8例RhD变异型的血清学特征及基因序列分析

目的探讨RhD变异型患者的血清学特征及基因序列分析。方法采用微柱凝胶卡式法对拟输血患者进行ABO及RhD血型检测,对RhD抗原减弱及阴性标本进行盐水试管法复查和RhD阴性确认试验,对检出的D变异型样本进行基因检测。结果726例RhD抗原减弱及阴性标本经RhD阴性确认试验共检出8例D变异型,该8例样本经基因测序共检出7种基因型分别为RHD*01W.72/RHD*01N.01、RHD*15/RHD*D-CE(2)-D、RHD*01EL.01/RHD*15、RHD*DCE(3-9)-D/RHD*01N.01、RHD*15/RHD*01N.01、RHD-496G/RHD*01N.01和RHD*01EL.01/RHD*01W.71。其中,2例RHD*15/RHD*01N.01为弱D15型;1例RHD*01W.72/RHD*01N.01为弱D72型;2例RhD和RhCE基因重组,分别为RHD*15/RHD*D-CE(2)-D和RHD*D-CE(3-9)-D/RHD*01N.01;1例RHD-496G/RHD*01N.01的c.496C>G为新的RHD变异位点,已向GenBank数据库提交确认申请;3例两条配子基因均出现突变,其中2例为新的组合方式:RHD*15/RHD*D-CE(2)-D和RHD*01EL.01/RHD*01W.71。6例样本进行了RhCE表型检测,其中5例样本含有C抗原,占83.3%,以Ccee表型居多,3例,占50%。结论血清学检测联合基因测序有助于发现血型表现型和基因型特点,为了解RhD变异型及指导临床输血提供参考。

上海市Rh阴性献血者D变异型与不规则抗体调查

目的调查上海市Rh阴性献血者D变异型并进行不规则抗体的检测。方法采用微量板木瓜酶法常规鉴定Rh血清学表型,用间接抗人球蛋白试验确认Rh阴性及D变异型,用筛选细胞进行不规则抗体的筛选。结果常规鉴定Rh阴性1 938例,确认为Rh阴性1 872份(96.59%),其中表型ccdee 1 069例(57.10%)、Ccdee 611例(32.64%)、CCdee 81例(4.33%)、ccdEe 76例(4.06%)、CcdEe 33例(1.76%)、ccdEE 2例(0.11%)。检测出66例(3.41%)Rh D(Dv)变异型。1 872例Rh阴性献血者血清中,检出13例(0.69%)含有不规则抗体,66例Rh D变异型的血清中未检出不规则抗体。结论Rh阴性献血者D变异型和不规则抗体调查有利于提高输血的安全性、降低输血反应。

一例RHD960A/1227A基因型的D变异型患者的血型鉴定及其家系分析

目的准确鉴定携带D变异型合并亚洲型DEL个体的血型。方法采用常规血清学方法对1名临床常规血型检测为RhD阴性、其父母皆为RhD阳性的先证者及家系成员做RhD血型鉴定,使用D-Screen试剂盒检测该例D变异型标本的RhD抗原表位;提取基因组DNA,采用MLPA基因分型方法和Sanger测序法对该例D变异型标本做RHD基因型分型。结果先证者血清学鉴定:D变异型,基因分型:RHD*960A/RHD*1227A(RHD*960A/01EL.01);其父亲携带RHD*1227A等位基因、其母亲携带RHD*960A等位基因。结论携带RHD*1227A等位基因(亚洲型DEL)个体不会在免疫刺激下产生同种抗-D,表现为D变异型;基因型鉴定及分析可为这种患者输血安全及这种孕妇产前检测提供准确的依据。

宁夏地区RhD阴性献血人群D变异型及Rh表现型研究

目的探究宁夏地区RhD阴性献血人群Rh表型分布及表型与D变异型的关系。方法Rh阴性献血者通过微量板盐水法筛选,用间接抗人球蛋白试验(IAT)进行确认,鉴定C、c、E、e抗原表型。结果在1092例初筛RhD阴性标本中,确认为RhD阴性1032例(94.51%);检出D变异型60例(5.49%),分型分别为Ccee12例(20.00%)、CCee 4例(6.67%)、ccEe 34例(56.67%)、CcEe 8例(13.33%)、ccEE 2例(3.33%);E抗原阳性初筛RhD阴性125例,D变异型占35.20%(44/125)。确认RhD阴性献血者与D变异型献血者E抗原分布差异具有统计学意义(χ^2=239.88,P<0.01)。结论宁夏地区D变异型献血者表型以ccEe为主,含有E抗原的初筛RhD阴性个体D变异型的可能性高于其他表型的个体。

