苦参总黄酮对D-半乳糖致神经细胞衰老的改善作用及相关机制

目的探讨苦参总黄酮对D-半乳糖致神经细胞衰老的改善作用及相关机制。方法D-半乳糖处理PC12神经元细胞建立细胞衰老模型,分为模型组,10、20、40μg/ml苦参总黄酮组,同时设置空白对照组。检测各组细胞存活率、衰老细胞情况、凋亡率、细胞周期分布情况;测定细胞中抗氧化指标:超氧化物歧化酶、丙二醛、乳酸脱氢酶浓度;Western印迹检测细胞中B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素(Cyt)-C、Bcl-2、人核因子E2相关因子(Nrf)2、血红素氧合酶1蛋白表达水平。结论模型组细胞存活率明显低于空白对照组,β-半乳糖苷酶阳性染色率、细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组细胞存活率明显高于模型组,β-半乳糖苷酶阳性染色率、细胞凋亡率明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显(P<0.05)。各组G0/G1期、S期细胞比例差异有统计学意义(P<0.01);模型组G0/G1期细胞比例明显高于空白对照组,S期细胞比例明显低于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组G0/G1期细胞比例明显低于模型组,S期细胞比例明显高于模型组(P<0.05)。模型组超氧化物歧化酶浓度明显低于空白对照组,丙二醛、乳酸脱氢酶浓度明显高于空白对照组(P<0.01);苦参总黄酮组超氧化物歧化酶浓度明显高于模型组,丙二醛、乳酸脱氢酶浓度明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组Bax蛋白表达明显升高(P<0.01),Cyt-C、Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01);苦参总黄酮组Bax蛋白表达水平明显低于模型组,Cyt-C、Bcl-2蛋白表达水平明显高于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组Nrf2、血红素氧合酶1蛋白表达明显升高(P<0.01);苦参总黄酮组Nrf2、血红素氧合酶1蛋白表达水平明显低于模型组,且随着苦参总黄酮给药浓度的增加变化逐渐明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦参总黄酮可改善D半乳糖诱导的神经细胞衰老,且呈剂量依赖性,可能与激活Nrf2抗氧化信号途径、抑制氧化应激反应、降低细胞凋亡有关。

紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老模型小鼠的影响

目的探究紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆力及氧化应激损伤的影响。方法60只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、紫斑牡丹花粉组(750、1500、3000 mg·kg^(-1)),采用颈背部皮下注射D-半乳糖(500 mg·kg^(-1)),制备亚急性衰老模型。Morris水迷宫评估小鼠学习记忆力;HE、DAPI染色评估肝、脑组织细胞损伤情况;ELISA法检测小鼠血清、肝脑组织内MDA、T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT及γ-H2AX、SA-β-Gal水平。结果水迷宫实验结果表明,紫斑牡丹花粉能明显提高衰老小鼠的学习记忆力。组织染色结果表明,紫斑牡丹花粉对D-半乳糖致衰老小鼠肝脑组织细胞损伤具有保护作用,且高剂量组作用最为明显。ELISA结果显示,与模型组比较,紫斑牡丹花粉各剂量组的MDA、γ-H2AX、SA-β-Gal水平降低,T-AOC、GSH-Px、SOD、CAT水平升高。结论紫斑牡丹花粉能改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆力,提高衰老小鼠体内抗氧化酶活性和清除自由基、脂质过氧化物的能力,保护肝脑脏器组织细胞免受氧化损伤,提示其具有潜在的延缓衰老的作用。

桑葚中性多糖结构及其对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

目的探究桑葚中性多糖的结构特征及其对D-半乳糖致衰老小鼠的保护作用。方法采用水提醇沉法提取桑葚多糖,DEAE-纤维素柱和Sepharose CL-6B色谱柱纯化,获得中性多糖。采用高效液相色谱(HPLC)和红外光谱(FT-IR)法对中性多糖的分子质量、单糖组成及特征官能团进行分析。通过腹腔注射D-半乳糖建立过氧化损伤小鼠模型,灌胃给予中性多糖(50、100、200 mg/kg),检测小鼠血清和肝组织SOD、T-AOC、CAT、GSH-Px活性及MDA水平。结果桑葚中性多糖纯度为76.18%,分子量为1.068×10^(4)Da,主要由葡萄糖(76.9%)、半乳糖(6.0%)、阿拉伯糖(17.1%)组成,可提高小鼠血清和肝组织SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC酶活性,减少MDA水平。结论桑葚中性多糖能有效改善D-半乳糖诱导的氧化损伤,从而起到抗衰老作用。

