溃疡性结肠炎患者结肠黏膜组织微小RNA-155和细胞因子信号转导抑制因子1表达与疾病严重程度的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者结肠黏膜组织微小RNA-155(miR-155)、细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)表达水平与疾病严重程度的关系。方法选取2021年9月至2023年6月河北北方学院附属第二医院收治的UC患者130例。按照改良Mayo评分系统将患者分为活动期组(n=85)和缓解期组(n=45);根据改良Truelove和Witts分型标准将UC活动期患者分为轻度组(n=35)、中度组(n=30)和重度组(n=20)。同时选取健康体检行结肠镜检查或结肠单发息肉切除术后复查结肠镜结果正常并排除其他疾病者共90例作为对照组。收集UC患者病变显著的结肠段黏膜组织和对照组距肛门20 cm处正常结肠黏膜组织。采用荧光定量PCR法测定组织中miR-155、SOCS1 mRNA表达水平,免疫组织化学法测定组织中SOCS1蛋白表达情况,分析UC患者结肠黏膜组织miR-155、SOCS1 mRNA和改良Mayo评分的相关性,评价miR-155、SOCS1 mRNA表达水平对UC活动期患者发生重度病情的预测价值。结果与对照组和缓解期组比较,活动期组结肠黏膜组织miR-155表达水平显著升高,SOCS1 mRNA表达水平、SOCS1蛋白阳性表达率显著降低(P均<0.001)。轻、中、重度组UC活动期患者结肠黏膜组织miR-155表达水平和改良Mayo评分依次升高,SOCS1 mRNA表达水平依次降低(P均<0.001)。UC患者结肠黏膜组织miR-155与改良Mayo评分呈正相关,SOCS1 mRNA与改良Mayo评分呈负相关(P均<0.001)。miR-155高表达(OR=2.762,95%CI=1.284~5.944,P=0.009)、SOCS1 mRNA低表达(OR=2.617,95%CI=1.302~5.258,P=0.007)、改良Mayo评分≥12分(OR=3.232,95%CI=1.450~7.204,P=0.004)是影响UC活动期患者发生重度病情的危险因素。miR-155和SOCS1 mRNA联合预测UC活动期患者发生重度病情的曲线下面积为0.920。结论miR-155、SOCS1 mRNA的表达水平与UC活动期患者的病情严重程度存在相关性,两者联合对UC活动期患者发生重度病情的预测效能较高。

肺结核患者血清IP-10、SOCS1及CA125表达意义及其与引发支气管狭窄的相关性分析

目的分析肺结核患者血清γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)、细胞因子信号转导抑制物1(SOCS1)及糖类抗原125(CA125)表达意义及其与引发支气管狭窄的相关性。方法回顾性选择2021年1月至2023年1月河北省胸科医院收治的116例肺结核患者作为观察组,同期116名健康体检者作为对照组。根据观察组患者胸部影像学检查结果,分为重度组(n=26)和轻中度组(n=90);通过纤维支气管镜检查及活检,判断患者是否存在支气管狭窄,分为支气管狭窄组(n=42)与单纯肺结核组(n=74)。检测所有入选者血清IP-10、SOCS1及CA125水平,比较血清IP-10、SOCS1及CA125在对照组与观察组、不同严重程度的肺结核患者中的差异性;比较支气管狭窄组与单纯肺结核组第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、最大呼气峰流速(PEF);分析血清IP-10、SOCS1及CA125与肺结核患者肺功能相关指标及其并发支气管狭窄的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IP-10、SOCS1及CA125水平预测肺结核患者发生支气管狭窄的效能。结果观察组血清IP-10、CA125水平分别为(95.84±12.58)ng/L、(1.89±0.86)U/mL,均高于对照组[(71.25±5.63)ng/L、(0.74±0.23)U/mL],SOCS1水平为(165.32±7.95)μg/L,低于对照组[(252.54±24.71)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。重度组肺结核患者血清IP-10、CA125水平分别为(106.74±15.01)ng/L、(2.67±1.12)U/mL,均高于轻中度组[(89.72±8.16)ng/L、(1.45±0.60)U/mL],SOCS1水平为(154.12±6.07)μg/L,低于轻中度组[(200.75±15.83)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。支气管狭窄组FEV1、FVC、PEF均小于单纯肺结核组,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析,肺结核患者FEV1、FVC、PEF与血清IP-10、CA125水平呈正相关(P<0.05),与SOCS1水平呈负相关(P<0.05)。经ROC曲线分析,血清IP-10、SOCS1联合CA125预测肺结核患者发生支气管狭窄的敏感度为89.12%,特异度为48.63%,曲线下面积为0.924。结论肺结核患者血清IP-10、CA125水平明显升高,SOCS1水平降低,与病情严重程度相关,其联合预测支气管狭窄具有较好的效能。

