CYP2D家族基因在大鼠肝癌组织中的表达及突变研究

背景与目的:观察二甲氨基偶氮苯(Dimethylaminoazobenzene,DAB)诱导大鼠形成肝癌后细胞色素CYP2D家族基因的表达水平及突变并分析其意义。材料与方法:用DAB诱导大鼠形成肝癌,RT_PCR定量分析CYP2D1、CYP2D2和CYP2D4mRNA在肝脏中的表达水平,并对各PCR产物测序分析,观察是否有点突变。结果:CYP2D2和CYP2D4的mRNA表达水平在肝脏癌组织中及癌旁组织中明显低于正常组织,两者在癌组织中的表达水平低于在癌旁组织;CYP2D1在肝脏癌组织中及癌旁组织中的的表达水平虽低于正常组织,但之间无明显的差异性。CYP2D2在肝脏癌组织的PCR产物经测序分析存在碱基插入突变。结论:DAB可以不同程度降低CYP2D家族基因在肝脏的表达,并可以诱发CYP2D2基因点突变,CYP2D家族基因差异性与肝癌形成有密切关系。

CYP2D6、MC4R、DRD2、ANKK1基因多态性对氯氮平个体化治疗的影响

目的研究CYP2D6、MC4R、DRD2、ANKK1基因多态性对氯氮平个体化治疗的影响。方法选取2022年4月~2023年10月在我院就诊的100例服用氯氮平的患者,采用高效液相色谱法测定氯氮平的血药浓度,扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应(ARMS-PCR)检测CYP2D6、MC4R、DRD2和ANKK1基因的突变及多态性。通过研究药物代谢动力学CYP2D6、MC4R、DRD2、ANKK1相关基因的多态性,比较不同基因型患者氯氮平血清药物浓度及泌乳素、总胆固醇的差异。结果CYP2D6^(*)10(100C/T)、CYP2D6^(*)14(1758G/A)、MC4R rs489693(C/A)、ANKK1 rs1800497(G/A)、DRD2 rs4436578(C/T)不同基因型患者的氯氮平血清药物浓度对比具有明显差异(P<0.05),且CYP2D6快代谢者和中代谢者的氯氮平血清药物浓度对比具有明显差异(P<0.05)。CYP2D6^(*)10(100C/T)、CYP2D6^(*)14(1758G/A)、MC4R rs489693(C/A)、ANKK1 rs1800497(G/A)、DRD2 rs4436578(C/T)不同基因型患者的总胆固醇水平对比具有明显差异(P<0.05),且CYP2D6快代谢者和中代谢者的总胆固醇水平对比具有明显差异(P<0.05);DRD2 rs4436578(C/T)不同基因型患者的泌乳素水平对比具有明显差异(P<0.05),但其他基因型患者的泌乳素水平对比无明显差异(P>0.05)。结论CYP2D6、MC4R、DRD2、ANKK1的不同基因型对氯氮平的代谢水平及不良反应存在影响。在采用氯氮平治疗前,应先检测患者的CYP2D6、MC4R、DRD2、ANKK1基因型,并制定个性化的治疗方案,以提高临床疗效。

ASA法测定细胞色素P4502D6酶缺陷等位基因CYP2D6E

目的 :建立细胞色素P4 50 2D6(CYP2D6)第 3 0 2 3位A→C突变造成CYP2D6酶活性缺陷的等位基因CYP2D6E的测定方法。方法 :利用等位基因特异扩增法 (ASA)为基本原理 ,设计两对引物分别扩增野生型等位基因和突变型等位基因。结果 :经 3 96例测定 ,发现 2例CYP2D6E与CYP2D6B的异突变型纯合子 ,其表现型均为慢代谢者。阳性对照说明本法重复性好 ,阴性对照显示本法无污染问题。结论 :本法比PCR -RFLP法更为快捷、更少污染。

黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D、CYP2C亚酶活性影响的实验研究

目的通过体内和体外实验研究黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D、CYP2C亚酶的活性影响。方法建立体外"cocktail"反应体系,利用LC/MS/MS法测定酶代谢产物,计算黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9和CYP2C19亚酶活性的影响;大鼠随机分为对照组和实验组,不同浓度黄芪颗粒和黄芪注射液连续灌胃10 d,制备肝微粒体并进行"cocktail"反应,评价两种药物体内对大鼠CYP1A2、CYP2D1、CYP2C6和CYP2C11亚酶活性影响。结果在体外"cocktail"实验中,黄芪颗粒和黄芪注射液明显地抑制了CYP2D6、CYP2C19和CYP1A2亚酶活性,而二者对于CYP2C9亚酶活性无影响。在大鼠灌胃给药实验中,黄芪颗粒在剂量32、160和800 mg.kg-1.d-1提高CYP1A2亚酶活性2.13、3.23和2.20倍,黄芪注射液在剂量0.16、0.8、4 g.kg-1.d-1提高CYP1A2亚酶活性1.65、2.26和2.89倍,而二者均未诱导CYP2D1、CYP2C6和CYP2C11亚酶活性增加。结论黄芪颗粒和黄芪注射液对CYP2D6、CYP2C19活性有抑制作用,对大鼠CYP1A2活性有诱导作用。