褪黑素改善D-半乳糖诱导的小鼠认知功能障碍

目的探讨褪黑素对D-半乳糖诱导的小鼠认知功能障碍的改善作用及潜在机制。方法将8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组(Control组)、D-半乳糖组(D-gal组)和D-半乳糖+褪黑素组(D-gal+MLT组),D-半乳糖采取腹腔注射(100 mg/kg),褪黑素采取灌胃(10 mg/kg),1次/d,持续3个月。采取Morris水迷宫实验评价小鼠认知功能;场电位长时程增强(long-term potentiation,LTP)实验评估药物对小鼠突触可塑性的影响;采用Western blots法测定小鼠海马和皮层组织中突触后致密蛋白(postsynaptic density-95,PSD95)、突触生长蛋白(synaptophysin,SYN)、沉默信息调节因子(sirtuin 1,SIRT1)及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的蛋白表达水平。结果与对照组相比,D-gal组小鼠水迷宫实验逃避潜伏期延长,目标象限停留时间明显减少(均P<0.05),LTP受损(P<0.01),海马和皮层组织中PSD95、SYN、BDNF的蛋白表达显著降低(均P<0.05)。与D-gal组比较,褪黑素干预后(D-gal+MLT组)小鼠水迷宫实验逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),LTP受损明显改善(P<0.01),海马和皮层组织中PSD95、SYN、SIRT1及BDNF蛋白表达水平显著增加(均P<0.05)。结论褪黑素对D-半乳糖诱导小鼠的认知功能障碍具有改善作用,其作用机制可能是通过提高SIRT1-BDNF表达水平,进而提高小鼠海马CA1区LTP,改善小鼠突触可塑性。

D-半乳糖对小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤及淫羊藿素的改善作用研究

目的研究D-半乳糖(D-galactose,D-gal)对小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤以及淫羊藿素(icaritin,ICT)的改善作用机制。方法首先将TM4细胞分为正常对照组、不同浓度D-gal处理组,Western blot检测TM4细胞连接功能相关蛋白(ZO-1、Occludin、β-catenin和Cx43)以及ERα/FAK信号通路相关蛋白(ERα、FAK和pY397-FAK)表达水平的变化;随后MTT筛选ICT药物浓度,并将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、D-gal处理+不同浓度ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平变化;分子对接研究ERα与ICT之间的相互作用,并预测两者之间的亲和力;最后将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、ERα抑制剂组、D-gal+ICT组、ERα抑制剂+ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平的变化。结果D-gal可浓度依赖性下调连接功能相关蛋白(ZO-1、Occludin、β-catenin和Cx43)以及ERα/FAK信号通路相关蛋白(ERα、FAK和pY397-FAK)表达水平;给予ICT药物后,上述蛋白表达水平均明显上调;ERα和ICT分子对接结果显示,ERα的Asp351氨基酸残基与ICT之间形成2个距离为3.4Å和2.4Å的氢键,且两者之间的对接结合能小于-7 kcal·mol^(-1);ERα抑制剂处理TM4细胞后,上述蛋白表达水平均明显下调,给予ICT后,上述蛋白表达水平未有明显变化。结论D-gal可导致TM4细胞连接功能损伤,而ICT可改善其损伤,机制可能与上调ERα/FAK信号通路相关。

