桔梗提取物对D-氨基半乳糖/内毒素诱导暴发性肝衰竭的影响

目的探讨桔梗提取物对D-氨基半乳糖/内毒素诱导的小鼠暴发性肝衰竭的预防作用。方法采用D-氨基半乳糖/内毒素诱导的小鼠暴发性肝衰竭模型,桔梗提取物小剂量组给予桔梗提取物150 mg/kg,桔梗提取物大剂量组给予桔梗提取物300 mg/kg,阳性对照组给予谷胱甘肽300 mg/kg,给药2次。末次给药1 h后除正常组外各组均腹腔注射D-氨基半乳糖(700 mg/kg)和内毒素(10μg/kg),8 h后,颈动脉取血,测定血清中丙氨酸氨基转肽酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,取肝脏,液氮保存。结果模型组小鼠肝损伤严重,ALT、AST较高,给药组AST及ALT降低。结论桔梗提取物能够减轻D-氨基半乳糖/内毒素诱导的小鼠暴发性肝衰竭,对肝脏起到保护作用。

D-氨基半乳糖/内毒素诱导的急性肝衰竭与Th1/Th2失衡

目的:研究Th1/Th2失衡与D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭的关系。方法:30只Wistar大鼠腹腔内注射D-氨基半乳糖/内毒素诱导大鼠急性肝衰竭模型(AHF组),另取30只腹腔内注射等量生理盐水为正常对照(N组)。两组动物于建模后3h、6h、12h、24h、48h、72h各取5只动物检测其血清丙氨酸转氨酶(ALT)与肝组织的病理形态学变化;ELISA检测不同时间点动物血清中Th1/Th2型细胞因子(IFN-γ/IL-4)水平的变化。结果:AHF组肝组织显示炎细胞浸润和明显坏死的急性肝衰竭特征,且各时间点血清ALT值均明显高于N组(P<0.05);AHF组与N组相比血清内Th1型细胞因子(IFN-γ)的增高在3h(P<0.01)、6h(P<0.01);Th2型细胞因子(IL-4)水平在各时间点无明显变化(P>0.05)。结论:在D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭模型中,存在Th1/Th2失衡,机体内发生了促炎反应,对此急性肝衰竭早期损伤起重要作用。

补体活化在D-氨基半乳糖/内毒素诱导的大鼠实验性肝坏死中的作用

目的：探讨补体系统活化在大鼠实验性肝坏死中的作用。方法：应用D-氨基半乳糖／内毒素（Ga1N／LPS）诱导大鼠肝坏死，用血清50％补体溶解法作为评价血清经典途径补体溶血活性而检测血清CH50、光镜下观察肝组织形态学改变和免疫组化法检测肝组织内补体C3沉积。结果：各组大鼠在用药后随着时间延长血清CH50呈不同程度下降，与对照组比较，单用Ga1N后第4小时血清CH50显著下降（71．43％，P〈0、05），2、6、8、10、12和14小时血清CH50降低更显著（P〈0．01），最低为30、5％；单用LPS后2小时的血清CH50下降至正常水平的69．31％（P〈0．01）；用药后4～6小时，血清CH50有回升趋势，但仍低于正常水平，差异显著（P〈0．05）；Ga1N／LPS组血清CH50的变化与Ga1N组相似，用药后2～14小时血清CH50下降均非常显著（P〈0.01）；应用Ga1N／LPS后2～4小时的血清CH50与LPS组比较差异不显著（P〉0．05），但在用药后6～14小时血清的CH50在两组间差异非常显著（P〈0．01）。联合注射Ga1N／LPS后可见肝组织呈亚大块坏死，并观察到C3沉积于Kupffer细胞、肝细胞膜及坏死区；单用Ga1N组可见肝组织损伤轻微，并观察到有单核细胞浸润、肝细胞气球样变及灶性坏死，但未见C3在肝内沉积；单用LPS组的肝组织形态学改变与Ga1N组类似，C3沉积在内皮细胞和Kupffer细胞。结论：血清补体活化和肝内局部补体活化在Ga1N／LPS大鼠急性肝坏死中起重要作用。外源性LPS可引起大鼠血清补体系统经典途径的活化，但其所致的肝损伤可能与肝组织中补体C3的局部沉积有关。Ga1N所致肝损伤可能与血清补体活化无明显关系。