冬凌草甲素调节JAK2/STAT3/SOCS-1信号通路对糖耐量异常大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨冬凌草甲素(Oridonin,Ori)对糖耐量异常(impaired glucose tolerance,IGT)大鼠胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的影响及作用机制。方法采用高脂饮食喂养联合链脲佐菌素注射法构建IGT大鼠IR模型,大鼠分为正常组(CT组)、IGT模型组(IGT组)、Ori组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))、Ori+Colivelin(COL)组(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)Ori+2 mg/kg COL),每组6只。血糖检测仪测定空腹血糖(FPG)、葡萄糖耐量试验(OGTT)2 h血糖(2 hPG),ELISA试剂盒测定空腹胰岛素(FINS)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),血液自动分析仪测定血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,HE染色观察肝脏病理形态,Western blot验证附睾脂肪磷酸化(p)-激活Janus激活激酶2(JAK2)、JAK2、p-信号转导和转录激活因子3(STAT3)、STAT3、p-细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)、SOCS-1蛋白表达。结果与CT组比较,IGT组大鼠肝脏细胞肿胀,胞浆内可见大量大小不一的脂肪空泡,细胞核被脂肪空泡挤压偏位,且发生炎性细胞浸润,FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平升高,血清HDL-C水平下降(P<0.05);与IGT组相比,Ori组大鼠肝脏细胞胞浆内脂肪滴及空泡数量明显减少,细胞肿胀有所缓解,未见炎性细胞浸润,FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平下降,血清HDL-C水平升高(P<0.05);与Ori组相比,Ori+COL组大鼠肝脏脂肪变状况加剧,细胞肿大,血清FPG、2hPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、MCP-1、TNF-α以及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、p-SOCS-1/SOCS-1蛋白表达水平升高,血清HDL-C水平下降(P<0.05)。结论Ori对IGT大鼠IR的缓解作用可能与抑制JAK2/STAT3/SOCS-1信号通路激活有关。

血清SAA4和SOCS1对脊柱结核与化脓性脊柱炎的早期鉴别价值

目的探究血清淀粉样蛋白4(SAA4)和细胞因子信号传导抑制因子1(SOCS1)对脊柱结核(STB)与化脓性脊柱炎(PS)的早期鉴别价值。方法收集2019年1月至2021年6月就诊于新乡医学院第一附属医院的STB患者(STB组,n=62)和PS患者(PS组,n=52)一般资料,另将同期进行健康体检者50名作为对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清SAA4和SOCS1水平;Logistic回归分析鉴别STB与PS的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SAA4和SOCS1对STB和PS的鉴别价值。结果与对照组相比,STB组、PS组患者血清SAA4水平均升高,SOCS1水平均降低(P<0.05),且STB组SAA4和SOCS1水平均高于PS组(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,血清SAA4和SOCS1是鉴别STB与PS的预测因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,SAA4和SOCS1单独鉴别STB与PS的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.833和0.872,敏感度分别为75.8%和75.8%,特异性分别为65.1%和66.9%,两者联合鉴别STB与PS的AUC为0.947,敏感度和特异性分别为88.7%和78.0%,两者联合鉴别的AUC显著大于SAA4和SOCS1单独鉴别的AUC(Z=2.683,2.015,P<0.05)。结论STB患者血清SAA4和SOCS1水平均显著高于PS患者,两者均可作为STB和PS的早期鉴别指标,且两者联合检测可提高鉴别诊断效能。

枢经推拿对脊髓神经结扎大鼠模型炎症反应及SOCS1、TLR4蛋白表达的影响

目的本研究旨在探讨枢经推拿对神经病理性疼痛(NP)的抑炎镇痛机制。方法30只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、推拿组、假推拿组、假手术组,每组6只。除了正常组不进行处理,假手术组暴露L5神经外,其余3组大鼠采用脊神经结扎(SNL)法建立NP大鼠模型。造模后第1天开始,推拿组给予枢经推拿治疗,假推拿组给予抚摸,持续干预7 d,在造模前1 d及造模后1 d、3 d、7 d检测各组大鼠热痛缩足反应潜伏期(PWL)和机械性刺激缩足反应阈值(PWT)。干预7 d后,采用Western blot检测大鼠脊髓背角中细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)表达水平,采用ELISA检测脊髓背角组织白细胞介素6(IL-6)水平。结果造模前1 d,各组大鼠的PWT、PWL没有显著差异(P>0.05);造模后1 d、3 d、7 d,与正常组、假手术组相比,假推拿组、推拿组、模型组大鼠的PWT、PWL均降低(P<0.05),且造模后3 d和7 d,与模型组、假推拿组相比,推拿组大鼠的PWT、PWL均升高(P<0.05)。与正常组、假手术组相比,假推拿组、推拿组、模型组大鼠的SOCS1蛋白水平均明显升高(P<0.05);推拿组大鼠与模型组、假推拿组相比,SOCS1水平升高(P<0.05)。与正常组、假手术组相比,假推拿组、推拿组、模型组大鼠的脊髓背角TLR4、NF-κB、IL-6水平明显增加(P<0.05);与模型组相比,推拿组大鼠的TLR4、NF-κB、IL-6水平明显降低(P<0.05)。结论枢经推拿可以改善由SNL诱导的NP,其机制可能与通过上调脊髓背角中SOCS1蛋白表达,负反馈下调TLR4及NF-κB蛋白表达,降低促炎因子IL-6产生有关。