CYP2D6*10基因型与接受他莫昔芬治疗乳腺癌患者的生存率的相关性研究

目的研究CYP2D6*10基因型对接受他莫昔芬(tamoxifen,TAM)治疗乳腺癌患者的生存率相关性的影响。方法选择该院乳腺外科2008—2003年收治的257名接受TAM治疗乳腺癌患者。调查TAM使用情况和生存状态等相关资料;采集患者外周静脉血5 mL或石蜡切片用于DNA提取;用PCR技术检测CYP2D6*10基因多态性;查明CYP2D6*10基因多态性与患者的生存率相关性的关系。结果该次研究中,携带CYP2D6*10/*10患者占15%(38/257),CYP2D6野生型(Wt)/*10患者占41%(105/257)和CYP2D6Wt/Wt占44%(114/257)。各CYP2D6*10基因型的临床病理参数之间没有相关性差异。在中国CYP2D6*10/*10基因型对接受TAM治疗乳腺癌患者的DFS和OS的影响CYP2D6Wt/Wt和CYP2D6Wt/*10基因型是类似(P>0.05),不存在相关性。结论研究结果显示,CYP2D6*10基因型与接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间没有相关性。

中国人群CYP2D6基因多态性对美托洛尔药代动力学的影响

目的：研究中国人群CYP2D6基因多态性对美托洛尔药代动力学的影响。方法：使用基因芯片技术测定中国健康志愿者CYP2D6的基因型,按照分型结果将志愿者分为四组,第1组：CYP2D6＊2W＊10W,第2组：CYP2D6＊2H＊10W或CYP2D6＊2M＊10W,第3组：CYP2D6＊2M＊10H,第4组：CYP2D6＊2M＊10M,每组筛选10人,共40人。各组志愿者单次口服100mg美托洛尔后,使用HPLC方法测定血和尿中美托洛尔及其代谢产物α-羟基美托洛尔（HM）的浓度,研究其在不同基因型志愿者体内的药代过程。结果：第2组美托洛尔及其HM的主要药动学参数与第1组相比均没有统计学差异。第3组美托洛尔的t1/2、AUC、Cmax显著高于第1组（P〈0.05）;而HM的t1/2延长47.3%,AUC降低56.0%（P〈0.05）。第4组美托洛尔的t1/2、AUC、Cmax均显著高于第1组（P〈0.05）和第3组（P〈0.05）;HM的t1/2、AUC、Cmax与第1组和第3组相比均有统计学差异（P〈0.05）,且呈现基因剂量效应。第3组和第4组的口服清除率和肾清除率均低于第1组,而0-24h代谢比率分别为第1组的1.82倍和3.96倍。结论：CYP2D6＊2对于美托洛尔的药代动力学过程没有影响;但CYP2D6＊10可降低酶活性,且CYP2D6＊10纯合子变异比杂合子变异对美托洛尔药代动力学的影响更大,呈现基因剂量效应。

奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响

目的通过奥扎格雷钠的大鼠体内、外实验,观察奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响。方法对照组和奥扎格雷钠诱导组大鼠分别经口给予生理盐水和奥扎格雷钠1wk,HPLC法测定大鼠尿样及肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬的代谢率,观察奥扎格雷钠对CYP2D6活性的影响。结果①大鼠给予奥扎格雷钠(37mg·kg-1),其尿样中右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);②奥扎格雷钠诱导组大鼠肝微粒体中加入右美沙芬(0·324mmol·L-1),其右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);③奥扎格雷钠与CYP2D6特异性抑制剂西米替丁可明显降低右美沙芬的代谢率(P<0·01),并且奥扎格雷钠组其右美沙芬的代谢率低于西米替丁组(P<0·05);④奥扎格雷钠IC50=26·5μmol·L-1,西咪替丁IC50=86·3μmol·L-1,奥扎格雷钠诱导组肝微粒体Km=0·67mmol·L-1,Vmax=2·13nmol·min-1·g-1protein;对照组肝微粒体Km=0·29mmol·L-1,Vmax=0·91nmol·min-1·g-1protein;⑤体内和体外相应实验数据具有很好的相关性(r=0·9811)。结论奥扎格雷钠可诱导CYP2D6酶的活性。

