结晶母液回收D-对羟基苯甘氨酸的工艺优化研究

D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)是合成甜味剂、药物的重要中间体,为降低工艺成本,提高产品质量,提出了一种结晶母液回收D-HPG的连续色谱新工艺。优选纳滤膜进行前处理,增浓结晶母液,筛选Applexion NF200纳滤膜增浓D-HPG效果较好。通过单柱实验筛选连续色谱系统填料树脂,其中Applexion XA945树脂对D-HPG和硫酸铵分离度可达16。进一步对色谱系统的分离效果进行研究,结果表明,经连续色谱分离后,进料液中D-HPG平均纯度由42.2%提高至96.3%,平均收率达91%。利用连续色谱系统从结晶母液中回收D-HPG,是较有前途的工艺。与传统工艺相比,新工艺既保证了D-HPG总收率,又降低其工艺成本,提高了产品质量。

高效液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸

建立了反应体系中 D-对羟基苯甘氨酸、N-氨甲酰 - D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因 3者含量的测定方法。采用高效液相色谱法测定 ,以 Kromasil- C18为固定相 ,φ(乙腈 )∶ φ(水 )∶ φ(磷酸 (85 % ) ) =10∶ 90∶0 .0 1为流动相 ,紫外检测波长为 2 10 nm。3者回收率分别为 99.5 % ,98.6 %及 99.6 % ,RSD为 0 .11% ,0 .13%和0 .2 1%。实验结果表明该法简便、快速。

双酶法合成中D-对羟基苯甘氨酸及其中间体的测定

建立了双酶法合成中D 对羟基苯甘氨酸及其中间体N 氨甲酰基 D 对羟基苯甘氨酸的定量检测方法 :前者通过测反应混合物中NH4+ 的增加来定量 ,后者则以PDAB显色定量。此法对NH4+ 和N 氨甲酰基 D 对羟基苯甘氨酸的回收率分别为 97.7%～ 10 2 .5 %和 98.4 %～ 10 1.7%。

D-对羟基苯甘氨酸的酶法生产工艺研究

利用自行从土壤中分离的假单胞菌 sp.2 2 6 2产生的酶 ,在诱导剂的作用下 ,建立了以 DL-对羟基苯海因为底物制备 D-对羟基苯甘氨酸的方法 ,确定了发酵及酶转化的最佳工艺条件。

D-对羟基苯甘氨酸生产过程的高效毛细管电泳法分析

建立了高效毛细管电泳法测定酶法反应体系中D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因、N-氨甲酰基-D-对羟基苯甘氨酸的含量。采用未涂层石英毛细管柱,运行缓冲液为20mmol/L硼砂缓冲液(pH9.0),检测波长230nm。分离电压30kV,进样压力0.5psi,进样时间5s,采用苯酚为内标。三成分均在0.01%～0.1%范围内线性关系良好。

脂肪酶催化外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯水解制备对映体纯D-对羟基苯甘氨酸的新方法

基于在反应体系中添加碳酸氢铵可有效地促进酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解这一有趣现象的发现 ,探讨了利用有机介质中酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解制备对映体纯 D 对羟基苯甘氨酸及其衍生物的可能性 ,研究了不同来源的酶、摇床转速、水含量、对羟基苯甘氨酸甲酯浓度、反应介质及温度等因素对该反应的影响 .结果表明 ,在所研究的 11种酶中脂肪酶Novozym 4 35对该反应的催化活性和对映体选择性较高 ,叔丁醇为最合适的反应介质 ,最适水含量为0 4 % (V/V) ,对羟基苯甘氨酸甲酯的适宜浓度为 2 0mmol/L ,最适摇床转速和反应温度分别为 130r/min和 30℃ .在此优化条件下反应 2 6h后 ,底物转化率和产物ee分别为 39 8%和 95 2 % .

