香附饮片与4种醋制香附饮片的快速鉴别

目的建立香附饮片与4种醋制香附饮片的傅里叶变换红外光谱图,快速鉴别香附饮片与4种醋制香附饮片;建立香附饮片与4种醋制香附饮片的高效液相指纹图谱,并测定α-香附酮、香附烯酮、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素的含量。方法建立25批香附样品的红外光谱图,利用OMNIC 9.2软件分析其平均红外光谱间的差异,采用Spectrum for Window 3.02软件标定共有峰,计算相对峰高;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立香附饮片与4种醋制香附饮片的高效液相指纹图谱,进行相似度评价,确定共有峰个数;采用SIMCA 14.1软件进行聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析,判断红外光谱图结果与高效液相指纹图谱结果是否相互验证;测定α-香附酮、香附烯酮、5-HMF、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素的含量。结果25批香附样品的红外光谱图的相关系数为0.9347~0.9829,共标定16个共有峰,1500~1300 cm^(-1)波段处差异明显。正态分布分析结果显示,2928、1649、995 cm^(-1)波段处可分别将醋煮品、醋炙品、醋蒸品与饮片区分;高效液相指纹图谱结果显示25批样品共有21个共有峰,相似度均大于0.9。指认出3号峰为5-HMF,7号峰为对香豆酸,8号峰为阿魏酸,14号峰为木犀草素,19号峰为香附烯酮,21号峰为α-香附酮;红外光谱图与高效液相指纹图谱聚类分析结果、主成分分析结果与正交偏最小二乘法-判别分析结果一致,均可聚为五类,即能够相互验证;5-HMF的含量经炮制后均有增加。对香豆酸、阿魏酸、木犀草素在饮片中含量最低,经炮制后均有增加。香附烯酮经醋炙、醋煮、醋蒸、醋煮蒸后均有减少,在香附饮片中含量最高。α-香附酮经醋炙后含量略有增加,经醋煮、醋蒸、醋煮蒸后均减少。结论香附饮片与4种醋制香附饮片的红外光谱图之间存在明显差异,能够快速鉴别香附饮片与4种醋制香附饮片;所建立的高效液相指纹图谱与含量测定方法操作简单、准确。

香附炮制的历史沿革及研究现状

香附为妇科常用药,被认为是调经止痛之要药,临床上一般炮制后使用。本文梳理《中国药典》与各省市炮制规范中关于香附的炮制情况,以及不同炮制品中医理论的功效和现代药理作用,并整理归纳了炮制后的药效物质基础和作用机理。对香附炮制规范的完善和提高、炮制后活性成分及作用机理的发现与探索进行展望,为香附炮制的深入研究提供参考。

基于传统煎药工艺的生香附、醋香附和四制香附定性定量方法研究

目的:基于传统煎药工艺,建立生香附、醋香附和四制香附的定性定量分析方法。方法:依据传统煎药工艺,制备生香附、醋香附和四制香附挥发油和水煎液。采用薄层色谱(TLC)法,以香附烯酮和α-香附酮为对照,对上述三者的挥发油定性鉴别;以香附对照药材为对照,对上述三者水煎液定性鉴别。采用高效液相色谱法,建立生香附、醋香附及四制香附中香附烯酮和α-香附酮含量测定方法。结果:在TLC色谱图中,斑点清晰、分离度好。建立的含量分析法,香附烯酮、α-香附酮分别在0.109~1.088μg,0.044~0.444μg的范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000),平均回收率依次为102.4%(RSD=1.8%)和102.1%(RSD=1.6%)。同一批香附中香附烯酮和α-香附酮含量呈现生香附>醋香附>四制香附的规律。结论:本方法为生香附、醋香附和四制香附质量控制提供了参考。

黄精产地加工及炮制方法的历史沿革

目的回顾黄精产地加工及炮制方法的发展演变和古今应用差异。方法通过查阅古今文献,对黄精的产地加工及炮制方法的历史沿革进行考证。结果与结论黄精是临床常用的补气养阴中药,但目前我国黄精的产地加工和炮制工艺存在“各地各法”现象,导致各地黄精饮片质量参差不齐,甚至影响黄精饮片临床用药的安全和有效。本研究能为黄精饮片的炮制工艺规范及炮制机理的深入研究提供参考依据。