他汀类药物降脂治疗的CYP2D6基因多态性及其与高脂血症的关系

目的:观察他汀类药物降脂治疗相关的基因多态性位点CYP4502D6*10(CYP2D6*10)在宁夏地区的分布和对辛伐他汀降脂疗效的影响及其与高脂血症的关系。方法:采用等位基因特异扩增技术,测定150例健康回族人和200例高脂血症患者CYP2D6基因型并分析基因型与血脂水平、辛伐他汀调脂疗效的关系。结果:CYP2D6*10基因在宁夏地区的突变频率为47.6%,CYP2D6*10等位基因与高脂血症无显著相关性,服用辛伐他汀8周后CC基因型较CT及TT基因型个体总胆固醇(TC)水平明显降低,差异有统计学意义。结论:CYP2D6*10基因多态性存在种族和地域的差异,CYP2D6*10基因多态性对TC水平有显著影响,该基因多态性可能成为辛伐他汀调脂疗效的预测因子。

CYP2D6遗传多态性与肺癌易感性关系的研究

目的 探讨CYP2D6Ch基因多态性的频率分布 ,以及与肺癌的遗传易感性关系。方法 应用病例 对照研究及PCR RFLP等技术 ,检测肺癌及正常对照各 5 0例的CYP2D6Ch基因型 ,并应用Logistic回归分析基因多态性与肺癌易感性的关系。结果 (1)CYP2D6ChT/T型 (突变型 )频率在病例组中为 36 .0 % ,在对照组中为 5 0 .0 % ;非T/T型 (即C/C合并C/T基因型 )与肺癌风险临界升高相关 (OR =3.0 6 ;95 %CI=0 .94～ 9.92 )。 (2 )对病例组进行相关变量的分层分析后发现 ,在肺鳞癌 ,或轻度吸烟组中 ,CYP2D6Ch非T/T型与肺癌风险升高显著相关 (分别为 :OR =3.2 0 ,CI =1.0 4～ 9.85 ;OR =7.0 7,CI =1.16～ 4 2 .85 )。结论 本文提示CYP2D6Ch基因型分布规律与欧美人群差异较大 ,且T/T型在肺鳞癌或轻度吸烟者中可作为保护因素而降低肺癌的易感性。

CYP2D6基因多态与托莫西汀治疗儿童注意缺陷多动障碍反应的关联研究

目的：研究细胞色素酶CYP2D6基因多态与托莫西汀治疗注意缺陷多动障碍（ADHD）临床疗效的关联。方法：选取111例符合美国精神障碍诊断统计手册第4版（DSM-IV）诊断标准的汉族ADHD患儿,经8-12周的托莫西汀开放剂量滴定,至1.2-1.4 mg/kg.d的治疗剂量维持治疗至少4周。在基线和获得最佳剂量4周后使用ADHD评定量表（ADHD-RS）评估行为变化,以ADHD-RS减分作为主要疗效评估指标,以治疗后ADHD-RS各条目评分≤1为缓解标准。选择CYP2D6基因的3个SNPs（rs1080985,rs1065852,rs16947）检测多态性,使用荧光定量PCR仪进行聚合酶链反应（PCR）并判读基因型。结果：本研究未能发现单个多态性与托莫西汀治疗反应的关联（P〉0.05）。单体型分析发现GAC单体型与缓解状态的关联有统计学意义[缓解vs.未缓解单体型频数（率）：5/56（8.9%）vs.3/164（1.8%）,P〈0.05],多重检验校正后仍存在显著性趋势（P=0.082）;与有效状态的关联分析也发现GAC单体型与有效存在关联趋势（P=0.078）,8例携带者全部为治疗有效的患者,无效的患者中无此单体型。结论：本研究提示CYP2D6基因多态性可能与托莫西汀治疗ADHD的临床症状改善存在关联,但还需要在大样本中进一步验证。

中国汉族、维吾尔族、哈萨克族人群中细胞因子的表达与CYP2D6基因多态性

目的探讨细胞因子在汉族、维吾尔族、哈萨克族正常人血清中的表达水平是否存在民族间的差异以及与CYP2D6基因多态性是否有关。方法ELISA双抗体夹心法。结果血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)浓度范围:汉族为18-665pg·L-1和0.04-106ng·L-1,维吾尔族为19-1020pg·L-1和0.05-112ng·L-1,哈萨克族为21-1014pg·L-1和0.11-94ng·L-1。结论TNF-α的浓度在汉族与维吾尔族间存在显著性差异(P<0.01),哈萨克族与维吾尔族间存在显著性差异(P<0.01),汉族与哈萨克族间无显著性差异(P>0.05)。TGF-β1浓度在汉族与维吾尔族间存在显著性差异(P<0.01),汉族与哈萨克族间存在显著性差异(P<0.05),维吾尔族与哈萨克族之间无显著性差异。