Toll样受体4在D-氨基半乳糖/内毒素介导的急性肝损伤中的表达

目的 研究D 氨基半乳糖 (D Gal) /内毒素介导的急性肝损伤模型中肝组织细胞Toll样受体 4 (TLR4 )的表达变化 ,探讨TLR4在识别内毒素、启动炎性肝损伤中的作用。方法 BALB/C小鼠腹内注射D Gal90 0mg/kg与内毒素 (即脂多糖 ,LPS) 10 μg/kg后 0～ 7h分别检测血清丙氨酸转氨酶 (ALT)及天门冬氨酸转氨酶 (AST)与血浆肿瘤坏死因子 (TNF α)含量以评价肝功能 ;另随机取10只小鼠给药后观察致死率。用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和TanonGis 2 .0软件分析不同时间点肝组织中TLR4mRNA表达 ,并与血浆TNF α含量进行相关分析 ;免疫组织化学观察肝组织TLR4蛋白的表达。实验数据用SAS软件分析。结果 给药后 4h ,血清转氨酶明显升高 (与 0h比较 ,P <0 .0 5 ) ;血浆TNF α含量逐步上升 ,在 2h、5h有两个分泌高峰 ;7h小鼠开始死亡 ,10h致死率达 80 %。正常小鼠肝组织少量表达TLR4mRNA ,给药后表达明显增强 (与 0h比较 ,P <0 .0 5 ) ;免疫组织化学也显示TLR4蛋白有类似的变化 ,尤其肝窦内皮细胞、库普弗细胞表达更为显著。血浆TNF α含量与肝组织TLR4mRNA表达呈正相关。结论 肝内细胞膜上表达的TLR4可能通过启动下游的炎性应答基因表达及细胞因子释放而诱导出肝组织对LPS的炎性应答。因此 ,调控TLR4表达可能?

正交试验法优选D-氨基半乳糖敏化小鼠的内毒素休克模型

目的:建立D-氨基半乳糖敏化小鼠内毒素休克的规范化模型。方法:选择对内毒素休克小鼠死亡率有影响的3个因素:D-氨基半乳糖增敏剂量、内毒素攻击剂量及其给药途径,每个因素选取3个水平,按L9(34)正交试验表安排试验。以小鼠48h死亡率为评价指标,并通过验证试验,优化与实验要求相符的造模条件。结果:各因素对动物死亡率影响程度依次为:D-氨基半乳糖增敏剂量>内毒素给药途径>内毒素攻击剂量。采用D-氨基半乳糖600mg·kg-1敏化小鼠,腹腔注射内毒素0.5mg·kg-1的给药方案为佳。结论:规范内毒素休克模型的复制条件,将有利于科学评价药物的抗内毒素活性。

