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SIRT5、CRIP1在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义
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作者 韩璐 纪爱芳 +2 位作者 魏子白 栗彦琪 王彪 《疑难病杂志》 CAS 2024年第4期390-394,共5页
目的探讨沉默调节蛋白5(SIRT5)、富含半胱氨酸肠蛋白1(CRIP1)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达及临床意义。方法选取2018年1月—2020年5月长治医学院附属和平医院肝胆外科手术切除HCC患者150例,采用免疫组化法检测HCC组织及癌旁组织中SIRT... 目的探讨沉默调节蛋白5(SIRT5)、富含半胱氨酸肠蛋白1(CRIP1)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达及临床意义。方法选取2018年1月—2020年5月长治医学院附属和平医院肝胆外科手术切除HCC患者150例,采用免疫组化法检测HCC组织及癌旁组织中SIRT5、CRIP1表达;分析SIRT5、CRIP1表达与HCC患者临床病理参数的关系;根据HCC组织中SIRT5、CRIP1表达水平将HCC患者分为SIRT5、CRIP1阳性/阴性表达组,采用Kaplan-Meier法绘制SIRT5、CRIP1阳性/阴性表达HCC患者生存曲线;采用Cox回归分析影响HCC患者预后的因素。结果与癌旁组织比较,HCC组织SIRT5阳性表达率降低,CRIP1阳性表达率升高(χ^(2)=40.991、42.946,P均<0.001)。肿瘤单发、肿瘤直径小、中高分化程度、无脉管侵犯、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的HCC组织较肿瘤多发、肿瘤直径大、低分化、有脉管侵犯、TNM分期Ⅲ期的患者SIRT5阳性表达率升高、CRIP1阳性表达率降低,差异均有统计学意义(SIRT5:χ^(2)/P=5.179/0.023、6.459/0.011、5.899/0.015、7.402/0.007、5.930/0.015;CRIP1:χ^(2)/P=4.275/0.039、5.442/0.002、6.459/0.011、6.394/0.011、5.655/0.017);随访3年,150例HCC患者失访11例,3年总生存率为56.83%(79/139)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,SIRT5阳性表达组3年总生存率高于SIRT5阴性表达组,CRIP1阳性表达组3年总生存率低于CRIP1阴性表达组(Log-rankχ^(2)=7.552、20.942,P=0.006、<0.001)。多因素Cox回归分析显示,肿瘤数目多发、肿瘤直径≥5 cm、低分化、脉管侵犯、TNM分期Ⅲ期、CRIP1阳性为HCC患者死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=2.685(1.031~6.999)、2.252(1.143~4.439)、4.181(1.735~10.076)、3.945(1.653~9.419)、3.485(1.492~8.141)、4.540(1.641~12.562),P均<0.05],SIRT5阳性为独立保护因素[OR(95%CI)=0.207(0.085~0.506),P<0.01]。结论HCC组织SIRT5低表达和CRIP1高表达,与肿瘤数目、肿瘤直径、分化程度、脉管侵犯、TNM分期和预后有关。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 沉默调节蛋白5 富含半胱氨酸肠蛋白1 病理参数 预后
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Structure and function of epididymal protein cysteine-rich secretory protein-1 被引量:4
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作者 Kenneth P. Roberts Daniel S. Johnston +5 位作者 Michael A. Nolan Joseph L. Wooters Nicole C. Waxmonsky Laura B. Piehl Kathy M. Ensrud-Bowlin David W. Hamilton 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2007年第4期508-514,共7页
Cysteine-rich secretory protein-1 (CRISP-1) is a glycoprotein secreted by the epididymal epithelium. It is a member of a large family of proteins characterized by two conserved domains and a set of 16 conserved cyst... Cysteine-rich secretory protein-1 (CRISP-1) is a glycoprotein secreted by the epididymal epithelium. It is a member of a large family of proteins characterized by two conserved domains and a set of 16 conserved cysteine residues. In mammals, CRISP-1 inhibits sperm-egg fusion and can suppress sperm capacitation. The molecular mechanism of action of the mammalian CRISP proteins remains unknown, but certain non-mammalian CRISP proteins can block ion channels. In the rat, CRISP-1 comprises two forms referred to as Proteins D and E. Recent work in our laboratory demonstrates that the D form of CRISP-1 associates transiently with the sperm surface, whereas the E form binds tightly. When the spermatozoa are washed, the E form of CRISP-1 persists on the sperm surface after all D form has dissociated. Cross-linking studies demonstrate different protein-protein interaction patterns for D and E, although no binding partners for either protein have yet been identified. Mass spectrometric analyses revealed a potential post-translational modification on the E form