香附醋制工艺的优化研究

目的:优选醋制香附的最佳炮制工艺。方法:采用四因素三水平(L9(34))正交试验,以醋用量、炒制温度、炒制时间为因素,α-香附酮、木犀草素及挥发油含量的综合加权评分值为评价指标。结果:醋制香附的最佳工艺为香附100 g,醋25 mL用15 mL水稀释后与药材拌匀,闷润6 h,150℃炒制8 min。结论:该工艺稳定、合理、可行,可为进一步研究其醋制机理奠定基础。

四制香附对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响及作用机制研究

目的:探讨建昌帮四制香附及其石油醚部位对未孕大鼠离体子宫平滑肌收缩作用的影响及其机制。方法:采用雌性未孕大鼠,灌胃己烯雌酚致敏,制备离体子宫标本,通过powerlab生物信号采集系统考察生香附、四制香附及其石油醚部位各提取液及α-香附酮对由缩宫素引起的大鼠离体子宫平滑肌收缩的抑制作用,并通过加入受体拮抗剂初步探讨其作用机制。结果:各样品对未孕大鼠离体子宫平滑肌收缩的抑制作用强弱依次为:四制香附石油醚部位﹥四制香附﹥α-香附酮﹥生香附,且α-香附酮、四制香附及其石油醚部位呈现剂量依赖性地抑制子宫平滑肌的收缩作用。结论:四制香附及其石油醚部位抑制子宫平滑肌收缩的作用优于α-香附酮和生香附。

香附炮制前后总皂苷含量比较研究

目的:研究香附炮制前后总皂苷含量的变化。方法:采用高氯酸显色法,以紫外-可见分光光度法进行测定。结果:香附醋炙后总皂苷含量比生品提高28.21%,酒炙提高22.48%。结论:香附炮制后总皂苷含量明显升高,醋炙比酒炙香附总皂苷含量高。总皂苷是否为香附中的有效成分有待于进一步研究。

以药理效应为指标考察建昌帮四制香附炮制工艺

目的:考察建昌帮四制香附炮制工艺。方法:采用均匀设计法炮制香附,运用回流提取法对香附成分进行提取,建立缩宫素所致小鼠在体痛经模型,考察不同炮制品的镇痛效果。结果:各给药组与模型组比较,其中U-2、U-3、U-4、U-6、U-7、U-11、U-12均有极显著性差异,U-8有显著性差异。结论:以药理效应为指标考察建昌帮四制香附的最佳炮制工艺为:生姜70g/kg、食盐4g/kg、黄酒0.3 kg/kg、米醋0.4 kg/kg,在180-190℃下炒制10分钟。

基于AMDIS和保留指数结合的GC-MS技术定性鉴别醋炙前后香附-艾叶药对中挥发油化学成分的变化

目的从药对的整体角度切入,以调经止痛的功效为评价模型,来探究醋炙对香附-艾叶药对整体配伍的影响。方法采用GC-MS结合AMDIS与保留指数鉴别方法并联合主成分分析寻找共性规律的研究策略,全面系统地分析了醋炙前后香附-艾叶药对中挥发油化学成分的变化。结果香附-艾叶(生品)挥发油中共鉴别出54种化学成分,而香附-艾叶(醋品)挥发油中共鉴别出52种化学成分。醋炙前后的香附-艾叶药对与醋炙前后的单味药中挥发油化学成分的变化并不一致。从整体来看,在醋香附-醋艾叶药对的挥发油中,多数低沸点化合物的含量降低,而高沸点化合物无明显变化,且大部分低沸点化合物主要归属于艾叶,大部分高沸点化合物主要归属于香附,α-香附酮的相对含量也有所增加。在醋香附-醋艾叶药对的挥发油中含量明显增加的化合物多为去氧倍半萜类化合物、长链脂肪醇和长链脂肪酮,而萜类氧化衍生物的含量则有所降低。结论采用GC-MS结合AMDIS与保留指数鉴别方法并联合主成分分析寻找共性规律的研究策略,可全面、科学和快速地鉴别醋炙前后香附-艾叶药对中挥发油的差异。从整体上看,醋炙使得香附-艾叶药对中挥发油的毒性减小,安全性增加,稳固并小幅增强了调经止痛的功效。