替米沙坦联合羟苯磺酸钙通过miR-19b-3p/SOCS1轴调节自发性高血压主动脉的抗炎作用

目的探讨替米沙坦联合羟苯磺酸钙在自发性高血压中对主动脉的保护作用及作用机制。方法将自发性高血压(SHR)大鼠及其WKY大鼠随机分为(n=6):对照组(WKY)、SHR+NC组(未经处理的SHR大鼠)、SHR+替米沙坦组(替米沙坦治疗的SHR大鼠)、SHR+CAD组(CAD治疗的SHR大鼠)、替米沙坦+CAD组(替米沙坦和CAD联合治疗的SHR大鼠),每组6只。利用苏木精-伊红染色观察治疗前后主动脉血管的变化情况;利用ELISA检测炎症因子的表达水平。利用TargetScan预测miR-19b-3p的下游靶基因,利用双荧光素酶实验验证miR-19b-3p以及下游靶基因之间的结合关系。细胞分组:control组,替米沙坦+NC组,NC+CAD组及替米沙坦+CAD组。随后为了验证替米沙坦与羟苯磺酸钙与miR-19b-3p/SOCS1信号轴的调节关系,利用替米沙坦、羟苯磺酸钙单独处理或者联合对VSMC细胞进行处理。细胞分组:空白组、miR-19b-3p inhibitoror组、miR-19b-3p inhibitor+替米沙坦+NC组、miR-19b-3p inhibitor+NC+CAD组、miR-19b-3p inhibitoror+替米沙坦+CAD组。利用qRT-PCR检测miR-19b-3p和SOCS1的表达水平。从自发性高血压大鼠主动脉中分离血管平滑肌细胞(VSMC),利用CCK-8、Transwell小室实验、qRT-PCR以及Western blot方法验证替米沙坦和羟苯磺酸钙对细胞增殖、迁移表型分型以及炎症因子表达的影响。结果与对照组相比,SHR+NC组大鼠的主动脉管壁厚度明显增厚,管腔内壁降低;经SHR+替米沙坦和SHR+CAD组的SHR大鼠胸主动脉管壁厚度降低,管腔半径增加。ELISA结果显示,与对照组相比,SHR+NC组大鼠血液中IL-1β、TNF-α、IL-6的表达水平显著增加(P<0.05),SHR+替米沙坦、SHR+CAD组、替米沙坦+CAD组的大鼠体内炎症因子的表达水平较SHR+NC组显著降低(P<0.05)。与对照组主动脉中miR-19b-3p的表达水平相比,SHR+NC组显著升高,SHR+替米沙坦和SHR+TAD组显著降低(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组SOCS1的表达水平相比,SHR+NC组显著降低,SHR+替米沙坦、SHR+CAD组、替米沙坦+CAD组较SHR+NC组显著上调(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与control组相比,替米沙坦+NC组、NC+CAD组和替米沙坦+CAD组VSMC细胞中α-SMA、SM22α的表达水平显著增高,OPN的表达水平显著下降(P<0.05)。transwell小室实验结果显示,与control组VSMC细胞的迁移相比,替米沙坦+NC组、NC+CAD组和替米沙坦+CAD组显著降低(P<0.05)。与空白组相比,miR-19b-3p inhibitor组IL-1β、TNF-α的表达水平显著降低,进一步添加替米沙坦与羟苯磺酸钙处理后能增强这一结果(P<0.05)。结论替米沙坦与羟苯磺酸钙联用可以通过调节miR-19b-3p/SOCS1信号轴改善自发性高血压大鼠主动脉损伤,抑制炎症因子的表达。

血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与大疱性类天疱疮病情的相关分析

目的探讨血清细胞因子信号转导抑制蛋白-1(SOCS-1)、SOCS-3及抗大疱性类天疱疮(BP)-180抗体水平与BP病情的相关分析。方法选取2018年5月—2022年5月本院诊治的82例BP患者作为研究对象,并将其设立为观察组,同期选取41例健康体检者作为对照组,并根据病情程度将82例BP患者分为轻度组(活动性皮损面积≤10%,n=28)、中度组(活动性皮损面积10%~30%,n=27)和重度组(活动性皮损面积>30%,n=27),展开回顾性研究,对比血清SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体水平及自身免疫性大疱性皮肤病严重程度评分(ABSIS);采用Pearson法分析SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS评分的相关性;并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体诊断BP的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度。结果观察组的男性、女性均可发病,性别分布上差异无统计学意义,其中40~69岁为高发的年龄段。观察组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于对照组(P<0.05)。重度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS呈正相关(r分别为0.441、0.580、0.723,P<0.001)。ROC曲线分析显示,SOCS-1、SOCS-3和抗BP-180抗体诊断BP的AUC值分别为0.696、0.765和0.965(P<0.05);敏感度分别为53.70%、41.50%和95.10%,特异度分别为87.80%、100.00%和85.40%。结论血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与BP病情严重程度呈正相关,即其水平会随着病情程度变化而发生改变,临床可通过监测SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平变化为诊断BP及评估病情严重程度提供参考。