硒化刺五加多糖对D-半乳糖诱导小鼠氧化损伤的保护作用

为了研究硒化刺五加多糖(Se-ASPS)对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠氧化损伤的保护作用。采用D-gal腹腔注射建立小鼠氧化损伤模型,高、中、低剂量组分别添加硒化刺五加多糖200、100、50 mg/kg·bw,小鼠连续灌胃28 d。比较各组小鼠的体重和采食量变化及脏器指数,采用HE染色观察小鼠肝脏病变。使用试剂盒分析血清、心、肝、脾和肾组织中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷草转氨酶(Glutamine Transferase,AST)和谷丙转氨酶(Alglutamine Transferase,ALT)的含量。与D-gal模型组相比,硒化刺五加多糖组均能显著提高小鼠体重(P<0.05),且硒化刺五加多糖高剂量组能显著提高小鼠脏器指数(P<0.05);HE染色发现,硒化刺五加多糖能修复D-半乳糖对小鼠肝脏组织造成的损伤;硒化刺五加多糖高剂量组可显著提高小鼠血清、心、肝、脾、肾组织中SOD、GSH-Px、CAT酶的活性(P<0.05),并显著降低MDA、AST、ALT含量(P<0.05),且高剂量组表现最突出(P<0.01)。Se-ASPS能够明显地保护机体对抗D-gal带来的氧化损伤。

D-半乳糖在实验性白内障模型中的应用研究

白内障是由于晶状体代谢紊乱引起的常见眼科疾病,可导致视力障碍或失明,其发生发展受多种因素影响,其中年龄是最主要的因素。目前药物治疗仅针对早期白内障有延缓作用,但对于发展到中晚期影响视力的白内障仍需手术治疗。因此建立实验性白内障模型,探索合适的药物预防和治疗白内障至关重要。D-半乳糖已广泛应用于衰老动物模型研究,常被用于糖尿病性白内障和年龄相关性白内障的模型。文章对D-半乳糖诱导白内障模型的发病机制、造模方法以及造模成功的评定标准进行阐述,以期指导白内障防治相关的实验性研究。

红鳘鱼胶胶原蛋白对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤的抗衰老作用研究

以红鳘鱼胶为原料,酸酶法提取胶原蛋白,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、氨基酸组成分析等方法进行理化性质分析,并以D-半乳糖建立衰老小鼠模型,探究其对小鼠皮肤含水量、羟脯氨酸含量、皮肤病理形态和抗氧化活性的影响。结果表明,胶原蛋白由2条α链与1条β链组成,为典型的Ⅰ型胶原蛋白,以甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、脯氨酸为特征氨基酸,分别占总氨基酸含量13.890%,8.601%,7.650%和7.124%,且不含色氨酸;动物实验结果表明,经D-半乳糖造模后,MN组小鼠皮肤粗糙、松弛,皱纹数量增多,相较于CN组皮肤水分含量降低了13.52%,羟脯氨酸含量降低了26.20%,抗氧化能力降低,小鼠皮肤真皮层变薄,胶原纤维、弹性纤维含量降低,部分明显断开;红鳘鱼胶胶原蛋白干预后,能够显著改善由于D-半乳糖造成的小鼠背部皮肤水分流失,增强小鼠皮肤组织氧化应激抵抗力,胶原蛋白组皮肤结构基本恢复,皮肤胶原纤维和弹力纤维含量升高,Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比例升高了9.79%。综上分析,通过红鳘鱼胶制备的胶原蛋白可延缓D-半乳糖引起的皮肤衰老,可为胶原蛋白在化妆品领域的高值化利用提供依据。

两种生育酚酯衍生物对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用

为探究两种生育酚酯衍生物(D-α-生育酚醋酸酯和DL-α-生育酚醋酸酯)的抗衰老作用,本实验测定其体外抗氧化能力,并采用D-半乳糖构建衰老小鼠模型,同时用两种生育酚酯衍生物干预42 d,分析衰老相关指标变化规律。结果表明:在0.1~0.3 mg/mL质量浓度范围内,两种生育酚酯衍生物的羟自由基清除能力、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力、Fe2+螯合能力、总还原能力均优于VC。与衰老模型组相比,经过生育酚酯衍生物干预后,小鼠血清中丙二醛含量显著下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001),谷胱甘肽过氧化物酶和总抗氧化能力显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001);血清中炎症因子白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α和肝功能指标天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶水平显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001);小鼠肝脏中核因子-E2-相关因子(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase,NQO1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA及蛋白相对表达量提升,其中DL-α-生育酚醋酸酯的Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA相对表达量分别增加了514.08%、461.78%、515.32%,蛋白相对表达量分别增加了620.00%、988.89%、1200.00%(P<0.0001)。综上所述,两种生育酚酯衍生物对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用,且DL-α-生育酚醋酸酯效果更好,二者抗衰老作用可能与调控Nrf2信号通路相关。