HPLC法比较4种醋香附中黄酮类成分含量研究

目的:采用高效液相色谱(HPLC)法比较4种醋制方法制备的醋香附饮片中黄酮类成分的差异,为控制香附炮制品的质量提供依据。方法:以芦丁、木犀草苷和木犀草素为指标性成分,采用Intersil ODS-3 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇为流动相A,0.1%磷酸水为流动相B,梯度洗脱(0~35 min,38%~38%A;35~45 min,38%~50%A;45~70 min,50%~50%A;70~110 min,50%~90%A),流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长为350 nm。结果:对芦丁、木犀草素和木犀草苷在选定的浓度范围内线性关系良好,其相关系数均>0.9997,加样回收率为98.10%、97.73%、98.20%,RSD%为1.56%、1.58%、1.22%,重复性、稳定性、精密度良好。3种黄酮成分总量由高到低依次为醋炙品>醋煮品>醋煮蒸品>醋蒸品>生品。结论:建立的HPLC法测定不同香附醋制品中芦丁、木犀草素和木犀草苷含量的方法简单、可行、重现性好,3种黄酮成分总量在醋炙品中最高。

香附在痛经方剂中的炮制与配伍规律探究

目的:探讨香附在痛经方剂中的炮制方法与配伍规律。方法:收集整理《中医方剂大辞典》中含香附的痛经复方共71首,用Microsoft Excel建立数据库,通过数据筛选等功能,研究香附在痛经方剂中的炮制方法与配伍规律。结果:香附在经期腹痛的方剂中最多见,较少出现在经后腹痛的方剂中。痛经方剂中香附多生用,经前腹痛方剂中炒香附使用频率居第二位,经期腹痛方剂中制香附使用频率居第二位。配伍出现频率较高的是香附-当归、香附-川芎、香附-白芍。经前腹痛的方剂中亦多用香附配伍延胡索等;经期腹痛的方剂中亦多用香附配伍木香等;经后腹痛的方剂中常用香附配伍艾叶等。结论:香附治疗痛经依据疼痛发生时期的不同而有炮制、配伍之异。

香附挥发油的提取工艺及其化学成分研究

优选香附挥发油提取的最佳工艺条件,鉴定挥发油的化学成分.以香附子油提取率为考察指标,以提取时间、料液比、浸泡时间、提取次数为考察因素进行正交试验,优选提取工艺参数的最佳组合;采用气质联用色谱(GC-MS)对挥发油主要成分进行分离分析.最佳提取工艺条件为:提取时间为2h,香附子料液比为1:3,浸泡时间为18h,提取次数为2次;通过GC-MS分析,从香附挥发油中分离鉴定了89种化学成分,α–香附酮含量为25%.在优选工艺参数下提取香附挥发油工艺稳定可行,从香附挥发油中鉴定了89种化学成分,其中,α–香附酮相对百分含量最高.

香附挥发油β-CD包合物制备工艺及其化学成分研究

目的:采用饱和水溶液法研究香附挥发油β-CD包合物的最佳制备工艺,并鉴定包合油的化学成分。方法:以挥发油的包合率为考察指标,以主客分子投料比、包合温度和包合时间为考察因素进行正交试验,优选出香附挥发油的最佳包合工艺;采用GC-MS对挥发油主要成分进行分离鉴定。结果:饱和水溶液法制备香附挥发油环糊精包合物的最佳主客分子投料比、包合温度和包合时间分别为1∶10、50℃和1h。包合油的化学成分有75个。结论:挥发油包合影响因素程度依次为A>B>C,最佳工艺条件为A3B2C1,即油∶β-CD比例为1∶10,恒温50℃搅拌,包合1h。挥发油化学成分多样化,β-CD是选择性包合的。

从体系的熵值变化探索江西建昌帮四制香附炮制科学内涵

目的利用信息熵阐释建昌帮四制香附炮制的科学内涵。方法通过熵值变化评估四制香附不同炮制体系全过程熵值-效应-特征组分,筛选出能代表建昌帮四制香附调经止痛效应的特征组分。结果以大鼠痛经模型、大鼠离体子宫肌张力模型、血液流变学的效应指标和HPLC指纹图为评价指标的本研究的数据分析显示,酒香附与醋香附在四种不同试验中最优目标权重为大鼠痛经模型,四制香附最优目标权重为大鼠离体子宫肌张力模型。进一步综合分析得到最优的合成条件,即原料比1∶1.6,反应时间为50 min,反应温度82℃。结论本研究筛选出能代表建昌帮四制香附调经止痛效应的特征组分,为中药炮制工艺提供数据参考,探明了传统炮制技术的科学内涵。