SOCS3调控JAK/STAT3通路对PD-1/PD-L1抑制剂所致小鼠心脏毒性的影响

目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)通过调控酪氨酸激酶/转录激活因子3(JAK/STAT3)通路影响巨噬细胞M1型极化的作用机制,及其对程序性死亡受体1/程序性死亡配体1(PD-1/PD-L1)抑制剂所致小鼠心脏毒性的影响。方法 将RAW 264.7细胞分为对照组、LPS组、pc-NC组、pc-SOCS3组、si-NC组、si-SOCS3组及抑制剂组,细胞转染相应质粒并使用100 ng/mL LPS干预;50只SPF级6周龄BALB/c小鼠分为正常组、模型组、NC组、SOCS3组及抑制剂组,每组10只,除正常组外,其余各组小鼠通过腹腔注射PD-1/PD-L1抑制剂BMS-1 10 mg/kg建立PD-1/PD-L1抑制剂诱导的小鼠心脏毒性模型,并通过尾静脉注射相应质粒或腹腔注射相应药物。HE染色观察小鼠心脏组织病理;ELISA法检测细胞上清和小鼠血清IL-10、TNF-α和IL-1β水平;Western blot检测细胞SOCS3、CD86、CD80以及JAK/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果 细胞过表达SOCS3会促进巨噬细胞细胞炎症因子水平和M1型极化,并抑制JAK/STAT3通路相关蛋白表达;细胞SOCS3低表达后,细胞炎症因子水平降低,并抑制巨噬细胞M1型极化,激活JAK/STAT3通路(P<0.05);BMS-1干预后小鼠心脏组织损伤严重,心脏指数、血清炎症水平及CD86、CD80蛋白表达明显升高,JAK/STAT3通路相关蛋白表达明显降低(P<0.05);过表达SOCS3组小鼠心脏损伤减轻,心脏指数、血清炎症因子及心脏CD86、CD80蛋白表达明显降低,JAK/STAT3通路相关蛋白表达明显升高(P<0.05);JAK/STAT3通路抑制剂AG490逆转了低表达SOCS3对PD-1/PD-L1抑制剂诱导小鼠心脏损伤减轻作用和M1型巨噬细胞极化作用。结论 低表达SOCS3可通过激活JAK/STAT3通路抑制巨噬细胞M1型极化并减轻PD-1/PD-L1抑制剂所致小鼠心脏毒性。

血清IP-10、SOCS1联合T-SPOT.TB对肺结核的诊断价值

目的探讨γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)、细胞因子信号转导抑制物1(SOCS1)在肺结核(PTB)患者血清中的表达,以及IP-10、SOCS1联合结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对PTB的诊断价值。方法收集2020年1月至2023年2月在该院治疗的96例PTB患者作为PTB组,另选取同期该院收治的与PTB患者临床资料基本一致的其他肺部疾病患者96例作为对照组。比较两组血清IP-10和SOCS1水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IP-10、SOCS1对PTB的诊断效能。采用四格表法分析血清IP-10、SOCS1联合T-SPOT.TB对PTB的诊断价值。结果与对照组相比,PTB组血清IP-10水平明显升高(P<0.05),SOCS1水平明显降低(P<0.05)。四格表法分析结果显示,血清IP-10、SOCS1联合T-SPOT.TB诊断PTB的准确率为92.71%,灵敏度为95.83%,特异度为89.58%。其中3项联合诊断的特异度高于IP-10、SOCS1单独诊断(P<0.05),准确率和灵敏度高于T-SPOT.TB、IP-10、SOCS1单独诊断(P<0.05)。结论PTB患者血清IP-10水平明显升高,SOCS1水平明显降低,血清IP-10、SOCS1联合T-SPOT.TB对PTB具有较高的诊断价值。

血清CHI3L1、SOCS3对2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的预测价值

目的分析血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)对2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的预测价值。方法将2019年12月至2021年12月该院收治的98例2型糖尿病患者作为研究对象,并根据尿清蛋白排泄率(UAER)将患者分为单纯糖尿病组(n=55)、早期糖尿病肾病组(n=43),同时另选取同期来该院进行体检的50例健康者作为对照组。所有研究对象入院后均检测血清CHI3L1、SOCS3水平。分析比较各组临床资料和实验室指标,采用受试者工作特性曲线(ROC曲线)评估血清CHI3L1、SOCS3对2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的预测价值,多因素Logistic回归分析探讨影响2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的相关因素。结果早期糖尿病肾病组患者血清CHI3L1、SOCS3水平均明显高于单纯糖尿病组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05);单纯糖尿病组血清CHI3L1、SOCS3水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清CHI3L1预测2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的曲线下面积、灵敏度、特异度分别为0.768、93.02%、52.73%;血清SOCS3预测2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的曲线下面积、灵敏度、特异度分别为0.830、93.02%、61.82%,两者联合预测2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的曲线下面积、灵敏度、特异度分别为0.920、88.37%、87.27%。多因素Logistic回归分析结果得出,血清CHI3L1(OR=3.90,95%CI:1.90~7.98)、SOCS3(OR=4.10,95%CI:1.86~9.01)均为影响2型糖尿病患者出现早期糖尿病肾病的危险因素(P<0.05)。结论血清CHI3L1、SOCS3在2型糖尿病患者中均升高,且2型糖尿病合并糖尿病肾病患者血清CHI3L1、SOCS3水平更高,二者是2型糖尿病患者早期糖尿病肾病的相关因素,同时对2型糖尿病患者早期糖尿病肾病具有较高的预测价值。