西安地区Rh阴性献血者抗原分布及D变异型分子机制的研究

目的研究西安地区Rh阴性献血者中抗原分布和D变异型的分子机制。方法对初筛为RhD阴性的无偿献血者,采用盐水法鉴定Rh C/c/E/e抗原,采用间接抗球蛋白法(IAT)进行阴性确认。对D变异型采用商用试剂盒进行基因分型,并对特殊标本的RHD基因的10个外显子序列进行测序分析。结果在1 944例初筛阴性标本中,ccee 1 096例(56. 38%),Ccee 554例(28. 50%);阴性确认试验阴性1 865例(95. 94%),阴性确认试验阳性的D变异型79例(4. 06%)。在D变异型中,cc Ee表型35例(44. 30%),Cc Ee表型20例(25. 32%);基因分型检出55例(69. 62%)弱D 15,11例(13. 92%) DⅥⅢ,5例(6. 32%) Del(1227A),3例(3. 79%) Dva(Hus),DBT-1、弱D 33、DLO和RHD*845A/1227A各1例,发现1例新的等位基因RHD*1252G。结论通过对西安地区Rh阴性献血者抗原分布及D变异型分子机制的研究,可以了解本地区Rh抗原分布特点,发现特殊的RHD基因型,对指导临床输血,保障输血安全工作具有重要的作用。

48例D变异型基因背景研究

目的明确48例D变异型标本的RHD遗传背景。方法收集2020年7月~2021年7月送检苏州市中心血站和徐州市中心血站进行RHD血型确认的献血者和患者标本,D抗原盐水法阴性或弱阳性、间接抗人球蛋白试验至少有一种抗-D结果为阳性者鉴定为D变异型,提取D变异型标本的基因组DNA,采用PCR-SSP方法对标本RHD基因型进行初步鉴定,对于有疑问或无法鉴定的结果,进一步对RHD外显子1-10进行基因测序。结果48例D变异型标本中,PCR-SSP方法直接确定RHD等位基因组成的有35例,包括RHD*15、RHD*06.03.01、RHD*15/RHD*01EL.01、RHD*01EL.01,其中RHD*15和RHD*06.03.01例数最多,分别有17例(34.69%)和9例(18.37%)。其余13例经RHD测序后确定等位基因组成,其中5例为弱D(RHD*01W.72、RHD*01W.54、RHD*01W.10和RHD*11/RHD*01EL.01),4例为部分D(RHD*05.01、RHD*05.04、RHD*05.05和RHD*16.02),1例为RHD*01。另有3例单核苷酸突变的弱D标本,分别为RHD*779G 2例和509T>G(GenBank:MZ423199)1例。509T>G突变经多种单抗检测与部分D表型接近。RHD*15的常见分型为ccEe,占该等位基因组成的70.59%;RHD*06.03.01的常见分型为Ccee,占该等位基因组成的77.78%。结论RHD*15为本地区最常见的D变异型,其常见分型为ccEe。D变异型在本地区具有丰富的遗传多样性。

十堰市Rh弱D和/或部分D变异型血型血清学检测结果分析

目的了解十堰市无偿献血者中Rh弱D和/或部分D变异型所占比例。方法在122 084名无偿献血者中采用微板法初筛出Rh(D)阴性献血者442名,采用间接抗人球蛋白试验(IAT)试管法确认Rh(D)阴性、弱D和/或部分D变异型,Rh因子血清学表型鉴定采用盐水试管法。结果 442名初筛Rh(D)阴性献血者中采用IAT确认Rh(D)阴性427例,占总人数的0.35%;检出Rh弱D和/或部分D 15例,检出率分别为3.394%(15/442)和0.013%(15/122 084),弱D和/或部分D仅检出4种表型,分布比例分别为cc Ee 40%、Ccee 40%、Cc Ee 13.33%、CCee 6.67%,不规则抗体检测均为阴性。结论从献血者角度讲,D变异型个体所献血液应该作为Rh阳性血液供应临床;从受血者角度讲,则应该输Rh阴性血液。而一个个体可能在不同时间先后成为献血者或受血者,因此正确鉴定弱D和部分D在内的D变异型并制定相应的输血策略,对于输血安全和合理用血有着重要的意义。