红鳘鱼胶胶原蛋白对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤的抗衰老作用研究

以红鳘鱼胶为原料,酸酶法提取胶原蛋白,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、氨基酸组成分析等方法进行理化性质分析,并以D-半乳糖建立衰老小鼠模型,探究其对小鼠皮肤含水量、羟脯氨酸含量、皮肤病理形态和抗氧化活性的影响。结果表明,胶原蛋白由2条α链与1条β链组成,为典型的Ⅰ型胶原蛋白,以甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、脯氨酸为特征氨基酸,分别占总氨基酸含量13.890%,8.601%,7.650%和7.124%,且不含色氨酸;动物实验结果表明,经D-半乳糖造模后,MN组小鼠皮肤粗糙、松弛,皱纹数量增多,相较于CN组皮肤水分含量降低了13.52%,羟脯氨酸含量降低了26.20%,抗氧化能力降低,小鼠皮肤真皮层变薄,胶原纤维、弹性纤维含量降低,部分明显断开;红鳘鱼胶胶原蛋白干预后,能够显著改善由于D-半乳糖造成的小鼠背部皮肤水分流失,增强小鼠皮肤组织氧化应激抵抗力,胶原蛋白组皮肤结构基本恢复,皮肤胶原纤维和弹力纤维含量升高,Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比例升高了9.79%。综上分析,通过红鳘鱼胶制备的胶原蛋白可延缓D-半乳糖引起的皮肤衰老,可为胶原蛋白在化妆品领域的高值化利用提供依据。

内毒素加D-氨基半乳糖协同给药制造暴发性肝功能衰竭模型

用内毒素加D-氨基半乳糖(Gal-N)给小鼠腹腔注射,成功地制造了暴发性肝功能衰竭新模型,24h死亡率达79％,病理学检查显示弥漫性肝坏死,肝细胞索排列松散。

D-半乳糖胺诱导肝衰竭肠源性内毒素血症模型最佳剂量选择

目的:以D-半乳糖胺(D-gal)不同剂量腹腔注射诱导建立肝衰竭肠源性内毒素血症(IETM)实验动物模型,研究符合肝衰竭IETM改变的最佳造模剂量。方法:将SD大鼠随机分为正常组和D-gal低、中、高、超剂量组,D-gal低、中、高、超剂量组分别以不同剂量D-gal腹腔注射建立肝衰竭IETM模型,正常组在腹腔注射等量生理盐水后24h全部处死,观察D-gal各组大鼠在造模后24h、48h死亡率、肝功能、血清内毒素、肝组织及结肠组织病理等变化。结果:D-gal各组大鼠死亡率、肝功能、血清内毒素、肝组织及结肠组织损伤均明显高于正常组(P<0.01),且随D-gal剂量的增加而加重。结论:1腹腔注射D-gal可诱导建立肝衰竭IETM模型;2D-gal 1.8g/kg腹腔注射诱导建立的IETM模型符合肝衰竭IETM相关改变且更易于观察药物对IETM的干预作用。

复方藏药25WSSWAN对小鼠内毒素联合D-半乳糖损伤的保护作用及机制研究

目的：探讨复方藏药25WSSWAN对小鼠内毒素联合D半乳糖损伤的保护作用及机制研究。方法：复方藏药25WSSWWAN娃哈哈水加热溶解，取上清液，以人体常用量换算为动物中剂量，其3倍为动物大剂量给药。昆明种雄性小鼠48只，随即分成4组，NS组、25WSSWAN大、25WSSWAN中、地塞米松组，除地塞米松组外，其它各组每天灌胃给药1次，共5次，

急性氨基半乳糖／内毒素肝损伤鼠的花生四烯酸代谢

使用氨基半乳糖和内毒素建立大鼠急性肝损伤模型。１２ｈ后血清酶及肝血栓素Ａ_２（ＴＸＡ_２）显著升高，肝白三烯Ｃ_４（ＬＴＣ_４）和前列腺素（ＰＧＩ_２）变化不明显。脂氧酶抑制剂能降低血清酶，显著增加肝ＴＸＡ_２生成，对ＬＴＣ_４和ＰＧＩ_２影响不显著。环氧酶抑制剂不能降低血清酶，但使肝ＬＴＣ_４显著升高，ＴＸＡ_２显著降低，对ＰＧＩ_２影响不明显。提示在急性肝损伤时花生四烯酸代谢异常。其代谢产物白三烯和血栓素是导致肝损伤的重要炎症介质。