沉默SOCS1联合rAAV/PSA基因修饰的树突状细胞疫苗治疗前列腺癌的实验研究

目的研究沉默细胞因子信号抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)基因联合rAAV/PSA基因修饰的树突状细胞(dendritic cell,DC)对前列腺癌LNCaP细胞的体外杀伤效应。方法应用重组腺相关病毒(rAAV)介导的RNA干扰技术沉默人DC的SOCS1基因的表达,行Western blot检测基因沉默效果。rAAV-shRNA-SOCS1和rAAV/PSA感染DC,将DC细胞分为Control-DC组、rAAV/PSA-DC组、SOCS1(-)+rAAV/PSA-DC组。采用系列细胞因子诱导DC成熟,诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。流式细胞术检测分析各组DC细胞表型及CTL细胞的免疫表型;ELISA法检测各组DC细胞培养上清中细胞因子白介素-10(IL-10)及IL-12 p70的分泌水平,各组CTL细胞释放γ-干扰素(IFN-γ)的水平;LDH法检测各组CTL细胞对前列腺癌LNCaP靶细胞的杀伤效率。结果rAAV-shRNA-SOCS1感染DC后,可有效下调DC的SOCS1表达水平。与对照组比较,沉默SOCS1联合rAAV/PSA基因修饰的DC细胞培养上清中细胞因子IL-12 p70的分泌水平显著增高,IL-10的分泌水平明显下降(P<0.05);该组DC表面分子CD80、CD83和CD86的表达明显上调(P<0.05)。该组DC诱导的CTL中CD8^(+)、CD8^(+)CD69^(+)T细胞的比例明显增高,而CD4^(+)T细胞、CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg细胞的比例显著降低(P<0.05),IFN-γ的释放水平明显增高(P<0.05),对PSA阳性的前列腺癌靶细胞LNCaP具有更强的杀伤活性(P<0.05),且具有抗原特异性。结论沉默SOCS1联合rAAV/PSA基因修饰的DC疫苗可以产生高效而特异性的抗前列腺癌免疫效应。

沉默SOCS1对肝细胞癌患者树突状细胞表面抗原及其免疫调控的影响

目的分析沉默细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)对肝细胞癌患者树突状细胞表面抗原及其免疫调控的影响。方法采集宁夏回族自治区人民医院2020年10月至2021年10月收治的60例肝细胞癌患者的外周静脉血,通过淋巴细胞分离液离心得到外周血单核细胞,进行相关细胞表面标志物水平、SOCS1蛋白表达、树突状细胞表面抗原及树突状细胞上清液中细胞因子水平检测。结果流式细胞术检测CD3^(+)细胞约占94%,CD3^(+)CD4^(+)细胞约占36%,而CD3^(+)CD8^(+)细胞约占52%。CD1a和CD83分别为树突状细胞特异性和成熟的细胞标记物,CD1a^(+)细胞约占93%,CD1a^(+)CD83^(+)细胞约占85%。在诱导0、1、3 d时miR-618表达水平无明显变化,在第5、7天miR-618表达水平均降低(P均<0.05)。双荧光素酶系统表明,miR-618与SOCS1表达具有靶向调控作用(P<0.05)。miR-618过表达后,SOCS1蛋白表达量低于mimic NC组(P<0.05)。与各对照组相比,miR-618 mimic组和SOCS1 shRNA组CD11c、HLA-DR和CD86阳性细胞均增多(P均<0.05),CD4阳性细胞无明显变化(P>0.05)。miR-618 mimic^(+)sh-SOCS1组CD11c、HLA-DR、CD86阳性细胞数均增多(P均<0.05)。与各对照组相比,miR-618mimic组和shRNA-SOCS1组TNF-γ、IL-12和IFN-α表达水平均上升(P均<0.05),miR-618 mimic^(+)sh-SOCS1组上述因子均增加(P均<0.05)。结论沉默SOCS1可以促进肝细胞癌患者树突状细胞活化,提高其免疫调控能力。