知母-黄柏药对改善D-半乳糖诱导衰老小鼠认知障碍的机制研究

目的:研究知母-黄柏药对(简称“知柏”)对D-半乳糖(D-gal)诱导衰老模型小鼠认知障碍的改善作用,并探讨其作用机制。方法:将75只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组(D-gal 125 mg/kg)、吡拉西坦组(468 mg/kg)、知柏组(4.5 g/kg)和雷帕霉素哺乳靶蛋白(mTOR)抑制剂组(依维莫司,RAD001,3mg/kg),每组15只。通过D-gal建立小鼠衰老模型,并连续8周灌胃给予知柏水煎液。采用Morris水迷宫和新物体识别测试评价衰老模型小鼠的认知功能;HE染色法观察各组小鼠海马组织病理变化情况;尼氏染色和高尔基染色观察海马区神经元和突触的病理形态变化;收集海马组织以测定脑内三磷酸腺苷(ATP)含量,Western Blot法检测海马中泛素结合蛋白62(P62)、肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin-1)、突触素(Syn)、突触后密度蛋白-95(PSD-95)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、mTOR的蛋白表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测海马中Syn、AMPK、mTOR基因表达水平。结果:与空白组相比,模型组小鼠在Morris水迷宫和新物体识别测试中表现出认知功能显著降低(P<0.01)。在模型组中,海马区的细胞数量减少,细胞排列松散,神经元形态不规则,尼氏小体数量明显减少,树突分支数量以及树突棘密度也显著减少。模型组小鼠海马中ATP水平、P62、Syn、PSD-95、mTOR蛋白表达显著降低(P<0.01),Beclin-1表达显著升高(P<0.01),pAMPK/AMPK蛋白含量比值和AMPK基因表达显著升高(P<0.01),Syn和mTOR基因表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,吡拉西坦组和知柏组小鼠的认知功能得到了显著改善,表现为Morris水迷宫测试中潜伏期的显著缩短(P<0.01),穿越平台次数和靶象限停留时间显著增加(P<0.01),以及新物体识别指数的显著升高(P<0.01),海马区树突棘密度显著增加(P<0.01),神经元损伤也在一定程度上得到了缓解。海马中ATP水平、P62、Syn、PSD-95和mTOR蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05),Beclin-1蛋白表达显著降低(P<0.01),pAMPK/AMPK蛋白含量比值和AMPK基因表达显著降低(P<0.01,P<0.05),Syn、mTOR基因表达显著升高(P<0.01)。抑制剂RAD001组与模型组结果相似,经知柏治疗后上述指标均有所回调。结论:知柏可能通过激活AMPK/mTOR信号通路抑制神经元过度自噬,增强突触可塑性,改善由D-gal引起的小鼠认知障碍。

D-半乳糖结晶母液的脱色工艺

D-半乳糖工业化生产过程中会产生大量的母液,母液中仍含有大量的D-半乳糖,对生产母液回收利用,不仅可以提高D-半乳糖成品收率,还可以减少废液排放。D-半乳糖母液成分复杂,颜色呈深褐色,必须经过脱色除杂处理,才能实现回收利用。本实验建立了树脂-活性炭联合脱色法,筛选获得了性能良好的树脂,并优化了脱色条件和树脂再生条件。结果表明,采用HYA-310树脂和ZX-301活性炭联合脱色,在母液pH3.0、总糖质量浓度90g/L、上样液体积流量0.5mL/min时,脱色效果最好,脱色后母液透光率超过90%。将饱和NaCl用于脱色树脂的再生,树脂交换容量恢复率达到91.2%,可循环使用10次以上。采用该工艺,母液中D-半乳糖收率达60%,D-半乳糖成品纯度超过98%。