异甘草酸镁对D-氨基半乳糖急性肝损伤模型小鼠的保护作用研究

目的研究异甘草酸镁对D-氨基半乳糖急性肝损伤模型小鼠的保护作用。方法以D-氨基半乳糖建立小鼠急性肝损伤模型,分别设正常对照组、病理模型组、异甘草酸镁高、低剂量组以及美能组、易善复组、凯西莱组,测定各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织中丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)含量。另以HE染色,采用光镜对各组小鼠肝脏作病理检查。结果异甘草酸镁可明显降低ALT、AST的活性(P<0.01)及肝组织中MDA、XOD、NO、NOS、iNOS的含量;升高肝组织中SOD、GSH-PX、T-AOC的含量。光镜下可观察到异甘草酸镁能减轻小鼠肝脏坏死性病理改变。结论异甘草酸镁对D-氨基半乳糖诱导的小鼠急性肝损伤具有良好的保护作用。

沙苑子黄酮对CCl_4及D-氨基半乳糖致急性肝损伤的保护作用

目的探讨沙苑子黄酮(FAC)对肝损伤的保护作用。方法采用0.1%CCl4(10mL/kg)、D-氨基半乳糖(D-Gal,700mg/kg)分别ip造成小鼠急性肝损伤模型,并ig不同剂量的FAC,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,观察肝组织病理改变;用CCl4损伤原代培养大鼠肝细胞,测定细胞培养液ALT、AST活性,MTT法测定肝细胞增殖活性。结果FAC能显著降低小鼠CCl4和D-Gal损伤原代培养大鼠肝细胞模型ALT和AST活性(P<0.01),病理学观察显示,FAC明显减轻肝组织损伤程度(P<0.01)。FAC显著提高肝细胞活性,促进肝细胞增殖。结论FAC具有显著的保肝作用。

狗肝菜多糖减轻D-氨基半乳糖与脂多糖诱导的大鼠急性肝损伤

目的:观察壮药狗肝菜多糖对D-氨基半乳糖(D-GalN)及脂多糖(LPS)所致大鼠急性重症肝炎的影响。方法:将48只雄性Wistar大鼠随机分成模型、狗肝菜多糖高、低剂量和对照组;狗肝菜多糖高剂量组(300mg·kg-1)、低剂量组(150mg·kg-1)在造模前灌胃给药6d,其它各组用生理盐水对照;末次给药后1h除对照组外均在腹腔内注射D-GalN(500mg.kg-1)和LPS(20μg/kg)建立大鼠急性重症肝炎模型,对照组用生理盐水对照。于6h、12h分别观察并计算各组动物死亡率;存活动物于6h行眶后静脉窦采血用于检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β);12h摘除眼球采血用于检测血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和一氧化氮(NO);分光光度法检测血清ALT、AST、NO含量,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β水平。12h后全部处死存活动物,肝组织切片观察肝脏病理形态学变化。结果:6h各组动物均存活;与模型组相比,狗肝菜处理组12h死亡率明显低于模型组。模型组血清ALT、AST活力和TNF-α、IL-1β、NO水平均升高,狗肝菜多糖高、低剂量组血清指标均明显低于模型组。模型肝组织大片坏死、淤血,狗肝菜多糖高、低剂量组组织损伤程度明显降低,以高剂量组效果最佳。结论:狗肝菜多糖能减轻D-GalN/LPS诱导的肝损伤,可能通过降低炎性介质TNF-α、IL-1β和NO的水平发挥作用。

蕨麻多糖保护D-氨基半乳糖急性肝损伤小鼠的作用机制

目的考察蕨麻多糖(PAP)对D-氨基半乳糖(D-GlaN)诱导的急性肝损伤小鼠肝脏的保护作用机制。方法 60只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、联苯双酯组(阳性对照)以及PAP 50、100、200mg/kg各剂量组,每组10只。先分别给予生理盐水、联苯双酯以及不同剂量受试药PAP,然后除正常对照组注射生理盐水外,其余5组均于给药7d后用8%D-GlaN腹腔注射,建立D-GlaN急性肝损伤模型。24h后处死,测定小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)等指标。结果模型对照组小鼠肝组织中的MDA含量升高,SOD和GSH-Px活性降低,GSH含量降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);联苯双酯以及50、100、200mg/kg各剂量PAP均可明显降低D-GlaN急性肝损伤小鼠肝组织中的MDA含量,提高SOD和GSH-Px的活性,增加GSH含量,与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 PAP对D-GlaN急性肝损伤小鼠肝脏的保护作用可能与其清除自由基、保护细胞膜和抗脂质过氧化有关。

