL浓度水提物对金黄色葡萄球菌和表面葡萄球菌有较好的抑菌作用,其MIC值分别为7.81、3.91 mg/mL,对大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、沙门菌、鲍曼不动杆菌不具有抑菌活性;止血实验:与对照组相比,20 g/kg·d和10 g/kg·d剂量时,均能较好地缩短小鼠BT、CT并显著提高血小板数量(P<0.05或P<0.01);5g/kg·d剂量时,能较好地缩短小鼠CT和提高血小板数量(P<0.05或P<0.01),但小鼠BT与对照组无统计学差异(P>0.05)。结论琉璃草根水提物具有较好的止血和抑菌作用。

大果琉璃草生物学特性的初步研究

通过栽培、观察,探究大果琉璃草的植物形态、内部结构和生态适应性等生物学特性。主要采取试验地栽培、实地测量和石蜡切片的方法,研究发现大果琉璃草具有发达的栅栏组织,表皮细胞较小且紧密排列,叶被蜡质,主根粗壮且须根发达,花期、果期集中于6-8月,常生长在草地、山坡、沙丘、石滩及路边。探究大果琉璃草的生物学特性可为合理开发、利用及规范化种植提供理论依据。

湖北省维管植物分布新记录

报道了湖北省神农架大九湖国家湿地公园内发现的湖北省维管植物分布的新记录类群,包括1个新记录属大爪草属(Spergula Linnaeus),含1个新记录种大爪草(Spergula arvensis Linnaeus);1种新记录的蕨类植物宪需耳蕨(Polystichum kungianum H.He&Li Bing Zhang);1个新记录变种,倒钩琉璃草[Cynoglossum wallichii var.glochidiatum(Wallich ex Bentham)Kazmi]。这些新分布类群丰富了湖北省的植物多样性,为本地区的植物区系研究提供了新资料。

高孜万药材中总黄酮含量的测定

目的:测定几种不同来源的维吾尔药材高孜万中总黄酮含量,为高孜万药材的筛选及推广提供技术支撑。方法:以芦丁为对照品,采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法,在510 nm处利用紫外分光光度法测定意大利牛舌草、琉璃苣、糙草、倒提壶等4种不同来源的高孜万药材中总黄酮的含量。结果:意大利牛舌草、琉璃苣、倒提壶、糙草等4种不同来源的高孜万中总黄酮的含量分别为意大利牛舌草3.85 mg.g-1、琉璃苣3.72 mg.g-1、倒提壶2.35 mg.g-1、糙草(和田)3.14 mg.g-1、糙草(策勒)4.73 mg.g-1、糙草(于田)3.76 mg.g-1。其中策勒产糙草中总黄酮含量最高,倒提壶含量最低。结论:该方法准确、可靠、重复性好,可以用作高孜万中总黄酮含量的测定。糙草、琉璃苣和意大利牛舌草中总黄酮的含量没有太大的差别。