金线莲多糖体外抗氧化活性及其对D-半乳糖诱导肝脏损伤小鼠的保护作用

目的评价金线莲多糖(ARP)及其近缘品台湾银线兰多糖(AFP)、血叶兰多糖(LDP)的体外抗氧化活性,初步探讨金线莲多糖对D-半乳糖诱导肝脏损伤小鼠的保护作用。方法①体外实验:以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和超氧阴离子(•O^(2-))自由基清除率为指标,以抗环血酸(VC)为阳性对照,评价ARP、AFP、LDP的体外抗氧化活性。②体内实验:将60只ICR雄性小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组、低剂量组、中剂量组和高剂量组各10只。除正常组外其余5组每日按200 mg/kg颈背部皮下注射D-半乳糖溶液,正常组每日颈背部皮下注射同剂量生理盐水;阳性组按100 mg/(kg∙d)予维生素C药液灌胃,低、中、高剂量组分别按250、500、1000 mg/(kg∙d)予金线莲多糖药液灌胃,正常组及模型组按20 mL/(kg∙d)予生理盐水灌胃,连续干预42 d。ELISA测定小鼠肝组织丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果①体外实验:与VC比较,除3.0 mg/mL ARP外,各浓度ARP、AFP、LDP DPPH、ABTS、•O^(2-)自由基清除率均明显降低(P<0.05);与ARP比较,除0.5 mg/mL AFP外,各浓度AFP、LDP DPPH、ABTS、•O^(2-)自由基清除率均明显降低(P<0.05)。②体内实验:与正常组比较,模型组ALT、AST、MDA含量均明显升高(P<0.05),GSH-Px、T-SOD含量均明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组ALT、AST、MDA含量均明显降低(P<0.05),GSH-Px、T-SOD含量均明显升高(P<0.05)。结论ARP体外抗氧化活性优于AFP和LDP,且ARP能通过调节肝脏氧化应激水平缓解D-半乳糖诱导氧化应激小鼠的肝脏氧化损伤。

葛根素对D-半乳糖诱导衰老小鼠心脏的保护作用

目的 研究葛根素对D-半乳糖诱导的心脏老化的保护作用。方法 24只6~8周龄的昆明小鼠随机分成对照组、D-半乳糖组、葛根素低剂量组和葛根素高剂量组4组,通过持续皮下注射D-半乳糖(150 mg/kg/d)建立衰老模型,造模成功后给予葛根素和等量0.9%氯化钠溶液灌胃,60 d后,应用HE染色检测心肌组织形态学改变;采用自动生化分析仪检测血清心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,c Tn T)和肌酸激酶(creatine kinase,CK);应用ELISA法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;使用二氢乙锭(Dihydroethidium,DHE)荧光探针测量心肌组织中的组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;免疫组织化学法检测组织8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)表达,蛋白印迹法检测4-羟基-2-壬烯醛(4-hydroxy-2-nonenal,4-HNE)、p21和p53蛋白表达。结果 与对照组比较,D-半乳糖组小鼠心肌纤维排列不规则,c Tn T、CK、ROS、MDA的水平升高、SOD的水平降低,8-OHdG、4-HNE、p21和p53表达水平明显升高(P<0.01)。与D-半乳糖组比较,葛根素低剂量和葛根素高剂量给药组小鼠血清中c Tn T、CK水平明显降低(P<0.05)。此外,心肌组织ROS、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、8-OHdG、4-HNE、p21和p53表达水平也明显降低,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平显著增加(P<0.05)。结论 葛根素通过抑制氧化应激减弱D-半乳糖诱导的心脏衰老,表明葛根素可作为抗衰老治疗的潜在有效中草药活性成分。

牡丹根皮提取物对D-半乳糖致小鼠衰老模型的影响

利用D-半乳糖诱导的皮肤衰老模型,评估了牡丹根皮提取物对多种生物标志物的影响,以及对皮肤含水量和水分散失量的影响。结果表明,牡丹根皮提取物能够显著改善皮肤的丙二醛(MDA)水平和过氧化氢酶(CAT)活性,有效降低晚期糖基化终末产物(AGEs)和白介素1β(1L-1β)的水平,同时对小鼠皮肤病理有显著的改善效果。此外,牡丹根皮提取物还能降低皮肤炎症因子,增加皮肤中的总超氧化物歧化酶(SOD),改善羟脯氨酸(HYP)水平和Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)水平。然而,对谷胱甘肽(GSH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、皮肤含水量和皮肤水分散失的影响较小。总的来说,牡丹根皮提取物在一定程度上展现了优秀的抗衰老效果,这为其在抗衰老产品中的应用提供了科学依据。