CYP2D6,CYP3A5和MDR1基因多态性对利培酮缓释微球药代动力学的影响

目的评估单次肌肉注射利培酮缓释微球后CYP2D6,CYP3A5和MDR1基因多态性对利培酮,9-羟基利培酮及总活性物药代动力学的影响.方法38名精神病分裂症患者分别在接受单次12.5,25,37.5或50mg注射用利培酮缓释微球后（每一剂量组为8-10人）,在0、1、3、8d以及d2、5、8、11、15、18、22、25、29、36和43取血,测定利培酮和9-羟基利培酮血药浓度,并测定每个受试者CYP2D6＊4,CYP2D6＊10,CYP2D6＊14,CYP3A5＊3,MDR1C1236T,G26677TA和C3435T基因型.结果利培酮、9-羟基利培酮和总活性物药代动力学参数在CYP3A5＊3,MDR1G1236T和MDR1C3435T不同基因型间无显著差异;CYP2D6＊10/＊10的利培酮与9-羟基利培酮Cmax和AUC比值明显高于CYP2D6＊1/＊1（P=0.030,P=0.046）,但CYP2D6＊10不同基因型间利培酮、9-羟基利培酮和总活性物的Cmax和AUC无显著差异;MDR1G2677TA纯和突变型的总活性物的AUC明显高于野生型（P=0.038）.结论CYP2D6＊10影响利培酮缓释微球在体内代谢为9-羟基利培酮,MDR1G2677TA影响利培酮总活性物浓度,可能影响其临床疗效.

CYP2D6基因多态性与抗精神病药物的个体化应用

CYP2D6是一种重要的细胞色素P450酶,存在着显著的基因多态性。CYP2D6在抗精神病类药物的代谢中发挥着重要作用,与许多抗精神病药物药动学及药效学的个体间变异存在着密切联系,检测CYP2D6基因型有助于患者抗精神病药物治疗方案的选择和调整,提高用药的安全性和有效性。本文综述CYP2D6基因多态性对抗精神病药物的药动学、不良反应及药物相互作用的影响,探讨了CYP2D6基因型检测在抗精神病个体化治疗中的应用前景。

CYP2D6*10基因多态性与美托洛尔治疗高血压疗效的关系(英文)

目的:研究CYP2D6*10基因多态性与美托洛尔治疗高血压疗效的关系。方法:60例原发性高血压患者口服美托洛尔47.5 mg/d三日后,测定口服美托洛尔2h的血药浓度。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测CYP2D6*10基因型,根据基因检测结果高血压病人被分为CC型组(野生型纯合子,快代谢型,14例),CT型组(突变杂合子,中代谢型,25例)和TT型组(突变纯合子,弱代谢性,19例)3组。根据CYP2D6*10基因型调整美托洛尔用量,一周后,再次检测口服美托洛尔2h的血药浓度,并检测基因导向治疗前后的平均心率及血压。结果:基因导向治疗前,美托洛尔血药浓度TT组显著高于CC和CT组[(64.74±32.94)ng/ml比(26.57±19.40)ng/ml比(23.88±12.86)ng/ml,P<0.01];与TT组比较,CC组平均收缩压[(132.84±13.40)mmHg比(144.14±14.28)mmHg]、舒张压[(76.95±9.07)mmHg比(81.36±7.33)mmHg]、心率[(69.13±11.83)次/min比(76.66±7.33)次/min]明显升高(P均<0.05)。基因导向治疗后各组的血药浓度、平均收缩压、舒张压及心率无统计学差异(P均>0.05)。与基因导向治疗前比较,CC组治疗后血药浓度显著升高,平均收缩压、舒张压及心率显著降低(P<0.05),CT组、TT组的血压及心率与治疗前比较无统计学差异(P>0.05)。结论:CYP2D6*10基因多态性影响美托洛尔药物代谢及其治疗高血压病的疗效,基因导向个体化治疗可显著改善疗效,短时间内达到理想治疗目标。