that is not present on the D form. This is the only discernable difference between Proteins D and E, and presumably is responsible for the difference in behavior of these two forms of rat CRISP- 1. These studies demonstrate that the more abundant D form interacts with spermatozoa transiently, possibly with a specific receptor on the sperm surface, consistent with a capacitation-suppressing function during sperm transit and storage in the epididymis, and also confirm a tightly bound population of the E form that could act in the female reproductive tract. (Asian J Androl 2007 July; 9: 508-514) 展开更多
关键词 cysteine-rich secretory protein-1 EPIDIDYMIS SPERM CAPACITATION
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肝细胞癌患者癌组织中CRIP1、STUB1表达及临床预后意义
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作者 张景 沈晨 +1 位作者 马鹏飞 郑幼伟 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第3期266-271,共6页
目的探讨肝细胞癌患者癌组织中富含半胱氨酸肠蛋白1(CRIP1)、STIP1同源性和包含U-box蛋白1(STUB1)表达及临床预后意义。方法选取2018年2月至2020年2月该院诊治的112例肝细胞癌患者作为研究对象。免疫组化法检测肝细胞癌患者癌组织和癌... 目的探讨肝细胞癌患者癌组织中富含半胱氨酸肠蛋白1(CRIP1)、STIP1同源性和包含U-box蛋白1(STUB1)表达及临床预后意义。方法选取2018年2月至2020年2月该院诊治的112例肝细胞癌患者作为研究对象。免疫组化法检测肝细胞癌患者癌组织和癌旁组织中CRIP1、STUB1表达。分析肝细胞癌患者癌组织CRIP1、STUB1表达与其临床病理特征的关系。Kaplan-Meier生存分析癌组织CRIP1、STUB1表达对肝细胞癌患者预后的影响。COX回归分析影响肝细胞癌预后的因素。结果肝细胞癌患者癌组织中CRIP1阳性率为62.50%(70/112),明显高于癌旁组织[7.14%(8/112)],差异有统计学意义(χ^(2)=76.652,P<0.05)。肝细胞癌患者癌组织中STUB1阳性率为26.23%(32/112),明显低于癌旁组织[82.14%(92/112)],差异有统计学意义(χ^(2)=73.284,P<0.05)。癌组织中CRIP1与STUB1表达呈负相关(r=-0.678,P<0.001)。不同肿瘤TNM分期、组织学分级及肿瘤最大径的肝细胞癌患者癌组织中CRIP1、STUB1阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CRIP1阳性组3年累积生存率明显低于CRIP1阴性组,差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=29.601,P<0.001)。STUB1阴性组3年累积生存率明显低于STUB1阳性组,差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=13.590,P<0.001)。肿瘤TNM分期Ⅱ~Ⅲ期、组织学分级Ⅲ级、肿瘤最大径>5 cm、CRIP1阳性、STUB1阴性是影响肝细胞癌患者预后的独立危险因素。结论肝细胞癌患者癌组织中CRIP1表达上调,STUB1表达下调,临床上可根据肝细胞癌患者癌组织中CRIP1、STUB1表达情况对患者预后进行评估。 展开更多
关键词 肝细胞癌 富含半胱氨酸肠蛋白1 STIP1同源性和包含U-box蛋白1 临床病理特征 预后
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枯草芽孢杆菌CH-1降解羽毛产物对Cr(Ⅵ)的还原作用
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作者 李茹桥 刘颖 +2 位作者 陈清旺 吴嘉沛 陈金军 《中国农学通报》 2024年第15期117-123,共7页
本研究旨在探索一种对环境友好的方法以减少重金属六价铬Cr(Ⅵ)的毒性。采用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CH-1发酵羽毛,制备出富含半胱氨酸的羽毛发酵液(Feather Fermentation Broth,FFB)。实验结果显示FFB能够有效地将有毒的六价... 本研究旨在探索一种对环境友好的方法以减少重金属六价铬Cr(Ⅵ)的毒性。采用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CH-1发酵羽毛,制备出富含半胱氨酸的羽毛发酵液(Feather Fermentation Broth,FFB)。实验结果显示FFB能够有效地将有毒的六价铬还原为相对无害的三价铬。通过对FFB的β-角蛋白酶酶活性、半胱氨酸浓度以及对六价铬Cr(Ⅵ)的还原率的测定。我们发现FFB中β-角蛋白酶酶活性在21 h左右达到最大值,而半胱氨酸含量在36 h达到最高值,Cr(Ⅵ)的还原效果最佳时间也是36 h。值得注意的是,即使经过高压高温处理,FFB对Cr(Ⅵ)的还原力并未受到影响,表明还原过程不依赖于生物酶的作用。进一步实验,将FFB上清原液浓缩5倍后处理重铬酸钾溶液,发现浓缩液的还原效果是原始上清液效果的1.5倍。研究表明枯草芽孢杆菌CH-1能较好地降解羽毛废弃物,水解产物中含大量半胱氨酸,对Cr(Ⅵ)具有显著的还原能力。综上所述,本研究提供了一种使用枯草芽孢杆菌CH-1无公害处理羽毛废弃物的新策略,并为其在循环农业生态系统中的应用提供了理论依据和精确计算方法。这一发现对于实现农业废弃物资源化利用,以及环境中有毒六价铬的安全处理具有重要意义。 展开更多
关键词 Cr(Ⅵ)还原 羽毛水解产物 枯草芽孢杆菌CH-1 角蛋白酶活性 半胱氨酸 环境治理
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芪地糖肾方调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导高糖刺激肾小球内皮细胞焦亡的研究
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作者 史扬 董昭熙 +5 位作者 周盈 谢惠迪 郭燕 宿家铭 郑毅成 柳红芳 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第1期1-7,共7页
