CysLTR1通路调节铝负荷肝细胞氧化应激及凋亡机制

目的:研究CysLTR1通路调节铝负荷肝细胞氧化应激及凋亡的作用机制。方法:HL-7702细胞用RPMI-1640培养,分为正常对照组、铝负荷组、MK-571+铝组,分别给予相应药物干预后,用MTT法检测细胞活力,确定CysLTR1抑制剂(MK-571)给药浓度。采用细胞流式技术检测各组细胞凋亡的情况,运用试剂盒检测各组细胞中的ALT、AST水平,SOD和MDA含量。运用WB技术测定各组细胞中Caspase3、Caspase9、Bcl-2和BAX的蛋白表达。结果:给予MK-571(3nmol/L)可以提高铝负荷L02细胞生存率(P<0.01),并降低铝负荷L02细胞凋亡指数(P<0.01),降低铝负荷细胞中ALT和AST水平(P<0.01),减少MDA的含量(P<0.01),同时提高SOD的活力(P<0.01)。MK-571还可以下调铝负荷细胞中Caspase3、Caspase9和BAX蛋白的表达(P<0.05和P<0.01),上调Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。结论:CysLTR1通路调节铝负荷肝细胞氧化应激,影响细胞凋亡机制,保护铝负荷肝细胞凋亡。

蠲哮汤对哮喘大鼠肺组织CysLTs和CysLTR1 mRNA的影响

目的:探讨疏利气机、涤痰行瘀方蠲哮汤对哮喘大鼠肺组织CysLTs和CysLTR1 mRNA的影响。方法:将189只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、孟鲁司特钠组(C组)、地塞米松组(D组)、蠲哮汤低、中、高剂量组(E-G组),卵蛋白氢氧化铝溶液致敏,并长期雾化吸入卵蛋白激发哮喘,A组予0.9%氯化钠溶液雾化代替,分别持续1、2、4周,各时间点处死每组大鼠9只,检测肺组织CysLTs和CysLTR1mRNA。结果:肺组织CysLTs:同时间段,与B组比较,C组、D组、F组和G组CYSLTs表达显著下调(P<0.05)。不同时间段,各药物治疗组第4周CYSLTs表达显著低于本组第2周CYSLTs表达(P<0.05)。肺组织CysLTR1m RNA:同时间段,与B组比较,C组、D组、F组和G组CysLTR1 mRNA相对表达水平均显著下调(P<0.05)。不同时间段,各药物治疗组第4周CysLTR1 mRNA表达低于本组第2周CysLTR1 mRNA表达(P<0.05)。结论:蠲哮汤干预哮喘大鼠肺组织CysLTs和CysLTR1 mRNA有效。蠲哮汤可能是通过影响CysLTR1 mRNA表达干预CysLTR1介导的哮喘CysLTs炎症作用达到防治哮喘的目的。

基于气道炎症及Th1/Th2免疫通路探究抗支糖浆对雾化烟草提取物环境哮喘模型小鼠的影响

目的:基于气道炎症及Th1/Th2免疫通路探究抗支糖浆对雾化烟草提取物环境哮喘模型小鼠的影响。方法:将90只健康SPF级雌性KM小鼠随机分为9组,即空白组(A组)、模型组(B组)、模型+抗支糖浆低剂量组(C组)、模型+抗支糖浆高剂量组(D组)、模型+孟鲁司特组(E组)、模型+雾化烟草提取物组(F组)、模型+雾化烟草提取物+抗支糖浆低剂量组(G组)、模型+雾化烟草提取物+抗支糖浆高剂量组(H组)、模型+雾化烟草提取物+孟鲁司特组(I组)。除A组外,其他各组用卵白蛋白(OVA)联合氢氧化铝凝胶致敏及OVA雾化,并给予孟鲁司特片、抗支糖浆进行药物干预。F、G、H、I组给予雾化烟草提取物。实验后进行肺组织病理检查,统计肺泡灌洗液(BALF)中细胞的分类及计数,采用ELISA法测定BALF中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、LTD4的含量,Western Blot法和RT-PCR法检测CysLTR1的蛋白和基因表达。结果:空白组支气管及肺泡结构正常,未见明显病理改变,模型+雾化烟草提取物组病理改变最为明显。与空白组相比,其余组的白细胞总数、EOS绝对计数等各项指标均增多;模型组、模型+雾化烟草提取物组IFN-γ含量减少,其中,模型+雾化烟草提取物组减少更明显(P<0.05),而IL-4、IL-5、IL-13、LTD4含量增多(P<0.05);模型组、模型+雾化烟草提取物组CysLTR1的蛋白表达水平增多,模型+雾化烟草提取物组增多更明显(P<0.05);模型组、模型+雾化烟草提取物组CysLTR1mRNA相对表达量增多,模型+雾化烟草提取物组增多更明显(P<0.05)。经药物干预后,各给药组的生理生化指标均有不同程度好转。结论:抗支糖浆可改善雾化烟草提取物环境哮喘模型小鼠的一般病理状态,减轻雾化烟草提取物环境哮喘气道炎症,可通过调节IL-4、IL-5、IL-13、LTD4、IFN-γ的表达,恢复Th1/Th2免疫平衡状态,下调CysLTR1mRNA的表达,从而干预CysLTR1介导的哮喘CysLTs炎症通路,达到防治雾化烟草提取物环境哮喘的目的。

柴芍承气汤对脓毒症大鼠胰腺损伤的影响及机制研究

目的观察柴芍承气汤对脓毒症大鼠胰腺损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法36只Wistar大鼠随机分为对照组、脓毒症组和柴芍承气汤组,脓毒症组和柴芍承气汤组采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症模型,柴芍承气汤组于造模前1 h及造模后6 h各灌胃1次。生化法检测大鼠胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)、脂质过氧化物(LPO)、谷胱甘肽(GSH)水平,免疫组化和Western blot检测胰腺组织半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR1)、核因子(NF)-κB蛋白表达,TUNEL染色检测胰腺组织细胞凋亡情况。结果与对照组比较,脓毒症组大鼠胰腺组织MPO、LPO水平显著升高,GSH水平显著降低(P<0.001),CysLTR1、NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.001);与脓毒症组比较,柴芍承气汤组大鼠胰腺组织MPO、LPO水平显著降低,GSH水平显著升高(P<0.05,P<0.01),CysLTR1、NF-κB蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论柴芍承气汤对脓毒症大鼠胰腺损伤具有一定保护作用,其机制与抑制细胞凋亡,下调CysLTR1介导的NF-κB信号通路有关。