反相高效液相色谱法测定尿中右美沙芬及去甲右美沙芬的含量与CYP2D6表型分析

目的 建立RP HPLC测定不同种族人尿中右美沙芬及去甲右美沙芬含量的方法。方法 尿样经酶水解 ,酸、碱提取纯化后 ,2 0 μL直接进样于HPLC系统 ,经苯基柱分离后荧光 (激发波长 2 80nm ,发射波长 310nm)检测 ,流动相为乙腈 10mmol·L-1KH2 PO4,10mmol·L-11 己烷磺酸钠缓冲溶液 ( 5 1∶4 9,pH 4 .0 ) ,柱温为 2 5℃。 结果 样品中右美沙芬及去甲右美沙芬得到较好分离 ,线性范围右美沙芬在 0 .0 2～ 2 μg·mL-1,r =0 .9998,n =9,最低检测限为 0 .4ng·mL-1。去甲右美沙芬 0 .5～ 30μg·mL-1,r=0 .9985 ,n =7,最低检测限为 0 .8ng·mL-1。结论 该方法简便可靠 。

中国汉族人群CYP2D6、CYP3A5、CYP1A2基因多态性研究

目的本研究旨在确定药物代谢相关酶CYP2D6、CYP3A5、CYP1A2基因的遗传多态性,研究常见的等位基因CYP2D6~*2、~*10、~*14、CYP3A5~*3、CYP1A2~*1C在汉族人群中人群中的分布。方法用荧光原位杂交(FISH)检测基因多态性。结果 CYP2D6~*10等位基因是最常见的变异(47.52%),且高于白种人(P<0.05),其次为~*1等位基因(34.65%),~*2等位基因(14.36%),~*14(3.47%)且高于既往中国的研究(P<0.05),CYP2D6~*10/~*10(IM),~*1/~*10(EM)和~*1/~*1(EM)基因型最多,占中国汉族人群的29.70%、25.75%和17.82%,没有发现~*14/~*14。CYP3A5~*3和CYP1A2~*1C分别是最常见的等位基因(72.08%和41.07%),~*3/~*3(PM)是CYP3A5最常见的基因型(57.50%),1A/1A是CYP1A2(40.48%)最常见的基因型,并且和1A/1C基因型非常接近(36.90%)。而在性别的比较中发现,男性CYP2D6以EM为主,CYP1A2以UM为主;女性CYP2D62D6以IM为主,CYP1A2以IM和PM为主,而CYP3A5的基因型性别的差异不明显。结论在中国汉族人群中CYP2D6仅发现正常代谢型(EM)和中间代谢型(IM),且以正常代谢型为主,CYP3A5以慢代谢型(PM)为主,CYP1A2以超快代谢(UM),中间代谢(IM)为主,且两个基因型接近。CYP2D6和CYP1A2代谢型存有性别差异。

中国人CYP3A5和CYP2D6基因多态性与他莫昔芬及其活性代谢物血药浓度的相关性

目的:研究中国汉族人群CYP3A5和CYP2D6基因多态性与乳腺癌患者体内他莫昔芬及其活性代谢物4-羟基他莫昔芬血药浓度的相关性。方法:30例乳腺癌患者,应用PCR方法检测其CYP3A5和CYP2D6基因型,应用LC-MS/MS方法测定患者体内他莫昔芬及其活性代谢物4-羟基他莫昔芬的含量,对试验数据进行统计分析。结果:CYP3A5基因型与乳腺癌患者体内他莫昔芬的浓度差异有统计学意义,比较发现*1/*1和*1/*3组的他莫昔芬的浓度值明显低于*3/*3组(P<0.01)。CYP2D6基因型与其活性代谢物4-羟基他莫昔芬的浓度差异有统计学意义;*1/*1和*1/*10两组4-羟基他莫昔芬的浓度值都明显高于*10/*10组(P<0.01),但*1/*1组和*1/*10组之间4-羟基他莫昔芬的浓度值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乳腺癌患者的CYP3A5和CYP2D6基因型影响他莫昔芬的体内代谢。

CYP2D6基因多态性与药物基因组学研究的进展

CYP2D6基因多态性导致有关药物疗效及不良反应的个体差异,本文就此进行综述。

药物代谢酶CYP2D6和CYP2C19的基因多态性与个体化治疗

药物代谢酶的活性高低是决定药物代谢强度和持久性的主要因素。参与药物代谢的酶主要有细胞色素P450（cytochromep450，CYP450）同工酶、N-乙酰转移酶（N．acefyltransferase，NAT）、醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase，ADH）和酯酶（esterase）等，而在众多代谢酶中，CYP450酶起着非常重要的作用，它可代谢降解大约40％～50％的药物。CYP450酶又称混合功能氧化酶或单加氧酶，是一种以血红蛋白为辅基的B族细胞色素超家族蛋白酶，广泛存在于动物、真核有机体、植物、真菌和细菌中，是必不可少的结构酶。