目的 探究芪地糖肾方通过NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/消皮素D蛋白(NLRP3/Caspase-1/GSDMD)通路介导高糖刺激的肾小球内皮细胞焦亡的作用。方法 将肾小球内皮细胞分为正常组、高糖组、芪地糖肾方组,... 目的 探究芪地糖肾方通过NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/消皮素D蛋白(NLRP3/Caspase-1/GSDMD)通路介导高糖刺激的肾小球内皮细胞焦亡的作用。方法 将肾小球内皮细胞分为正常组、高糖组、芪地糖肾方组,分别予完全培养基、30 mmol/L高糖培养基、30 mmol/L高糖培养基+芪地糖肾方100μg/mL培养48 h,采用细胞免疫荧光染色法观察细胞中NLRP3表达情况及细胞骨架情况,采用Western blot法检测细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、消皮素D蛋白(GSDMD)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)表达情况。结果 与正常组比较,高糖组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号增强,细胞骨架损伤明显;与高糖组比较,芪地糖肾方组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号减弱,细胞骨架损伤状态改善。结论 芪地糖肾方可通过抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡相关通路激活改善高糖诱导的肾小球内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾脏病 肾小球内皮细胞 芪地糖肾方 焦亡 NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 消皮素D蛋白
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Synthesis of N1-Substituted-3-aryl-4-alkyl-4, 5-dihydro-1H-1-pyra-zolethiocarboxamide as Novel Small Molecule Inhibitors of Cysteine Protease of T.cruzi
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作者 ChunGUO XiaoHuiDU 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2002年第11期1043-1046,共4页
A series of N1-substituted-3-aryl-4-alkyl-4, 5-dihydro-1H-1-pyrazolethiocarboxamide were prepared from the Mannich bases of aryl ketones in good yields. Some derivatives were found to be active against the cysteine p... A series of N1-substituted-3-aryl-4-alkyl-4, 5-dihydro-1H-1-pyrazolethiocarboxamide were prepared from the Mannich bases of aryl ketones in good yields. Some derivatives were found to be active against the cysteine protease of T.cruzi.. 展开更多
关键词 N1-substituted-3-aryl-4-alkyl-4 5-dihydro-1H-1-pyrazolethiocarboxamide synthesis T.cruzi. cysteine protease inhibitor.
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老年2型糖尿病患者血清CYR61、caveolin-1水平与骨质疏松症的关系 被引量:5
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作者 赵波 许丙义 +1 位作者 徐海斌 黄媛霞 《广东医学》 CAS 2023年第2期224-228,共5页
目的探讨血清高半胱氨酸蛋白61(CYR61)、小凹蛋白-1(caveolin-1)水平与老年2型糖尿病(T2DM)患者合并骨质疏松症的关系。方法选取2020年3月至2022年8月就诊的208例T2DM患者作为研究对象。记录患者一般资料,根据骨密度检测结果分为骨量正... 目的探讨血清高半胱氨酸蛋白61(CYR61)、小凹蛋白-1(caveolin-1)水平与老年2型糖尿病(T2DM)患者合并骨质疏松症的关系。方法选取2020年3月至2022年8月就诊的208例T2DM患者作为研究对象。记录患者一般资料,根据骨密度检测结果分为骨量正常组(骨密度T值>1)60例、骨量减少组(-2.5<骨密度T值≤-1)62例、骨质疏松组(骨密度T值≤-2.5)86例。采用酶联免疫吸附法检测血清CYR61、caveolin-1水平,采用全自动电化学发光仪检测骨代谢标志物Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)、骨钙素(BGP)、25羟基维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)的水平;采用Pearson法分析T2DM合并骨质疏松症患者血清CYR61、caveolin-1水平与各指标的相关性;采用logistic多因素回归分析T2DM患者合并骨质疏松症的影响因素。结果骨质疏松组糖尿病病程、β-CTX显著高于骨量减少组和骨量正常组,血清CYR61、caveolin-1、PINP、BGP、25(OH)D_(3)水平显著低于骨量减少组和骨量正常组(P<0.05)。骨量减少组糖尿病病程、β-CTX显著高于骨量正常组,血清CYR61、caveolin-1、PINP、BGP、25(OH)D_(3)水平显著低于骨量正常组(P<0.05)。T2DM合并骨质疏松症患者CYR61与caveolin-1水平呈正相关(r=0.500,P<0.05),二者与PINP、BGP、25(OH)D_(3)呈正相关,与糖尿病病程、β-CTX呈负相关(P<0.05)。CYR61、caveolin-1是T2DM患者合并骨质疏松症的保护因素(P<0.05)。结论老年T2DM合并骨质疏松症患者血清CYR61、caveolin-1低表达,可一定程度反映患者骨代谢情况。 展开更多
关键词 老年2型糖尿病 骨质疏松症 高半胱氨酸蛋白61 小凹蛋白-1
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N-乙酰-L-半胱氨酸抗1型糖尿病模型比格犬晶状体上皮氧化损伤的作用 被引量:1
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作者 周水莲 白雨曼 +6 位作者 谢文婷 黄健佳 邱文粤 庞晓玥 章心婷 唐兆新 苏荣胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期361-370,共10页