SOCS1在慢性HBV相关性肝病患者血清中的表达水平及临床意义

目的研究细胞因子信号传导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝病中的表达水平及其临床意义。方法选取慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)、肝硬化及HBV相关性慢加急性肝衰竭(HBV associated chronic acute liver failure,HBV-ACLF)患者及健康对照各25例,采用RT-PCR方法检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中SOCS1 mRNA表达水平,用ELISA法检测慢性肝病患者及健康对照血浆中SOCS1、白细胞介素6(IL-6)水平。分析各组患者SOCS1相对表达量、SOCS1 mRNA表达水平及其他实验室检查指标如HBV-DNA、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、凝血酶原活动度(prothrombin activity,PTA)、总胆红素(total bilirubin,TBil)之间的差异,并分析SOCS1 mRNA表达水平与上述实验室指标之间的关联性。结果SOCS1 mRNA表达水平及血清SOCS1在HBV-ACLF组最高,其次为肝硬化组,在健康对照组最低,各组间差异均有统计学意义(F=109.65,P<0.001);SOCS1 mRNA相对表达量与TBil(r=0.89,P<0.001)、ALT(r=0.89,P<0.001)、AST(r=0.84,P<0.001)、IL-6(r=0.93,P<0.001)呈正相关,与PTA(r=-0.89,P<0.001)呈负相关,与HBV DNA无显著相关性(P=0.28)。结论SOCS1在HBV相关慢性肝病患者中的表达水平可反映疾病的严重程度,并与评价肝病严重程度相关指标呈显著相关性。

miR-155-5p靶向下调SOCS1减轻脂多糖诱导的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞炎症损伤

目的探讨微小RNA-155-5p(miR-155-5p)对脂多糖(LPS)诱导SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞神经炎症损伤的影响。方法采用人SH-SY5Y细胞,设立miR-155-5p过表达及其阴性对照(miR-155-5p mimic组、mimic-NC组)和miR-155-5p低表达及其阴性对照(miR-155-5p inhibitor组、inhibitor-NC组),将LPS处理上述各组转染成功细胞24 h,并设置未转染SH-SY5Y细胞的对照组和LPS处理组(LPS组)。噻唑蓝(MTT)法检测SH-SY5Y细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,反转录PCR法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-10 mRNA水平和miR-155-5p表达,Western blot法检测细胞裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、磷酸化核因子κB p65/核因子κB p65(p-NF-κB p65/NF-κB p65)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK/p38 MAPK)蛋白水平。采用miR-155-5p模拟物(miR-155-5p mimic)、miR-155-5p抑制物(miR-155-5p inhibitor)调节SH-SY5Y细胞miR-155-5p表达,生物信息学预测miR-155-5p与细胞因子信号传送阻抑物1(SOCS1)靶向关系并进行荧光素酶实验验证。构建miR-155-5p与SOCS1均下调的SH-SY5Y细胞(miR-155-5p inhibitor/si-SOCS1组),采用上述方法检测细胞活性、细胞凋亡、炎性细胞因子mRNA表达以及SOCS1蛋白表达和p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值。结果与对照组相比,LPS组SH-SY5Y细胞活性、Bcl2蛋白表达、IL-10 mRNA水平、SOCS1蛋白表达降低,细胞凋亡率、c-caspase-3和BAX蛋白表达、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平升高,miR-155-5p表达量和p-NF-κB p65/NF-κB p65和p-p38 MAPK/p38 MAPK比值升高。与LPS组相比,miR-155-5p inhibitor组SH-SY5Y细胞活性、Bcl2蛋白表达、IL-10 mRNA水平、SOCS1蛋白表达升高,miR-155-5p表达量、细胞凋亡率、c-caspase-3和BAX蛋白表达、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值降低。与LPS组相比,miR-155-5p mimic组SH-SY5Y细胞活性、Bcl2蛋白表达、IL-10 mRNA水平、SOCS1蛋白表达降低,miR-155-5p表达量、细胞凋亡率、c-caspase-3和BAX蛋白表达、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值增加。miR-155-5p与SOCS1具有靶向关系,与miR-155-5p inhibitor组相比,miR-155-5p inhibitor/si-SOCS1组细胞活性、IL-10 mRNA水平降低,细胞凋亡率、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK比值、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平升高。结论抑制miR-155-5p表达可减轻LPS诱导的神经炎症损伤,可能与靶向下调SOCS1表达有关。

CRM1和SOCS1在胃癌发生发展中作用及与预后的关系

目的探讨染色体区域稳定蛋白1(chromosomal region maintenance 1,CRM1)与细胞因子信号传导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)表达与胃癌演进、临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化检测低级别上皮内瘤变胃组织27例、高级别上皮内瘤变胃组织26例,以及进展期胃癌组织67例及对应癌旁组织67例中CRM1及SOCS1蛋白表达水平,分析两者在不同病变胃黏膜中的变化以及与胃癌临床病理特征的关系,通过在线分析工具Kaplan-Meier Plotter、单因素及多因素Cox分析影响胃癌患者预后的相关因素。结果胃癌组织中CRM1表达高于癌旁组织,SOCS1表达低于癌旁组织及瘤变组织(P<0.05);CRM1在胃癌组织高表达与浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05);生存分析显示高表达CRM1提示预后不良(P<0.05),SOCS1表达水平与预后无关(P>0.05);在胃癌组织中,CRM1与SOCS1表达无显著相关性(R=-0.025,P=0.842)。结论CRM1和SOCS1参与胃癌发生,CRM1高表达可能参与胃癌侵袭及转移等恶性进展。

