期刊文献+
共找到22篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
Reaction of antibodies to Campylobacter jejuni and cytolethal distending toxin B with tissues and food antigens 被引量:3
1
作者 Aristo Vojdani Elroy Vojdani 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2019年第9期1050-1066,共17页
BACKGROUND The bacteria Campylobacter jejuni(C. jejuni) is commonly associated with GuillaneBarré syndrome(GBS) and irritable bowel syndrome(IBS), but studies have also linked it with Miller Fisher syndrome, reac... BACKGROUND The bacteria Campylobacter jejuni(C. jejuni) is commonly associated with GuillaneBarré syndrome(GBS) and irritable bowel syndrome(IBS), but studies have also linked it with Miller Fisher syndrome, reactive arthritis and other disorders, some of which are autoimmune. It is possible that C. jejuni and its toxins may be crossreactive with some human tissues and food antigens, potentially leading to autoimmune responses.AIM To measure the immune reactivity of C. jejuni and C. jejuni cytolethal distending toxin(Cdt) antibodies with tissue and food antigens to examine their role in autoimmunities.METHODS Using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) methodology, specific antibodies made against C. jejuni and C. jejuni Cdt were applied to a variety of microwell plates coated with 45 tissues and 180 food antigens. The resulting immunoreactivities were compared to reactions with control wells coated with human serum albumin(HSA) which were used as negative controls and with wells coated with C. jejuni lysate or C. jejuni Cdt which served as positive controls.RESULTS At 3 SD above the mean of control wells coated with HSA or 0.41 OD, the mouse monoclonal antibody made against C. jejuni showed moderate to high reactions with zonulin, somatotropin, acetylcholine receptor, β-amyloid and presenilin.This immune reaction was low with an additional 25 tissue antigens including asialoganglioside, and the same antibody did not react at all with another 15 tissue antigens. Examining the reaction between C. jejuni antibody and 180 food antigens, we found insignificant reactions with 163 foods but low to high immune reactions with 17 food antigens. Similarly, we examined the reaction