本研究旨在探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对1型糖尿病模型比格犬晶状体上皮氧化损伤的影响。将40只2~3岁比格犬随机分为对照组(CON组)、糖尿病模型组(DM组)、胰岛素治疗组(INS组)、NAC联合胰岛素治疗组(NAC+INS组)和NAC治疗组(NAC组),每组... 本研究旨在探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对1型糖尿病模型比格犬晶状体上皮氧化损伤的影响。将40只2~3岁比格犬随机分为对照组(CON组)、糖尿病模型组(DM组)、胰岛素治疗组(INS组)、NAC联合胰岛素治疗组(NAC+INS组)和NAC治疗组(NAC组),每组8只,各治疗组试验犬模型建立持续120 d。在造模前及造模后按试验设定时间对犬进行空腹血糖监测、胰岛素释放试验、房水葡萄糖测定、用裂隙灯进行白内障等级评定。对眼晶状体上皮进行病理组织学观察的同时,利用ELISA、RT-PCR等方法对晶状体内氧化应激指标进行检测。试验结果显示:空腹血糖监测和胰岛素释放试验显示,成功建立了1型糖尿病比格犬模型;与CON组相比,DM组犬在试验结束时,血清及房水葡萄糖显著升高(P<0.05),晶状体功能明显下降;裂隙灯结果显示,DM组犬的晶状体混浊等级在试验结束时达Ⅳ级,其余4组并未出现明显皮质混浊迹象,且DM组的晶状体上皮出现细胞核固缩和坏死小体等较为明显的病理变化;NAC、INS和NAC+INS组血糖虽呈下降趋势,但仍高于CON组,其中,NAC+INS组血糖较DM组显著下降(P<0.05),晶状体混浊也明显改善;试验结束时,与CON组相比,DM组犬晶体上皮和房水MDA含量升高(P<0.05或P<0.01),GSH-Px活性和GSH/GSSG均显著下降(P<0.05或P<0.01),GR活性下降(晶状体上皮,P>0.05;房水,P<0.01),给予NAC联合胰岛素治疗后,晶体上皮内的氧化应激标志物均出现相反趋势;DM组及各治疗组中抗氧化相关基因SOD2和GR表达量均显著升高(P<0.05)。综上:NAC联合胰岛素治疗能有效改善糖尿病犬的血糖和晶状体功能,NAC联合胰岛素治疗后对糖尿病犬晶状体上皮损伤的保护作用可能和抑制晶状体的氧化应激有关。 展开更多
关键词 1型糖尿病 糖尿病性白内障 晶状体上皮细胞 氧化应激 N-乙酰-L-半胱氨酸
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Preventive and therapeutic effect of N-Acetyl-L-cysteine on infection-associated preterm labor in mice 被引量:2
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作者 Ling Jiang Qian Yan +1 位作者 Rong-Hui Liu Lu Zhang 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2016年第2期195-198,共4页
Objective:To study the preventive and therapeutic effect of N-Acetyl-L-cysteine on infectionassociated preterm labor in mice.Methods:A total of 66 C57BL/6 inbred strain pregnant mice were selected and randomly divided... Objective:To study the preventive and therapeutic effect of N-Acetyl-L-cysteine on infectionassociated preterm labor in mice.Methods:A total of 66 C57BL/6 inbred strain pregnant mice were selected and randomly divided into groups A,B and C,with 22 cases in each group.Group A,B and C were regarded as model group,prevention group and treatment group,respectively.The model of infection-associated preterm labor was built by intraperitoneal injection of Escherichia coli.Ten mice of each group were taken and observed the preterm birth rates and live birth rates,respectively.Three mice of each group were killed at 3 h,6 h,12 h and 24 h after building the model.Their uterus tissues were collected and the expressions of the AP-1 and MCP-1 in those tissues were assayed with immunohistochemical method and the expressions of NF-κ Bp65 and TNF- protein in the placenta tissues of those mice were also detected with immunohistochemical method.Results:The preterm birth rates of mice in groups B and C were significantly lower than that in group A,while their live birth rates were distinctly higher than that in group A(P<0.05);the expressions of the AP-1 and MCP-1 in the uterus tissues and NF-κ Bp65 and TNF- protein in the placenta tissues of mice in groups B and C were evidently lower than those in group A(P<0.05);the comparison of the expressions of the NF-κ Bp65 and TNF- between group B and C showed no statistical differences(P>0.05).Conclusions:N-Acetyl-L-cysteine can lower the incidence rate of infection-associated preterm labor by prohibiting the activation of the protein AP-1/MCP-1and decreasing the expression of NF- κ Bp65 and TNF- in the pregnant tissues of premature mice to reduce the inflammatory reactions. 展开更多
关键词 N-ACETYL-L-cysteine Infection-associated PRETERM labor AP-1 MCP-1 NF-κ BP65 TNF-α
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SIRT1、FAP-α、caspase-3在结直肠癌中的表达及相关性 被引量:1
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作者 王春华 杜刚 +1 位作者 杜永刚 邓亨怡 《河北医药》 CAS 2023年第12期1770-1774,共5页