香附炮制历史沿革及现代研究进展

香附为临床常用中药,炮制历史悠久。为梳理其炮制进程,笔者从炮制辅料角度切入,通过系统查阅古代医案典籍、现代法典等相关文献资料,梳理香附炮制历史沿革,理清香附炮制发展脉络。经古今文献梳理后发现,香附古今炮制方法众多,不加辅料的制法有炒、煮、蒸等;加辅料的制法有醋制、童便制、姜制、盐制、酒制、多辅料制等,但随历史演变,一些特色辅料炮制法逐渐消失,现今多应用醋制品。地方炮制规范记载的香附制法颇多,存在“一地多法、各地各法”现象,缺乏统一质量标准,导致香附饮片质量参差不齐,甚至可能会影响临床用药的有效性。基于此,笔者通过对目前香附炮制研究过程中存在的问题进行分析,在香附古法炮制传承及饮片质量标准提升等方面进行展望,以期为香附炮制工艺与机制研究提供重要的文献依据和理论支持。

氧化铝陶瓷膜富集醋香附挥发油的工艺研究

目的考察100、300、800 nm和1、2μm 5种不同孔径氧化铝陶瓷膜分离醋香附(vinegar-processed Cyperi Rhizoma)挥发油的工艺,探索陶瓷膜用于中药挥发油分离的可行性,为实现油水混合物的规模化分离提供实验依据。方法采用水蒸气蒸馏法获得醋香附油水混合物,考察醋香附油水混合物粒径分布、平均膜孔径与稳定膜通量之间的相关性,采用化学需氧量定量评价挥发油截留率,并通过油水分离前后陶瓷膜表面宏观和溶液微观性质的变化来定性验证油水分离效果。结果2种小孔径氧化铝陶瓷膜(平均孔径100、300 nm)在0.10~0.20 MPa压力下挥发油截油率较高,但膜通量低,且易造成膜孔堵塞;2种中等孔径氧化铝陶瓷膜(平均孔径800 nm、1μm)在增加压力后通量显著增加,但挥发油截油率略有降低,分别在0.05 MPa和0.03 MPa时达到最佳分离效果;1种大孔径氧化铝陶瓷膜(平均孔径2μm)在不同压力下通量均较高,但挥发油截油率较低。结论在0.05 MPa和0.03 MPa 2种压力下,800 nm和1μm孔径氧化铝陶瓷膜可实现醋香附油水混合物中挥发油成分的富集,为深入研究陶瓷膜在分离中药油水混合物提供了实验依据。

香附炮制前后挥发油的GC-MS指纹图谱对比研究

目的建立香附生品、参照品和醋制品的挥发油GC-MS指纹图谱,拟从整体角度表征香附炮制前后化学信息的变化。方法采用GC-MS法,建立了3组香附挥发油的指纹图谱,并采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件A版进行数据分析。结果香附各制品相似度良好,验证了前期筛选的炮制工艺稳定可行。得到了香附生品共有峰52个、参照品28个、醋制品53个,鉴定了其中46个峰。对比分析发现,香附炮制后其挥发油成分种类、质量分数均有所变化;以生品为参照,对比参照品和醋制品共有成分,结果醋制品挥发油成分种类保留更为完整。结论以醋作为炮制辅料科学合理,可起到稳定保护香附挥发油成分的作用,为揭示香附醋制机制及其物质基础提供一定科学依据。