of C. jejuni Cdt with the same tissues and food antigens. The strongest reactions were observed with zonulin, intrinsic factor and somatotropin. The reaction was moderate with 9 different tissue antigens including thyroid peroxidase, and reaction was low with another 10 different antigens, including neuronal antigens.The reaction of C. jejuni Cdt antibody with an additional 23 tissue antigens was insignificant. Regarding the reaction of C. jejuni Cdt antibody with different food antigens, 160 out of 180 foods showed insignificant reactions, while 20 foods showed reactions ranging from low to high.CONCLUSION Our findings indicate that C. jejuni and its Cdt may play a role in inflammation and autoimmunities beyond the gut. 展开更多
关键词 CAMPYLOBACTER JEJUNI cytolethal distending toxin Tissue ANTIGENS Food ANTIGENS Autoimmune REACTIVITIES CROSS-REACTIVITY
下载PDF
甲型副伤寒沙门氏菌cdtB亚基的原核表达及对巨噬细胞IL-6、IL-8、TNF-α分泌的影响 被引量:2
2
作者 陈鸿鹄 吴圆圆 +1 位作者 占利 梅玲玲 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期535-538,546,共5页
目的研究甲型副伤寒沙门氏菌感染过程中,cdtB对宿主巨噬细胞分泌促炎细胞因子的影响。NF-κB信号通路阻断剂对cdtB诱导的巨噬细胞分泌细胞因子的影响。方法对甲型副伤寒沙门氏菌cdtB亚基进行原核表达,制备并模型纯化重组蛋白,建立其刺激... 目的研究甲型副伤寒沙门氏菌感染过程中,cdtB对宿主巨噬细胞分泌促炎细胞因子的影响。NF-κB信号通路阻断剂对cdtB诱导的巨噬细胞分泌细胞因子的影响。方法对甲型副伤寒沙门氏菌cdtB亚基进行原核表达,制备并模型纯化重组蛋白,建立其刺激人THP-1巨噬细胞模型,ELISA检测THP-1分泌IL-6,IL-8和TNF-α等细胞因子。在共培养体系中加入NF-κB信号通路阻断剂,ELISA检测THP-1分泌IL-6,IL-8和TNF-α等细胞因子。结果成功构建甲型副伤寒沙门氏菌cdtB原核表达系统,表达并纯化重组cdtB蛋白,与空白对照相比,受到cdtB刺激的THP-1细胞上清中的IL-6,IL-8和TNF-α浓度显著上升,而在THP-1细胞培养基中加入NF-κB信号通路阻断剂SN50可以显著抑制重组cdtB诱导的IL-6、IL-8、TNF-α分泌。结论甲型副伤寒沙门氏菌cdtB能够通过NF-κB信号通路诱导巨噬细胞分泌IL-6、IL-8和TNF-α,在甲型副伤寒相关的炎症反应中发挥促进作用。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 cdtB 细胞因子 巨噬细胞
下载PDF
伴放线放线杆菌cdtC基因的克隆及其原核表达载体pET15b-cdtC的构建 被引量:4
3
作者 王晓茜 李璐 徐艳 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期153-156,共4页
目的:本实验设计克隆Aa CdtC亚基蛋白的编码基因cdtC并构建其原核表达载体pET 15b-cdtC,为研究CdtC亚基对CDT全毒素功能的分子机制奠定基础。方法:厌氧培养Aa ATCC 29523,提取Aa基因组DNA,PCR反应扩增cdtC基因片段。将此片段克隆入pMD 1... 目的:本实验设计克隆Aa CdtC亚基蛋白的编码基因cdtC并构建其原核表达载体pET 15b-cdtC,为研究CdtC亚基对CDT全毒素功能的分子机制奠定基础。方法:厌氧培养Aa ATCC 29523,提取Aa基因组DNA,PCR反应扩增cdtC基因片段。将此片段克隆入pMD 19-T Vector,经限制性内切酶BamHI和Xho I酶切得到粘性末端cdtC片段,克隆入原核表达载体pET 15b中。结果:产物经PCR初步鉴定后进行DNA序列分析,测序结果与Genbank公布序列一致性达100%。结论:本实验成功克隆了cdtC基因,并成功构建了其原核表达载体pET15b-cdtC。为深入研究CdtC亚基以及CDT全毒素分子作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 伴放线放线杆菌 基因克隆 cdtC 原核表达载体