目的探究沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、成纤维细胞活化蛋白-α(fibroblast activation protein-α,FAP-α)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine aspartase-3,caspase-3)在结直肠癌中的表达及相关性。方法... 目的探究沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、成纤维细胞活化蛋白-α(fibroblast activation protein-α,FAP-α)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine aspartase-3,caspase-3)在结直肠癌中的表达及相关性。方法收集2021年4月至2022年4月整理归档较为完整的45例为结直肠癌组织石蜡标本,另外选取45例为距离癌组织边缘5 cm的癌旁组织石蜡标本。采取免疫组化法检测SIRT1、FAP-α、caspase-3水平表达,分析SIRT1、FAP-α、caspase-3在结直肠癌中的表达变化及与预后的相关性。结果与癌旁组织相比,结直肠癌组织中SIRT1、FAP-α、caspase-3表达量均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组织中SIRT1、FAP-α、caspase-3表达与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤位置、远处转移无关,与淋巴结转移、肿瘤的直径、组织学类别、浸润程度、TNM分期、脉管瘤栓、分化程度有关相关,差异有统计学意义(P<0.05)。SIRT1、FAP-α、caspase-3之间Pearson相关性分析显示,SIRT1、FAP-α之间呈正相关(r=0.534,P=0.001);FAP-α、caspase-3之间呈正相关(r=0.556,P=0.001);SIRT1、caspase-3之间呈正相关(r=0.585,P=0.001)。ROC曲线显示,三项联合对结直肠癌的诊断价值高于SIRT1、FAP-α、caspase-3单项诊断(P=0.001)。结论结直肠癌患者机体内SIRT1、FAP-α、caspase-3水平表达上升,可看出其水平变化与结直肠癌患者产生病症有密切的关联,因此三者可作为预测结直肠癌患者治疗的重要依据。 展开更多
关键词 结直肠癌 沉默信息调节因子1 成纤维细胞活化蛋白-α 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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达格列净通过Caspase-1介导的细胞焦亡对糖尿病肾病小鼠肾损伤的影响 被引量:3
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作者 王莹 殷豆豆 巢楠 《中国医药导报》 CAS 2023年第8期34-37,共4页
目的基于胱天蛋白酶-1(Caspase-1)通路介导的细胞焦亡作用,探究达格列净(DAP)对糖尿病肾病(DN)小鼠肾损伤的影响。方法取30只SPF级C57BL/6雄性小鼠,8周龄,体重17~25 g,根据随机数字表法将其分为对照组、模型组、DAP组,每组10只。模型组... 目的基于胱天蛋白酶-1(Caspase-1)通路介导的细胞焦亡作用,探究达格列净(DAP)对糖尿病肾病(DN)小鼠肾损伤的影响。方法取30只SPF级C57BL/6雄性小鼠,8周龄,体重17~25 g,根据随机数字表法将其分为对照组、模型组、DAP组,每组10只。模型组、DAP组建立DN模型,对照组给予普通饲料。DAP组灌胃给予1 mg/(kg·d)DAP,对照组及模型组均灌胃给予等量生理盐水,连续给药4周。药物干预后比较各组小鼠的一般情况,血肌酐、24 h尿蛋白、血清白细胞介素-18(IL-18)水平;观察肾脏病理学变化;比较小鼠肾组织Caspase-1通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组精神萎靡,活动减少,偶有颤抖,尿量显著增多,体型较瘦;与模型组比较,DAP组有多饮多食现象,尿量增多不明显,活动正常。与对照组比较,模型组24 h尿蛋白、血肌酐、血清IL-18水平及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、GSDMD、IL-18蛋白水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,DAP组小鼠24 h尿蛋白、血肌酐、血清IL-18水平及NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-18蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论DAP可能通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路活化抑制细胞焦亡,保护肾脏。 展开更多
关键词 达格列净 半胱天冬酶-1通路 细胞焦亡 糖尿病肾病
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颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水患者血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平变化及意义 被引量:6
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作者 黄永健 麦玲 +4 位作者 罗婷 王崇科 方孟秋 何咸锰 黄毅 《山东医药》 CAS 2023年第10期31-35,共5页
目的探讨颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水患者血清半胱氨酸蛋白酶裂解细胞角蛋白-18(CCCK-18)、神经轴突向导因子-1(Netrin-1)、乙酰肝素酶(HPA)水平变化及意义。方法选取200例颅内动脉瘤破裂后蛛网膜下腔出血患者,根据患者血管内... 目的探讨颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水患者血清半胱氨酸蛋白酶裂解细胞角蛋白-18(CCCK-18)、神经轴突向导因子-1(Netrin-1)、乙酰肝素酶(HPA)水平变化及意义。方法选取200例颅内动脉瘤破裂后蛛网膜下腔出血患者,根据患者血管内介入术后是否发生慢性脑积水分为发生组52例与未发生组148例。比较两组临床资料及血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平,Logistic回归分析颅内动脉瘤患者血管内介入术后慢性脑积水的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价CCCK-18、Netrin-1、HPA对颅内动脉瘤患者血管内介入术后慢性脑积水的预测价值,比较不同血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平患者生存预后情况。结果发生组年龄、Hunthess分级及Fisher分级与未发生组比较差异有统计学意义(P均<0.05);发生组术后第1、3、7天血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平均高于对照组(P均<0.05);Logistic回归分析结果显示,CCCK-18、Netrin-1、HPA均为颅内动脉瘤患者血管内介入术后慢性脑积水发生的影响因素(P均<0.05);CCCK-18、Netrin-1、HPA联合预测颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水的AUC为0.927,较单一指标预测AUC大(P均<0.05);术后第3天CCCK-18、Netrin-1、HPA高水平患者30 d内病死率高于低水平患者(P均<0.05)。结论颅内动脉瘤血管内介入术后慢性脑积水患者血清CCCK-18、Netrin-1、HPA水平较高,联合检测有助于慢性脑积水预测及预后评估。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤 血管内介入术 慢性脑积水 半胱氨酸蛋白酶裂解细胞角蛋白-18 神经轴突向导因子-1 乙酰肝素酶
