Effect of BSA on RAPD Analysis of Cynomorium songaricum

[Objective] The objective of the study was to study the role played by BSA in Random Amplified polymorphic DNA(RAPD).[Method]The improvement of RAPD amplification was observed by adding BSA in the analysis of Cynomorium songaricum RAPD.[Result] The result showed that in the process of Cynomorium songaricum RAPD analysis,the effect of amplification improved significantly and the dosage of Taq enzyme declined by adding BSA.The suitable concentration of BSA used in RAPD of Cynomorium songaricum Rupr was 2 μg/μl.[Conclusion]It is feasible to add BSA to improve the RAPD analysis of plants.This study has provided foundation for the application of BSA in RAPD analysis.

锁阳（Cynomorium songaricum Rupr．）不同生育期营养成分的动态研究

对锁阳肉质茎的营养成分，过去曾有人只作过零散的报导，且大都无含量数据．本文对不同生育期锁阳肉质茎所含营养成分的种类及含量进行了系统地比较研究，发现锁阳中除含有药用成分外，还含有丰富的还原糖、淀粉、蛋白质、多种氨基酸及微量元素等营养成分．因此，锁阳不仅可以药用，而且具有广阔的开发利用价值．

TRITERPENES AND OTHER CONSTITUENTS FROM CYNOMORIUM SONGARICUM

From the whole plant of Cynomorium songaricum a new triterpene was isolated together with acetyl ursolic acid, ursolic acid, β-sitosterol palmitate, β-sitosterol, palmitic acid and β-sitosterol glucoside. The structure of the new compound was elucidated as ursa-12-ene-28-oic acid, 3β-propanedioic acid monoester (cynoterpene, 1).

锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)与莜麦(Avena chinensis Metag.)种子萌发过程中内源激素动态的比较研究

为了探索全寄生植物锁阳种子萌发及吸器形成与内源激素之间的关系 ,我们对不同萌发期种子内源自由态激素 GA3 、ABA、IAA、i PAS和 ZRS进行了定量测定 ,并与不同萌发期莜麦种子内源激素动态进行比较 .结果表明 :锁阳种子萌发过程中 IAA、i PAs+ ZRS以及 ZRs都有所增加 ,而 ABA明显下降 ,莜麦种子萌发过程中 GA3 启动萌发的作用较锁阳明显 ,而ABA、IAA、i PAS+ ZRS均呈下降趋势 .

寄生植物锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)营养器官的解剖学研究

锁阳不定根起源于肉质茎的皮层细胞，结构类似于吸器，细胞具有线粒体、内质网及造粉体．肉质茎由幼小芽体发育形成，包括壁栓质化的表层细胞、基本组织和维管束；基本组织细胞高度液泡化，含有细胞器和贮藏物，维管束具形成层而无序排列．基本组织细胞分裂分化导致茎的次生生长．叶退化成鳞片状，叶肉细胞没有分化。

锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)的寄生生物学特性及其人工繁殖

对全寄生种子植物锁阳的寄生生物学特性及其人工繁殖课题进行了深入探讨．发现锁阳具有同某些全寄生、半寄生和非寄生种子植物所不同的独特的寄生生物学特性．这些特性，对于上述类型种子植物的胚胎发育、种子结构、种子休眠以及萌发、生长发育等系统发育过程的比较研究，可提供有价值的信息；对其进行人工繁殖研究，对资源再生、保护及合理开发利用都具重要的现实意义；它的人工繁殖成功与否关键在于深入了解其种子萌发条件和如何提高萌发率．

锁阳(Cynomorium songaricum)种子与吸器起源

锁阳种子由胚、胚乳和种皮组成．胚为球形原胚，合点端细胞大，珠孔端细胞小．胚细胞中含有油滴、蛋白质及淀粉．胚乳细胞的细胞壁较厚，由纤维素组成；中心及近胚的胚乳细胞壁内突生长，细胞腔呈不规则形；胚乳细胞内含油滴、淀粉．种皮由几层细胞组成细胞壁未木质化．吸器起源于珠孔端的胚细胞．吸器由外被薄壁细胞的分生细胞区和伸长区组成；吸器细胞含有细胞器，多糖颗粒及一些膜包被结构．

