野生和养殖锦鲤肠道微生物多样性及功能预测

为探究不同生活环境下锦鲤肠道微生物的差异,本研究采用16S rRNA高通量测序技术对野生和养殖锦鲤肠道微生物组成进行分析。结果表明,锦鲤肠道微生物中的优势门为变形菌门(Proteobacteria,29.81%)、蓝细菌门(Cyanobacteria,25.57%)、绿弯菌门(Chloroflexi,18.16%);不同环境下锦鲤肠道菌群在数量和群落结构上都有明显差异,在属水平上,养殖环境下优势菌属有红细菌属(Rhodobacter)、藤黄色杆菌属(Luteolibacter)、泉发菌属(Crenothrix),野生环境下优势菌属有绿丝菌属(Chloronema)、纤发鞘丝蓝细菌属(Leptolyngbya)、暖绳菌属(Caldilinea);在种水平上,养殖环境下优势菌有Methylobacterium adhaesivum、琥珀黄杆菌(Flavobacterium succinicans)、胭脂甲杆菌(Methylobacterium komagatae)、湖泊玫瑰单胞菌(Roseomonas lacus);野生环境下优势菌有空腔污水球菌(Defluviicoccus vanus)、Proteocatella sphenisci、湖泊玫瑰单胞菌、Roseomonas massiliensis、索氏鲸杆菌(Cetobacterium somerae);α多样性分析显示养殖环境下锦鲤肠道微生物的多样性以及物种丰富度均比野生样本高;肠道微生物功能预测显示,L1、L2、L3水平最富集的KEGG通路分别是新陈代谢、氨基酸代谢和萜类和类固醇的生物合成,不同环境下差异显著的KEGG通路包括2-氧羧酸添加代谢、甜菜碱生物合成、安莎霉素的生物合成、双酚降解、丁酸盐代谢等。本研究从肠道微生物角度探究了锦鲤的环境适应性,为其健康养殖提供了新思路。

赤峰地区池塘养殖松浦镜鲤技术要点

松浦镜鲤(Cyprinuscarpio Songpu mirror)是在原松浦镜鲤选育系(F 4)的基础上,采用混合选育而得的优良品种。文章主要介绍了赤峰地区池塘养殖松浦镜鲤的池塘和水质条件、苗种投放、日常管理、养殖技术等要点,可供相关技术人员参考。

5种中草药对鲤血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及红细胞过氧化氢酶活性的影响

用分别添加3%刺五加、蒲公英、枸杞子、金银花和大蒜单方中草药的基础日粮饲喂鲤(Cyprinus carpio),在第15 d和第30 d测定其血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)及红细胞过氧化氢酶(CAT)活性。结果显示,15 d时,血清GOT活性仅大蒜组与对照组差异显著,血清GPT及红细胞CAT活性各试验组与对照组差异均不显著;30 d时,血清GOT活性各实验组与对照组的差异均不显著,血清GPT活性刺五加组和蒲公英组与对照组差异显著,红细胞CAT活性各实验组与对照组的差异均不显著。

中草药对鲤不同组织溶菌酶活性的影响

中草药具有增强机体免疫、抗氧化和抗疲劳等作用。在水温23℃下,给饲养在水族箱中平均体质量85.88±2.45g的鲤(Cyprinus carpio L)投喂添加了复方中草药AB(由甘草等组成)、CD(由茵陈、板蓝根等组成)的配合饲料和一个对照组,连续饲喂28d后,停食一天,采集实验鱼血清和组织(肝胰脏、脾、鳃)样本,测定溶菌酶含量。结果显示,29d时,CD组血清及各组织溶菌酶含量均与对照组有明显差异(P<0.05),AB组除肝胰脏组织外,血清和其余组织中的溶菌本科含量也和对照有显著性差异(P<0.05),但两种中草药之间溶菌本科含量除肝胰脏组织外无显著差异(P>0.05)。提示这两种复方中药均有不同程度促进鱼类免疫力的作用。

牛磺酸对鲤鱼诱食活性的初步研究

用牛磺酸作为诱食剂,以0.2%、0.4%、0.6%、0.8%的剂量将牛磺酸添加到基础饵料中,以基础饵料为对照,以鲤鱼为对象进行诱食活性试验,用one-way ANOVA检验统计分析,结果表明:牛磺酸对鲤鱼有明显的诱食作用,其中0.4%组诱食效果最佳,极显著地高于对照组(P<0.01)。