D变异型受血者输RhD阴性血1例

目的:探讨受血者红细胞表面是否存在D抗原。方法:采用盐水试管法、间接抗人球蛋白法检测受血者红细胞表面D抗原。结果:受血者红细胞表面存在D抗原,但D抗原表达不完全,定为弱D型。结论:受血者若为弱D型应作Rh阴性论,输Rh阴性血。

新乡地区Rh阴性无偿献血者Rh表型分布及RhD变异型基因型分析

目的分析新乡地区Rh阴性无偿献血者Rh表型分布及RhD变异型基因型。方法选择2018年1月至2019年12月于新乡市中心血站无偿献血的110667名无偿献血者为研究对象。采用试管法ABO正反定型试验检测ABO血型,采用试管法Rh抗原分型试验检测Rh表型并初筛RhD阴性受试者,采用间接抗人球蛋白试验对初筛RhD阴性受试者进行RhD阴性确认,并检出RhD变异型受试者。采用聚合酶链式反应法扩增RhD变异型受试者RHD基因外显子E1~E10,将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察相应的外显子区域有无特异性条带出现。采用Sanger测序法对RhD变异型受试者的RHD基因外显子E1~E10的特异性扩增产物进行基因测序,应用SeqMan软件分析基因序列,根据单核苷酸多态性位点确定RhD变异型。结果110667名受试者中,初筛RhD阴性269例(0.24%)。269例初筛RhD阴性受试者中,Rh阴性256例(95.17%),RhD变异型13例(4.83%)。256例RhD阴性受试者中,ABO血型为A型78例(30.47%)、B型92例(35.94%)、O型64例(25.00%)、AB型22例(8.59%),Rh表型分布以ccdee(60.55%)和Ccdee(29.30%)居多。11例RhD变异型受试者的RHD基因外显子E1~E10为特异性条带,2例RhD变异型受试者的RHD基因外显子E1~E5、E8、E10为特异性条带。13例RhD变异型受试者中,7例弱D型、4例DEL型和2例部分D型。13例RhD变异型受试者RHD基因RhCE表型分别为CCee(2/13)、Ccee(6/13)和ccEe(5/13)。7例RhD变异型受试者等位基因RHD*15的E6外显子发生845G>A杂合突变。4例RhD变异型受试者的E9外显子发生1227 G>A杂合突变,其中1例受试者同时发生ZVS7+152 C>A突变。2例RhD变异型受试者的RHD基因E6~E9外显子发生突变,被RHCE基因所取代,表现为RHD-CE(6-9)-RHD。结论新乡地区RhD阴性无偿献血者中Rh表型分布以ccdee和Ccdee居多,RhD变异型以弱D型为主,其RHD等位基因为RHD*15。

岳阳地区Rh(D)阴性献血者D变异型调查

到目前已发现人类有36个血型系统，对临床输血最为重要的是AB0和Rh血型系统。Rh血型是血型系统中最复杂、最具多态性的血型系统，其临床意义仅次于ABO血型系统，可引起严重的输血反应和新生儿输血反应。

RhD变异型1例

Rh血型系统是最复杂的血型系统,其临床重要性仅次于ABO系统[1]。目前发现的Rh抗原数达到了49个,临床上含D抗原者为Rh阳性,无D抗原者为Rh阴性,特殊的Rhnull表型缺少全部Rh抗原。正常D、D变异型、弱D、不完全D、超强D均视为D阳性,血型血清学的方法很难鉴别不同型别的弱D和不完全D,现统称为D变异型。

IRS2基因G1057D变异与中国汉族人肥胖型2型糖尿病的相关性(英文)