锁阳(Cynomorium songaricum)胚胎学研究Ⅰ.大、小孢子发生和雌、雄配子体形成

锁阳（Ｃ．ｓｏｎｇａｒｉｃｕｍＲｕｐｒ．）花药壁发育属基本型，中层为一层，腺质绒毡层，细胞具双核现象，药室内壁见纤维状加厚；花药具有４个小孢子囊室，小孢子母细胞减数分裂后胞质分裂为同时型；小孢子四分体呈四面体形，也有左右对称形，成熟花粉为二细胞型．直生胚珠，单珠被和厚珠心，大孢子母细胞减数分裂产生直线形和Ｔ－形排列的四分体，合点端大孢子为功能性并发育成蓼型胚囊．

两种不同产地锁阳多糖组分的结构解析及体外抗氧化活性对比研究

研究两种不同产地锁阳多糖的组成及初级结构,并探讨体外抗氧化活性。利用水提醇沉法提取粗多糖,采用红外分光光度法、离子色谱法、高效凝胶色谱法等对样品进行初级结构解析、单糖组成及分子量的测定;并测定其体外抗氧化活性。结果显示,苏尼特粗多糖中总糖含量(49.65%)比阿拉善粗多糖中总糖含量(35.44%)略高。苏尼特右旗锁阳TCA法脱蛋白多糖及阿拉善锁阳TCA法脱蛋白多糖的重均分子量分别为56.131、50.696kDa,两种脱蛋白多糖中单糖组成没有明显区别。在一定浓度范围之内均有一定的体外抗氧化活性,并呈质量浓度依赖关系。研究发现,苏尼特右旗产锁阳中多糖含量比阿拉善产锁阳高,分子量、单糖组成及抗氧化活性等方面没有明显差异。本研究可为锁阳及其它类似药材中多糖的提取、纯化及药理活性研究提供参考。

ICP-MS法测定锁阳药材与饮片中的5种金属元素

以硝酸-氢氟酸-高氯酸为消解体系对样品进行处理,采用ICP-MS法进行测定。结果表明:5种金属元素均在0~500μg/L浓度范围内线性关系良好(r2>0.999);检出限在0.0031~0.0720μg/L;低、中、高3种浓度水平,5种元素的平均回收率(n=3)在93.75%~105.0%之间,重复性RSD(n=6)在1.2%~3.4%之间。结果表明,锁阳饮片是矿质元素含量丰富的药品及功能保健食品,其中锁阳药材:Zn>Cu>Pb>Ni>Cr;锁阳饮片:Zn>Cu>Pb>Ni>Cr。可见锁阳经过炮制加工成饮片,其金属元素含量变化趋势与原药材具有一致性。通过研究甘肃道地药材锁阳的金属含量,发现锁阳药材经地道炮制后,由有害金属导致的健康风险等级降低,增强了中药临床使用的安全性,本研究为道地药材的风险等级评估提供了实验基础与研究思路。