下载PDF
副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析 被引量:2
4
作者 李艳玲 李建军 +6 位作者 周泷 崔宁 刘娇 张艳禾 李刚 谢芳 王春来 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期449-452,共4页
细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进... 细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达。SD S-PAGE和w estern blot检测目的蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为25 ku。将纯化后的重组蛋白复性后进行体外细胞毒性试验。结果表明,CdtC蛋白对Vero细胞和PK-15细胞有较强的细胞毒性作用。本研究为研究细胞致死膨胀毒素CDT的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 cdtC亚基 细胞毒性
下载PDF
cdt基因亚基cdtA的克隆及其原核表达载体的构建 被引量:1
5
作者 李璐 徐艳 +2 位作者 王晓茜 杨迷芳 段君兰 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2009年第11期619-623,共5页
目的:进行伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)cdtA基因的克隆并构建其原核表达载体,为进一步研究CdtA蛋白功能以及CDT全毒素的功能做准备。方法:从AaATCC29522中通过PCR获得cdtA基因片段,克隆到中间载体pMD19-TVe... 目的:进行伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)cdtA基因的克隆并构建其原核表达载体,为进一步研究CdtA蛋白功能以及CDT全毒素的功能做准备。方法:从AaATCC29522中通过PCR获得cdtA基因片段,克隆到中间载体pMD19-TVector中,再经双酶切得到cdtA片段克隆到原核表达载体pET-15b中,得到融合表达载体pET-15b-cdtA。结果:成功构建pET-15b-cdtA,经PCR鉴定以及测序鉴定插入cdtA基因序列正确,阅读框架完整,未发现突变。结论:成功克隆了cdtA基因,并在原核载体上得以表达。 展开更多
关键词 细胞致死性扩张毒素 cdtA基因 原核表达载体
下载PDF
副猪格拉瑟菌5型细胞致死性膨胀毒素CdtB破坏猪呼吸道上皮屏障的机制
6
作者 陈敏 刘明星 +2 位作者 张鹏云 蔺辉星 范红结 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期304-316,共13页
旨在探究副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障引起系统性感染的机制。通过超速离心和密度梯度离心提取副猪格拉瑟菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs),OMVs经SDS-PAGE显示,蛋白质条带分布在55~100 ku,... 旨在探究副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)突破猪呼吸道上皮屏障引起系统性感染的机制。通过超速离心和密度梯度离心提取副猪格拉瑟菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs),OMVs经SDS-PAGE显示,蛋白质条带分布在55~100 ku,经透射电子显微镜(TEM)观察,OMVs的粒径在100~200 nm,纳米粒子直径分析(NTA)结果显示,样品在100~200 nm处的粒子数目最多。进而用制备的HbpA及OmpP2多克隆抗体对OMVs及不含OMVs的细菌上清进行Western blot验证,证实所提取的样品为外膜囊泡,且进一步结果证明细胞致死性膨胀毒素(CDT)在GPS培养物中主要以OMVs的形式存在。用OMVs或CdtB处理猪气管上皮细胞(swine tracheal epithelial cells, STEC)36 h,检测STEC中cleaved-caspase3、ZO-1和Occludin的蛋白表达水平,并用FITC-葡聚糖(FD-4)检测STEC单层细胞的细胞旁通透性。结果发现,OMVs与CdtB处理后凋亡相关蛋白cleaved-caspase3表达水平升高,ZO-1和Occludin的表达水平降低,FD-4渗透率升高,同时,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试验发现,当CdtB与STEC单层细胞共孵育24 h、OMVs与STEC单层细胞共孵育36 h后,STEC存活率显著降低。而Pifithrin-α预处理STEC可抑制OMVs和CdtB引起的细胞凋亡和屏障通透性的增加。另外,用免疫磁珠捕获的方法去除OMVs中的CdtB(OMVs-ΔCdtB),OMVs-ΔCdtB处理STEC 36 h后cleaved-caspase3、ZO-1、Occludin表达水平与对照组相比无显著差异。综上,成功提取并纯化GPS OMVs,且试验证明GPS可通过OMVs转运CdtB诱导STEC凋亡和屏障损伤,为副猪格拉瑟菌突破呼吸道上皮屏障的机制提供新思路。 展开更多