目的研究IRS2基因G1057D突变与中国汉族人2型糖尿病(type2diabetesmellitus,T2DM)的相关性。方法选取辽宁汉族人T2DM组218例,健康对照组221名,各分为肥胖和非肥胖两个亚组。应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法筛查IRS2G1057D突变并探讨与T2DM的相关性。结果(1)IRS2G1057D总突变频率为29%。非肥胖DM组DD型频率显著低于非肥胖对照组,Logistic回归分析显示DD型OR值为0.265;而肥胖DM组DD型频率则显著高于肥胖对照组,Logistic回归分析显示DD型的OR值为3.991。(2)在非肥胖亚组:DM组DD型的WHR高于同组GG型(P<0.01);对照组DD型的FPG及2hCP低于同组GG型(P<0.05,P<0.01),HOMAB高于同组GG型(P<0.01)。在肥胖亚组:DM组DD型的WHR、HOMAIR及2hPG、2hINS、2hCP均高于同组GG型,HOMAB低于同组GG型;对照组DD型的WHR、2hINS、HOMAIR及HOMAB也分别高于及低于同组GG型(均P<0.05)。结论IRS2基因G1057D突变以肥胖为中介与T2DM相关联。

济南地区RhD阴性献血人群D变异型及Rh表现型研究

目的研究济南地区RhD阴性献血者Rh表现型分布情况及不同表现型与D变异型的关系,指导RhD阴性患者的临床输血。方法山东省血液中心检验科初检RhD阴性样本588份,采用间接抗人球蛋白法进行确认,并测定C、c、E、e抗原表现型频率。结果 588例初筛阴性样本中检出D变异型16例,其中ccEe表现型12例,Ccee表现型3例,CCee表现型1例;确认阴性样本572例,其中ccdee表现型333例(58.22%),Ccdee表现型152例(26.57%),ccdEe表现型42例(7.34%),CcdEe表现型22例(3.85%),CCdee表现型18例(3.15%),ccdEE表现型4例(0.70%),CCdEe表现型1例(0.17%)。结论济南地区RhD阴性献血者Rh表现型以ccdee和Ccdee为主。表现型含有E抗原的初检RhD阴性个体为D变异型的概率高于其他表现型。

弱D25变异型血型抗原表位分析及输血策略探讨

目的对1例输注阳性血液的D变异型患者进行Rh血型血清学及分子生物学鉴定,并对其进行不规则抗体检测,探讨该D变异型的输血策略。方法采集患者标本,用2种不同的单克隆抗-D试剂鉴定D抗原,并用试剂盒检测D变异体抗原表位,Rh CE抗原分型,红细胞直接抗球蛋白试验,不规则抗体筛查;采用多重链接酶依赖的探针扩增（MLPA）方法检测RHD及RHCE基因型,对于MLPA检测不到的RHD突变型等位基因,对RHD基因全部10个外显子进行PCR扩增及产物直接测序分析。结果该患者初步D抗原鉴定结果显示为D抗原弱表达,且直接抗球蛋白试验阴性;D抗原表位检测结果显示其红细胞与D抗原ep D5.4、ep D2.1和ep D3.1表位特异性单克隆抗体产生弱凝集反应,与其余表位抗体均无凝集反应,大量输注D阳性血液后的168 d及232 d抗体筛查结果均为阴性;Rh CE抗原分型为cc Ee,MLPA结果显示其基因型为RHD/d,RHCE基因MLPA基因分型结果与血清学表型一致;RHD基因外显子直接测序发现其第3外显子携带纯合的c.341G〉A（p.Arg114Gln）错义突变。结论患者为弱D25变异型,对弱D25型的D抗原进行表位分析的显示其部分抗原表位缺失。该患者大量输注阳性血液后未产生抗-D,为制定该血型患者的临床输血策略提供数据。

DFR变异型孕妇血型鉴定及孕期监测策略探讨

目的对3例RhD变异型孕妇进行血型血清学和分子生物学鉴定,探讨其孕期监测策略。方法收集3例D变异型孕妇外周血标本,采用2种单克隆抗-D试剂进行RhD抗原鉴定,使用D-Screen试剂盒进行D抗原表位检测。提取基因组DNA,采用多重连接探针扩增技术(MLPA)和序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)基因分型试剂盒检测RHD-CE-D杂交等位基因,使用Sanger测序法对RHD基因进行测序分析。结果D抗原表位检测结果提示这3例标本为DFR变异型标本,进一步分子生物学检测鉴定其基因型分别RHD*DFR2/01N.01(n=2)和RHD*DFR1/1227A(n=1)。结论基因型为RHD*DFR2/01N.01的2例DFR表型孕妇的孕期检测策略应参照D阴性孕妇进行;而携带RHD*1227A等位基因即“亚洲型”DEL等位基因的DFR表型孕妇建议按照“亚洲型”DEL孕妇进行孕期监测,即无需频繁筛查意外抗体,也不需要预防性注射抗-D免疫球蛋白。