D-对羟基苯甘氨酸分子印迹聚合物的制备及分子识别能力

以D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)为模板分子,以丙烯酰胺(AM)和α-甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了D-HPG分子印迹聚合物,并测定其对D-HPG的识别能力。静态吸附实验表明,以MAA为功能单体制备的分子印迹聚合物具有更强的分子识别能力,其饱和吸附量达43.9μmol·g-1,印迹因子α为3.6。分子力学计算表明,MAA与D-HPG形成复合物的结合能较大,且MAA在乙醇和水中的溶剂化能较小,因此与AM比较,MAA和模板分子D-HPG在乙醇和水中能形成更加稳定的复合物。紫外光谱分析表明,MAA与D-HPG之间的结合力比AM与D-HPG之间的结合力要强,与分子力学计算以及静态吸附实验得到的结果相一致。

微生物酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展

D_对羟基苯甘氨酸 (D_p_HPG)是半合成青霉素和头孢霉素的重要前体。综述了微生物酶法生产D_对羟基苯甘氨酸的方法种类及其优缺点并对酶的来源即菌种的选育方法做了总结。此外 。

酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展

介绍了酶法生产D -对羟基苯甘氨酸的研究现状 .综述了酶法生产D -对羟基苯甘氨酸的方法种类及其优缺点并对酶的来源即菌种的筛选方法做了总结 .此外 ,还简介了基因工程领域内的研究状况 .

生物酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究

生物酶法生产D-对羟基苯甘氨酸具有良好的应用前景。通过介绍生物酶法生产D-对羟基苯甘氨酸的研究现状,从酶的分离纯化、酶和细胞的固定化、反应介质研究和反应动力学研究以及基因工程进展几个方面作了总结。

海因酶法制备D-对羟基苯甘氨酸的研究进展

D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)主要用于合成β-内酰胺类半合成抗生素,是国内最紧缺的医药中间体之一。微生物酶法是目前获得光学纯D-HPG的重要途径,微生物中起催化作用的主要是D-海因酶和N-氨甲酰水解酶。文章综述了产酶微生物的来源,酶的理化性质,以及培养条件的优化、基因工程、酶的固定化技术生产D-HPG的研究进展。

D-对羟基苯甘氨酸产生菌的筛选研究

目的采用多种筛选方法以获得D-海因酶及N-氨甲酰水解酶的阳性菌株。方法通过以底物(对羟基苯海因)为唯一氮源的培养基从土样和水样中初步分离,然后利用双层琼脂法和微孔快速筛选法对分离到的菌株以及实验室保藏的菌株进行筛选,得到D-海因酶阳性菌株。用茚三酮显色法及纸色谱法进一步筛选N-氨甲酰水解酶阳性菌株。结果最终获得D-海因酶阳性菌株54株,从这54株菌中筛选到2株产N-氨甲酰水解酶的阳性菌株,从而获得了可同时产生双酶的菌株。结论几种不同筛选方法和测定方法的配合使用提高了阳性菌株的获得机会,为进一步诱变得到高产菌株,建立基因工程菌,获得基因工程药物奠定了基础。

D-对羟基苯甘氨酸合成的研究进展

分别介绍了生物酶催化和化学合成D-对羟基苯甘氨酸的方法,生物酶催化法的选择性高,污染小,反应条件温和,是未来发展的方向。其关键是酶的固载与循环使用。化学合成法有对甲氧基苯甲醛法、Strecker氨基酸合成法以及醛酸-苯酚法3种,其中醛酸-苯酚法工艺成熟,是目前工业上普遍采用的方法,但对环境有一定污染。同时还讨论了D,L-对羟基苯甘氨酸的拆分方法。