不同干燥方式的九制何首乌对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用

目的:探究不同干燥方式的九制何首乌对D-半乳糖诱导衰老小鼠的影响。方法:将50只ICR小鼠随机分成空白组、模型组、阳性对照组、九蒸九晒制首乌组、九蒸九烘制首乌组,每日腹腔注射D-半乳糖(0.5 g·kg^(-1))构建小鼠衰老模型,造模同时给药,持续12周。应用Morris水迷宫实验方法测定小鼠的空间记忆和学习水平,计算各组小鼠胸腺、脾脏指数,检测小鼠血清及脑、肝、肾匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平,检测小鼠肝肾功能水平。结果:与空白对照组相比,模型组空间记忆和学习能力明显降低,体质量、脏器指数明显下降,血清以及全脑、肝、肾匀浆中SOD、GSH-Px水平明显下降,而MDA水平显著上升,血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、肌酐、尿素水平显著性上升;药物干预组与模型组相比,空间记忆和记忆水平明显改善,体质量、脏器系数显著增加,改善D-半乳糖诱导的氧化应激,提高SOD、GSH-Px水平,抑制MDA含量的升高,肝肾功能趋于正常。两种干燥方式的给药组小鼠的指标相当,无明显差异。结论:不同干燥方法的九制何首乌的水煎液对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用,且两种方法的抗衰老作用无显著差异。

莼菜多糖对D-半乳糖致衰老模型大鼠抗氧化作用研究

目的:本研究选用D-半乳糖所致的衰老大鼠为试验对象,研究莼菜多糖是否具备体内抗氧化的效果。方法:采用D-半乳糖致衰老法对健康大鼠造模,分组给药,给药期结束后分别取大鼠血清、肝脏、大脑样本组织液,用黄嘌呤氧化酶法检测SOD水平,用5,5-双硫代对硝基苯甲酸(DTNB)显色法检测GSH-Px水平,用硫代巴比妥酸(TBA)法测定MDA水平。结果:跟模型组相比,莼菜多糖能明显提升各组衰老大鼠血清、肝脏、大脑中SOD水平和GSH-Px水平,能明显降低MDA水平(P<0.01或P<0.05)。其中,莼菜黏液多糖的效果尤为明显。结论:莼菜多糖能在一定程度上提高机体的抗氧化能力。

丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物对D-半乳糖致小鼠衰老模型的抗氧化作用研究

目的研究丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物对衰老模型小鼠的抵抗作用。方法采用小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖的方法构建小鼠衰老模型;模型小鼠随机分为模型组、丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物高(200 mg·kg^(-1))、中(100 mg·kg^(-1))、低(50 mg·kg^(-1))剂量组,每天按规定给药剂量分别灌胃,维生素C对照组每天按100 mg·kg^(-1)的给药剂量进行灌胃。连续给药4 w后,观察并记录小鼠体重和形态方面的变化,测定小鼠胸腺和脾脏指数,检测小鼠血清及肝脏组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力三个指标。结果与空白组相比较,模型组小鼠的体质量和脏器指数明显下降,血清和各脏器组织中的SOD、GSH-Px活力均有所降低,MDA含量有所升高,且大部分差异显著(P<0.05),说明衰老小鼠模型构建成功。与模型组相比,复配物各剂量组小鼠体质量和脏器指数均有所升高,血清和脏器中的SOD、GSH-Px活力均有不同程度的回升,MDA含量显著下降(P<0.05)。其中复配物高剂量组大鼠血清中SOD、GSH-Px和MDA含量分别为(118.78±6.87)U·mL^(-1)、(111.27±10.36)U·mL^(-1)和(3.86±2.13)nmol·mL^(-1),大鼠肝脏中SOD、GSH-Px和MDA含量分别为(126.73±11.48)U·mg^(-1)、(105.56±11.57)U·mg^(-1)和(7.95±0.99)nmol·mg^(-1),与模型组相比具有显著差异(P<0.05)。结论丹皮酚、绿原酸和没食子酸复配物能有效提高衰老小鼠的抗氧化能力,高剂量组作用效果最为显著。其抗氧化机制可能与抑制氧化酶的活性,增强机体抗氧化酶的活性有关。