循环水系统结合鱼菜、紫外处理对镜鲤生长及水质的影响

为探索绿色环保的循环水养殖模式,设计循环水鱼菜共生系统(鱼菜组)、紫外灯鱼菜共生系统(鱼菜紫外灯组)及循环水养殖系统(循环水组),比较三种不同处理方式对镜鲤(Cyprinuscarpio var.specularis)、叶用莴苣(Lactuca sativa var.ramosa)生长和养殖水质的影响。结果显示,鱼菜组、鱼菜紫外灯组处理对镜鲤的生长无显著影响,但会显著影响镜鲤形态学指标,鱼菜组镜鲤肠体比显著低于循环水组。体成分方面,鱼菜组全鱼粗蛋白、粗脂肪显著高于循环水组,鱼菜组肝脏粗蛋白显著低于循环水组。鱼菜紫外灯组的细菌总数显著低于鱼菜组。水质方面,鱼菜组、鱼菜紫外灯组可显著降低系统中氨氮、硝酸盐氮及总磷总氮含量,鱼菜紫外灯组硝酸盐氮、总磷及总氮含量显著高于鱼菜组。综上所述,循环水系统耦合水培蔬菜单元可改善系统水质,改善鱼体成分,并且结合紫外灯处理可降低水体细菌总数。

苏云金芽孢杆菌对黄河鲤血液免疫效果研究

研究了苏云金芽孢杆菌对黄河鲤血液免疫应答的影响。将苏云金芽孢杆菌按1．0×10^11、3．0×10^11、5．0×10^11 cfu／kg3个浓度添加在鱼用全价颗粒饲料中，投喂经嗜水气单胞菌疫苗免疫组（‰～As）和未免疫组（B0～B3）黄河鲤。分别于0、15、30、40d时检测各组黄河鲤白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活性以及血清凝集抗体效价，并进行攻毒试验。结果表明：添加苏云金芽孢杆菌可使黄河鲤血液中自细胞吞噬活性和血清溶菌酶活性显著提高。添加组与对照组差异显著（P〈0．05），添加浓度越高，血液白细胞活性和溶菌酶活性越强。免疫组与未免疫组白细胞吞噬活性差异不显著（P〉0．05），而溶菌酶活性差异显著（P〈0．05）。在停止投喂后10d，白细胞活性、血清溶菌酶活性逐渐下降，但差异不显著（P〉0．05）。添加苏云金芽孢杆菌还可提高黄河鲤的凝集抗体效价及攻毒后的存活率。其中，当菌株添加浓度为5．0×10^11 cfu／kg时．受免疫的黄河鲤免疫保护率最高。即投喂苏云金芽孢杆菌对黄河鲤血液免疫应答有明显促进作用。

铅胁迫对建鲤鱼种的毒性试验

为评价重金属铅对鱼体的毒性,研究了铅对建鲤(Cyprinuscarpio var.Jian)鱼种的急性毒性及亚急性毒性。结果显示:铅的24hLC50为7.44mg/L,48hLC50为6.48mg/L,安全浓度(SC)为0.65mg/L,属于高毒;建鲤鱼种对铅的耐受性低于其他鱼种;亚急性试验过程中,鱼体中铅的含量随浓度的增大而上升,随时间的推移先升高,随后降低至平衡,到50d试验结束时,各铅浓度组鱼体中的含铅量均处于0.3μg/g湿重左右。

建鲤催乳素受体基因全长cDNA的克隆、序列分析与组织表达

为了解催乳素受体(Prolactin Receptor,PRLR)的基因序列及其在建鲤(Cyprinus carpio var.jian)渗透调节组织中的表达情况,采用同源克隆和末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends,RACE)的方法分离克隆了建鲤PRLR基因全长cDNA,得到2 440 bp的全长cDNA,包括1 821 bp的开放阅读框(ORF),213 bp的5′末端非编码区(UTR)以及406 bp的3′末端非编码区(UTR)。对该基因序列和推测的氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其他硬骨鱼类该基因的氨基酸序列相似度在37.46%～87.25%,与鲤(Cyprinus carpio)的氨基酸相似度最高(87.25%),鲫(Carassius auratus)次之(86.86%),和金头鲷(Sparus aurata)的相似度较低(41.87%),和人(Homo sapiens)最低(37.46%),表明不同物种间的PRLR的氨基酸序列具有较高的保守性。用实时定量PCR(RT-PCR)检测该基因在建鲤脑、肠、鳃、性腺、肝、脾、肾、皮肤中催乳素受体的相对表达量,其中鳃、肾、肠3个主要渗透调节组织的表达量较高,这表明建鲤的渗透调节组织是PRLR的主要表达场所,从定量角度提示了催乳素(prolactin,PRL)通过PRLR的表达,作用于渗透调节组织从而行使其渗透压调节功能。本研究旨在为进一步探索建鲤的渗透调控机制提供基础依据。

