100例RhD初筛阴性孕妇D放散型表型筛查及基因型分析

目的对100例Rh D阴性孕妇进行D放散型（Del）表型筛查及基因型分析,同时进行抗体筛查和鉴定,以指导Del血型孕妇的产前监测。方法 2016年2月—2016年11月期间,收集100例多次妊娠且初筛为Rh D阴性的孕妇外周血标本,采用抗球蛋白凝胶卡法检测Rh D血型,抗球蛋白凝胶卡法进行直接抗球蛋白试验;采用Rh血型分型卡检测Rh CE抗原;抗球蛋白凝胶卡法进行不规则抗体筛查及抗体鉴定。采用吸收放散试验进行Del血型表型鉴定,同时采用序列特异性聚合酶链反应（PCR-SSP）进行RHD＊01EL.01（RHD＊1227A）等位基因检测,应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）对Del表型标本RHD基因合子型进行进一步分析;对D变异型标本,进行D抗原表位检测（D-Screen）和RHD基因10个外显子的PCR扩增及直接测序分析。结果 100例标本中检出Del表型27例（27%）,均没有产生抗-D,其中21例Rh CE抗原分型为Ccee（77.8%）,4例为CCee（14.8%）,2例为Cc Ee（7.4%）;25例RHD基因型为RHD＊01EL.01/01N.01（92.6%）,2例RHD＊01EL.01/RHD＊01EL.01（7.4%）。此外还检出D变异型4例（4%）,其中包括2例部分DⅥ3,1例弱D25和1例弱D15,均未产生抗-D。检出Rh D真阴性血型69例,其中产生抗-D 9例（12.7%）,且有2例合并抗-C;产生抗-c E合并抗-Jkb1例。结论携带有RHD＊01EL.01等位基因的＂亚洲型＂Del血型孕妇在Rh D阳性胎儿的免疫刺激下,很可能不会产生抗-D,属于完全性Del（complete Del）血型。

Rh血型D放散型(D^(el))

Rh血型系统是人类红细胞30个血型系统中最为复杂的1个抗原系统,在临床输血中其重要性仅次于ABO血型。Rh血型系统包括50多个抗原,

Rh(D)阴性无偿献血者Rh表型及Del检测结果与分析

目的明确Rh(D)阴性无偿献血者Rh表型及Del型的分布情况,充分掌握Rh(D)阴性献血者资料,为临床需求提供保障。方法采用盐水介质试管凝集法进行Rh(D)初筛,初筛阴性标本再用抗球蛋白法进行Rh(D)阴性确证试验。用生理盐水介质试管凝集法将Rh(D)确证实验阴性无偿献血者标本进行ABO血型和Rh表型检测。采用吸收放散试验对Rh(D)确证阴性无偿献血者标本进行Del型检测。结果筛检并确证1451份Rh(D)阴性无偿献血者,ABO血型分类结果包括A型449份、B型384份、AB型146份、O型472份。性别分类结果包括男性842份、女性609份。Rh(D)检测结果中40份弱D、395份Del阳性、1016份Del阴性。Rh表型中29份CcdEe型、439份Ccdee型、93份CCdee型、778份ccdee型、99份ccdEe型、5份ccdEE型、1份CcdEE型、2份CCdEE型、1份CCd--型、3份--dee型、1份--dEe型。结论本血站具有丰富的Rh(D)阴性无偿献血者,基本满足临床需求;对Rh(D)阴性献血者标本进一步开展Rh表型和Del检测,掌握Rh(D)阴性供血者信息资料,有助于保障Rh(D)阴性受血者的输血安全。

RhD(-)血型中Del的检测及意义

目的了解吸收放散法是否可用于RhD(-)血型中的吸收放散弱D型(Delution,Del)De1ution的检测及Del在临床输血中的意义。方法使用吸收热放散法对43例初筛RhD(-)的血样进行了Del的检测。结果43例RhD(-)血中检出了6例Del。结论常规血清学RhD(-)个体中存在着Del,输入Del血后机体可能被免疫,故每个RhD(-)个体都应用吸收放散试验来进行确认。

中国部分地区RhD(-)汉族人RHD基因结构分析

目的 :了解RhD(- )中国汉族人RHD基因的构成情况 ,并探讨其潜在的应用价值。方法 :采用PCR SSP方法分析 5 0名RhD(+)和 76名常规血清学RhD(- )汉族供血者的RHD基因存在情况 ,对其中 8例RhD(- )血样进行了吸收放散试验。结果 :5 0名RhD(+)供者RHD基因完整存在。 76名RhD(- )供者中 ,2 2名供者(2 8 95 % )存在完整RHD基因 ,9名供者 (11 84% )缺失大部分RHD基因 ,并全为中间缺失型 ;45名供者(5 9 2 1% )完整缺失RHD基因。携带完整RHD基因片段的RhD(- )个体表型均为CC或Cc,而无cc。吸收放散试验证实携带完整RHD基因的常规血清学RhD(- )个体中存在吸收放散弱D型 (Delution ,Del)。结论 :常规血清学RhD(- )中国人RHD基因存在多态性 ,提示中国汉族人RhD(- )特征有多种遗传机制 ,因此在临床医学中要正确对待不同遗传背景的常规血清学RhD(- )个体。

江苏汉族DEL表型个体的分子机制

目的研究中国江苏地区RhD阴性人群DEL表型的分子机制。方法用吸收放散法从57名RhD阴性献血者筛选出DEL型，用试管法检测其C、c、E和e抗原，序列特异性引物-聚合酶链反应检测RHCE基因型。用聚合酶链反应和测序方法对DEL表型个体RHD基因进行序列分析。结果共检出DEL型10例，占RhD阴性人群17．54％；DEL个体以RhCcee为主（80．0％），而RhD阴性个体Rhccee表型最多（61．7％）。10例DEL个体RHD基因第9外显子的1227位点G均突变为A。结论常规方法鉴定的RhD阴性人群中有一定比例的个体为表达突变RHD基因的DEL型。RHD＊1227A是江苏省汉族人群最常见的DEL分子机制。

DEL红细胞膜D抗原表位分析

目的分析Rh血型D放散型(DEL)红细胞膜D抗原表位(epitopemapping)。方法采用微量吸收放散技术通过9种抗D抗原不同表位的人抗D单克隆抗体,检测3名已知Rh表型和RH基因型的D放散型个体的红细胞膜D抗原表位,分别以Rh阳性、Rh阴性、部分D表型DVa(Hus)和DVIⅢ型样本作为对照。结果3名携带RHD1227A等位基因的D放散型个体,红细胞膜D抗原9个抗原表位均检测为阳性,而对照样本检测结果各不相同。结论携带RHD1227A等位基因的中国汉族D放散型个体红细胞膜可能表达基本完整D抗原。