D-半乳糖诱导衰老小鼠模型研究进展

为了促进健康老龄化进程,预防与衰老相关的健康问题,正确理解衰老机制以及开发有效的抗衰老干预措施。系统注射D-半乳糖(D-galactose)已被用于人工诱导体外和体内衰老,以及抗衰老治疗干预研究。本文从氧化应激、线粒体功能障碍、免疫衰老以及对各器官的影响四个方面综述了D-半乳糖诱导衰老的特征性变化,从多角度为抗衰老提供理论依据。

基于非靶向代谢组学研究普洱熟茶对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用

延缓衰老已成为当今社会关注和探究的热点。本课题组前期研究发现普洱熟茶能够通过调节肠道菌群来延缓小鼠衰老,但小鼠体内内源性物质反应生成的代谢产物不明。本研究采用Morris水迷宫实验检测对照小鼠、D-半乳糖衰老模型小鼠及普洱熟茶干预小鼠的学习记忆能力,并利用非靶向代谢组学技术检测各组小鼠的脑组织和血清,探究普洱熟茶对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用,筛选普洱熟茶对衰老小鼠作用的差异代谢物并分析其涉及的代谢通路。结果表明:普洱熟茶能改善衰老小鼠的学习行为能力,调节衰老小鼠脑组织中26种差异代谢物,主要涉及甘油磷脂代谢、VB_(6)代谢、组氨酸代谢和嘌呤代谢通路,其中甘油磷脂代谢和组氨酸代谢通路最为显著;血清中共有11种差异代谢物,主要涉及VB_(6)代谢和花生四烯酸代谢通路,其中VB_(6)代谢通路最为显著。给予普洱熟茶的衰老小鼠体内甘油磷脂代谢通路相关代谢物磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)(20:5/20:4)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanlamine,PE)(22:2/14:0)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)(20:5/18:1)、溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,Lyso PC)(18:2)等,组氨酸代谢通路相关代谢物肌肽,VB_(6)代谢通路相关代谢物5’-磷酸吡哆醛丰度显著升高,表明普洱熟茶可能通过调节脂类代谢、氨基酸代谢发挥抗衰老作用。

橙皮素调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路对D-半乳糖诱导的白内障大鼠氧化应激损伤的影响

目的:探究橙皮素对D-半乳糖诱导的白内障大鼠氧化应激损伤的影响以及调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、橙皮素低、高剂量组、橙皮素高剂量+Nrf2抑制剂ATRA组,除假手术组,其余组均通过皮下注射200mg/kg的D-半乳糖建立白内障大鼠模型。阳性对照组灌胃复明胶囊(30mg/kg),橙皮素低、高剂量组分别灌胃橙皮素(50mg/kg、150mg/kg),橙皮素高剂量+ATRA组先灌胃橙皮素(100mg/kg),再腹腔注射ATRA(10mg/kg)。裂隙灯观察双眼晶状体组织浑浊程度;HE观察各组晶状体上皮组织形态学变化;TUNEL法检测晶状体上皮组织细胞凋亡率;ELISA测定晶状体中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;Western blotting检测晶状体中Keap1、Nrf2、HO-1蛋白的表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠模型组晶状体上皮组织出现细胞排列紊乱、水肿、间隙增大等病变;晶状体浑浊程度、上皮细胞凋亡率、Keap1、细胞质Nrf2蛋白表达升高,SOD、CAT、GSH-Px活性、细胞核Nrf2、HO-1蛋白表达均降低(P<0.05)。与模型组相比,阳性对照组和橙皮素低、高剂量组大鼠晶状体上皮损伤减轻;晶状体浑浊程度、上皮细胞凋亡率、Keap1、细胞质Nrf2蛋白表达降低,SOD、CAT、GSH-Px活性、细胞核Nrf2、HO-1蛋白表达均升高(P<0.05)。Nrf2抑制剂ATRA可显著减弱高剂量橙皮素对白内障大鼠晶状体损伤的改善作用。结论:橙皮素可减轻D-半乳糖诱导的白内障大鼠氧化应激损伤,可能通过抑制Keap1表达,促进Nrf2/ARE通路活化实现。