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人重组骨形态发生蛋白7通过下调半胱氨酸蛋白酶-1/焦孔素D信号通路抑制高糖诱导的近曲小管上皮细胞的焦亡
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作者 魏凯悦 米焱 +3 位作者 王彩丽 吴雅茹 张丁予 高和平 《临床肾脏病杂志》 2023年第5期403-411,共9页
目的 观察人重组骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)对高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的焦亡和炎症反应的作用。方法 体外培养高糖(high glucose,HG)刺激的HK-2细胞... 目的 观察人重组骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)对高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的焦亡和炎症反应的作用。方法 体外培养高糖(high glucose,HG)刺激的HK-2细胞模拟糖尿病肾病模型。分为正常浓度葡萄糖对照组(Control)、高浓度葡萄糖组(HG)、Control+rhBMP-7组、HG+rhBMP-7组。采用免疫荧光方法检测HK-2细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SAM)、焦孔素D(gasderminD, GSDMD)蛋白和焦孔素E(gasderminE, GSDME)蛋白;TUNEL染色检测细胞死亡情况;蛋白质印迹法检测各组HK-2细胞中焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、半胱氨酸蛋白酶-4(caspase-4)、半胱氨酸蛋白酶-5(caspase-5)、 N-GSDMD和GAPDH的表达;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组HK-2细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果 与Control组相比,高糖组HK-2细胞Tunel染色的阳性率明显增加,差异具有统计学意义(P<0.000 1),α-SMA蛋白和α-SMA mRNA表达量也显著增加(P<0.000 1),E-cadherin蛋白和Ecadherin mRNA表达量显著下降(P=0.000 6,P<0.000 1);HG组添加rhBMP-7后α-SMA蛋白和m RNA水平显著下降(P=0.011 7, P=0.002), E-cadherin蛋白和m RNA水平明显升高(P=0.001 5,P<0.000 1)。与对照组比较,HG组HK-2细胞GSDME/GSDMD蛋白的荧光信号明显增强。进而,HG组添加rhBMP-7后GSDME/GSDMD蛋白荧光信号显著减弱。同样,HG组HK-2细胞中焦亡相关蛋白caspase-1、caspase-4、caspase-5以及GSDMD的表达量显著高于对照组,差异明显(均P<0.001)。HG组添加rhBMP-7后焦亡相关蛋白的表达明显下降(分别P<0.001,P=0.002,P<0.001)。与对照组比较,HG组HK-2细胞培养上清液中IL-1β和IL-18蛋白浓度显著增加(均P<0.001)。进而导致rhBMP-7干预后HG组细胞上清液中IL-10和IL-1β蛋白浓度明显减少(P<0.001)。结论 rhBMP-7具有抑制HK-2细胞焦亡的作用,其通过调控caspase-1/GSDMD信号通路减缓高糖诱导的HK-2细胞焦亡。 展开更多
关键词 人肾皮质近曲小管上皮细胞 人重组骨形态发生蛋白-7 细胞焦亡 半胱氨酸蛋白酶-1/焦孔素D
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乙型肝炎肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎患者外周血单个核细胞NLRP3和Caspase-1水平变化及其临床意义探讨 被引量:2
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作者 冯冬霞 奚晶 +2 位作者 杨振斌 刘亚芹 胡茜莹 《实用肝脏病杂志》 CAS 2023年第5期682-685,共4页
目的 探讨乙型肝炎肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者外周血单个核细胞(PBMCs)核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)和半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)水平变化及其预测预后的价值。方法 2018年1月~2020年5月我院诊治的乙型肝炎... 目的 探讨乙型肝炎肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者外周血单个核细胞(PBMCs)核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)和半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)水平变化及其预测预后的价值。方法 2018年1月~2020年5月我院诊治的乙型肝炎肝硬化并发SBP患者65例,采用PCR法检测PBMCs NLRP3和Caspase-1 mRNA水平,采用ELISA法检测血清血白介素-1β(IL-1β)和IL-18水平。应用受试者工作特征曲线并计算曲线下面积(AUC)分析各指标对患者预后的预测价值。结果 21例重症组PBMCs NLRP3和Caspase-1 mRNA水平及血清IL-1β和IL-18水平分别为(1.5±0.3)和(2.0±0.4)、(11.7±2.1)pg/mL和(17.4±1.6)pg/mL,显著高于44例轻症组【分别为(1.1±0.2)和(1.6±0.3)、(8.6±1.3)pg/mL和(12.1±1.3)pg/mL,P<0.05】;应用PBMCs NLRP3联合Caspase-1水平评估SBP患者病情严重程度的AUC为0.899,SE(95%CI)=0.036(0.828~0.971);15例死亡组PBMCs NLRP3和Caspase-1 mRNA水平及血清IL-1β和IL-18水平分别为(1.7±0.3)和(2.3±0.5)、(12.5±2.2)pg/mL和(18.2±3.1)pg/mL,显著高于50例生存组【分别为(1.1±0.2)和(1.6±0.3)、(8.9±1.8)pg/mL和(12.7±2.5)pg/mL,P<0.05】;应用PBMCs NLRP3联合Caspase-1水平预测患者预后的AUC为0.916,SE(95%CI)=0.043(0.831~0.999)。结论 乙型肝炎肝硬化并发SBP患者PBMCs NLRP3和Caspase-1水平升高,可能与病情严重程度相关,其机制仍需要研究。 展开更多