D变异型受血者产生同种抗-D合并抗-E及抗-C抗体1例

1临床资料1.1病例资料患者,女,72岁,已婚,育有1子1女。20余年来反复出现胸闷气喘,有夜间阵发性呼吸困难,曾有风湿性心脏病、心功能不全病史,2002年在上海华山医院行二尖瓣金属置换术及主动脉瓣修复术。有脑梗死病史,甲亢病史1年,曾口服甲硫咪唑片治疗,目前停服,控制可,否认有高血压及其他慢性疾病,肝炎性肝硬化多年,2016年4月发现肝癌,在我院多次行肝癌介入治疗,目前合并肺转移。患者因受凉后出现咳嗽、胸闷情况.

青岛地区RhD阴性及D变异型无偿献血者RHD基因的多态性研究

目的探讨青岛地区RhD阴性及D变异型无偿献血者的分子机制与RHD基因的多态性。方法对220例经血清学试验确证为阴性及5例D变异型的无偿献血者，采用PCR—SSP方法检测RHD基因的第1-10外显子，对全部或部分外显子扩增阳性的样本进行测序分析。结果在220例确证试验阴性的样本中，RHD基因第1-10外显子检测全部为阴性的样本有166例（75．45％），部分或全部存在的标本有54例（24．55％）。共获得8种等位基因型，分别为RHDl227G-A28例（12．73％）、RHD-CE-（2—9）-D19例（8．64％）、RHD-CE-（3-7）-D1例（O．45％）、RHD3G〉A1例（0．45％）、RHD 711delC 2例（0．91％），RHD1013T〉C1例（0．45％），RHD1227A／G1例（O．45％）。RHD基因第1-10外显子未发现突变者1例。5例D变异的个体共有2种等位基因型，分别为RHD845G：〉A（4例）和RHD697G〉A（1例）。结论青岛地区RhD阴性无偿献血者的RHD基因以整体缺失为主，并存在丰富的遗传学多态性。

临床Rh D变异型鉴定分析

目的 通过分析丽水市中心医院2016年1月—2020年9月10例Rh D变异型,探讨更准确鉴定Rh血型的方法,提高临床用血安全性。方法 自身对照阴性,Ig M抗D试剂与受检者红细胞凝胶微柱卡凝集强度<4+时试管法采用3种不同克隆株Ig M抗D试剂进行检测;自身对照阳性,DTT处理后再鉴定。结果 6例患者红细胞与Ig M抗D试剂凝集度1+~2+,4例患者红细胞与Ig M抗D试剂凝集度2+~3+且与3种不同克隆株凝集强度差异较大,根据其反应类型可判定为D变异型,其中1例自身凝集影响Rh D变异型鉴定。结论 Rh血型鉴定中凝胶微柱卡凝集度<4+,试管法凝集度<3+要考虑D变异,也要注意避免患者红细胞自身凝集带来的干扰。

一例部分D血型表型及基因型鉴定分析

目的分析RhD变异体的血清学特征并进行RhD基因检测。方法采用微柱凝胶法对2023年平邑县人民医院收治的一例RhD变异体患者血型进行血清学分析,采用SSP-PCR法进行RhD基因型检测,对患者血液标本的基因组DNA进行全外显子测序(WES)确定与其表型相关的突变,同时采用Sanger测序验证变异位点。结果患者血清学结果显示为D变异型,RhD基因测序结果显示外显子1,3-7,9有突变。结论外显子1,3-7,9有突变,该患者样本基因与RHD*01.01和RHD*01N.04相符,基因型为D+/D-型,表型为部分D型。应对D变异体进行分型研究,从而采取合理的输血策略。