小鼠脑缺血后SOCS1动态变化及其对氧糖剥夺/复氧后BV2细胞中炎症反应的影响

目的探讨小鼠脑缺血后细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)动态变化及其在氧-葡萄糖剥夺再复氧(OGDR)后的小鼠小胶质细胞BV-2(BV2)炎症模型中的表达变化与潜在抗炎作用。方法(1)建立小鼠脑缺血模型,于6 h、1 d、3 d、5 d、7 d各个时间点,以PCR技术检测小鼠脑缺血区及周围组织SOCS1 mRNA的表达变化,Western blot检测SOCS1蛋白的表达变化。(2)体外研究中对BV2细胞进行OGDR处理,模拟脑缺血再灌注的体内过程。以常氧培养的BV2细胞作为对照。在氧-葡萄糖剥夺(OGD)后0.5 h、1 h、2 h、3 h及OGDR后0 h、3 h、6 h、12 h,Western blot法检测SOCS1蛋白表达水平,选取氧糖剥夺复氧炎症模型最佳效果时间点,后续所用OGDR模型皆以最佳效果时间点制作。(3)Western blot法检测OGDR处理后BV2细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和诱导型一氧化氮合酶(INOS)表达水平。(4)运用质粒构建技术构建SOCS1质粒转染BV2细胞,以空载质粒转染BV2细胞作为参照,经Western blot法检测转染质粒后的BV2细胞中SOCS1的蛋白表达水平升高与否验证质粒转染是否成功,转染成功后继续将BV2细胞分为对照组、SOCS1质粒组、空载质粒组+OGDR、SOCS1质粒组+OGDR,Western blot检测各组SOCS1蛋白及TNF-α、IL-1β、IL-6和INOS的表达水平。结果(1)与假手术组比较,小鼠脑缺血各个时间点(6 h、1 d、3 d、5 d、7 d)SOCS1 mRNA及蛋白表达均增加,表达高峰位于5 d(P<0.05)。(2)与对照组比较,OGD(0.5 h、1 h、2 h、3 h)SOCS1蛋白表达增加,表达高峰位于2 h(P<0.05)。与对照组相比较,OGDR(0 h、3 h、6 h、12 h)SOCS1蛋白表达增高,表达高峰位于6 h(P<0.05)。因此选取氧糖剥夺复氧炎症模型预实验结果显示最佳效果时间点为缺氧2 h、复氧6 h用于后续实验。(3)与对照组比较,OGDR后BV2细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白水平均升高(均P<0.05)。(4)与对照组和空载质粒组比较,SOCS1质粒组SOCS1蛋白表达升高(P<0.05);与空载质粒+OGDR组相比,SOCS1质粒+OGDR组中IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达水平降低,INOS的蛋白表达水平升高(均P<0.05)。结论小鼠脑缺血后SOCS1蛋白表达升高,在体外实验OGDR后BV2细胞中SOCS1蛋白表达增加,SOCS1高表达可降低BV2细胞OGDR炎症模型中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,可能在缺血性脑卒中再灌注损伤的炎症反应中发挥重要作用。

维生素D对慢性湿疹小鼠的改善及对miRNA155/SOCS1轴的调节作用研究

目的探讨维生素D对慢性湿疹小鼠的改善及对微小核糖核酸(miRNA)155/细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)轴的调节作用。方法60只健康小鼠中随机取10只为A组,除外2只建模不成功,另48只右耳慢性湿疹模型小鼠以随机体质量排序法分为B组、C组、D组、E组,各12只。B组、D组、E组分别以5μg/kg miRNA155激动剂agomiR-155、10μg/kg 1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]+5μg/kg agomiR-155混合液、10μg/kg 1,25(OH)2D3溶液均匀涂抹右耳,A组、C组以等量生理盐水涂抹右耳,1次/d,给药10 d。计算耳质量差、肿胀度;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-2、干扰素-γ(IFN-γ);光镜下观察右耳组织病理形态学改变;实时聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miRNA155、SOCS1 mRNA相对表达量;蛋白质印迹法(Western blotting)检测SOCS1蛋白相对表达量。结果与A组比较,B组耳质量差、肿胀度及IL-2、IFN-γ水平升高,IL-4、IL-5水平降低(P<0.05);与B组比较,C组、D组、E组耳质量差、肿胀度及IL-2、IFN-γ水平降低,IL-4、IL-5水平升高,且耳质量差、肿胀度及IL-2、IFN-γ,E组<D组<C组,IL-4、IL-5,C组<D组<E组(P<0.05);与B组、C组比较,D组、E组右耳组织表皮增厚、真皮炎性细胞浸润、水肿等异常改变减轻,其中E组减轻更明显;与A组比较,B组miRNA155 mRNA相对表达量升高,SOCS1 mRNA及蛋白相对表达量降低(P<0.05);与B组比较,C组、D组、E组miRNA155 mRNA相对表达量降低,SOCS1 mRNA及蛋白相对表达量升高,且miRNA155 mRNA相对表达量,E组<D组<C组,SOCS1 mRNA及蛋白相对表达量,C组<D组<E组(P<0.05)。结论维生素D对慢性湿疹小鼠病情有一定改善作用,机制可能与调节miRNA155/SOCS1轴有关。