关键词 肝硬化 自发性细菌性腹膜炎 外周血单个核细胞 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 预后
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TIM-3、CCN1及SII与胃癌患者预后的关系 被引量:3
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作者 陈胜利 邢世江 +3 位作者 李新 许家健 曾欢玲 赵玉华 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2023年第4期373-377,共5页
目的分析T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(TIM-3)、结缔组织生长因子/富含半胱氨酸61/肾母细胞瘤-1(CCN1)及全身免疫炎症指数(SII)与胃癌患者预后的关系及其预测价值。方法选择于2018年1月至2022年1月收治于南方医科大学附属小榄医院的120例胃... 目的分析T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(TIM-3)、结缔组织生长因子/富含半胱氨酸61/肾母细胞瘤-1(CCN1)及全身免疫炎症指数(SII)与胃癌患者预后的关系及其预测价值。方法选择于2018年1月至2022年1月收治于南方医科大学附属小榄医院的120例胃癌患者,所有患者治疗后随访1年,根据其是否复发或死亡分为预后良好组与预后不良组。单因素分析影响胃癌患者预后的相关因素,Logistic回归分析明确影响胃癌患者预后的危险因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析TIM-3、CCN1及SII对胃癌患者预后不良的预测价值。结果与预后良好组比较,预后不良组患者pTNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤最大径≥5 cm占比、TIM-3、CCN1阳性表达率及SII均明显更高(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,pTNM分期、肿瘤最大径、TIM-3、CCN1及SII是影响胃癌患者预后不良的危险因素(P<0.05);TIM-3、CCN1及SII预测胃癌患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.725、0.748、0.837,三者联合预测胃癌患者预后不良的AUC为0.916,明显大于三者单独预测(P<0.05)。结论pTNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤最大径≥5 cm、TIM-3、CCN1异常表达及SII异常上升可提示胃癌患者预后不良,且TIM-3、CCN1及SII联合检测对预测胃癌患者预后不良的价值较高。 展开更多
关键词 T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3 结缔组织生长因子/富含半胱氨酸61/肾母细胞瘤-1 全身免疫炎症指数 胃癌
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DFT Study of Geometrical and Vibrational Features of Sulfur Containing Amino Acids in Hydrated Media: L-Cysteine and L-Methionine
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作者 Mama Nsangou Jonathan Koyambo-Konzapa Jean Jules Fifen 《Journal of Chemistry and Chemical Engineering》 2013年第9期850-871,共22页
关键词 L-半胱氨酸 L-蛋氨酸 含硫氨基酸 振动模式 几何优化 密度泛函理论 水合 媒体
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以壳聚糖纳米微球为载体的Crisp1-DNA避孕疫苗的制备及体外表达 被引量:4
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作者 罗金 杨菁 +2 位作者 程琰 张怡 徐望明 《生殖医学杂志》 CAS 2016年第10期947-952,共6页
目的构建以壳聚糖纳米微球为载体的Crisp1DNA疫苗,对其物理学、生物学活性进行测定,并评估其在COS-7细胞中的表达情况及细胞毒性。方法采用本实验室前期构建的真核表达质粒pcDNA3.1-Crisp1,以复凝法制备载Crisp1DNA疫苗的壳聚糖纳米粒(C... 目的构建以壳聚糖纳米微球为载体的Crisp1DNA疫苗,对其物理学、生物学活性进行测定,并评估其在COS-7细胞中的表达情况及细胞毒性。方法采用本实验室前期构建的真核表达质粒pcDNA3.1-Crisp1,以复凝法制备载Crisp1DNA疫苗的壳聚糖纳米粒(CS/DNA NPs),用透射电镜以及凝胶阻滞分析对其相关物理学、生物学活性进行测定,然后将载Crisp1DNA疫苗的壳聚糖纳米粒转染至COS-7细胞,检测其细胞毒性,并用间接免疫荧光法鉴定其在细胞内的表达情况。结果透射电镜结果显示纳米粒形态较均一,平均粒径为189.3nm,Zeta电位约为+0.2mV。凝胶阻滞分析显示壳聚糖微粒可将DNA疫苗完全阻滞于加样孔中并保护DNA质粒不降解。MTT试验显示壳聚糖组细胞存活率显著高于脂质体组(P<0.01)。间接免疫荧光实验结果显示CS/DNA NPs能在COS-7细胞中有效表达Crisp 1抗原蛋白。结论由壳聚糖纳米微球介导的Crisp1DNA疫苗,可在真核细胞中有效地表达,且具有较小的细胞毒性,为进一步发展安全有效的DNA避孕疫苗打下了基础。 展开更多
关键词 Crisp-1 避孕 DNA疫苗 壳聚糖 纳米微球
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富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2在神经母细胞瘤恶性进展中的功能和机制
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作者 张瑶 郭金鑫 +6 位作者 战世佳 洪恩宇 杨慧 贾安娜 常艳 郭永丽 张璇 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期495-504,共10页