关键词 副猪格拉瑟菌 外膜囊泡 细胞致死性膨胀毒素cdtB 猪呼吸道上皮细胞
下载PDF
伴放线放线杆菌细胞致死性扩张毒素序列进化分析 被引量:1
7
作者 孙静华 张琛 +1 位作者 喻钢 侯本祥 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2017年第9期493-498,535,共7页
目的:应用生物信息学的方法研究伴放线放线杆菌(Aa)细胞致死性扩张毒素(CDT)的3个蛋白亚基在不同细菌中的序列变化情况,为牙周病中Aa菌株的检测提供思路。方法:运用ncbi genbank数据库、蛋白同源性比对(blast P和tblastn)及极大似然法... 目的:应用生物信息学的方法研究伴放线放线杆菌(Aa)细胞致死性扩张毒素(CDT)的3个蛋白亚基在不同细菌中的序列变化情况,为牙周病中Aa菌株的检测提供思路。方法:运用ncbi genbank数据库、蛋白同源性比对(blast P和tblastn)及极大似然法构建进化树等,研究Aa中CDT蛋白的3个亚基在不同菌种的序列保守性。结果:在Genbank数据库674个属的细菌中,发现有20个属27个种含有CDT蛋白亚基,其中11个种的细菌只含有Cdt B蛋白亚基。在进化过程中,Cdt B与CDT其他两种亚基蛋白相比,序列间的变化无明显相关性,且蛋白序列更为保守。系统进化树分析表明,Aa的Cdt B蛋白与嗜血杆菌属、沙门氏菌属和螺杆菌属的细菌有较近的亲缘关系。结论:Aa CDT蛋白复合体的Cdt B与其他两个亚基的蛋白在序列进化上存在显著差异,推测一些菌种中CDT蛋白毒性功能的发挥并不需要3个亚基共同存在。 展开更多
关键词 伴放线放线杆菌 细胞致死性扩张毒素 进化 生物信息学
下载PDF
伴放线聚集杆菌细胞致死性膨胀毒素介导人T淋巴细胞凋亡的实验研究 被引量:1
8
作者 陈慧萍 陈旭 +2 位作者 李璐 孙颖 徐艳 《口腔医学》 CAS 2015年第5期365-369,共5页
目的通过研究伴放线聚集杆菌(aggregatibacter actinomycetemcomitans,A.actinomycetemcomitans)的一种毒力因子细胞致死性膨胀毒素(cytolethal distending toxin,CDT)诱导人T淋巴细胞发生凋亡过程中表达改变的相关基因,探索其凋亡过程... 目的通过研究伴放线聚集杆菌(aggregatibacter actinomycetemcomitans,A.actinomycetemcomitans)的一种毒力因子细胞致死性膨胀毒素(cytolethal distending toxin,CDT)诱导人T淋巴细胞发生凋亡过程中表达改变的相关基因,探索其凋亡过程中可能存在的相关信号调节通路,寻找侵袭性牙周炎诊断、治疗潜在的生物标记分子。方法通过透射电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡的情况,荧光定量PCR检测CDT蛋白作用于人T淋巴细胞后凋亡相关基因表达的改变。结果 CDT蛋白作用于人T淋巴细胞24 h后,处理组细胞凋亡比例约为29.1%,对照组约为6.3%,透射电镜观察到典型的凋亡细胞的形态,如细胞体积缩小、染色质浓缩及边集等现象。荧光定量PCR结果显示促凋亡基因GADD45A、TNFSF8、TRADD、TNFRSF10B和TP53表达升高。结论伴放线聚集杆菌CDT可以促进人T淋巴细胞的凋亡,在这一过程中相关的促凋亡基因表达增加。 展开更多
关键词 伴放线聚集杆菌 细胞致死性膨胀毒素 JURKAT细胞 凋亡
下载PDF
细胞致死性扩张毒素和外膜蛋白的结构功能和致病机制
9
作者 孙菲 张建刚 肖水清 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第5期565-568,共4页
伴放线放线杆菌是青少年牙周病的主要致病菌,与侵袭性牙周炎密切相关。伴放线放线杆菌细胞致死性扩张毒素(CDT)和外膜蛋白(OMP)等毒力因子使其更易定植到宿主体内,破坏宿主的免疫调节,从而进一步引起牙周组织破坏和加速牙周病的进展。... 伴放线放线杆菌是青少年牙周病的主要致病菌,与侵袭性牙周炎密切相关。伴放线放线杆菌细胞致死性扩张毒素(CDT)和外膜蛋白(OMP)等毒力因子使其更易定植到宿主体内,破坏宿主的免疫调节,从而进一步引起牙周组织破坏和加速牙周病的进展。本文主要就CDT和OMP毒力因子目前的结构功能及致病机制作一综述,以期对其深入研究有所帮助。 展开更多