UC患儿肠道菌群及血清MUC1、SOCS-3的表达水平与病情程度的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患儿肠道菌群及血清上皮细胞膜结合黏液素1(MUC1)、细胞因子信号转导负调控因子-3(SOCS-3)的表达水平与病情程度的相关性。方法回顾性分析2018年1月至2022年10月榆林市第一医院收治的110例UC患儿的临床资料,根据溃疡性结肠炎严重程度的不同将患儿分为轻度组35例,中度组46例和重度组29例,另选取同期30例健康体检者作为对照组。检测所有受检者粪便样品中的肠道菌群分布情况以及血清MUC1、SOCS-3水平,并采用Pearson相关性分析法分析各指标与UC病情严重程度的相关性。结果血清MUC1水平比较,重度组>中度组>轻度组>对照组,SOCS-3水平比较,重度组<中度组<轻度组<对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度组与中度组患儿的双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌明显少于轻度组与对照组,而肠杆菌、肠球菌、小梭菌明显多于轻度组与对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但重度组与中度组、轻度组与对照组的上述各项指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。经Pearson相关性分析结果显示,MUC1、肠杆菌、肠球菌、小梭菌与UC患儿病情严重程度呈正相关(r=0.639、0.221、0.420、0.316,P<0.05),SOCS-3、双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌与UC患儿病情严重程度呈负相关(r=-0.481、-0.257、-0.252、-0.132,P<0.05)。结论UC患儿病情越严重,肠道致病菌越多,益生菌越少,且血清MUC1与UC患儿病情严重程度呈正相关,SOCS-3与UC患儿病情严重程度呈负相关。

SOCS1/SOCS3在冠心病患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的探讨SOCS1和SOCS3在冠心病发病中的作用,进一步了解冠心病的发病机制。方法应用real time-PCR及Western blot法检测正常健康人(对照组,n=10)和冠心病患者(冠心病组,n=30)外周血单个核细胞中SOCS1/SOCS3的mRNA和蛋白表达水平,同时用ELISA法检测血浆中IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-17、TNF-α、IFN-γ和TGF-β1水平。结果 SOCS1、SOCS3的mRNA和蛋白在冠心病组[SOCS1:(1.95±0.77),(1.19±0.43);SOCS3:(3.60±1.35),(1.35±0.59)]的表达水平明显高于对照组[SOCS1:(1.18±0.43),(0.58±0.33);SOCS3:(1.16±0.67),(0.87±0.35)],差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组比较,冠心病患者血浆IL-1β[(22.2±8.1)vs.(13.6±5.9)],IL-6[(33.1±14.2)vs.(19.1±9.1)],IL-12[(25.0±5.5)vs.(11.5±2.9)],IL-17[(25.0±10.4)vs.(13.4±5.6)],TNF-α[(29.5±12.0)vs.(17.8±6.4)],IFN-γ[(20.3±10.7)vs.(10.4±3.8)]水平显著上升,而IL-4[(8.3±3.4)vs.(16.4±7.4)],IL-10[(14.9±7.2)vs.(38.7±16.9)]和TGF-β1[(122±52)vs.(361±117)]水平明显下降(单位均为pg/mL),两组间的差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 SOCS1和SOCS3的高表达可能参与冠心病的发病,其机制可能与冠心病患者体内促炎细胞因子水平升高有关。

GLP-1下调非酒精性脂肪肝大鼠SOCS-3和SREBP-1c的表达

目的:探讨胰高血糖素样肽-l(GLP-1)对非酒精性脂肪肝大鼠SOCS-3和SREBP-1c mRNA表达的影响。方法:将雄性SD大鼠32只随机分为正常对照(NC)组、高脂(HF)组和HF+利拉鲁肽(Lira)组。HF组和HF+Lira组给予高脂饲料喂养16周,HF+Lira组高脂喂养12周后,给予Lira 600μg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射4周。在16周末处死大鼠。全自动生化仪检测血清ALT、AST、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC);GPO-PAP法测定肝脏TG含量;酶联免疫法测定空腹胰岛素,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);光学显微镜下观察肝脏病理变化;RTqPCR法测定肝组织SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达水平。结果:与NC组相比,HF组血清ALT、AST、TG、TC、肝TG、FINS及HOMA-IR均明显升高(P<0.01);HF+Lira组与HF组相比,血清的ALT、AST、TG、TC、肝TG、FINS及HOMA-IR均下降,差异有统计学显著性(P<0.05)。HF组肝组织SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达水平较NC组显著增强(P<0.01);HF+Lira组较HF组SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达显著下降(P<0.05)。结论:Lira可能通过下调肝组织SOCS-3和SREBP-1c的mRNA表达,改善IR,减少肝脏TG沉积,从而对非酒精性脂肪性肝病起到治疗作用。