香附醋制前后香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮的含量比较

目的：研究醋制对香附中3种特征性成分香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮含量的影响.方法：采用HPLC测定醋制前后不同产地香附中3种成分的含量,Phenomenex C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相甲醇-水（68∶ 32）,检测波长242 nm,流速1.0 mL· min^-1,柱温30℃.结果：建立的含量测定方法稳定可靠,香附烯酮、圆柚酮及α-香附酮线性范围依次为0.260 ～0.912,0.028 ～0.098,0.082～ 0.286 μg;平均回收率分别为98.34％,97.87％,99.12％,RSD依次为1.48％,2.03％,1.37％.11个产地香附生品中香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮的质量分数分别为1.52 ～4.80,0.04 ～0.20,0.70 ～ 1.99 mg·g^-1;醋制后3种成分质量分数依次为1.55 ～4.96,0.04～ 0.19,0.61 ～1.97 mg·g^-1.结论：不同产地香附中3种成分含量差异较大,醋制后香附烯酮含量升高,圆柚酮和α-香附酮含量降低,为香附的醋制机制研究提供参考.

基于成分敲出策略辨识四制香附抗痛经的主要效应成分

目的:基于成分敲出策略对四制香附抗痛经的主要药效成分进行初步辨识,为该药材的后续研究提供参考。方法:采用硅胶柱色谱技术结合制备高效液相色谱法(HPLC)对四制香附石油醚部位中具有抗痛经作用的活性成分α-香附酮(A),香附烯酮(B)和sugeonol(C)分别按照敲出A,B,C,AB,AC,BC,ABC的方法不断敲出,从而得到各目标敲出成分A+,B+,C+,AB+,AC+,BC+,ABC+及其相应的阴性样品A-,B-,C-,AB-,AC-,BC-,ABC-,利用HPLC对各目标敲出成分及其阴性样品进行检测,通过小鼠离体子宫平滑肌收缩试验,探究各敲出目标成分及其对应阴性样品、石油醚部位对小鼠离体子宫平滑肌的影响。结果:α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分分别组合敲出的目标成分的抗痛经作用比单独敲出的目标成分强;与石油醚部位比较,阴性样品A-,B-,C-抗痛经作用明显下降;目标成分AB+的抗痛经作用强于敲出目标成分后的阴性样品AB-;阴性样品ABC-仍具有抗痛经作用;各敲出目标成分与其阴性样品的平均抑制率之和均比石油醚部位的平均抑制率大。结论:在中药整体水平上,证明α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分都是香附抗痛经作用的活性成分,并且三者之间可能存在着协同作用,其中α-香附酮与香附烯酮是香附抗痛经作用的主要药效物质,除了目标成分α-香附酮、香附烯酮和sugeonol外,香附中还存在着其他的抗痛经活性成分,各敲出目标成分与其阴性样品(其他成分的混合物)之间均可能存在着拮抗作用。

基于目标成分“敲入”的四制香附质量控制研究

目的:通过目标成分“敲入”,建立以关键药效组分为标示量的质量控制限度。方法:采用硅胶柱色谱技术结合高效液相色谱法对四制香附石油醚部位中具有活性的成分α-香附酮、香附烯酮及sugeonol进行敲出,获得阴性样品,将不同梯度α-香附酮(A)、香附烯酮(B)和sugeonol(C)分别依次按照敲入A、B、C、AB、AC、BC、ABC的方法不断敲入到其相对应阴性部位样品A^-、B^-、C^-、AB^-、AC^-、BC^-、ABC-中,探索香附药效成分对小鼠离体子宫平滑肌收缩的影响,建立量-效关系。结果:当α-香附酮敲入的量达到0.75倍量时,对离体子宫肌的抑制作用与石油醚部位等效,即α-香附酮在香附石油醚部位中的含量达到2.48%时;当香附烯酮敲入的量达到0.68倍时,即石油醚部位中香附烯酮的含量达到1.97%时,就可以与石油醚整体拥有相同的效果;当sugeonol敲入的量达到0.25倍,即石油醚部位中香附烯酮的含量达到0.028%时,对离体子宫肌的抑制作用与石油醚部位等效;将目标成分α-香附酮、香附烯酮及sugeonol进行组合敲入时,则含量要达目标成分1.00倍敲入时,才能达到与香附石油醚部位相同的作用效果,说明香附中的这3种化学成分之间可能存在着相互作用的关系。结论:建立了四制香附中各目标成分逐步敲入到其阴性品中的量与离体子宫肌收缩平均抑制率的“量-效”关系曲线,结果表明四制香附石油醚部位中α-香附酮的含量应该不低于2.48%,香附烯酮不低于1.97%,sugeonol不低于0.028%。