关键词 伴放线放线杆菌 细胞致死膨胀毒素 外膜蛋白
下载PDF
副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素的细胞毒性研究 被引量:7
10
作者 陈西 王湘如 +3 位作者 徐晓娟 郭凤娟 陈焕春 蔡旭旺 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1750-1755,共6页
本研究旨在原核表达副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素(Cytolethal distending toxin,CDT),并作用于猪髋动脉内皮细胞(Pig iliac endothelial cells,PIEC),以研究其细胞毒性。根据本实验室完成的副猪嗜血杆菌SH 0165株(血清5型)全基因组序列... 本研究旨在原核表达副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素(Cytolethal distending toxin,CDT),并作用于猪髋动脉内皮细胞(Pig iliac endothelial cells,PIEC),以研究其细胞毒性。根据本实验室完成的副猪嗜血杆菌SH 0165株(血清5型)全基因组序列,针对cdtA、cdtB和cdtC基因序列设计引物,扩增的基因片段大小分别约为681、834和531bp。将靶基因克隆到原核表达载体pET28a中,再转化到E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达3h,SDS-PAGE和Western blot检测证实表达产物以包涵体形式存在,大小分别约36、34和28ku。通过体外重构毒素与PIEC细胞作用3h,继续培养72h观察细胞形态学变化。结果表明,CdtABC全毒素致PIEC细胞膨胀、空泡形成、细胞凋亡等,而其他试验组变化不显著。结果提示,CDT毒素可能在细菌感染与致病中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 细胞致死膨胀毒素 毒素 细胞毒性
下载PDF
副猪嗜血杆菌CDT三顺反子的表达、组装及生物学活性
11
作者 李军星 余斌 +3 位作者 徐丽华 苏菲 叶十一 袁秀芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期283-289,共7页
副猪嗜血杆菌是猪的常见病原菌,以异源三聚体形式分泌到胞外环境的细胞致死性膨胀毒素(CDT)是该菌重要的毒力因子,制备完整的重组CDT对于其功能研究至关重要。本研究构建了可用于同时表达CDT 3个亚基的三顺反子重组质粒,优化了完整毒素... 副猪嗜血杆菌是猪的常见病原菌,以异源三聚体形式分泌到胞外环境的细胞致死性膨胀毒素(CDT)是该菌重要的毒力因子,制备完整的重组CDT对于其功能研究至关重要。本研究构建了可用于同时表达CDT 3个亚基的三顺反子重组质粒,优化了完整毒素三聚体的体外组装及纯化方法,并验证了重组三聚体毒素的生物学活性。结果显示,CDT 3个亚基以CdtA/CdtB/CdtC-his方式组合时,按0.1 g/L等体积混合,在PBS中以尿素浓度梯度透析时组装效果最好。构建的重组三顺反子质粒在大肠杆菌中可以同时表达出比例相当的3个CDT亚基,并且均以包涵体形式存在,经包涵体离心粗纯化后,即可用于重组三聚体CDT的组装。组装的三聚体CDT经亲和层析及分子筛层析纯化,得到高纯度的完整毒素。完整毒素可以引起Marc145细胞体积明显膨胀,且分裂周期停滞于G2/M期的细胞比例显著增加。结果表明,本研究建立了一种简单有效的副猪嗜血杆菌重组CDT完整毒素制备方法,所制备的CDT具有良好的生物学活性。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 细胞致死性膨胀毒素 三顺反子质粒 完整毒素
原文传递
副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素各亚基处理PK-15细胞的基因表达谱分析 被引量:1
12
作者 牛惠 李艳玲 +5 位作者 周泷 李大鹏 张艳禾 李刚 谢芳 王春来 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期371-374,共4页
