RhD变异型DⅥ Ⅲ型分子生物学研究

目的探讨RhD变异型DⅥⅢ型的分子生物学机制。方法选取2020年11月至2022年5月北京市红十字血液中心血型室接收的RhD血型弱阳性患者血样。使用3个厂家的单克隆抗-D(1个IgM、2个IgM/IgG抗-D)检测患者RhD血型,其中IgM抗-D采用盐水试管法(saline tube method,S)、IgG抗-D采用间接抗人球蛋白试验(indirect anti-human globulin test,IAT);采用直接抗人球蛋白分型卡和Rh分型卡检测患者直抗(direct anti-human globulin test,DAT)和RhCcEe抗原。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测RHD基因缺失情况、RHD基因10个外显子全序列及其相邻侧翼内含子测序分析样本RHD基因型。结果共纳入RhD血型弱阳性患者血样8份,盐水试管法均只与一个厂家的抗-D试剂(IgM/IgG抗-D)呈弱阳性反应,IgM抗-D和另一家IgM/IgG抗-D阴性;IAT与2个厂家的抗-D试剂(IgM/IgG抗-D)均4+;DAT均阴性;RhCcEe表型分别为Ccee(6/8)、ccee(1/8)、CcEe(1/8)。实时荧光定量PCR结果均为RHD基因外显子E3~E6缺失,RHD基因外显子全序列测序均为RHD^(*)06.03.01。结论通过分子生物学方法对RHD基因的检测能准确鉴定为DⅥⅢ型,为受血者和供血者在临床输血中提供不同的保障策略。