D-对羟基苯甘氨酸合成方法进展

介绍了光学活性 D－对羟基苯甘氨酸合成方法进展，并对其市场前景进行了预测。

盐析—树脂吸附法处理D-对羟基苯甘氨酸生产废水

采用盐析—树脂NDA-99吸附组合工艺处理D-对羟基苯甘氨酸生产过程中排放的高浓度含酚废水。实验确定的最佳工艺条件:(1)盐析剂为无水Na2SO4,其投加质量浓度为140g/L,温度40℃,搅拌时间30min;(2)采用双柱串联吸附,吸附流量10mL/h,处理水量150mL/批次。实验结果表明:在最佳工艺条件下对该废水进行处理,出水无色透明,CODCr、挥发酚、TOC去除率分别为41.31%～42.98%、61.28%～64.07%、39.09%～40.46%。

D-对羟基苯甘氨酸生产菌株的选育方法探讨

利用国际上通用的以底物———对羟基苯海因(HPH)为惟一氮源的培养基从69个土壤样品和3个水样中初步分离出238个菌株,然后利用双层琼脂法和微孔快速筛选法对分离到的菌株和实验室保藏的220多株菌进行反复筛选,最终获得D＿海因酶阳性菌株54株.用茚三酮显色法及纸层析法从这54株菌中筛选到2株产N＿氨甲酰水解酶的阳性菌株,从而获得了可同时产生D＿海因酶(DHase)和D＿氨甲酰水解酶(DCase)的菌株.

用基因工程菌酶法和化学法制备-D-对羟基苯甘氨酸(英文)

D 对羟基苯甘氨酸 (D p HPG)是制备羟氨苄青霉素、羟氨苄头孢菌素和羟氨唑头孢菌素等β 内酰胺类抗生素的重要中间体 ,同时它也用于多种多肽类激素及农药的合成 .在D 对羟基苯甘氨酸的多种制备方法中 ,生物酶转化法具有原料易得、工艺简单、耗能少、产率高、成本低、光学纯度好、三废污染少等优势 .为利用生物酶转化法制备D 对羟基苯甘氨酸 ,首先用尿素、乙醛酸和苯酚合成底物D ,L 对羟基苯海因 ,然后利用D 海因酶基因工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞作酶源 ,进行底物D ,L 对羟基苯海因到中间体N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶法转化 ,最后用化学法将N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸进一步转化为D 对羟基苯甘氨酸 .结果表明 ,底物D ,L 对羟基苯海因的收率为 60 % .8L体积的发酵小试实验表明 ,发酵 12h ,工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht的海因酶活力为 30 0 0U L ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳薄层扫描结果显示海因酶表达量约占菌体总可溶性蛋白质的 60 % ,菌体收率为 6% .8L体积的海因酶转化实验表明 ,在 4 %底物D ,L 对羟基苯海因和 1%菌体 (湿重 )pH 9 0情况下 ,反应 5h ,D ,L 对羟基苯海因的转化率可达 96% .在酸性条件下 ,用NaNO2 将N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸转化为D 对羟基苯甘氨酸 ,反应 2h ,转?

水-有机相在制备D-对羟基苯甘氨酸中的应用

利用水 水溶性有机溶剂体系,研究了来源于恶臭假单胞菌的海因酶催化DL 对羟基苯海因合成N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸,以制备D 对羟基苯甘氨酸,并就培养基的筛选、有机溶剂的选择和有机溶剂质量分数的优化作了探讨.结果发现,适量的有机溶剂可增加底物的溶解度,进而显著增加酶反应速度.培养基以质量分数为1%的甘油、1%的酵母膏、0 2%的K2HPO4·3H2O、0 3%的NaCl、0 05%的MgSO4·7H2O和0 1%的诱导剂为佳;有机溶剂以二甲亚砜为宜,其质量分数以10%左右为佳.在此优化反应条件下,水 水溶性有机溶剂体系中酶反应的速度较水相中提高近4倍.

D-对羟基苯甘氨酸的制备及开发前景

主要介绍了D-对羟基苯甘氨酸合成方法进展 ,并对其市场前景进行了预测。

D-对羟基苯甘氨酸的合成研究

综述了近年来D-对羟基苯甘氨酸合成工艺的研究进展.通过比较发现乙醛酸法及生物酶拆分制备D-对羟基苯甘氨酸具有较好的应用前景.