为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)细胞致死膨胀毒素(CDT)各亚基(Cdt A、Cdt B和Cdt C)的相关生物学功能,本研究采用基因芯片技术对以CDT各亚基处理的PK-15细胞基因表达谱进行检测和分析。通过比较各亚基处理细胞与空白对照细胞基因表达... 为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)细胞致死膨胀毒素(CDT)各亚基(Cdt A、Cdt B和Cdt C)的相关生物学功能,本研究采用基因芯片技术对以CDT各亚基处理的PK-15细胞基因表达谱进行检测和分析。通过比较各亚基处理细胞与空白对照细胞基因表达谱的检测结果显示,Cdt A、Cdt B和Cdt C作用PK-15细胞后,处理细胞中分别有91个基因、126个基因及135个基因出现差异表达变化。根据芯片结果选取变化较显著的基因进行荧光定量RT-PCR验证,结果与基因芯片检测结果基本一致。基因注释(GO)分析表明,这些蛋白分别参与免疫系统调节、生物调控、代谢过程和定位等过程。本研究结果为进一步研究CDT的致病作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 细胞致死膨胀毒素 表达谱基因芯片
下载PDF
基于iTRAQ技术的伴放线聚集杆菌细胞致死性扩张毒素诱导Jurkat细胞的凋亡研究 被引量:1
13
作者 陈旭 许悦 +3 位作者 俞文伟 贺凡真 徐艳 李璐 《口腔医学》 CAS 2016年第6期494-497,共4页
目的探索伴放线聚集杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,A.a)的一种毒力因子(cytolethal distending toxin,CDT)诱导人T淋巴细胞发生凋亡过程中表达改变的信号分子。方法培养Jurkat细胞,并进行分组:不做处理的正常细胞对照组... 目的探索伴放线聚集杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,A.a)的一种毒力因子(cytolethal distending toxin,CDT)诱导人T淋巴细胞发生凋亡过程中表达改变的信号分子。方法培养Jurkat细胞,并进行分组:不做处理的正常细胞对照组、野生型A.a CDT刺激Jurkat细胞的野生组、突变型A.a CDT刺激Jurkat细胞的突变组,应用i TRAQ技术检测A.a CDT作用Jurkat细胞24 h过程中表达差异蛋白。结果通过筛选,我们得到20个凋亡相关的蛋白(变化倍数>1.3),其中表达上调的有8个(CASP8/CD3E/YY1/SH3BGRL3/P53/CASP3/UBE2I/TNFRSF10B),表达下调的有12个(F5/RPL18A/DAD1/MTCH2/HIST1H1E/CNBP/RBM25/SLC16A1/KDM2A/CD99/RAC2/TMX1)。结论本研究检测出了伴放线聚集杆菌细胞致死性膨胀毒素诱导人T淋巴细胞凋亡过程中表达差异的蛋白,并筛选了一条可能的信号通路UBE2I/P53/TNFRSF10B/CASP8/CASP3,为下一步研究及临床治疗局限型侵袭性牙周炎提供思路。 展开更多
关键词 伴放线聚集杆菌 细胞致死性膨胀毒素 JURKAT细胞 凋亡 iTRAQ技术
下载PDF
伴放线放线杆菌细胞致死性扩张毒素研究进展 被引量:1
14
作者 段君兰 徐艳 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期48-51,41,共5页
细胞致死性扩张毒素(cytolethal distending toxin,CDT)是近年来新发现的一种伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)的毒力因子(Aa CDT),研究发现该毒力因子在Aa的牙周致病机制中发挥着重要的作用。本文就Aa CDT的... 细胞致死性扩张毒素(cytolethal distending toxin,CDT)是近年来新发现的一种伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)的毒力因子(Aa CDT),研究发现该毒力因子在Aa的牙周致病机制中发挥着重要的作用。本文就Aa CDT的结构和功能、作用机制及致病机制等方面的研究进展作一综述,以期进一步了解Aa的致病机理。 展开更多
关键词 伴放线放线杆菌 细胞致死性扩张毒素
下载PDF
伴放线放线杆菌细胞致死性扩张毒素的细胞毒性研究
15
作者 段君兰 李璐 +1 位作者 徐艳 杨迷芳 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期181-186,199,共7页
目的:体外诱导表达伴放线放线杆菌(Aqqregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)细胞致死性扩张毒素(cytolethal distending toxin,CDT),观察其对中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO cell)和人宫颈癌上皮细胞(HeLa cell)... 目的:体外诱导表达伴放线放线杆菌(Aqqregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)细胞致死性扩张毒素(cytolethal distending toxin,CDT),观察其对中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO cell)和人宫颈癌上皮细胞(HeLa cell)的毒性作用。