超抗原SEB和D-氨基半乳糖对小鼠肝细胞的作用观察

用超抗原葡萄球菌Ｂ型肠毒素（ＳＥＢ）、Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ＧａｌＮ）及两者合用腹腔注射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于２、６、１２、２４ｈ取肝脏和血标本，从形态学和生化指标来研究肝细胞的死亡模式；同时还检测了小鼠２４ｈ死亡率。结果发现单用ＳＥＢ可诱导肝细胞凋亡，其机制可能与ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ等细胞因子的产生和作用有关。单用Ｄ－ＧａｌＮ可同时引起肝细胞凋亡和变性，ＳＥＢ和Ｄ－ＧａｌＮ合用２、６ｈ见肝细胞凋亡，１２ｈ后以肝细胞坏死为主，小鼠２４ｈ死亡率达５０％。因而，推测凋亡与坏死间存在一定的联系。

D-半乳糖对大鼠海马氨基酸含量及海马CA1区突触结构参数的影响

目的 观察经 D-半乳糖长期处理的大鼠海马氨基酸含量及海马 CA1区突触结构参数的改变。方法 应用反相高效液相法对大鼠海马氨基酸含量进行分析 ,应用透射电镜结合图像分析对突触结构参数进行观察。结果 (1 ) D-半乳糖可导致模型大鼠天冬氨酸、牛磺酸、γ-氨基丁酸含量降低 ,谷氨酸含量升高 (P<0 .0 5) ;(2 )在突触结构参数中 ,经 D-半乳糖处理的大鼠突触间隙明显增宽、突触后致密物厚度变薄、突触活性区长度缩短 (P<0 .0 5) ,突触界面曲率三组间无差异。结论 D-半乳糖可改变大鼠海马氨基酸含量 。

18α甘草酸对D-氨基半乳糖引起的大鼠急性肝损伤治疗作用

目的观察18α甘草酸(18α-GA)对D-氨基半乳糖(GalN)引起大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法 SD大鼠60只,随机分为6组,除阴性对照组外,所有动物同时腹腔注射10%GalN溶液500 mg/kg,给药组于GalN处理前3 d分别腹腔注射18α-GA 15、30、60 mg/kg,每日一次,GalN处理30 h后取血测定血清ALT、AST,并取肝左叶作病理组织学观察。结果 18α-GA能明显抑制急性肝损伤大鼠血清转氨酶的活力,并减轻肝脏病理损伤。结论 18α-GA对GalN引起大鼠急性肝损伤具有防治效果。

赤芍总苷对D-氨基半乳糖胺所致小鼠肝损伤的保护作用

目的观察赤芍总苷对D-氨基半乳糖胺(D-GalN)所致小鼠肝损伤的防治作用。方法NIH小鼠60只,随机分5组,分别为正常对照组,模型组,赤芍总苷高剂量组、低剂量组和联苯双脂组小鼠分别灌胃给药,1次/d,连续7d,末次给药1h后,除正常对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射D-GalN 800mg/kg,16h后采血,检测血清ALT、AST活性及超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,并观察肝组织病理学变化。结果赤芍总苷高剂量组能显著降低D-GalN所致小鼠肝损伤血清ALT、AST活性,提高肝组织匀浆SOD活性,降低MDA,明显改善肝组织损伤的程度,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论赤芍总苷对D-GalN诱导的小鼠肝损伤有保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。