锁阳提取物对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能障碍的影响研究

目的基于网络药理学及动物实验探讨锁阳提取物对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠认知功能障碍的影响。方法利用网络药理学预测锁阳提取物改善AD的相关靶点及信号通路;以快速老化小鼠(SAMP8)为AD模型,基于前期预实验结果,选取0.17 g/(kg·d)为锁阳提取物最佳给药剂量,根据分组分别给予锁阳提取物[0.17 g/(kg·d)]、盐酸多奈哌齐[2.0 mg/(kg·d)]及生理盐水等体积灌胃28 d;Morris水迷宫评价动物学习认知功能;尼氏染色观察海马回1区(CA1)神经元形态数量;免疫组织化学法染色检测自噬效应蛋白(Beclin-1)、选择性自噬接头蛋白(p62)、微管相关蛋白轻链3(LC-3)蛋白表达情况;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组小鼠海马区磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)蛋白表达水平。结果基于网络药理学研究,预测锁阳改善AD的生物机制可能为自噬的调节,可能的信号通路为PI3K/AKT/GSK-3β;动物实验结果显示,锁阳提取物能够改善AD模型小鼠的空间记忆学习能力,改善海马神经元细胞损伤状况,明显增加神经元细胞数量,提高小鼠海马PI3K、p-AKT/AKT、Beclin-1、LC3表达水平,降低p-GSK-3β/GSK-3β、p62表达水平。且上述实验过程中雌雄小鼠见未见明显差异。结论锁阳提取物可能通过激活PI3K-AKT-GSK-3β信号通路介导的自噬作用改善雌雄AD模型小鼠的认知功能障碍,且作用无明显性别差异。

基于网络药理学和分子对接的锁阳治痿弱活性成分筛选及含量测定

目的:基于网络药理学和分子对接技术筛选锁阳治痿弱的功效成分并测定其含量。方法:利用BATMAN-TCM数据库及文献检索获取锁阳的化学成分并筛选出潜在的活性成分;通过PharmMapper和Genecards等数据库筛选潜在活性成分靶标和性功能障碍的靶标;利用STRING数据库获取成分与疾病交集靶标之间的相互关系,构建PPI网络和成分-靶点-通路网络分析锁阳干预性功能障碍的核心靶标;通过Autodock进行核心靶标与活性成分的分子对接,筛选出锁阳治痿弱的功效成分并测定其含量。结果收集并筛选到锁阳的40个潜在的活性成分,通过调节76个潜在靶标参与疾病过程。分子对接结果显示槲皮素、木犀草素、熊果酸、根皮苷4种成分与核心靶点结合能力突出,为锁阳改善性功能障碍的主要物质基础。HPLC测定锁阳中其主要存在形式芦丁、木犀草苷、根皮苷、熊果酸的含量分别为0.331 mg·g^(-1)、0.184 mg·g^(-1)、1.768 mg·g^(-1)、0.017 mg·g^(-1)。结论:芦丁、木犀草苷、熊果酸、根皮苷为锁阳治痿弱的功效成分,建立的HPLC含量测定方法简便、稳定、可靠。

甘肃河西地区不同产地锁阳中4种活性成分与生态因子的相关性研究

目的:对甘肃河西地区不同产地锁阳中4种活性成分与生态因子的相关性进行研究。方法:收集甘肃河西地区9个不同产地锁阳的经纬度、海拔、温度、降水量等生态因子信息,采用高效液相色谱法测定不同产地锁阳中没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、根皮苷4种活性成分的含量,分析活性成分与生态因子的相关性。结果:不同产地锁阳中4种活性成分含量差异较大,没食子酸含量在0.056~0.453mg/g之间,原儿茶含量在0.010~0.058mg/之间,儿茶素含量在2.813~6.751mg/g之间,根皮苷含量在0.056~0.178mg/g之间。结论:最暖季降水量、年均降水量、最湿月降水量、最湿季降水量、最湿季均温、最冷月最高温是影响锁阳中原儿茶酸含量的主要生态因子,降水量与其呈明显负相关,温度与其呈明显正相关,其他活性成分与生态因子相关性不显著。

锁阳的本草考证

锁阳在本草典籍中最早见于《本草衍义补遗》,以肉苁蓉的代用药物开始在各类本草典籍中记载,其主产于甘肃、内蒙古、宁夏、陕西等地。锁阳作为临床、保健的常用中药材,仍有源流、道地、采收、性味、功效等方面的存疑及易被忽略的使用禁忌,故有必要进行较为全面系统的梳理、考证、分析。经考证,锁阳于春、冬二季采收,味甘性温,归肝经、肾经、大肠经,质润,可补阴益精,并以此基础派生兴阳之功,可治精血亏虚、腰膝痿软、肠燥便秘等诸症,但对虚而大便不燥结者、泄泻、阳易举而精不固者忌用。该考证结果可为锁阳的临床合理用药和保健应用提供参考。