黑龙江地区锦鲤的饲养和抗寒研究

通过引进的日本原种锦鲤在黑龙江地区土池 (富营养 )饲养 ,采用与食用鲤鱼相同的养殖条件 ,对锦鲤一龄鱼、二龄鱼、三龄鱼、四龄鱼和亲鱼的成活率测定 ,分别达 77%、85%、95 %、94%、1 0 0 %。得出锦鲤适合黑龙江地区的土池养殖。进行原种锦鲤、杂交种锦鲤一龄鱼、二龄鱼和三龄鱼室内和自然条件下越冬成活率的比较 ,原种锦鲤在水温 1 1℃的室内越冬成活率较高。在高寒地区自然越冬条件下成活率接近 0 ,抗寒能力极差。但与荷包红鲤抗寒品系杂交的杂交种锦鲤 ,一龄鱼、二龄鱼和三龄鱼在自然条件越冬成活率分别达 56 6 %、86%和 81 1 %。抗寒性状可通过与荷包红鲤抗寒品系杂交遗传给杂交种锦鲤。并对自交种、杂交种的后代较好体色的锦鲤进行了统计 ,自交种后代为 35% ,同荷包红鲤抗寒品系的杂交种后代为 6 % ,杂交种后代体色较好的锦鲤明显低于自交种。

兴国红鲤受精卵皮层颗粒释放及卵子质膜修复重组的研究

用扫描电镜和透射电镜观察了兴国红鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏｖａｒ．ｓｉｎｇｕｏｎｅｎｓｉｓ）受精前后卵子质膜变化以及皮层颗粒释放的过程，初步提出了质膜修复重组的模式。结果表明，释放出的皮层颗粒内含物通过卵膜发达的管道网络系统排出；修复重组后的卵球质膜可能吸收了部分皮层颗粒包膜，这种新膜对于将来的卵裂可能有益。

谷氨酰胺在体内和体外试验中对鲤免疫力影响的研究

以鲤的中肾白细胞作为研究对象,研究了谷氨酰胺对鲤免疫细胞免疫力的影响。在培养基中分别添加浓度为0、0.5、1.0、1.5、2.0 mmol/L的谷氨酰胺,在细胞培养2、6、12、24 h后,分别测定白细胞的呼吸爆发活力。结果发现,添加谷氨酰胺后,鲤肾脏白细胞的呼吸爆发活力得到了明显提高(P<0.05),且随着培养时间的延长,呼吸爆发活力呈现先上升后下降的趋势,最高值出现在培养12 h后的2.0 mmol/L谷氨酰胺组。在鲤肾脏白细胞培养12、24 h后,测定鲤肾脏白细胞的吞噬活力,发现白细胞吞噬活力变化趋势和呼吸爆发活力相似,其最高值出现在1.5 mmol/L谷氨酰胺细胞培养24 h后的添加组,鲤肾脏白细胞对迟钝爱德华氏菌杀菌率变化趋势与吞噬活力相符,添加谷氨酰胺后的各组杀菌率最高值发生在1.5 mmol/L谷氨酰胺组,与1.0、2.0 mmol/L谷氨酰胺组之间差异均不显著(P>0.05),但均显著高于对照组及0.5 mmol/L谷氨酰胺组(P<0.05)。将平均体重37 g的鲤鱼分为5组,每组30条,体内注射0、50、100、150、200 mg/kg鱼体重的谷氨酰胺溶液,商业饲料投喂2周后分离中肾获取鲤肾脏白细胞,发现白细胞的呼吸爆发活力和增殖活力随谷氨酰胺浓度的增加而呈现先显著上升后趋于平稳的趋势(P<0.05),而吞噬活力则一直显著升高(P<0.05),最高值均出现在200 mg/kg谷氨酰胺注射组。综合结果表明,谷氨酰胺是鲤有效的免疫增强剂。

不同水温联合用药中恩诺沙星在鲤体内的药代动力学及残留的影响

为比较水温对没食子酸与恩诺沙星联合用药后恩诺沙星在福瑞鲤体内的药代动力学及其残留消除规律的影响,采用对照试验,将福瑞鲤随机分为高温组(26±1)℃和低温组(20±1)℃,没食子酸与恩诺沙星按质量比10∶1配伍后单次混饲口灌给药,用量为体质量2 mg/kg(以恩诺沙星计),血浆、肌肉、肝胰脏、肾脏各组织样品中的恩诺沙星含量经高效液相色谱法测定。数据经DAS 3.0药物代谢动力学软件的非房室模型统计矩方法分析。结果表明:恩诺沙星在血浆中高温组达峰时间T_(max)(0.75 h)早于低温组(4 h),且高温组达峰浓度C_(max)、药时曲线下面积AUC、表观分布容积Vz均大于低温组,分别为1.966 mg/L、130.122 mg/(L·h)、16.9 L/kg和1.610 mg/L、102.795 mg/(L·h)、3.186 L/kg。在鱼体肌肉、肝胰脏、肾脏中的药物浓度均呈现先升高后降低的变化趋势。高温组各组织中的药物在达峰前均高于低温组相应组织含量,而达峰后,高温组较低温组消除更快。表明水温对与没食子酸联用后恩诺沙星的吸收、分布、消除代谢均有较大促进作用。