HPLC法同时测定穿山甲炮制品中3个主要环二肽成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定炮山甲中3个成分L-丝-L-酪氨酸环二肽、D-丝-L-酪氨酸环二肽、L-甘-L-酪氨酸环二肽的含量。方法:采用赛分Sepax Bio-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%TFA乙腈-0.1%TFA水(2∶98)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长210 nm。并以3种环二肽为指标,使用SPSS 22.0软件对40批样品进行聚类分析。结果:3个环二肽分离良好,L-丝-L-酪氨酸环二肽、D-丝-L-酪氨酸环二肽、L-甘-L-酪氨酸环二肽进样量分别在0.056~2.244μg(r=0.999 9)、0.061~2.452μg(r=0.999 7)、0.059~2.348μg(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系。加样回收率分别为101.8%、98.1%、95.7%,相应的RSD分别为0.76%、2.2%、2.6%;40批样品中3个成分的含量范围分别为0.007 0%~0.23%,0.005 0%~0.14%,0.008 0%~0.18%,盐类增重对环二肽含量有显著影响,聚类分析将其分为3类。结论:本方法准确可靠,适用于炮山甲中环二肽成分的含量测定。

穿山甲、猪蹄甲、羊蹄甲炮制品水溶性成分的比较研究

目的:比较穿山甲、猪蹄甲、羊蹄甲炮制品的水溶性成分为寻找穿山甲替代资源提供参考。方法:本研究以穿山甲、猪蹄甲、羊蹄甲炮制品为研究对象,通过HPLC指纹图谱及多元数据分析对比3种炮制品的水溶性成分。结果:建立了穿山甲、猪蹄甲、羊蹄甲炮制品水溶性成分的指纹图谱,其中穿山甲炮制品指纹图谱确定了20个共有峰,并指认出7种成分,12批穿山甲炮制品相似度在0.813~0.944;猪蹄甲炮制品指纹图谱确定了22个共有峰,指认出4种成分,12批猪蹄甲炮制品相似度在0.882~0.991;羊蹄甲炮制品指纹图谱确定了19个共有峰,指认出4种成分,12批羊蹄甲炮制品相似度在0.865~0.998。穿山甲色谱峰可分为核苷类、肽类2类组分群;3种炮制品核苷组分相似,均含有黄嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、尿嘧啶,L-甘-L-酪氨酸环二肽、L-丝-L-酪氨酸环二肽、D-丝-L-酪氨酸环二肽只存在于穿山甲中,3种炮制品的水溶性成分差异显著。结论:本研究系统比较了穿山甲、猪蹄甲、羊蹄甲、炮制品水溶性成分的异同,能够为其临床用药提供参考,对寻找穿山甲替代资源的具有参考意义。