ABTS法和DPPH法测定锁阳多糖抗氧化活性的适用性

以开发锁阳多糖工业化生产工艺过程中的锁阳多糖粗提物为原料,比较了ABTS法和DPPH法进行抗氧化活性检测的适用性,结合化学成分分析和红外光谱法表征,结果表明:DPPH法易被锁阳多糖粗提物中蛋白、多酚及其复合物等成分影响,测定结果不准确;而ABTS法不受杂质成分干扰,实验结果更可靠,可作为锁阳多糖粗提物体外抗氧化活性检测方法之一;且锁阳多糖粗提物比纯化锁阳多糖具有更强的抗氧化能力,可为抗氧化剂产品开发提供原料。

锁阳黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马组织ROS含量及NADPH氧化酶、NLRP3表达的影响

目的 观察锁阳黄酮对β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织活性氧(ROS)含量及NADPH氧化酶、Nod样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响,探讨其神经保护作用的机制。方法 70只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、多奈哌齐组及锁阳黄酮低、中、高剂量组,每组10只。大鼠于双侧海马注射Aβ_(1-42)建立AD大鼠模型。假手术组注射等体积生理盐水,空白组不予任何处理。多奈哌齐组和锁阳黄酮低、中、高剂量组予相应药物灌胃,空白组、假手术组和模型组予等体积生理盐水灌胃,连续28 d。Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马组织病理变化,免疫组化检测海马组织Aβ_(1-42)表达,ELISA检测海马组织及血清ROS含量,Western blot检测海马组织NADPH氧化酶亚基(gp91^(phox)、p22^(phox)、p67^(phox)、p47^(phox))、NLRP3、白细胞介素(IL)-1β蛋白表达,RT-PCR检测海马组织NADPH氧化酶各亚基(gp91^(phox)、p22^(phox)、p67^(phox)、p47^(phox))mRNA表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P<0.01),跨平台次数和目标象限停留时间明显减少(P<0.01);海马CA1区锥体细胞凋亡明显,局部锥体细胞排列紊乱,海马组织Aβ_(1-42)表达明显升高(P<0.05);海马组织及血清ROS含量明显增加(P<0.01),海马组织NADPH氧化酶各亚基和NLRP3、IL-1β蛋白表达明显升高(P<0.01),NADPH氧化酶各亚基mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,锁阳黄酮高剂量组大鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),跨平台次数和目标象限停留时间明显增加(P<0.05,P<0.01);海马CA1区病理形态有所改善,海马组织Aβ_(1-42)表达明显降低(P<0.05);海马组织及血清ROS含量明显减少(P<0.01),海马组织NADPH氧化酶各亚基和NLRP3、IL-1β蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),NADPH氧化酶各亚基mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 锁阳黄酮可通过调节AD大鼠海马组织ROS含量及NADPH氧化酶、NLRP3表达,抑制氧化应激和炎症反应,发挥神经保护作用。

