栉孔扇贝D形幼虫血细胞发生特点的研究

研究组前期实验表明，栉孔扇贝（Chlamys farreri）从囊胚期开始的各发育时期中，以D形幼虫期开始出现形态可辨的血细胞。本文采用石蜡切片、组织化学、栉孔扇贝血细胞单克隆抗体的免疫组化方法，定位、观察栉孔扇贝D形幼虫血细胞的分布和形态特点。结果表明：可辨形态的血细胞集中分布于幼虫的外套膜、面盘、口、食道、胃、消化腺、肠等组织，游离的血细胞大多为球形或椭球形，直径约为1～3μm，中央有一深色细胞核，而在消化腺中血细胞密集层叠，形态各异。在该时期未观察到不同类型的血细胞和造血组织。结论认为，D形幼虫期开始出现形态可辨的血细胞，主要分布于与摄食消化相关的组织器官内。

栉孔扇贝(Chlamys farreri)与华贵栉孔扇贝(C.nobilis)远缘杂交子代的胚胎发生及幼虫生长发育的初步研究

采用单一自由度独立比较的方法,研究了两个栉-华杂交组合HCH(栉孔扇贝长岛群体×华贵栉孔扇贝)和HJH(栉孔扇贝胶南群体×华贵栉孔扇贝)以及栉孔扇贝种内交配组合ZZ的胚胎发生及幼虫生长发育过程。结果表明,栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝的种间杂交F1在生长和发育的两个环节上是不一致的,在涉及器官及其功能形成的发育环节上,杂交表现负效应;而在涉及形态变化和增大的生长环节上,杂交表现正效应,存在杂种优势现象。两个杂交组合中,HJH综合效果较好,授精22h平均孵化率达到95.8%,与ZZ基本接近;30日龄平均变态率达61.5%,明显好于组合HCH的42.0%;8日龄幼虫平均大小达143.4μm×123.2μm,表现出更强的生长优势。这些结果为全面评价栉孔扇贝与华贵栉孔扇贝杂交体系应用价值和选配优良杂交组合提供了理论依据。

铜和温度对厚壳贻贝早期幼虫生长和存活的影响

进行了不同温度(10、14、17℃)和不同Cu(Ⅱ)质量浓度(7.40、32.63、56.58、193.94、300.48μg/L)的耦合作用对厚壳贻贝Mytilus coruscus D形幼虫生长和存活的急性毒性影响试验。结果表明:Cu(Ⅱ)胁迫96 h后,10、14℃试验组幼虫的存活率在Cu(Ⅱ)质量浓度为193.94、300.48μg/L时均显著降低(P<0.05),17℃试验组幼虫的存活率在Cu(Ⅱ)质量浓度为56.58μg/L及以上时显著降低(P<0.05);在温度为10、14、17℃时Cu(Ⅱ)胁迫的96 h半致死浓度(96 h LC50)分别为143.6、143.5、133.0μg/L,表明随着温度的升高LC50呈下降趋势;Cu(Ⅱ)胁迫96 h的生长试验结果显示,在10℃时,56.58μg/L质量浓度组的壳长相对增长率与对照组存在显著性差异(P<0.05),14、17℃时,32.63、56.58μg/L质量浓度组的壳长相对增长率与对照组存在显著性差异(P<0.05);在相同Cu(Ⅱ)浓度和不同水温胁迫下,17℃试验组幼虫壳长相对增长率显著高于10、14℃试验组(P<0.05)。研究表明,Cu(Ⅱ)胁迫和温度的变化能影响厚壳贻贝D形幼虫的存活,且在较高的温度下幼虫对Cu(Ⅱ)胁迫更为敏感。

用次氯酸钠防止海湾扇贝幼虫下沉的试验

采用 1 0× 1 0 -6,2 0× 1 0 -6,30× 1 0 -6浓度的NaClO处理海湾扇贝幼虫 ,可以有效防止幼虫下沉 。

低盐诱导海湾扇贝三倍体育苗技术的研究

通过低盐海水浸泡海湾扇贝受精卵抑制受精卵第二极体释放的方法诱导海湾扇贝产生三倍体。当海湾扇贝的受精卵40%出现第一极体时,立即用不同盐度梯度即22.5、20、17.5、15、12.5、10、7.5、对照组(盐度30)的海水对受精卵进行处理10、15min后,马上将处理的受精卵移入正常海水中孵化。实验结果表明,不同梯度低盐海水可以诱导海湾扇贝产生三倍体,盐度为20以上时,三倍体诱导率小于2.91%,但随着盐度的下降,三倍体诱导率迅速提高,当盐度为12.5时,三倍体诱导率高达85.91%。当盐度低于7.5时,由于D形幼虫极少,三倍体诱导率无法测出。在处理时间上,15min的处理效果比10min处理效果好。因此,本研究在低盐度条件下抑制受精卵第二极体产生海湾扇贝三倍体的最佳处理方法是低盐范围在12.5～15之间,处理时间为15min,三倍体诱导率高,孵化率也较高,适合生产上推广应用。

长牡蛎“海大2号”四倍体的人工诱导

为筛选适宜的四倍体诱导条件,研究了细胞松弛素B(CB)浓度(0.3、0.5、0.7和0.9 mg/L)、起始诱导时间(5、10和15min)、诱导持续时间(10、15、20和25min)及三者的交互作用对长牡蛎“海大2号”四倍体诱导率(四倍体率)和D形幼虫率的影响,并对诱导处理组获得的幼贝倍性进行检测分析,进一步验证了研究诱导方法获得可存活长牡蛎“海大2号”四倍体幼贝的可行性。结果表明,CB浓度和起始诱导时间对长牡蛎“海大2号”四倍体率有显著影响(P<0.05),而诱导持续时间对四倍体率影响不显著(P>0.05),但是三者的交互作用对四倍体率有显著影响(P<0.05)。在CB浓度为0.5 mg/L、起始诱导时间为15min及诱导持续时间为20min时,四倍体率有最大值为37.82%。CB浓度、起始诱导时间和诱导持续时间均对D形幼虫率有显著影响(P<0.05),但是三者的交互作用对D形幼虫率没有显著影响(P>0.05)。增加CB浓度或延长诱导持续时间,D形幼虫率均呈降低的趋势;起始诱导时间为5min时,D形幼虫率显著高于其他起始诱导时间。获得幼贝的两个诱导处理组的倍性检测结果显示,长牡蛎“海大2号”四倍体率分别为2.22%和3.03%,与幼虫期相比四倍体率显著下降。通过对CB浓度、起始诱导时间及诱导持续时间进行优化,可以筛选出适宜的长牡蛎“海大2号”四倍体诱导条件。研究结果为长牡蛎“海大2号”四倍体培育提供了重要的参考资料。

胶州湾移植底播菲律宾蛤仔面盘幼虫生物学特性研究

2006年5～9月,通过浮游拖网调查对胶州湾移植底播菲律宾蛤仔面盘幼虫(D形幼虫)生物学特性进行研究,结果表明:移植底播菲律宾蛤仔面盘幼虫壳长、壳高呈线性相关,与其它蛤仔种群面盘幼虫差异显著。