方法:诱导重组蛋白Aa CdtA、CdtB、CdtC的体外表达,采用镍亲和层析柱法纯化目的蛋白,体外重构Aa CDT全毒素。通过体外酶活性实验检测重组蛋白CdtB的生物学活性,并通过细胞克隆形成实验(Colony-forming experiment)及3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphe nyltetrazolium bromide,MTT]比色法进一步观察CDT对CHO细胞和HeLa细胞的毒性作用。结果:由重组蛋白Aa CdtA、CdtB、CdtC体外重构获得的Aa CDT全毒素不仅抑制CHO细胞增殖,导致CHO细胞克隆形成单位(Colony-Forming Unit,CFU)数目减少甚至消失。也可抑制He-La细胞增殖并引起包括细胞体积增大及细胞核增大增多的细胞形态学改变,并且此增殖抑制作用呈浓度依赖性。结论:体外成功构建了具有生物学活性的Aa CDT全毒素,且Aa CDT毒性发挥需要三个亚基CdtA、CdtB、CdtC同时存在并构成三聚体。 展开更多
关键词 伴放线放线杆菌 细胞致死性扩张毒素 中国仓鼠卵巢细胞 HELA细胞
下载PDF
细胞致死膨胀毒素研究进展
16
作者 谭惠惠 刘栋辉 +2 位作者 张小荣 郭梦娇 吴艳涛 《动物医学进展》 北大核心 2023年第8期91-96,共6页
细胞致死膨胀毒素(CDT)是细菌毒素家族的一种蛋白毒素,是多种革兰氏阴性菌的重要毒力因子,如空肠弯曲菌、幽门螺杆菌、伴放线杆菌等。该毒素的致病机理是通过破坏靶细胞DNA造成细胞损伤,最终导致细胞的分裂周期停滞甚至死亡。论文主要... 细胞致死膨胀毒素(CDT)是细菌毒素家族的一种蛋白毒素,是多种革兰氏阴性菌的重要毒力因子,如空肠弯曲菌、幽门螺杆菌、伴放线杆菌等。该毒素的致病机理是通过破坏靶细胞DNA造成细胞损伤,最终导致细胞的分裂周期停滞甚至死亡。论文主要总结了近几年来细胞致死膨胀毒素的相关研究,对其结构、生物学功能、转运机制及应用前景等研究进展进行总结及讨论,旨在为该毒素的相关研究提供一定参考。 展开更多
关键词 细胞致死膨胀毒素 蛋白毒素 基因毒素 DNA损伤
下载PDF
伴放线放线杆菌细胞膨胀致死毒素重组蛋白的表达 被引量:2
17
作者 孟姝 杨禾 +1 位作者 赵蕾 吴亚菲 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期409-412,共4页
目的通过分子克隆技术构建细胞膨胀致死毒素(cytolethaldistendingtoxin,CDT)的重组表达载体,并诱导重组CDT蛋白的表达,以期为重组CDT蛋白的生物学功能研究奠定基础。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增获得CDT的编码基因cdtABC,通... 目的通过分子克隆技术构建细胞膨胀致死毒素(cytolethaldistendingtoxin,CDT)的重组表达载体,并诱导重组CDT蛋白的表达,以期为重组CDT蛋白的生物学功能研究奠定基础。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增获得CDT的编码基因cdtABC,通过TA克隆和限制性酶切将cdtABC与目的载体pQE60连接,转化感受态大肠杆菌后诱导重组CDT蛋白的表达,收集细菌总蛋白进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹法鉴定。结果pQE60-cdtABC转染的感受态大肠杆菌中均携带cdtABC基因,该片段与GenBank中的DNA一致性高达99%。细菌总蛋白中21000、25000、32000左右的蛋白增多,蛋白质印迹法检测发现带有6-His标记的目的蛋白。结论本研究成功构建了CDT的重组表达载体,并诱导重组CDT蛋白的表达。 展开更多
关键词 牙周炎 放线杆菌 伴放射菌 细胞膨胀致死毒素
原文传递
临床分离胥伐成格隆沙门菌的抗菌药物敏感性和毒力基因研究 被引量:4
18
作者 刘晓霞 夏琳林 +8 位作者 张成龙 郇娟 师伟 吴晓妹 张利娟 韩双羽 杨杰 赵展 王玉宝 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期582-587,共6页