基于BDNF/TrkB信号通路的锁阳黄酮对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

目的基于BDNF/TrkB信号通路探讨锁阳黄酮对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响及潜在机制。方法70只SPF级Wistar雄性大鼠随机选取10只作为空白组、10只作为假手术组,余50只采用双侧海马注射Aβ_(1-42)建立AD大鼠模型,将造模大鼠再随机分为模型组、多奈哌齐组(0.5 mg/kg)和锁阳黄酮低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),连续灌胃相应药液28 d。跳台实验评价大鼠认知功能损伤程度,TUNEL染色观察海马组织细胞凋亡情况,透射电镜观察海马组织神经细胞和突触超微结构变化,ELISA测定海马及血清胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱酯酶(AChE)含量,Western blot检测海马组织Bcl-2、Bax、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9、脑源性神经营养因子(BDNF)及酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠跳台实验学习和记忆阶段错误次数明显增加,潜伏期明显缩短(P<0.01);海马组织细胞凋亡率明显升高(P<0.01),神经细胞和突触结构严重损伤;海马组织及血清ChAT、ACh含量明显减少(P<0.01),AChE含量明显增加(P<0.01);海马组织Bcl-2、BDNF和TrkB蛋白表达明显降低(P<0.01),Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,锁阳黄酮高剂量组大鼠认知功能损伤程度减轻,海马组织细胞凋亡率降低,神经细胞和突触结构有所改善,海马组织及血清ChAT、ACh含量增加,AChE含量减少,海马组织Bcl-2、BDNF和TrkB蛋白表达升高,Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论锁阳黄酮能明显改善Aβ_(1-42)诱导的AD大鼠认知功能损伤,增加中枢胆碱能系统ACh含量,抑制细胞凋亡及增加突触可塑性,其机制可能与上调海马组织BDNF/TrkB信号通路有关。

锁阳化学成分和药理作用研究进展及质量标志物(Q-Marker)的预测分析

锁阳是一种传统名贵的补益类中药,广泛分布于新疆、甘肃、内蒙古等地,具有补肾阳、益精血等功效。本文总结了从锁阳中分离的102种化学成分。基于锁阳化学成分和药理作用,结合质量标志物(Q-marker)的核心概念,从锁阳的化学成分与亲缘关系、传统功效、传统药性、临床疗效和化学可测成分方面,对锁阳质量标志物进行预测分析,筛选锁阳质量标志物,为锁阳质量控制和质量标准的建立提供一定的科学依据。

两种白刺属植物寄生锁阳营养成分分析

【目的】揭示小果白刺和大白刺寄生锁阳的营养组成及差异。【方法】采用分光光度法、氨基酸分析仪和电感耦合等离子体质谱等方法,对寄生于小果白刺和大白刺的锁阳茎与花序中的营养组成进行了测定。【结果】在水分、灰分、蛋白质、脂肪、多糖、粗纤维、可溶性膳食纤维和总膳食纤维含量方面,不同寄主及不同部位样品间无差异显著性(P>0.05)。寄生于小果白刺的锁阳茎和花序部位的氨基酸总量、必需氨基酸和药效氨基酸含量均高于寄生于大白刺锁阳的相应部位,且同一寄主锁阳的花序部位氨基酸含量显著高于茎部位(P<0.01)。对50种矿质元素进行了检测,锁阳中共检测出了23种矿物质元素,含量前3位的分别是S、Ca和Mg,其中镉(Cd)仅在锁阳茎部位中检出,而钒(V)仅在花序部位中检出;系统聚类结果表明,不同寄主锁阳的同一部位样品更为相似。【结论】两种白刺属植物寄生锁阳的营养组成差异不显著,但同一寄主锁阳的茎部位和花序部位氨基酸含量却存在极显著差异。本研究为不同寄主锁阳鉴别以及品质鉴定提供了数据支撑,也为锁阳资源的综合开发利用提供了依据。

锁阳相关制剂及保健品的开发与应用研究进展

锁阳历史悠久,疗效甚佳,被广泛应用于医疗和保健领域。锁阳中含有丰富的活性物质,使其具有广泛的药理作用。目前以锁阳为主开发的制剂包括丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、冲剂等多种剂型,以锁阳为主开发的保健品品种较多,如锁阳酒、锁阳饮料、锁阳茶、锁阳黄酮咀嚼片、锁阳膳食纤维等。虽然已开发的锁阳相关制剂及保健品品种较多,但对锁阳的治疗价值及保健功能体现仍不够齐全,临床应用范围较窄,推广应用不足,未来仍有较大的开发及应用潜力。