目的:探究富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2(cysteine and glycine-rich protein 2,CSRP2)在神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)恶性进展中的功能和作用机制。方法:利用R2数据库分析NB临床样本中CSRP2基因的mRNA水平与NB患儿临床预后的相关性;在N... 目的:探究富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2(cysteine and glycine-rich protein 2,CSRP2)在神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)恶性进展中的功能和作用机制。方法:利用R2数据库分析NB临床样本中CSRP2基因的mRNA水平与NB患儿临床预后的相关性;在NB细胞系SK-N-BE(2)和SH-SY5Y中利用靶向小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰CSRP2的表达或利用质粒转染过表达CSRP2;通过结晶紫染色和实时无标记动态细胞分析技术观察NB细胞的增殖情况;采用克隆形成方法观察NB细胞长时间的克隆形成能力;利用免疫荧光实验检测细胞增殖标记物Ki-67的水平;利用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色流式细胞术分析细胞周期比例,Annexin V/7AAD染色分析细胞凋亡比例;采用划痕实验观察细胞的迁移能力;利用Western blot或实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测NB原发肿瘤组织和细胞系中蛋白和基因的表达水平。结果:NB临床数据库中,国际神经母细胞瘤分期(international neuroblastoma staging system,INSS)为高危险度3/4期的NB组织中CSRP2的mRNA水平显著高于低危险度的1/2期,且高表达水平组NB患儿的生存期显著低于低表达组;Western blot结果显示,CSRP2在3/4期NB组织中的蛋白水平显著高于1/2期。NB细胞中敲低CSRP2,细胞的活力减弱、增殖能力降低;NB细胞中过表达CSRP2促进细胞增殖;敲低CSRP2后,sub-G1、G0/G1和S期细胞的比例增加,Annexin V阳性细胞的比例增多;敲低CSRP2的NB细胞的划痕愈合率显著小于对照组。机制研究发现,敲低CSRP2后细胞增殖标记分子Ki-67和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases 1/2,ERK1/2)磷酸化水平显著低于对照组。结论:CSRP2在高危险度3/4期NB组织中高表达,表达水平与NB患儿生存期呈负相关;CSRP2通过促进ERK1/2活化,促进NB细胞的增殖和迁移,抑制细胞凋亡,表明CSRP2通过激活ERK1/2促进NB进展,为高危NB的靶向治疗提供了潜在的靶点。 展开更多
关键词 富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2 神经母细胞瘤 细胞增殖 细胞迁移 细胞外信号调节激酶1/2
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结肠癌组织中Cyr61和HPA-1的表达水平及其在侵袭转移中的作用 被引量:5
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作者 崔京远 马红 +2 位作者 马文慧 亓玉琴 许之美 《中国现代普通外科进展》 CAS 2012年第6期439-443,共5页
目的:检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白、乙酰肝素酶(HPA-1)蛋白及Cyr61基因、HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌中侵袭转移的机制及关系。方法:用western blot方法检测结肠癌组织Cyr61和HPA-1的蛋白表达水平,用实时荧... 目的:检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白、乙酰肝素酶(HPA-1)蛋白及Cyr61基因、HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌中侵袭转移的机制及关系。方法:用western blot方法检测结肠癌组织Cyr61和HPA-1的蛋白表达水平,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测结肠癌Cyr61和HPA-1的基因表达水平,分析二者与结肠癌的临床病理特征的关系。结果:结肠癌中Cyr61蛋白及HPA-1蛋白的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织(P均<0.001);结肠癌中Cyr61 mRNA及HPA-1 mRNA的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织(P均<0.001)。Cyr61蛋白及基因和HPA-1蛋白及基因表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期等相关(P均<0.05)。结论:Cyr61蛋白、HPA-1蛋白及Cyr61 mRNA、HPA-1 mRNA在结肠癌组织中呈高表达,可促进结肠癌的侵袭转移。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 富含半胱氨酸61 乙酰肝素酶 蛋白免疫印迹法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
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半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1的基因克隆真核表达及细胞定位 被引量:2
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作者 刘家宏 徐小洁 +5 位作者 符静 范忠义 吕朝晖 陆菊明 朱建华 叶棋浓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期690-693,共4页
目的构建带FLAG标签的半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1(CRP1)的真核表达载体,明确该融合蛋白在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞和乳腺癌ZR75-1细胞中的表达及定位情况。方法采用PCR技术从乳腺cDNA文库中扩增出人CRP1基因,并将其插入到pCMV-Ta... 目的构建带FLAG标签的半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1(CRP1)的真核表达载体,明确该融合蛋白在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞和乳腺癌ZR75-1细胞中的表达及定位情况。方法采用PCR技术从乳腺cDNA文库中扩增出人CRP1基因,并将其插入到pCMV-Tag2B表达载体中;将重组质粒转染人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞,Western blot法检测转染细胞的表达情况;荧光显微镜观察pCMV-FLAG-CRP1在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞中的定位。结果双酶切和测序鉴定表明,pCMV-FLAG-CRP1真核表达质粒构建成功;Western blot法检测pCMV-FLAG-CRP1转染293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞后成功表达;荧光显微镜下观察,在293T、HepG2、ZR75-1细胞中,CRP1在细胞质和细胞核中均有分布,且胞质信号强于胞核。结论成功构建pCMV-FLAG-CRP1真核表达载体,CRP1可在不同细胞中的胞质和胞核表达。 展开更多
关键词 半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1(CRP1) 293T细胞 HEPG2细胞 乳腺癌ZR75-1细胞
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