目的:研究临床分离胥伐成格隆沙门菌的抗菌药物敏感性和毒力基因特征,为防治感染和了解其流行趋势提供依据。方法收集2014年5月至10月我院肠道门诊急性腹泻患者的临床资料,采集患者粪便标本进行沙门菌分离培养、生化鉴定、血清型分型,... 目的:研究临床分离胥伐成格隆沙门菌的抗菌药物敏感性和毒力基因特征,为防治感染和了解其流行趋势提供依据。方法收集2014年5月至10月我院肠道门诊急性腹泻患者的临床资料,采集患者粪便标本进行沙门菌分离培养、生化鉴定、血清型分型,对鉴定得到的胥伐成格隆沙门菌进行抗菌药物敏感性检测、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型和多位点序列分型(MLST),PCR扩增沙门菌毒力岛SPI1-5代表性基因和调节基因、毒力质粒基因和细胞致死膨胀毒素( CDT )基因,对cdtB、pltA和pltB的扩增产物进行序列分析。结果共检测到108株非重复非伤寒沙门菌,其中16株(14.8%)为胥伐成格隆沙门菌。16株胥伐成格隆沙门菌对氟喹诺酮、氨苄西林、头孢曲松、复方新诺明等11种常用抗菌药物敏感率为100%,PFGE分型结果为A克隆14株、B克隆1株和C克隆1株, A克隆中有8例患者有明确的共同饮食来源,提示为感染暴发;16株胥伐成格隆沙门菌MLST分型均为ST241型,SPI1-5代表性基因invA、sitC、hilA、sseL、sifA、mgtC、siiE、sopB和调节基因phoP以及CDT基因cdtB、pltA和pltB均阳性,毒力质粒基因pefA、prot6E、spvB均为阴性;本研究中的胥伐成格隆沙门菌CDT基因与伤寒沙门菌相应基因的DNA和氨基酸序列相似均大于97%。结论本研究分离到多克隆ST241型胥伐成格隆沙门菌临床株,虽对常用抗菌药物尚保持敏感,但携带SPI1-5毒力基因和伤寒毒素CDT基因,应关注胥伐成格隆沙门菌临床感染在我国的变化趋势和危害,开展持续监测和研究。 展开更多
关键词 胥伐成格隆沙门菌 脉冲场凝胶电泳 多位点序列分型 抗菌药物敏感性 沙门菌毒力岛 细胞致死膨胀毒素
原文传递
几种肠道菌中细胞致死性肿胀毒素的检测及其细胞毒性初步研究 被引量:1
19
作者 卢珊 孙娜 +1 位作者 任志鸿 叶长芸 《中国预防医学杂志》 CAS 2009年第5期326-331,共6页
目的了解肠出血性大肠杆菌、非典型致泻性大肠杆菌、志贺菌及部分肠杆菌中CDT毒素基因存在情况及其细胞毒性。方法用PCR方法检测cdt基因,并将阳性菌株培养上清与HeLa细胞共同孵育检测细胞形态的改变,初步评价CDT毒素的表达及其细胞毒性... 目的了解肠出血性大肠杆菌、非典型致泻性大肠杆菌、志贺菌及部分肠杆菌中CDT毒素基因存在情况及其细胞毒性。方法用PCR方法检测cdt基因,并将阳性菌株培养上清与HeLa细胞共同孵育检测细胞形态的改变,初步评价CDT毒素的表达及其细胞毒性。结果在肠出血性大肠杆菌O157∶NM中,cdt基因检出率为16.28%(7/43),其中3株为cdt-III型,其他4株为cdt-I型;携带HPI毒力岛的非典型致泻性大肠杆菌中cdt基因检出率为6.25%(5/80);在志贺菌中,cdt基因检出率为2.67%(4/150),非典型致泻性大肠杆菌和志贺菌检出的cdt基因全部为cdt-I型。而在O157∶H7大肠杆菌、枸橼酸杆菌和沙门菌未检出cdt基因。所有cdt基因阳性菌株均使HeLa细胞出现典型的细胞肿胀变化,效应滴度介于1∶2到1∶16之间。结论CDT毒素只在肠出血性大肠杆菌O157∶NM、携带HPI毒力岛的非典型致泻性大肠杆菌和志贺菌中检出,且检出率均比国外同类菌株低,其存在是否与疾病严重程度相关及其细胞毒性机制尚须进一步研究予以证明。 展开更多
关键词 细胞致死性肿胀毒素 大肠杆菌 志贺菌
原文传递
一株林麝肺源创口博德特氏杆菌全基因组及细胞致死性肿胀毒素分析 被引量:2
20
作者 曾红梅 赵位 +6 位作者 王翔 晏仕强 杨泽晓 罗燕 程建国 王印 姚学萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期2007-2017,共11页
【目的】为探究林麝的死亡原因,本研究无菌采集1只死亡林麝肺脏后进行细菌的分离鉴定。【方法】通过细菌分离纯化、生化试验和16S rRNA序列分析,对分离菌株进行鉴定;然后通过药敏试验、全基因组测序与分析以及细胞致死性肿胀毒素(cytole... 【目的】为探究林麝的死亡原因,本研究无菌采集1只死亡林麝肺脏后进行细菌的分离鉴定。【方法】通过细菌分离纯化、生化试验和16S rRNA序列分析,对分离菌株进行鉴定;然后通过药敏试验、全基因组测序与分析以及细胞致死性肿胀毒素(cytolethal distendin toxin subunit B,CDTB)分析,对分离菌株耐药性和致病性进行研究。【结果】在死亡林麝肺脏中分离出1株革兰阴性菌,经鉴定为创口博德特氏杆菌,命名为ZL0001。经过细胞培养观察和CDTB分析表明该菌为胞内寄生菌,含有细胞致死性肿胀毒素,能导致细胞凋亡。药敏结果表明该分离株对氨苄西林、亚胺培南、链霉素和四环素等药物敏感;对氨曲南、林可霉素、克林霉素和呋喃妥因耐药。全基因组测序分析结果表明,该菌株与其他创口博德特氏杆菌的平均核苷酸一致性(average nucleotide identity,ANI)值均>97%,基因组大小为4350644 bp,共发现22个耐药相关基因。此外,该菌株基因组包含63个毒力相关基因,其参与鞭毛蛋白、脂多糖、铁摄取、抗血清蛋白以及细胞致死性肿胀毒素等毒力因子的合成。【结论】本研究首次在动物呼吸道中分离出创口博德特氏杆菌,并证明其为胞内寄生菌,对林麝肺炎的发病机理研究具有重要意义。 展开更多
关键词 林麝 创口博德特氏杆菌 胞内寄生菌 细胞致死性肿胀毒素 全基因组序列
原文传递
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部